全 文 ：水飞蓟宾口服微乳制备及性质评价
江　来1, 刘　欢2, 王春龙2Ξ , 乔建军1
(11 天津大学化工学院, 天津　300072; 21 天津药物研究院, 天津　300193)
摘　要: 目的　制备稳定的水飞蓟宾口服微乳。方法　采用测定表面张力、绘制拟三元相图和正交设计相结合的方
法进行处方筛选及工艺优化。结果　鉴别了微乳类型, 用光子相关光度法测定了微乳的平均粒径, 并且用超速离心
法测定了药物在微乳中的相分布。经过对微乳进行离心及影响因素实验, 结果表明该微乳在室温下3 个月内能维持
均一稳定, 并且受高温光照影响较小。结论　该处方制备的水飞蓟宾口服微乳外观及稳定性良好, 为进一步研究奠
定了基础。
关键词: 水飞蓟宾; 微乳; 稳定性
中图分类号: R 28611　　　文献标识码: B　　　文章编号: 025322670 (2008) 0120051204
Prepara tion and capab il ity eva lua tion of ora l m icroem ulsion silyb in
J IAN G L ai1, L IU H uan2, W AN G Chun2long2, Q IAO J ian2jun1
(11 Schoo l of Chem ical Engineering and T echno logy of T ian jin U niversity, T ian jin 300072, Ch ina;
21 T ian jin Inst itu te of Pharm aceu tical R esearch, T ian jin 300193, Ch ina)
Abstract: Objective　To p repare stab le silyb in o ra l m icroem u lsion1M ethods　T he fo rm u la t ion of the
silyb in o ra l m icroem u lsion w as op t im ized by the com b inat ion of su rface ten sion m easu re, p seudo2ternary
phase diagram draw ing and o rthogonal design1 Results　M icroem u lsion type w as iden t if ied1 A verage par2
t icle d iam eter w as m easu red1 D istribu t ion of silyb in in m icroem u lsion w as m easu red by u lt racen2
t rifugat ion1 T he cen trifugaliza t ion and influencing facto rs experim en t of m icroem u lsion w ere carried ou t,
w h ich cou ld keep homogeneou s and stab le fo r th ree mon th s on the sto rage condit ion of room temperatu re1
M eanw h ile, the influence of h igh2tempera tu re and illum inat ion w as a lit t le1 Conclusion　Stab le o ra l m i2
croem u lsion silyb in can be p repared in th is fo rm u la t ion, w ith fine2look ing and desirab le stab ility w h ich is
bet ter fo r the fu rther studies1
Key words: silyb in; m icroem u lsion; stab ility
　　水飞蓟宾是从水飞蓟果实中提取的有效成分。
由于水飞蓟宾不溶于水和脂, 导致其现有片剂、胶囊
和滴丸等口服剂型有较大的首关效应, 体内的半衰
期短, 生物利用度低。微乳与普通剂型相比具有能包
裹难溶药物, 提高药物稳定性的优点, 在靶向给药和
缓控释给药方面有着广阔的应用前景。因此本实验
通过高压乳匀法制备水飞蓟宾口服微乳, 研究其工
艺影响因素, 并进行了稳定性考察。
1　仪器和材料
　　78HW —1 型恒温加热磁力搅拌器 (杭州仪表电
机有限公司) , D—79282 组织捣碎剪切仪 (德国
F luko ) , M —110L 高压微射流纳米均质机 (美国
M F IC) , T GL —16GB 小型通用离心机 (上海安亭科
学仪器 厂 ) , J—25 型 高 效 冷 冻 离 心 机 (美 国
Beckm an) , SHA —C 数显水浴恒温振荡器 (江苏省
金坛市宏华仪器厂) ,B I—9000A T 型光子相关光谱
仪 (美国B rookhaven) , UV —2550 型紫外可见分光
光度计 (日本岛津) , L C—10A T 高效液相色谱仪
(日本岛津) ,ANA STA R 工作站。
　　水飞蓟宾原料药由盘锦格林恩生物资源开发有
限公司提供, 质量分数为95% ; 各种植物油均为药用
级, 由浙江龙游聚兴粮油医药化工有限公司提供; 油
酸 (天津大学科威公司, 分析纯) , 聚山梨酯 80 (上海
大众制药厂, 药用级) , PEG400 (天津天成制药有限
公司, 药用级) , 各种短链醇均为分析纯。
2　方法与结果
211　处方的选择
21111　油相的选择: 聚山梨酯 80 作为常用的乳化
剂具有乳化能力强、副作用小等优点, 并且是亲水性
表面活性剂, 符合本实验将制备的O öW 型口服微
·15·中草药　Ch inese Traditiona l and Herbal D rugs　第 39 卷第 1 期 2008 年 1 月
Ξ 收稿日期: 2007205230
作者简介: 江　来 (1981—) , 男, 天津大学制药工程专业硕士研究生。　E2m ail: t jtd jianglai@gm ail1com3 通讯作者　王春龙　T el: (022) 23003212　E2m ail: dds2w cl@vip1sina1com
乳, 故选用聚山梨酯 80 为乳化剂, 用简便的滴体积
法[1 ] 测定各质量浓度聚山梨酯 80 溶液在各种备选
植物油中的表面张力以确定油相, 结果见图1。乳化
剂的主要作用是减小油水界面层的张力, 由图 1 可
以看出, 聚山梨酯 80 在大豆油中表面张力最小, 所
以确定大豆油为油相。
lgCö(m g·mL - 1)
图 1　表面张力曲线
F ig11　Surface ten sion curve
21112　助乳化剂种类的选择: 常用助乳化剂包括乙
醇、正丙醇、异丙醇、丙二醇、丙三醇等中低碳链醇,
由于处方成分增加, 滴体积法测表面张力的精确度
有限, 采用比较直观的拟三元相图法, 通过比较形成
的微乳区大小来考察助乳化能力。配制10% 醇水溶
液作为水相, 聚山梨酯 80 与大豆油分别按质量比
9∶1、8∶2、7∶3、6∶4、5∶5、4∶6、3∶7、2∶8、1∶9
混合, 用微量移液器吸取水相分别滴定该混合物, 每
滴一滴涡旋2 m in, 超声除气泡后观察混合物是否仍
澄清, 记下浑浊时各组分的质量比, 绘制相图, 得出
最大的微乳区, 结果见图2。可以看出, 丙三醇形成
的微乳区域面积最大, 因此选用丙三醇作助乳化剂。
PEG 400 对水飞蓟宾有显著增溶作用[2 ] , 试验中也
证实水飞蓟宾在PEG400 中的溶解度达到 225 m gö
mL (25 ℃) , 故选用PEG 400 作为药物的潜溶剂, 每
100 mL 含药量为 200 m g 的微乳中, PEG 400 用量
为110 mL。
图 2　助乳化剂的三元相图
F ig12　Pseudo- ternary phase d iagram of cosurfactan t
21113　正交试验设计确定处方: 在文献调研、单因
素考察的基础上确定主要考察因素为油相比例、乳
化剂比例、助乳化剂比例。微量的油酸对界面膜的稳
定能起到显著效果[3 ] , 因此加入油酸作为稳定剂, 一
并列入考察范围, 因素水平见表 1, 各因素按L 9 (34)
正交设计进行试验, 见表2。评价指标由两部分组成:
微乳的稳定性参数K e [4 ]和微乳离心后外观, 包括是
否有油滴浮面、是否分层、是否有沉淀。两项指标权
重相等, 综合评分。
表 1　处方筛选的因素水平
Table 1　Factors and levels of formulation selection
水平
因　素
A 大豆油ö% B 聚山梨酯80ö% C 丙三醇ö% D 油酸ö%
1 10 4 5 0105
2 20 6 7 0110
3 30 8 9 0115
表 2　L 9 (34)正交设计和结果
Table 2　D esign and result of L 9 (34) orthogonal test
试验号 A B C D 结果
1 　1 　1 　1 　1 85
2 1 2 2 2 90
3 1 3 3 3 88
4 2 1 2 3 72
5 2 2 3 1 80
6 2 3 1 2 85
7 3 1 3 2 70
8 3 2 1 3 80
9 3 3 2 1 75
k1 87167 75167 83133 80100
k2 79100 83133 79100 81167
k3 75100 82167 79133 80100
R 12167 7167 4133 1167
　　可知各因素对乳剂影响的大小顺序为A > B >
C> D , 即大豆油> 聚山梨酯80> 丙三醇> 油酸。最
优水平的组合为A 1B 2C1D 2, 即 10% 大豆油, 6% 聚山
梨酯80, 5% 丙三醇, 011% 油酸。
21114　正交试验设计确定工艺条件: 微乳质量除了
与处方有关外, 还很大程度上受工艺条件的影响, 经
过预试得到的可能影响较大的因素和水平, 见表 3。
用稳定性参数K e 评价, 见表4。可以看出, 工艺因素
的影响顺序为均质次数> 搅拌温度> 剪切时间, 最
优水平组合为均质3 次, 70 ℃搅拌, 剪切30 m in。
表 3　工艺条件的因素水平
Table 3　Factors and levels of process condition
水平 E 搅拌温度ö℃ F 剪切时间öm in G 均质次数ö次
1 60 20 1
2 70 30 3
·25· 中草药　Ch inese Traditiona l and Herbal D rugs　第 39 卷第 1 期 2008 年 1 月
表 4　L 4 (23)正交试验设计和结果
Table 4　D esign and result of L 4 (23) orthogonal test
试验号 E F G K eö%
　1 1 1 1 710
　2 1 2 2 310
　3 2 1 2 115
　4 2 2 1 410
　K 1 51000 41250 51500
　K 2 21750 31500 21250
　R 21250 01750 31250
212　微乳的制备: 药物溶于PEG 400, 然后与已添加
油酸的大豆油混匀作为油相, 70 ℃恒温搅拌; 聚山梨
酯80 和丙三醇溶于处方量的水, 70 ℃恒温搅拌; 将油
相缓慢滴加入水相中, 然后依次经过组织捣碎机剪切
30 m in, 微射流均质机均质3 次得到成乳。
213　水飞蓟宾的H PL C 法测定
21311 色谱条件 [5 ]: 色谱柱为岛津 Sh im 1pack V P
OD S (150 mm ×416 mm , 5 Λm ) ; 流动相: 甲醇2水2
冰醋酸 (42∶58∶5) ; 检测波长: 288 nm ; 体积流量:
110 mL öm in; 柱温: 35 ℃; 进样量: 20 ΛL。
21312　专属性考察: 分别取空白微乳和 2 m gömL
含药微乳011 mL 置10 mL 量瓶中, 用甲醇溶解并加
至刻度, 摇匀, 进样, 得色谱图, 见图3。可见药物峰形
好, 辅料不影响测定, 分离度较好。
töm in
12水飞蓟宾　22异水飞蓟宾
12silyb in　22iso silyb in
图 3　原料药 (A)、空白微乳 (B)和含药微乳 (C)的
HPLC 图谱
F ig13　HPLC Chronatogram s of silybin (A) , blank m i-
croemulsion ( B ) , and silybin m icroemulsion
(C)
214　性质测定
21411　微乳类型鉴别: 采用染色法鉴别微乳类型。
利用油溶性染料苏丹红和水溶性染料亚甲蓝在微乳
中红色或蓝色的扩散快慢来判断微乳的类型, 同时
向微乳中滴加两种染料各 1 滴, 若红色扩散快速于
蓝色则为W öO 型微乳; 反之为O öW 型。结果显示该
微乳为O öW 型。
21412　粒径测定: 采用光子相关光度法 (CPS) 分别
测定3 批样品, 得到平均粒径为31～ 33 nm。见图4。
粒径önm
图 4　光子相关光度法所测的粒径
F ig14　Particle d iameter by CPS
21413　相分布实验: 用超速离心法分离微乳的各
相, 用能使油和水共溶的混合溶媒溶解微乳成澄清
溶液, H PL C 法测定各相中药物的质量浓度, 计算药
物在油、水相和O öW 界面层的分配比例。
　　精取水飞蓟宾微乳 1 mL 用甲醇稀释至 100
mL , 以同法制备的无药微乳同样倍数稀释后作空
白, H PL C 法测定, 代入标准曲线方程计算得微乳中
水飞蓟宾的质量浓度为11962 m gömL。
　　取约20 mL 微乳装入25 mL 塑料管, 以 23 000
röm in 超速离心120 m in, 4 ℃。弃去上层稠乳, 取下
层水层4 mL , 8 000 röm in 继续离心60 m in, 再取该
离心管中的下层澄清液, 过0122 Λm 滤膜, 取续滤液
用甲醇稀释100 倍, H PL C 法测定, 经计算得到原微
乳水相中水飞蓟宾的质量浓度为4916 ΛgömL。
　　4 ℃时, 以23 000 röm in 超速离心120 m in。取尽
上层黏稠乳液, 100 ℃水浴4 h, 超声2 h, 完全吸取表
面透明油层, 用甲醇稀释 100 倍, H PL C 法测定, 经
计算得到原微乳油相中水飞蓟宾的质量浓度为
26412 ΛgömL。
　　很难分离出微乳的O öW 界面层, 因而难以直接
测定药物在界面层的质量浓度, 但可由分离前微乳
中水飞蓟宾总量与油、水相水飞蓟宾量的差间接计
算得到。
　　结果证实了该处方的O öW 口服微乳中水飞蓟宾
大部分分布在O öW 界面层, 这与文献报道[6 ]一致。
21414　相转变温度的测定: 取新鲜制备的微乳约30
mL , 置于小烧杯内, 放入恒温水浴中, 磁力搅拌。控
制水浴温度, 使较均匀地升温 (015 ℃öm in)。将电导
电极固定于敏感位置 (铂黑片上端恰与微乳界面相
平) , 测定微乳在25～ 90 ℃电导率的变化, 见图5。可
见微乳自 65 ℃随温度上升, 电导率由升高转为下
降, 此为初转变温度; 71 ℃时电导率重新开始上升,
·35·中草药　Ch inese Traditiona l and Herbal D rugs　第 39 卷第 1 期 2008 年 1 月
此为相转变温度, 因此控制搅拌乳化温度在65～ 71
℃得到的微乳相对稳定。
温度ö℃
图 5　微乳的电导率-温度曲线
F ig15　Conductiv ity- temperature curve of silybin
m icroemulsion
215　稳定性考察
21511　离心加速试验: 根据《中国药典》2005 年版
一部附录 IO 乳剂离心稳定性标准, 以 4 000 röm in
离心 15 m in, 无分层现象, 无药物析出, 提示该微乳
均一稳定。
21512　高温和光照试验: 微乳充氮、密封, 分别于
40、60 ℃, 4 500 1x 条件下放置10 d, 分别于0、5、10
d 考察微乳的外观、平均粒径、有效成分的质量浓
度, 见表5。可见该乳剂在室温下3 个月内能维持均
一稳定。60 ℃的10 d 留样的外观变化尤为明显, 有
效成分的质量浓度下降量略高于其他条件, 并且有
少量乳滴凝聚情况发生, 说明该微乳应低温或室温
贮藏。但是从平均粒径变化来看, 3 种条件对粒径的
影响都不大, 说明即使发生凝聚只是局部发生, 而微
乳整体仍比较稳定。
3　讨论
　　计算稳定性参数K e 时采用离心加速比较微乳
的分层速度, 以紫外分光光度法测定微乳离心前后
表 5　高温和光照试验
Table 5　H igh temperature and illum ination
条件 外观
平均粒径ö
nm
有效成分
相对量ö%
3 个月室温 均一, 无沉淀 32 9718
40 ℃ 0 d 均一, 无沉淀 31 9813
5 d 均一, 无沉淀 31 9811
10 d 均一, 无沉淀 32 9715
60 ℃ 0 d 均一, 无沉淀 31 9813
5 d 有少量乳滴挂壁 33 9712
10 d 有少量乳滴挂壁 35 9610
4 500 lx 光照 0 d 均一, 无沉淀 31 9813
5 d 均一, 无沉淀 31 9717
10 d 均一, 无沉淀 33 9710
的吸光度, 相差越小, 说明乳剂越稳定。该方法简便
快捷, 是评价乳剂稳定性的重要指标。
　　乳化剂和助乳化剂的种类及配比对微乳质量起
着重要作用, 本实验由简单方法入手, 逐步提高筛选
精度, 先后通过测表面张力、绘制拟三元相图和正交
设计进行处方筛选, 在达到实验目的的前提下尽量
减少工作量。
　　水飞蓟宾难溶于水和油, 本实验将其制备为口
服微乳。性质考察结果表明, 该工艺得到的微乳外
观、稳定性良好, 符合要求, 为进一步研究提供参考。
参考文献:
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药动学[J ]1 中国药科大学学报, 2005, 36 (5) : 42724311
大孔吸附树脂纯化达原滴丸处方提取液的工艺研究
廖茂梁1, 张铁军1, 高文远2, 薛　艳1Ξ
(11 天津药物研究院 中药现代研究部, 天津　300193; 21 天津大学 药物科学与技术学院, 天津　300193)
摘　要: 目的　研究大孔吸附树脂对达原滴丸提取液的吸附性能, 考察精制工艺。方法　以达原滴丸中黄芩苷质量
分数和收率为主要考察指标 , 考察了大孔吸附树脂N KA 212、H PD 2600、H PD 2500、H PD 2300、H PD 2100、D 101、AB 2
8、N KA 29 对达原滴丸中黄芩苷的吸附和解吸特性以及纯化能力。结果　达原滴丸提取液上H PD 2300 树脂, 上样液
黄芩苷质量浓度为 2165 m gömL , 体积流量为 3 BV öh, 50% 乙醇解吸 5 BV 时, 水洗 4 BV , 解吸效果较好。结论　
H PD 2300 树脂可用作达原滴丸的精制。
·45· 中草药　Ch inese Traditiona l and Herbal D rugs　第 39 卷第 1 期 2008 年 1 月
Ξ 收稿日期: 2007204223
基金项目: 天津市科技攻关培育项目 (033101911)
作者简介: 廖茂梁 (1981—) , 男, 江西南康人, 主要从事中药研发。T el: (022) 23003935　E2m ail: liam ao liang@ 1631com