全 文 ：液,进行测定, 结果见表 1。根据测定结果, 暂定本
品含补骨脂以补骨脂素和异补骨脂素的总量计, 不
得少于 01 15mg/ g。
表 1 全鹿丸中补骨脂素和异补骨脂素的测定结果
Table 1 Determination of psoralen and isopsoralen
批 号 补骨脂素/
( mg # g- 1 )
异补骨脂素/
( mg # g- 1 )
总量/
( m g # g- 1)
050802 01105 01 105 01 21
051103 01102 01 105 01 21
060401 01107 01 110 01 22
4 讨论
测定波长的选择:取补骨脂素、异补骨脂素对照
品溶液(质量浓度分别为 91 75 Lg / mL、91 17 Lg/
mL) ,在 200~ 400 nm 波长扫描,结果均在 246 nm
处有最大吸收,与现行版药典收载的补骨脂药材补
骨脂素、异补骨脂素测定项的测定波长一致,故确定
全鹿丸的测定波长为 246 nm。
流动相的选择:曾采用乙腈-水( 30B 70)、乙腈-
水( 32B 68)、甲醇-水( 55B 45)、甲醇-水( 50 B 50)为
流动相进行比较,结果乙腈-水系统分离效果较好,
两者中以乙腈-水( 30 B70)为流动相是补骨脂素、异
补骨脂素出峰时间较为合适。
不同色谱柱考察: 取同一供试品(批号 051103)
溶液,分别比较了 Ag ilent XDB C18、Ag ilent Zo rbax
SB C18、Sunf ire C18 3种色谱柱对补骨脂素、异补骨
脂素测定的影响, 结果表明,不同厂家色谱柱对测定
结果影响不大( RSD为 21 0% )。
硫磺熏蒸对山药中尿囊素的影响
赵海霞1, 2 ,刘 伟1*
( 11 康美药业股份有限公司博士后工作站, 广东 普宁 515341; 21 山东中医药大学附属医院, 山东 济南 250011)
摘 要:目的 探讨硫磺熏蒸对山药中尿囊素的影响。方法 以尿囊素为指标, 选择硫磺用量、熏蒸时间、熏蒸次
数 3 个因素,用 L 9 ( 34)正交试验表, 考察不同熏蒸工艺尿囊素的量并与未熏蒸山药进行比较。结果 硫磺用量为
100 g/ m3 ,熏蒸 1 次, 熏蒸 2 h, 尿囊素的量最高。结论 不同熏蒸工艺对山药中尿囊素有一定影响, 且有随硫磺用
量增加、熏蒸时间延长、次数增加而减少的趋势。
关键词:山药; 硫磺熏蒸;尿囊素; 高效液相色谱
中图分类号: R2861 02 文献标识码: B 文章编号: 0253-2670( 2009) 06-0903-02
山药为薯蓣科多年生宿根蔓草植物薯蓣 Di-
oscor ea opp osi ta Thunb1 的干燥根茎, 具有补脾养
胃、生津益肺、补肾涩精的功效, 临床常用于脾虚食
少、久泻不止、肺虚喘咳、肾虚遣精、带下尿频、虚热
消渴等症。山药含有多种化学成分,尿囊素是山药
的活性成分之一。尿囊素具有修复上皮组织, 促进
皮肤溃疡和伤口愈合,具有生肌作用,可用于胃及十
二指肠溃疡等 [ 1]。山药在加工处理过程中, 须经硫
磺熏蒸以利于贮存保质。但硫磺具一定毒性, 且中
药熏硫会破坏或改变方剂的功效,并破坏其化学成
分。为保证临床用药的质量, 本实验以尿囊素为指
标,就硫磺熏蒸山药的影响因素进行了探讨。
1 仪器与试药
Agilent 1100高效液相色谱仪, Agilent二元泵
DAD检测器。
尿囊素对照品购自中国药品生物制品检定所,
批号 1501-200001; 甲醇为色谱纯, 水为自制重蒸
水,硫磺为药用硫磺;山药购自普宁药材市场,经国
家中药现代化工程技术中心曹晖教授鉴定为薯蓣科
植物薯蓣 D1 op posita Thunb1 的干燥根茎。
2 方法与结果
21 1 硫磺熏制的山药样品的制备:采用不锈钢材料
自制熏箱, 熏箱内容积为 01 5 m3 , 内设 2层网状隔
板,熏箱顶部安装一小型排风扇, 底部留一观察窗。
实验时,将 500 g 山药饮片均匀摆放于网状隔板上,
称取规定量药用硫磺置于搪瓷盘中, 并放入熏箱底
部,点燃硫磺,关闭熏箱门及排风扇, 待硫磺形成明
显蓝色火焰时, 用胶带将熏箱门封闭。熏至规定时
间后,打开排风扇抽气 1 h,开启熏箱门。
21 2 尿囊素的测定方法的建立[ 2 ]
#903#中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 40 卷第 6 期 2009 年 6 月
* 收稿日期: 2008- 11-24 作者简介:赵海霞( 1965 ) ) ,女,山东威海人,副主任药师,博士,研究方向:中药新药开发及中药炮制原理的研究。
T el : 13793188011 E-mail: zh aohx1115@ 1261 com
21 21 1 色谱条件: Hypersil ODS 柱( 200 mm @ 41 6
mm, 5 Lm) ;流动相:甲醇-水( 1 B9) ; 体积流量: 01 5
mL/ m in;柱温: 30 e ; 检测波长: 224 nm。理论板数
按尿囊素计不低于 3 000。
21 21 2 对照品溶液的制备: 精密称取 51 97 mg 置
50 mL 量瓶中,加水溶解并定容。再精密吸取 10 mL
置100 mL 量瓶中,加水稀释至刻度,摇匀,即得。
21 21 3 供试品溶液的制备:取山药熏蒸前及各熏蒸
工艺炮制品粉末约 50 mg,精密称定,置 10 mL 干燥
量瓶中,加重蒸水1 mL 润湿, 20 e (实验时为室温,
以后考虑加少量冰控制温度)超声处理 10 min, 加
入甲醇约 7 mL, 于 20 e (实验时为室温)超声处理
20 min, 用甲醇稀释至刻度, 充分振荡, 静置 1 h, 沉
淀蛋白质、糖类等大分子。以 4 000 r/ min 离心 10
min, 取上清液 2 mL, 于 5 mL 量瓶中, 用重蒸水稀
释至刻度,充分振荡,过 01 45 Lm 滤膜, 得未熏蒸山
药供试液和 1~ 9号炮制品供试液。
21 21 4 精密度试验:精密吸取未熏蒸山药供试品溶
液 6 LL,连续进样 6次,记录尿囊素峰面积,结果其
RSD为 11 10%。
21 21 5 稳定性试验:精密吸取未熏蒸山药供试品溶
液6 LL,每隔 1 h 进样 1次, 结果尿囊素的峰面积的
RSD为 11 17%,结果表明供试品溶液在 5 h内稳定。
21 21 6 重现性试验:精密称取同一熏蒸工艺的样品
5份,制备供试品溶液,分别进样 6 LL, 按外标法计
算尿囊素的质量分数,结果 RSD为 01 75%。
21 21 7 回收率试验: 精密称取山药粉末 50 mg, 平
行 5份,分别精密添加尿囊素对照品约 01 5 mg, 制
备供试品溶液, 进样测定, 计算回收率, 结果平均回
收率为 981 63%, RSD为 11 36%。
21 21 8 测定:取尿囊素对照品溶液和供试品溶液各
6 LL 进样,每份样品重复 3次,采用外标法计算。
21 3 山药硫磺熏制的正交试验法优选:选用L 9 ( 34 )
试验设计,以尿囊素为指标,结合生产实际, 选择硫
磺用量( A)、熏蒸次数( B)、熏蒸时间( C)、抽风排气
时间( D)作为考察因素, 其中抽排风时间统一规定
为 1 h。各因素水平见表 1。测定结果见表 2, 方差
分析结果见表 3。方差分析结果表明, 因素 A 和因
素 B对硫磺熏蒸后山药中尿囊素有显著的影响, 因
素 C无显著影响。因此山药硫磺熏制的最佳工艺
为硫磺用量为 100 g / m3 , 熏蒸 1次,熏蒸 2 h。
21 4 验证试验:取山药饮片 3 批, 各 500 g, 按优选
出的熏蒸工艺条件进行熏蒸, 并测定尿囊素的质量
分数 , 结果尿囊素的质量分数分别为01 6 7% 、
表 1 因素水平
Table 1 Factors and levels
水平 因 素
A/ ( g # m - 3) B/ h C/次 D/ h
1 100 2 1 1
2 140 4 2 1
3 180 6 3 1
表 2 正交试验结果
Table 2 Results of orthogonal test
试验号 A B C D 尿囊素/ %
1 1 1 1 1 01 66
2 1 2 2 2 01 56
3 1 3 3 3 01 58
4 2 1 2 3 01 59
5 2 2 3 1 01 50
6 2 3 1 2 01 54
7 3 1 3 2 01 53
8 3 2 1 3 01 47
9 3 3 2 1 01 42
K 1 11 80 11 78 11 67 11 58
K 2 11 63 11 53 11 57 11 63
K 3 11 42 11 54 11 61 11 64
R 01 126 7 01 083 3 01 033 3 01 016 7
表 3 方差分析
Table 3 Analysis of variance
方差来源 离均差平方和 自由度 方差 F值 显著性
A 01024 16 2 01 012 1 351 065 P< 01 05
B 01013 36 2 01 006 7 191 387 P< 01 05
C 01001 69 2 01 000 8 21 452
误差 e 01000 69 2 01 000 3 1
F01 05 ( 2, 2) = 19100 F 01 01 ( 2, 2) = 991 00
01 65%、01 64%,表明优选出的工艺条件稳定可行。
3 讨论
选择熏蒸工艺的同时还测定了未经硫磺熏蒸的
山药中尿囊素的质量分数, 为 01 69%, 可见硫磺熏
蒸对山药中的尿囊素有一定的影响, 且有随硫磺用
量增加、熏蒸时间延长、次数增加而减少的趋势。
山药硫磺熏蒸工艺的选择除以山药中尿囊素为
指标外,还需考虑山药中残留二氧化硫不同程度的
增加。
硫磺熏蒸是中药传统的养护方法之一。山药经
硫磺熏蒸后,色白光亮,美观,不易生虫,大大延长其
贮存保质时间,但研究发现,山药经熏蒸后不仅对其
有效成分有所影响, 而且还产生了对人体有害的二
氧化硫和重金属, 综上所述, 山药熏硫弊多利少, 因
此选择既能保持山药较好的外观和防腐, 又能保证
其质量及用药安全的新的加工工艺势在必行。
参考文献:
[ 1] 黄泰康1 常用中药成分与药理手册 [ M ]1 北京: 中国中医药
科技出版社1 19941
[ 2] 王 玲,王 东1 不同产地山药中尿囊素含量的 HPLC测定
[ J]1 河南中医学院学报 20061 21( 5) : 20-211
#904# 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 40 卷第 6 期 2009 年 6 月