全 文 ：中革黄ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第9期2008年9月·1333·
表5正交试验的补充试验
Table5 Supplymentalresultsoforthogonaltest
0．06％，从干浸膏得率来看，前两次的干浸膏得率以
占总量的87％。因此考虑到生产上的可行性，正交
试验的最优组合为75％乙醇，第1次8倍量提取4
h，第2次6倍量提取3h。
2．7工艺验证试验：按照工艺优化条件制备3批样
品，结果九节龙皂苷I提取率为1．15％(RSD为
1．41％)，干浸膏得率为17．24％(RSD为2．66％)，
说明该工艺条件下，九节龙皂苷I提取率和干浸膏
得率均较高，从经济角度考虑在实际生产上比较节
省成本，且生产效率较高。
3讨论
对于九节龙皂苷I测定方面，通常用比色皿法，
由于九节龙皂苷I的结构特殊，没有生色基，需加入
显色剂方可进行，一般加入6％香草醛一冰醋酸0．2
mL，高氯酸0．8mL作为显色剂；或使用HPLC—UV
法利用末端吸收，检测波长为205nm。本实验对九
节龙皂苷I的测定采用高效液相色谱法，利用蒸发
光散射检测器进行测定。该方法结果准确，弥补了九
节龙皂苷I因缺少生色基无共轭结构对检测带来的
不便。
考虑到九节龙皂苷有效成分包含有脂溶性成
分，故选择适当体积分数的乙醇作为溶剂，因其主要
成分为九节龙皂苷l，故确定九节龙皂苷I为本工艺
研究的指标成分。
实验中比较了多种色谱柱，不同流动相体系，最
终选择了甲醇一水作为流动相，结果分离效果良好，
继而进一步试验选择了不同流动相配比的甲醇一水
分离九节龙皂苷1的效果，包括纯甲醇、90％甲醇、
80％甲醇、70％甲醇、60％甲醇。结果显示，80％甲醇
出峰时间过早，达不到完全分离的效果，而70％甲
醇出峰时间拖后造成时间和试剂上的浪费，故而最
终选定75％甲醇为流动相，考虑到九节龙皂苷I热
稳定性良好，结构稳定等因素，直接运用蒸发光检测
器的标准推荐参数即可得到良好的分离效果，所以
色谱柱条件最终确定为75％甲醇，检测器漂移管温
度：73．8℃；载气体积流量：2．0L／rain。
参考文献：
[1]张清华，王晓娟，缪振春，等．川产九节龙皂苷的化学研究[J]．
药学学报，1993，28(9)t673·678．
[2]陶小军，曹永孝．九节龙皂苷I的抗肿瘤作用和免疫调节作用
口]．中国药理学通报，2005，21(9)11070—1073．
[3]王晓娟，高迎春．九节龙皂苷对荷瘤小鼠放化疗的增效作用
[J]．中药材，2006，29(9)：951．953．
RP—HPLC法测定竹叶提取物中异荭草素
吴巍，程秀凤
(天津市尖峰天然产物研究开发有限公司．天津 300457)
摘 要：目的建立竹叶提取物中异荭草素的RP—HPLC的检测方法。方法色谱条件为KromasilC。。分析柱(250
mm×4．6nlm，5弘m)，柱温：30℃，波长：330rlm，流动相为乙脯．0．1％磷酸，梯度洗脱。结果异荭草素峰面积与质
量浓度成良好线性关系，其线性范围为25．65～256．5tJg／mL，r一0．99998。回收率为100．45％，RSD为0．36％
(行=6)．结论该法可使竹叶提取物中异荭草素得到良好分离，结果准确、重现性好。
关键词：竹叶提取物；异荭草素；高效液相色谱
中图分类号：R286．02 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2008)09—1333一03
收藕日期：2008—01—24
作者简介：吴 巍(197卜)，男，天津人，工程师，长期从事葡萄耔、苹果等提取物检测工作．
Tel(022)66237090—8023E—mail：tjnkwuwei@hotmail．corn
万方数据
·1334· 中草喃 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第9期2008年9月
竹叶含有多种对人体有益的成分，这些成分包
括叶绿素、竹叶多糖、竹叶黄酮、特种氨基酸、挥发性
成分等Eh23，其中竹叶黄酮由于具有抗氧化、抗衰老
等作用而越来越为人们所重视。新兴的功能性食品
添加剂竹叶提取物即是以竹叶黄酮作为其质量指标
的，竹叶黄酮中是以炭苷黄酮为主，其中4种主要的
炭苷黄酮分别为荭草苷、异荭草苷、牡荆苷和异牡荆
苷[3]。本实验通过RP—HPLC梯度洗脱法建立了一
个测定竹叶提取物中异荭草素的方法，结果本法快
速，准确，重现性好，其测定结果可以作为竹叶提取
物质量控制指标之一。
1仪器和试药
岛津公司LC--10ATvp二元高压液相色谱仪，
SPD--10Avp紫外可见检测器，HT一130柱温箱，
7725手动进样阀，Hamilton25pL进样针，Anastar
工作站。
竹叶提取物由天津尖峰天然产物研究开发有限
公司生产，异荭草素对照品(质量分数大于99％)购
自美国ChromaDex公司。乙腈、磷酸、甲醇均为分析
纯，水为双蒸水。
2方法与结果
2．1 色谱条件：色谱柱为KromasilC。。分析柱(250
mm×4．6mm，5pm)；流动相：0．1％磷酸(A)一乙腈
(B)，梯度洗脱：0--17min流动相B为18％，17～
30min流动相B逐渐上升为80％；波长：330nm；体
积流量：1mL／min；柱温：30℃；进样量：10弘L。
2．2对照品溶液制备：精密称量异荭草素对照品
10mg于50mL量瓶中，加入甲醇适量超声溶解，
加甲醇定容至刻度，摇匀，过0．45pm滤膜后即得，
备用。
2．3供试品溶液的制备：精密称量竹叶提取物150
mg于25mL量瓶中，加入甲醇超声2min，放冷至
室温，加甲醇定容至刻度，摇匀，过0．45pm滤膜，
取续滤液即得，备用。
2．4线性关系考察：精密吸取1、3、5、7、10mL异
荭草素对照品溶液于10mL量瓶中，分别加入甲醇
定容并摇匀，制成20、60、100、140、200／』g／mL对照
品溶液。取上述各溶液10弘L注入液相色谱仪分析，
记录异荭草素峰面积。以异荭草素质量浓度为横坐
标，峰面积为纵坐标，进行线性回归，得回归方程为
y=9819．58X一52072．61，r=0．99998，线性范围
为25．65--256．5ttg／mL。
2．5精密度试验：精密吸取100／zg／mL异荭草素
对照品溶液，在上述色谱条件下，连续重复进样5
次，测定异荭草素峰面积，计算得其RSD为
1．01％。
2．6重现性试验：取同一批竹叶提取物样品5份，
制备供试品溶液，进样测定异荭草素峰面积，计算，
其平均质量分数为2．54％，RSD为1．02％。
2．7稳定性试验：取供试品溶液分别在0、2、4、8、
16、24h测定异荭草素峰面积，计算，结果其RSD为
1．73％，表明供试品溶液中异荭草素在24h内
稳定。
2．8 回收率试验：精密称取含异荭草素2．45％的
竹叶提取物约30mg，共6份，分别精密加入
0．2456mg／mL异荭草素对照品溶液3mL，制备
供试品溶液，进样测定，计算得异荭草素平均回收率
为100．45％，RSD为0．36％。
2．9样品测定：分别取5个批号的竹叶提取物样
品，制备供试品溶液，进样测定，用回归方程计算异
荭草素的质量分数，结果见表1，色谱图见图1。
表l竹叶提取物中异荭草素的测定结果
Table1 Determinationofhom orientin
inbambooleafextracts
批号 异荭草素／％
BK060531一I
BK060531—2
BK050710—1
BK060718—1
BK060718—2
2．64
2．45
3．47
3．32
Z．84
A
0 10 20 30 0 10 20 30
t／rain
-一异荭草素
·一homoorientin
囤1 异荭草素对照品(A)和竹叶提取物样品(B)的
HPLC图
Fig．1HPLCCbromatogramofhomoorientin
referencesubstance(A)andbamboo
leafextractsample(B)
3讨论
由于竹叶提取物中的4种炭苷黄酮的对照品价
格都比较高，且都不容易得到，因此要同时测定4种
黄酮成分还需要植化工作者进一步努力。竹叶提取
物中的竹叶黄酮的测定一般是采用紫外分光光度计
法‘“。经本公司生产实际发现竹叶提取物中黄酮的
万方数据
中草焉 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第9期2008年9月·1335·
质量分数不同，其杂质或多或少会干扰测定的准确
性，而通过HPLC法将竹叶黄酮中的主要成分分离
出来并测定，为更准确判定竹叶提取物质量提供了
依据。
参考文献：
[13张英．天然功能性竹叶提取物一竹叶黄酮EJ3．中国食品添加
剂，2002(3)：54-66．
[23吴三林，李书华，弓加文．竹叶活性成分的研究进展口]-乐山
师范学院学报，2005，20(5)：53—54．
[3]兰燕宇，王爱民，何讯，等RP—HPLC测定注射用复方荭草
冻干粉针中异荭草素、荭草素的含量[J]．中国药学杂志，
2005，40(14)：1100—1102．
[4]刘江处．周荣琪．竹叶提取物总黄酮含量测定方法的改进
[J]．食品科技，2005，7：76—79．
温经丸质量标准研究
曲 佳1’2，车景超3，李艳玉‘，吕曙华2
(1．天津大学药物科学与技术学院，天津300072；2．天津市药品检验所，天津300070；3．广西中医学院研究生部，
广西南宁570001；4．天津中新药业集团股份有限公司达仁堂制药厂，天津300457)
摘要：目的建立温经丸的质量标准。方法采用薄层色谱法鉴别制剂中党参、吴茱萸、白术，制定处方附子中乌
头碱的限量检查方法，采用高效液相色谱法测定处方肉桂中桂皮醛。结果采用薄层色谱法均能检出党参、吴茱萸
及吴茱萸碱、白术；桂皮醛0．1392～0．6960pg线性关系良好，r=0．9999，平均回收率为97．3％，RSD为
0．91％。结论建立的质量标准方法简便、准确，重现性好，可用于温经丸的质量控制。
关键词：温经丸；党参；吴茱萸；白术；薄层色谱}桂皮醛；高效液相色谱
中图分类号：R286．1 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2008)09—1335一04
温经丸为《中华人民共和国卫生部药品标准》中
药成方制剂第1册收载品种，由党参、白术、茯苓、肉
桂、干姜、厚朴、黄芪、郁金、沉香、吴茱萸、附子1l味
中药组成，具有养血温经，散寒止痛的功效，用于妇
女血寒，经期腹痛，腰膝无力，湿寒白带，血色暗淡，
子宫虚冷等症。为了提高质量标准，有效地控制药品
质量，本实验采用TLC法对处方中党参、吴茱萸、白
术进行定性鉴别；建立附子中乌头碱的限量检查方
法；鉴于肉桂具有散寒止痛，活血通经的功效，故采
用HPLC法，以桂皮醛为定量指标，建立处方中肉
桂的测定方法。修订后的质量标准方法简便、准确，
重现性好，可用于温经丸的质量控制。
1仪器与材料
日本ShimadzuLC一2010AHT高效液相色谱
仪，LCSolution工作站。MettlerAE260万分之一
电子天平，MettlerToledoAG135十万分之一电子
天平，CAMAGLinomat5半自动点样仪，CAMAG
Reprostar3薄层色谱成像仪。
党参对照药材(批号：121057—200504)、吴茱萸
碱对照品(批号：110802—200504)、吴茱萸对照药材
(批号：120909—200508)、白术对照药材(批号：
120925—200407)、乌头碱对照品(批号：110720—
200410)、桂皮醛对照品(批号：110710—200212)均购
自中国药品生物制品检定所；温经丸由天津中新药
业集团股份有限公司达仁堂制药厂提供，9g／丸；缺
党参、吴茱萸、白术和附子的阴性对照样品均由天津
中新药业集团股份有限公司达仁堂制药厂提供，高
效液相用乙腈为色谱纯，其他试剂均为分析纯，水为
去离子水。
2方法与结果
2．1薄层色谱鉴别
2．1．1 党参：取本品lOg，剪碎，加硅藻土5g，研
匀，加甲醇100mL，超声处理45min，滤过，滤液蒸
干，残渣加水6mL使溶解，置C。。固相萃取小柱
(500mg，用甲醇、20％甲醇各10mL预洗)中，依次
用20％甲醇、甲醇各5mL洗脱，收集甲醇洗脱液，
浓缩至1mL，作为供试品溶液；同法制成缺党参阴
性对照样品溶液。另取党参对照药材1g，加甲醇25
mL，按供试品溶液的制备方法自“超声处理45
min”起依法制备，制成对照药材溶液。吸取上述3
种溶液各6pL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以
正丁醇一冰醋酸一水(7t 1 t 0．5)为展开剂，展开，取
收稿日期：2007—11-08
作者简介：曲 佳(1981一)，女，天津人，药师，2004年毕业于天津中医学院中药系，现为天津大学在读硕士研究生，研究方向为药物分
析与质量控制。TelI(022)23374076E—mail：面4599@sina．com
万方数据
RP-HPLC法测定竹叶提取物中异荭草素
作者： 吴巍， 程秀凤
作者单位： 天津市尖峰天然产物研究开发有限公司,天津,300457
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2008,39(9)
被引用次数： 1次

参考文献(4条)
1.张英 天然功能性竹叶提取物-竹叶黄酮[期刊论文]-中国食品添加剂 2002(03)
2.吴三林;李书华;弓加文 竹叶活性成分的研究进展[期刊论文]-乐山师范学院学报 2005(05)
3.兰燕宇;王爱民;何讯 RP-HPLC测定注射用复方荭草冻干粉针中异荭草素、荭草素的含量[期刊论文]-中国药学杂
志 2005(14)
4.刘江处;周荣琪 竹叶提取物总黄酮含量测定方法的改进[期刊论文]-食品科技 2005(07)

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2. 王松涛.赵建.侯若彤.杨志荣.张杰.WANG Song-tao.ZHAO Jian.HOU Ruo-tong.YANG Zhi-rong.ZHANG Jie 蓖麻
粗毒的获取及草原灭鼠的应用研究[期刊论文]-天然产物研究与开发2005,17(3)
3. 王志强 HPLC法测定参麻通络胶囊中阿魏酸的含量[期刊论文]-河北医药2009,31(15)
4. 陈敏珊 竹叶提取物的研究及竹叶提取物牙膏的研制[期刊论文]-牙膏工业2008,18(1)
5. 吴三林.李书华.弓加文 竹叶活性成分的研究进展[期刊论文]-乐山师范学院学报2005,20(5)
6. 童晓滨.谢妤.宋卫军.TONG Xiao-bin.XIE Yu.SONG Wei-jun 联合法提取雷竹叶多糖及其红外光谱的研究[期刊
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7. 刘靓雯 柄海鞘（Styela clava）天然产物的提取、结构鉴定及生理活性研究[学位论文]2005
8. 李洪玉.孙静芸.戴诗文 竹叶化学成分研究[期刊论文]-中药材2003,26(8)

引证文献(1条)
1.倪勤学.刘颖坤.龚凌霄.林新春.方伟.张英 6种地被竹叶有效成分及其抗氧化活性研究[期刊论文]-中草药
2011(11)


本文链接：http://d.wanfangdata.com.cn/Periodical_zcy200809018.aspx