全 文 ：·740· 中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第5期2008年5月
odstodeterminewat rabsorptioninratsingle—passintestinal
perfusionmodel[J]．AAPSPharmSci，2001，3：25—32·
[4]Cerquag／iaC，DiacoM，NuceraG，∥a1．Pharmacological
andclinicalb sisoftreatmentoffamiliaImediterraneanfever
(FMF)withcolchicineoranalogues：AnUpdate[J]．Curt
DrugTargets-lnflammAllergy，2005，4：117—124·
[5]UngellAL，NylanderS，BergstrandS·甜a1．Membrane
transportofdrugsindifferentgionsoftheintestinaltr ct
oftherat[J]．JPharmSci，1998，87：360—366．
[6]ValanzuelaB，CherA，Carreteropr．eta1．ProfileofP·
glycoproteindistributionin heratanditspossibleinfluence
onthesalbutamolintestinalabsorptionpr cess[J]．JPharm
Sci，2004．93：1641—1648．
[7]NakayamaA，EguchiO，HatakeyamaM，甜a1．Different
absorptionbehaviorsamongsteroidhormonesdutopossible
interactionwithP—glycoproteinintheratintestine[J]．Biol
PharmBull，1999，22：535—538．
[8]FagerholmU，J hanssonM，LennernasH．Comparison
betweenp rmeabilitycoefficientsnraandhumanjejunnum
[J]．．PharmRest1996，13：1336一i342．
[9]GeraldineMF，MyriamR，WilliamJ，eta1．Oralabsorption
characteristicsandpharmacokineticsofcoichicineinhealthy
volunteersafteringleandmultipledoses[J]．JClin
Pharrnacol，1996，36：874—883． ‘
[10]SabouraudA，Chappey0，DupinT，甜a1．Bindngof
colchicineandthiocoIchicosidetOhumanserumproteinsa d
bloodcells[J]．IntlClinPharmacolTher，l994，32：429—
432．
大黄素对大鼠肝移植排斥反应作用的时机选择
杨 潇，林胜璋‘，荆 河，徐贤绸，童洪飞
(温州医学院附属第二医院外科，浙江温州 325027)
摘 要：目的探讨大黄素对大鼠肝移植术后排斥反应作用的最佳时机。方法 以Wistar大鼠为供者，SD大鼠为
受者，建立大鼠原位肝移植模型。按照给予大黄素的时间不同，将模型动物随机分为4组，每组12只。A组作为对照
组，B、C、D3组分别于术前8d至手术当天、术前4d至术后4d、术后1—8d以ip给予大黄素50．0rag／(kg·d)。
观察各组大鼠存活时间和移植肝组织病理变化，并确定排斥活动指数(RAI)。结果D组术后受者存活时间为
(25．3士3．2)d，比其他3组明显延长(P<0．05)；D组移植肝的RAI为6．12土0．55，比其他3组明显减轻(P<
0．05)。结论于肝移植术后1～8d给予大黄素对大鼠移植肝的排斥反应有明显抑制作用，能显著延长移植大鼠
的存活时间。
关键词：大黄素；肝移植；移植物排斥，给药时机
中图分类号：R285．5 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2008)05—0740—03
大黄素(emodin)属蒽醌类衍生物，是蓼科植
物提取的有效单体，与大黄有许多相似的药理作用，
如抗肿瘤、抗炎、抑菌、抑制胰酶活性、保护肝肾功能
等[h2。。体外实验证实，大黄素对脂多糖刺激下单个
核细胞释放细胞因子有显著抑制作用[3]，也能抑制
由内毒素诱导的肿瘤坏死因子a(TNF—a)、白细胞
介素6(IL～6)、IL一1及IL一8等炎症细胞因子的分
泌，并能抑制淋巴细胞活化后的克隆扩增，从而进一
步影响免疫激活的后续环节。前期研究还发现[4]，大
黄素对大鼠肝移植后的急性排斥反应(acute
rejection，ACR)有抑制作用。本研究应用大鼠原位
肝移植模型来探讨应用大黄素的最佳时机。
1材料与方法
1．1 实验动物：供体为雄性Wistar大鼠，体质量
180～230g；受体为SD大鼠，体质量220～260g，均
由温州医学院实验动物中心提供，饲养条件符合SPF
标准。供体食水不限，受体手术前12h禁食不禁水。
1．2仪器和药品：显微器械手术包，微血管钳，8—0
无损伤手术缝线，聚乙烯塑料管制成的门静脉套管
和肝下下腔静脉套管，硬膜外麻醉导管制成的肝道
支架管。大黄素购自西安华萃生物技术有限公司，批
号为SH20060612，质量分数为98％。
1．3模型制备：按文献介绍的改良双套管法进行肝
移植[5]。其中供体手术采用腹主动脉灌注方式，修剪
供肝，安装好门静脉套管后，经门静脉再次灌注。受
体手术，肝动脉不予以重建，肝上下腔静脉连续缝合
进行吻合，门静脉和肝下下腔静脉采用套管套接，胆
道用自制支架管重建。建立稳定的Wistar大鼠到
SD大鼠原位肝移植模型后进行正式实验。
1．4 分组与处理：将成模SD大鼠随机分为4组，
收稿日期：2007—09—21
基金项目：国家自然科学基金资助项目(30572395)
作者简介：杨潇(1982一)，男，湖北荆州人，医师，硕士研究生，主要研究方向为肝胆胰外科基础与I临床。
*通讯作者林胜璋E—mail；wzf21sz@163．com
万方数据
中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第5期2008年5月·741·
每组12只，对照组(A组)及按不同时间进行干预
的给药组(B、C、D组)。B组于术前8d至手术当天
给药；C组于术前4d至术后4d给药；D组于术后
1～8d给药。各组均采用ip给予大黄素，用药剂量
为前期研究得到的最佳剂量50．0mg／(kg·d)[‘]。
1．5观察指标：移植术后第7天，每组随机处死6只
大鼠，取肝脏作组织病理检查，其余大鼠留作观察生
存时间。
1．6病理标本的获得与观察方法：将肝脏标本用
10％的中性福尔马林液固定，石蜡包埋，切片，HE
染色，光镜下观察移植肝排斥反应的程度，并采用
Banff分级方案确定排斥活动指数(RAI)[6]。该方
案将汇管区炎症、胆道炎症／损伤、静脉内皮细胞炎
症3项病变按各自的危害程度分别予以1～3分，3
项分值的总和称为RAI。RAI总积分为9分，RAI<
3分为非确定型ACR，3～5分为轻度ACR，5～7
分为中度ACR，7～9分为重度ACR。
1．7 统计学处理：计量资料以z±s表示，采用
SPSS12．0统计软件进行分析。
2结果
2．1 不同时机给大黄素对肝移植大鼠存活时间的
影响：各组肝移植大鼠存活时间见表l。结果显示，D
组大鼠存活时间比其他3组明显延长(P<0．05)，
表2
Table2
表1 各组肝移植大鼠的存活时间(；±s，甩=6)
Table1 Survivaltimeofrecipientsineverygroup
ofrats(；士s，厅=6)
组别 存活时间／d 0 组别
A 15．6士2．1 』 C
B 15．3士2．20 D
存活时问／d
15．8土2．0
25．3土3．2’
与其他3组比较：。P
0．05)。
2．2不同时机给大黄素对大鼠肝移植排斥程度的
影响：组织学观察结果显示，A组、B组、C组的移植
肝发生了严重排斥反应。A组表现为肝细胞索状排
列紊乱，可见气球样变，汇管区炎性细胞浸润，胆管
内皮有坏死、脱落。B组表现为汇管区炎性细胞浸
润，血管内膜损伤，有明显出血和肝细胞坏死。C组
表现为小叶结构破坏，肝细胞排列紊乱，汇管区大量
炎性细胞浸润，大片肝细胞坏死。D组仅呈中度排斥
反应，表现为肝细胞索状排列基本整齐，肝细胞浊
肿；汇管区有少量炎性细胞浸润，胆管内皮基本完
整，血管轻度扩张充血。病理结果见图1。
各组移植肝的RAI见表2。D组大鼠的RAI明
显低于其他3组(P
Cfil
图1各组大鼠移植肝病理结果
Fig．1Pathologicresultsoftransplantedliverofrecipientsineverygroupofrats
各组大鼠移植肝RAI(；土s，甩一6) FK506等不良反应相当明显‘川。近年来，国内外关
RAIoftransplantedliverin ecipient
ineverygroupofratsG±s，厅一6)
RAI
8．33±0．62
6．16士0．55‘
与其他3组比较：’尸d0．05
。P
肝脏虽然是免疫特殊器官，但肝移植术后仍然
存在着移植免疫排斥反应。因此，合理应用免疫抑制
剂控制排斥反应在肝移植中有着举足轻重的作用。
目前，临床上常用的药物如环孢菌素A(CsA)，
于中药及其有效成分用于移植术后的研究较为活
跃，也取得了一定的成果[4’8]。
肝脏移植后ACR主要是由T淋巴细胞介导的
细胞免疫应答[9]。这一免疫反应可分为3个阶段：受
体初始T细胞识别异体抗原，机体释放炎症细胞因
子；T细胞活化、增殖；效应阶段，即移植物损伤。另
外，肝移植后具有供体源性的过客细胞从移植肝游
走到宿主的末梢淋巴组织(脾脏)的现象口0|，提示
了该细胞不仅启动了排斥反应，而且也提示它有可
能促进了宿主形成免疫耐受。根据上述理论，大黄素
如果能阻断移植免疫应答过程中细胞因子的释放，
万方数据
·742· 中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第5期2008年5月
抑制淋巴细胞的增殖，或作用于过客细胞促进了宿
主形成免疫耐受，就能够有效地起到抗排斥反应的
作用，延长移植物存活时间。
本研究利用大鼠原位肝移植模型观察大黄素对
肝移植ACR作用的时机选择。实验结果显示，其抑
制排斥反应作用和给药时间有关。手术前8d给药
组(B组)和手术前4d至术后4d给药组(C组)
的存活时间分别与对照组相比无明显延长，均属于
排斥反应模型的术后生存期，提示于这两个时间段
给予大黄素对排斥反应影响不大。而术后8d给药
组，肝移植大鼠存活时间与对照组相比则明显延长，
提示作用发生在排斥反应期间，作用方式可能为直
接抗排斥反应或者减轻排斥反应的严重程度。
Banff分级方案是国际移植学会制订的肝移植
术后(ACR)组织病理学诊断标准[6]。本研究中，B
组和C组RAI均为8分以上，发生了重度ACR，两
组与对照组RAI的差异均无统计学意义；而D组
RAI则为6．16±0．55，仅发生了中度ACR，与对照
组相比差异显著。该结果从组织病理学的角度证实
了术后1～8d给予大黄素对大鼠移植肝的排斥反
应有明显抑制作用。至于具体的作用机制，有待今后
进一步研究。
参考文献：
[13HuangQ，ShenHM．ShuiG，eta1．Emodininhibitstumor
adhesionthroughdisruptionofthemembranelipidraft-
associatedintegrinsignalingpathwayEJ]．CancerRes，2006，
66(11)：5807—5815．
[22BasuS，GhoshA，HazraB．Evaluationofthea tibacterial
activityofVentilagom draspatanaGaerin，rubiacordifolia
LinnandLantanacamaraLinn：isolationofem dina d
physcionasactiveantibacterialagentsEJ]．PhytotherRes。
2005，19(10)：888—894．
[33KuoYC，TsaiWJ，MengHC．eta1．Immuneresponsesin
humanmesangialcellsregulatedby modinfromPolygonum
hypoleucumOhwi．口]．LifeSci，2001．58(11)：1271—1286．
[43林胜璋，徐贤绸，童洪飞，等．大黄素对大鼠肝移植排斥反
应的抑制作用[J3．中华器官移植杂志，2007，28(3)：147—
149．
[5]郑树森．肝脏移植[M]．北京：人民卫生出版社，2001．
[6]AnInternationalPanel．Banffschemaforgradingliver
allograftejection：ani ternationalconsensusdocumentf-J1．
Hepatology·1997，25(3)l658—663．
[7]黄东胜，郑树森，徐骁，等．肝移植术后免疫抑制剂的替
换应用口]．中华器官移植杂志，2002，23(4)：197—199．
[83威峰，王鹏志，朱理玮，等．中华眼镜蛇蛇毒及复方丹参
抑制异种免疫排斥的实验研究口]．中草药，2001．32(12){
1106—1108．
[93JungeG，TulliusSG，KlitzingV，eta1．Theinfluenceof
lateacuterejectionepisodesnlong—termg aftoutcomeaft r
livertransplantation[J]．TransplantProc，2005，37(4)I
1716—1717．
[103BishopGA，SunJ，DecruzDJ，eta1．Tolerancetoratliver
allografts：I．Donorcellmigrationandtolerance—associated
cytokineproductioninperipherallymphoidt ssues[J]．J
lmmunol，1996。156(12)：4925—4931．
芩百浓缩丸体内外抗肺炎支原体作用的实验研究
王伟明h2，张俊威1，许庆瑞1，张树明1
(1．黑龙江省中医研究院中药研究所，黑龙江哈尔滨150036}2．黑龙江中医药大学药学院，黑龙江哈尔滨150040)
摘 要：目的 研究复方中药芩百浓缩丸的体内外抗肺炎支原体作用。方法 采用微量稀释法检测芩百浓缩丸的
体外最小抑菌浓度(MIC)；采用滴鼻法建立大鼠肺炎支原体感染模型，以PCR检测造模情况，以细菌培养、器官指
数测定、病理学观察评价药物疗效。结果芩百浓缩丸的MIC为100pg／mL，能降低感染动物体温和肺指数，提高
胸腺指数，减轻肺组织的病理组织学改变。结论芩百浓缩丸在体内外均具有抗肺炎支原体作用。
关键词：芩百浓缩丸；肺炎支原体；MIC
中图分类号：R286．4 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2008)05—0742—04
肺炎支原体(Mycoplasmapneumoniae)是呼吸
系统感染最常见的病原体之一，感染主要见于儿童
和青年人(约占71％)，其分布呈全球性，全年都有
散发感染。在我国支原体肺炎在d,JL肺炎中的发生
率平均约为25％，而在学龄儿童中有时可达
50％～75％‘1。。在中医理论上，支原体肺炎归属为
“风温”病范畴。芩百浓缩丸(由黄芩、百部、紫菀等
中药组成)是用于治疗支原体肺炎的中成药，在多
年的临床实践中取得了良好的疗效。现通过体外抗
菌和动物实验方法对芩百浓缩丸治疗支原体肺炎的
收稿日期：2007—12—14
基金项目：国家中医药管理局新药开发专项基金资助项目(DIX055B)
作者简介：王伟明(1966一)，女．黑龙江省哈尔滨市人，黑龙江省中医研究院副院长．研究员，博士生，长期从事中药新药研发工作．
Tel／Fax：(0451)55665478E—mail：yjs—163163@163．corn
万方数据
大黄素对大鼠肝移植排斥反应作用的时机选择
作者： 杨潇， 林胜璋， 荆河， 徐贤绸， 童洪飞
作者单位： 温州医学院附属第二医院外科,浙江,温州,325027
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2008,39(5)
参考文献(10条)
1.Huang Q;Shen H M;Shui G Emodin inhibits tumor adhesion through disruption of the membrane lipid
raftassociated integrin signaling pathway[外文期刊] 2006(11)
2.Basu S;Ghosh A;Hazra B Evaluation of the antibacterialactivity of Ventilago madraspatana
Gaerin,rubia cordifolia Linn and Lantana camara Linn:isolation of emodin and physcion as active
antibacterial agents[外文期刊] 2005(10)
3.Kuo Y C;Tsai W J;Meng H C Immune responses in human mesangial cells regulated by emodin from
Polygonum hypoleucum Ohwi[外文期刊] 2001(11)
4.林胜璋;徐贤绸;童洪飞 大黄素对大鼠肝移植排斥反应的抑制作用[期刊论文]-中华器官移植杂志 2007(03)
5.郑树森 肝脏移植 2001
6.An International Panel Banff schema for grading liver allograft rejection:an international
consensus document[外文期刊] 1997(03)
7.黄东胜;郑树森;徐骁 肝移植术后免疫抑制剂的替换应用[期刊论文]-中华器官移植杂志 2002(04)
8.威峰;王鹏志;朱理玮 中华眼镜蛇蛇毒及复方丹参抑制异种免疫排斥的实验研究[期刊论文]-中草药 2001(12)
9.Junge G;Tullius S G;Klitzing V The influence of late acute rejection episodes on long-term graft
outcome after liver transplantation[外文期刊] 2005(04)
10.Bishop G A;Sun J;Decruz D J Tolerance to rat liver allografts:Ⅲ.Donor cell migration and
tolerance-associated cytokine production in peripheral lymphoid tissues 1996(12)
本文链接：http://d.wanfangdata.com.cn/Periodical_zcy200805034.aspx