全 文 ：·1034· 中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第7期2006年7,El
16、24h进样10肛L测定，原儿茶醛的保留时间平均
值为7．83min，RSD为0．18oA，原儿茶醛的峰面积
RSD为0．21％。
2．7重现性试验：精密称取同一批号样品5份，制
备供试品溶液，进样10pL测定，原儿茶醛色谱峰保
留时间和峰面积RSD分别为0．23％、0．55％。
2．8 回收率试验：取同一批号毛冬青滴丸，碾碎，混
匀，精密称取5份，每份0．3g，分别准确加入11．7
弘g／mL原儿茶醛对照品溶液各3mL，制备供试品
溶液，分别进样10肛L测定，计算回收率，结果平均
回收率为98．54％，RSD为1．13％。
2．9样品测定：分别精密吸取原儿茶醛对照品溶液
和样品溶液各10弘L，注入色谱仪测定，按外标法计
算毛冬青滴丸中原儿茶醛的质量分数。取3批样品
进行测定，结果见表1。对照品和供试品的HPLC图
见图1。
裹1 毛冬青滴丸中原儿茶醛的测定结果(一一3)
Table1 Determinationofprotocatechualdehyde
inMaodongqingDroppingPills(一一3)
3讨论
本实验采用甲醇溶解毛冬青滴丸，滤过后直接
进样测定，原儿茶醛色谱峰能得到较好的分离。测定
三 ．盐
0 2 4 6 8 10 12
*一protocatechualdehyde
图1 原儿茶醛对照品(A)和毛冬青滴
丸(B)的HPLC图谱
Fig．1HPLCChromatogramsfp Otocatechualdehyde
referencesubstance(A)andMaodo gqing
DroppingPills(B)
结果表明，每粒毛冬青滴丸约含原儿茶醛3．4弘g，
约相当于毛冬青片的1／3量。本法简便、快速、重现
性好，适用于毛冬青滴丸中原儿茶醛的定量测定。
References：
[13JiangsuNewMedicalCo lege．DictionaryofChineseMateria
Medica(中药大辞典)EM]．VolI：Shanghai：Shanghai
ScientificandTechnicalPub ishers，1986．
E2]DongKS，WangXQ，DongYF，eta1．ModemClinical
ChineseTaditionalMedicine(现代临床中药学)[M]．Beijing：
ChinaPressofTraditionalChineseMedicine。1998．
清火片中大黄素和大黄酚的HPLC法测定
王云娇1，李武毅2，张永云1
(1．中国医学科学院药用植物研究所云南分所，云南景洪666100；2．中山市恒生药业有限公司，广东中山5284117)
清火片由大青叶、大黄、石膏、薄荷脑4味中药
经提取制成，可清热泻火、通便，用于咽喉肿痛、牙
痛、头目眩晕、口鼻生疮、风火目赤、大便不通，效果
显著。本实验选用主药大黄中的大黄素、大黄酚作为
控制指标，用HPLC法测定样品中大黄素和大黄酚。
1仪器与试药
岛津公司色谱仪，LC--10ATvp泵、二级管阵
列检测器、2010色谱工作站；甲醇(色谱纯)，氯仿、
高氯酸(AR)；大黄素对照品(中国药品生物制品检
定所，批号0756—20023)，大黄酚对照品(中国药品
收稿日期：2005—09—17
生物制品检定所，批号0796—21055)；清火片(江西
安远药业股份有限公司)。
2方法与结果
2．1 色谱条件：色谱柱：日本岛津C。。键合硅胶柱
(150mm×4．6mm，5肛m)；进样体积为20pL；流
动相：甲醇一0．1％高氯酸(75：25)；检测波长：254
nm；体积流量：0．8mL／min。
2．2对照品溶液的制备：精密称取大黄素对照品5
mg、大黄酚对照品5mg，分别置于50mL量瓶中，
用甲醇稀释至刻度。精密吸取大黄素溶液1mL，大
三¨
万方数据
中草焉 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第7期2006年7月·1035·
黄酚溶液2mL，置于10mL量瓶中，加甲醇至刻
度，摇匀，即得(含大黄素10弘g／mL，含大黄酚20
t．tg／mL)。
2．3供试品溶液的制备：取本品20片，除去糖衣，
精密称取，研细，取0．8g，置100mL锥形瓶中，精
密加甲醇25mL，称定质量。加热回流30rain，放冷，
再称定质量，用甲醇补足减失质量，摇匀，滤过，精密
量取续滤液5mL，置5mL圆底烧瓶中，挥去甲醇，
加2．5mol／L硫酸溶液10mL，超声处理5rain，再
加氯仿10mL，加热回流1h，冷却，移至分液漏斗
中，用少量氯仿洗涤容器，并入分液漏斗中，分取氯
仿层，酸液用氯仿提取2次，每次约8mL，合并氯仿
液，以无水硫酸钠脱水，氯仿液移至100mL锥形瓶
中，挥去氯仿，残渣精密加甲醇10mL，称定质量，置
水浴中微热溶解残渣，放冷后，再称定质量，用甲醇
补足减的质量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
2．4 系统适应性试验：在上述的色谱条件下，注入
供试品溶液。理论塔板数以大黄素峰计算为2500
以上，分离度为4．0以上，拖尾因子为1．03。以大黄
酚峰计算3000以上，分离度为3．0以上，拖尾因子
为1．15。大黄素、大黄酚和其他组分均能达到较好
的分离，见图1。
A
2
．．i i．
B
2
队一～Ao 5 10 o 5 10
“min
1一大黄素2一大黄酚
1-emodin2一chrysophanol
图1 混合对照品(A)和清火片(B)的HPLC图
Fig．1HPLCChromatogramsfmixedreference
substances(A)andQinghuot blets(B)
2．5线性关系考察：精密称取五氧化二磷干燥至恒
重的大黄素对照品约5mg、大黄酚对照品约5rag，
分别置于50mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻
度，摇匀。再分别精密吸取0．2、0．4、1．2、4、5mL，分
别置于10mL量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，20
pL进样测定，以质量浓度为横坐标，峰面积为纵坐
标绘制标准曲线，结果表明大黄素在0．02～0．12
mg／mL，大黄酚为0．162～6．480弘g／mL与峰面积
内呈良好线性关系。标准方程分别为：大黄素y=
51288X+991．23，r=0．9999，大黄酚Y一
66187235．86X+21890．18，r=0．9999。
2．6精密度试验：取供试品溶液，连续进样测定6
次，记录峰面积，结果测得大黄素RSD为1．34％，
大黄酚RSD为1．27％。
2．7 重现性试验：取同一批样品(030212)，按供试
品溶液的制备方法分别制备6份供试品溶液，进行
大黄素和大黄酚的质量分数的测定，结果RSD分别
为0．41％、0．32％。
2．8稳定性试验：取供试品溶液分别在0、2、4、6、
8、10、12h进样，记录图谱，计算大黄素和大黄酚的
质量分数，其RSD分别为0．84、0．54％。
2．9回收率试验：取清火片粉末0．84g，精密称定，
置100mL锥形瓶中。分别精密称取大黄素对照品
2．5mg、大黄酚对照品2．5mg，制备供试品溶液，测
定，计算回收率。结果平均回收率大黄素为99．56％
(RSD为0．61％，，2—6)，大黄酚为99．22％(RSD
为0．36，n=6)。
2．10样品测定：测定3批样品中大黄素、大黄酚，
结果见表1。
表1清火片中大黄素和大黄酚的测定结果(一一2)
Table1 Determinationresultsofemodinand
chrysophanoiInQinghuoTables(一一2)
3讨论
本实验研究证明，该方法简单，准确，灵敏度高，
重现性好，稳定性也较好，可用于清火片中主要成分
大黄素和大黄酚的定量控制。
万方数据
清火片中大黄素和大黄酚的HPLC法测定
作者： 王云娇， 李武毅， 张永云
作者单位： 王云娇,张永云(中国医学科学院药用植物研究所云南分所,云南,景洪,666100)， 李武毅(中
山市恒生药业有限公司,广东,中山,5284117)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2006,37(7)
被引用次数： 5次

引证文献(5条)
1.张美.王鑫 化坚止痛膜中大黄素和大黄酚的HPLC法测定[期刊论文]-中草药 2010(6)
2.宁洁 HPLC法测定抗眩晕颗粒中大黄素和大黄酚[期刊论文]-中草药 2010(5)
3.张翠.刘颖.王晓泊 HPLC法测定芪丑汤中大黄素的含量[期刊论文]-黑龙江医药 2008(2)
4.师涛.孟宪生.罗国安.王义明.龚千峰 凉膈丸定性定量方法研究[期刊论文]-中国实验方剂学杂志 2008(5)
5.王勤.邸多隆.蒋生祥 大黄类药物分析方法研究概况[期刊论文]-中成药 2007(8)


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