全 文 ：·1502· 中草药 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第10期2006年10月
2．7 提取工艺的验证：用选定正交试验的优化工艺
作了3次平行验证，结果平均浸膏率为12．86％，
IC。。为5．23rag／mE薯蓣皂苷元的质量分数为
1．29％，表明该工艺稳定、可行、重现性好。
3讨论
本实验以lC。。作为提取工艺考察的指标之一，
从药效学方面考察工艺的合理性，更直观、更全面地
反映结果的可靠性。
近些年来已有许多学者报道薯蓣皂苷元有抗肿
瘤活性[2m“，本课题研究已证明白英中含有薯蓣皂
苷元，因此本实验选用薯蓣皂苷元为另一指标，从质
量控制方面考察提取工艺的合理性。
从实验结果可以看出，在6号试验中，IC。。为
5．84mg／mL，薯蓣皂苷元质量分数为1．77％均为
各列之首，提示1C∞与薯蓣皂苷元可能是有相关性
的，即薯蓣皂苷元质量分数越高，IC。。的值越小，体
外细胞增殖抑制作用越强。
References：
EI]ShiYP，WangH．Studyontheprocessforextracting
flavonoidsfromHypericumperJoractumL．byorthogonaltest
[J]．NatProdResDev(天然产物研究与开发)，2005，17
(3)：325—327．
[2]Hon．gzQ，LinJH．Antitumoractivityofdiosgenininvitro
[J]．JFujianCoil7raditChinMed(福建中医学院学报)，
2005，15(4)：37—39．‘
[3]WangI。J，WangY，ChenSW，eta1．Theantitumoractivity
ofdiosgenini v voandinvitroD]．ChinaJChinMaterMed
(中国中药杂志)，2002，27(10)：60—62．
[43ChenSW，WangY，SunCJ，eta1．Effectofdiosgeninontu—
motgrowthofnudemicebearinghumangastriceailcer[J]。J
JilinUniv：MdSci(吉林大学学报：医学版)，2003，29(2)：
26．27．
大孔吸附树脂纯化丹参总酚酸的工艺研究
房信胜1，谭晓梅2，王建华1
(1．山东农业大学农学院，山东泰安271018；2．南方医科大学中药新药研究重点实验室，广东广州510515)
丹参为唇型科植物丹参Salviamiltiorrhiza
Bunge的干燥根及根茎，活血调经、凉血消痈、安神，
在临床得到了广泛应用，并且是许多制剂的原料。其
中的酚酸类成分是水溶性主要有效部位，具有明显
的抑制血小板聚集、抗凝、溶纤及抗脂质过氧化的作
用[1]，是丹参活血化瘀的主要活性成分。该类化合物
主要有原儿茶醛、原儿茶酸、丹参素、丹酚酸A，B，
C、迷迭香酸等[2~4]。以往的精制主要采用水提醇沉
法，总酚酸的量低；也有报道用大孔树脂分离丹参中
的水溶性成分[5]，但只是用原儿茶醛和丹参素为指
标，缺乏对总成分和分离条件的系统研究。本实验采
用大孑L吸附树脂纯化该有效部位，并研究分离的工
艺条件和参数。
l仪器、材料和试剂
HP一8453紫外一可见分光光度计(美国惠普公
司)；HP一1100高效液相色谱仪(美国惠普公司)，
G1315A紫外一可见光二级管阵列检测器。
丹参药材购自广东省药材公司，产地四川中江，
由本系刘传明讲师鉴定为唇形科植物丹参S．milti—
orrhizaBunge的根；原儿茶醛对照品(中国药品生
物制品检定所，批号110810-200205)；大孑L吸附树
脂(南开大学和成树脂厂，均为药用型)。
无水乙醇、乙醚、冰醋酸、95％乙醇均为分析纯，
甲醇(分析纯，色谱纯)，蒸馏水(超纯水)。
2方法与结果
2．1丹参总酚酸的测定
2．1．1标准曲线的绘制：精密称取干燥至恒重的原
儿茶醛对照品16．08mg，用无水乙醇配成128．6
弘g／mL的对照品溶液。分别吸取对照品溶液0．2、
0．4、0．6、0．8、1．0、1．2mI。于10mL量瓶中，无水
乙醇定容，随行溶剂做空白，用紫外一可见分光光度
计于281nm依次测定吸光度，以质量浓度(C)为纵
坐标，吸光度(A)为横坐标绘制标准曲线。结果标准
曲线C=0．26842+13．855A，r=0．9995，线性范
围为2．6～15弘g／mL。
2．1．2样品测定：吸取样品液适量，用乙醚萃取4
次，萃取液水浴挥干乙醚，加无水乙醇溶解，滤过，定
容，作为待测液，取待测液适量，用无水乙醇稀释至
合适质量浓度后按标准曲线的绘制项下方法测定．，
计算总酚酸的量。
收稿日期：2005—12-14
作者简介：房信胜(1974一)，男，山东莱芜市人，硕士，主要从事中药药剂学教学及中药制剂开发和质量控制研究。
Tel：(0538)8248073E—mail：xinshf@126．corn
万方数据
中草药 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第10期2006年10月·15 3·
2．2树脂类型的选择
2．2．1树脂预处理：根据树脂性能初步选择了3种
树脂，分别称取3种干树脂各1g，加95％乙醇溶
胀，再用蒸馏水洗净树脂问乙醇备用。
2．2．2上样液的制备：称取干燥后的丹参粗粉，加
水浸泡6h，回流提取2次，均为8倍量水，每次1．5
h。合并提取液，减压浓缩，浓缩液加95％乙醇使含
醇量达80％，冰箱中冷藏10h，离心，上清液减压回
收乙醇，加l％盐酸调pH值至2，离心，上清液用蒸
馏水定量为12mg／mL(以总酚酸计)作为上柱液。
2．2．3吸附量与解吸率比较：吸取上样液10mL，
加入盛有树脂的具塞三角瓶中，于室温下振荡，进行
静态吸附。吸附完成后分离出上清液，树脂再用10
mL水洗涤1次，合并人上清液，作为剩余液。各树
脂再依次用30％、50％、70％、95％乙醇浸泡洗脱2
次，每次10mL。吸取剩余液和各洗脱液适量，乙醚
萃取后，以原儿茶醛做对照品，用紫外分光光度法测
定酚酸剩余量和解吸量，计算吸附量和解吸率(吸附
量=上样液中总酚酸量一剩余液中总酚酸量；比吸
附量一吸附量／干树脂质量；解吸率一总酚酸洗脱
量／总酚酸吸附量)，结果见表1。结果表明，ADF8
树脂的吸附量与解吸率均好，因此选择该树脂。
表l各种树脂的吸附与解吸情况
TableAdsorptioncapacityandesorptionrate
ofvariousre ins
刑娶
吸附 30％部50％部70％部95％部解吸 解吸
盈／mg分／mg分／mg分／mg分／mg量／mg率／％
ADSl738．0 20．6 5．7 一 一 26．3 69．2
ADF832．7 23．5 7．6 一 一 31．1 95．0
ADS2l63．5 13．0 14．0 3．6 1．8 32．4 51．0
2．3上样质量浓度对吸附量的影响：取含总酚酸
4、6、8、10、12mg／mL的上样液10mL，加入处理好
的ADF一8树脂中，静态吸附，其余操作同2．2．3项
下方法，计算吸附量，结果见表2。结果表明，含总酚
酸为10mg／mL时，吸附量较大。
表2上样质量浓度对吸附量的影响
Table2 Effectofliquorconcentration
onadsorptioncapacity
上样质量浓度／(mg·mL_1)比吸附量／(mg·g“)
4．0
6．0
8．O
10．O
12．0
28．3
32．7
34．2
36．5
34．6
2．4 盐效应对吸附量的影响!引：取含总酚酸10
mg／mL的上样液10mL，加入氯化钠使其在药液中
的质量浓度分别为2％、3％、4％、5％，上样，静态吸
附。其余操作与测定同2．2．3项下方法，计算吸附
量，结果见表3。结果表明，加入氯化钠后吸附量增
加，综合考虑，加人氯化钠质量浓度为2％较好。
表3盐效应对吸附量的影响
Table3 Effectofsalteffectonadsorptioncapacity
氯化钠的质量浓度／(rag·mL_1) 吸附量／mg
2．5洗脱曲线的绘制和洗脱溶媒用量的确定：2．2
项下结果表明，丹参总酚酸主要集中在30％乙醇洗
脱液中，50％洗脱液中虽然有一定量，但经过测定，
酚酸的量明显偏低，因此选择30％乙醇为洗脱剂。
树脂上样(柱高12cm)、动态吸附后，依次用水
和30％乙醇洗脱。水洗液每20mL收集一份共8
份，依次编为1～8号，测定每份洗下的总固体量，以
每份洗下的固体量为纵坐标，以编号为横坐标绘制
水洗脱杂质曲线，见图1。30％乙醇洗脱液共收集9
份，前3份每份40mL，后6份每份20mL，依次编
为17～97号，测定每份中总酚酸的量，以每份洗下的
总酚酸量为纵坐标，以编号为横坐标绘制洗脱曲线，
见图2。
凹
d
姓
围
L
斌
0 l 2 3 4 5 6 7 8
编弓
图1 ADF一8树脂水洗脱杂质曲线
Fig．1WaterlutioncurveofimpuritybyADF一8resin
曲
＼
强
链
裔
幽
．上
基
图2 ADF一8树脂30％乙醇洗脱酚酸曲线
Fig．230％Acoholelutioncurveofphenolicacid
byADF8resin
由洗脱曲线可知，水用量为150mL(约2．5
BV)时，基本达到最大杂质洗脱量，而只洗下极少的
∽
呲
¨
o
万方数据
·1504· 中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第10期2006年10月
酚酸；30％乙醇用量为240mL(约4BV)时，基本
达到最大酚酸洗脱量。因此水的用量选择2．5BV，
30％乙醇用量选择4BV。
2．6 试验验证：根据确定的树脂类型和最佳工艺，
用3根树脂柱(柱高26cm，内径5cm)同时进行酚
酸纯化试验，结果树脂纯化后总酚酸的平均质量分
数为53．8％，收率为1．9％。
2．7 工艺过程的HPLC图谱分析[7]：为指导工艺
研究，本研究分析了工艺研究过程中纯化前后的样
品中酚酸类成分的HPLC图谱，见图3。色谱条件
为：色谱柱ZorbaxODS柱(250mmX4．6mm，5
p．m)；流动相：甲醇一1％醋酸水溶液(40：60)；进样
量10L；柱温：室温；检测波长：281nm。
．L⋯⋯．—上——L——^1
0 10 20 30 40 50 0 I() 20 30 40 50
t／min
图3上样液(A)和树脂纯化后总酚酸(B)的HPLC图谱
Fig．3HPLCChromatogramsofsample(A)
andpurifiedphenolicacid(B)
3讨论
大孑L吸附树脂是吸附和筛选原理相结合的分离
材料，它的吸附性能是由于范德华引力或生成氢键
的结果，筛选作用是由其本身多孑L性结构所决定。由
于其良好的分离效果，目前在中药成分的分离纯化
中得到了广泛应用。根据树脂的结构、性能以及待分
离成分的性质，可以选择合适的树脂类型。作为酚酸
类成分，用大孔吸附树脂进行分离纯化的报道较少，
本实验选择的3种树脂均为氢键型极性吸附树脂，
对多元酚有较高的选择吸附性，因此本实验重点考
察了这3种树脂对丹参酚酸的纯化效果。从实验结
果看，某些树脂虽然吸附量大，但洗脱困难。
本实验通过工艺研究，有效提高了总酚酸的纯
度，纯化前酚酸在总固体物中的质量分数为7．2％，
纯化后质量分数达53．8％：本实验给出了水洗脱杂
质的曲线，目的是确定洗脱杂质时水的用量，而在其
他有关大孔吸附树脂的文献中，很少有说明水的用
量。另外丹参酚酸类成分性质不稳定，在工艺过程中
会存在某些成分的损失或量的变化，本实验结合
HPLC图谱进行了工艺过程的定性分析，结果表明，
在工艺过程中某些成分有量的变化，即各成分的比
例发生了变化，但总酚酸的成分组成(即成分谱)基
本没有变化，结果有利于指导谱一效关系分析。
References：‘
[1]YokozawaT，ChungHY，OuraH．Effectofextractfrom
．RadixSalviaMiltiorriaeonthurinaryurea，creatinend
elec—trolyteexcretioninuremicrats口]．JMedPharmSoc，
1986，(3)：10．
E2]MiaoMS．ModernP acticableTechnologyofChineseMateiia
MedicaQualityControl(现代实用中药质量控制技术)[M]．
Beijing：People’SMedicalPublishingHouse，2000．
E331．i zx。GuWH，HuangHZ．StudyQnthewater—soluble
phenolicofSalviamiltiorrhiza[J]．ChinP^drⅢJ(中国药学
杂志)，1981，16(9)：24—26．
[4]ZhouCx，LuoHW，DanyuzW．Studyonthewater—soluble
compoundsofSalviamiltiorrhiza[J]．JChinaPharmUniv
(中国药科大学学报)，2002，33(2)：127—130．
[5]WangzP，LiuYQ，FanJY，eta1．Studiesonpurificationof
water··solublecompoundsofSalviamiltiorrhizawithmacro—-
porousresin[J]．ChinTraditHerbDrags(中草药)，2003，
34(10)：908—909．
[63DongFY．NewTechnologyandMethodofChineseMateria
MedicaPreparation(中药制剂新工艺新方法)[M]．Beijing：
People’SMedicalPublishingHouse，2001．
[73LiuYH，ZhaoLH，HuangJ．StudyOiltheHPLCfingerprint
ofSalviamiltiorrhiza[J]．．，ChinaPharmUn v(中国药科大
学学报)，2002，33(2)：127-129．、
欢迎订阅《中草药》杂志2005年增刊
2005年11月25日～30日，由天津药物研究院和中国药学会主办的“第五届中药新药研究与
开发信息交流会暨《中草药》杂志第九届编委会”在海南省海口市召开，为了配合会议的召开，本刊
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昌岔§叠9夸9夸§夸争岔9全9撕9夸9净9》9岔9叠9口号叠9岔9》9脚9夸9夸9夸9岔9岔9岔9》9兮9岔9兮9夸9兮9夺9彦9套9夸9净9全9全9夸9舰
万方数据
大孔吸附树脂纯化丹参总酚酸的工艺研究
作者： 房信胜， 谭晓梅， 王建华
作者单位： 房信胜,王建华(山东农业大学农学院,山东,泰安,271018)， 谭晓梅(南方医科大学,中药新
药研究重点实验室,广东,广州,510515)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2006,37(10)
被引用次数： 3次

参考文献(7条)
1.Yokozawa T.Chung H Y.Oura H Effect of extract from Radix Salvia Miltiorriae on the urinary
urea,creatine and elec-trolyte excretion in uremic rats 1986(03)
2.Miao M S 现代实用中药质量控制技术 2000
3.Li Z X.Gu W H.Huang H Z Study on the water-soluble phenolic of Salvia miltiorrhiza 1981(09)
4.Zhou C X.Luo H W.Danyu Z W Study on the water-soluble compounds of Salvia miltiorrhiza 2002(02)
5.Wang Z P.Liu Y Q.Fan J Y Studies on purification of water-soluble compounds of Salvia miltiorrhiza
with macroporous resin[期刊论文]-中草药 2003(10)
6.Dong F Y 中药制剂新工艺新方法 2001
7.Liu Y H.Zhao L H.Huang J Study on the HPLC fingerprint of Salvia miltiorrhiza 2002(02)

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脂纯化丹参总酚酸的工艺研究[期刊论文]-中成药2007,29(9)
4. 王建佳.王永江.胡广利 大孔树脂吸附法提取丹参中丹酚酸B的实验研究[期刊论文]-中国新技术新产品2009(10)
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床 2011(4)
2.郑云枫.黄利.魏娟花.彭国平.李贺敏.程建明 不同类型树脂对4种丹参酚酸类成分的动态吸附研究[期刊论文]-中
成药 2013(8)
3.王跃生.王金钱.陈银芳.孙艳荣 折光法快速判断中药柱层析过程中的始终点及其在树脂精制丹参有效部位中的应
用[期刊论文]-江西中医学院学报 2007(2)


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