全 文 ：　第 13卷
　第 1期 　
江西中医学院学报
JOU RN AL OF JIANGXI CO LLEGE OF TRADIT ION AL CHIN ESE M EDICINE
Vol. 13　 No. 1　
2001　
田基黄注射液采用吸附澄清法新工艺的研究
易醒 1　肖小年 2　邵思华 3　胡仁胜 4　谢春松 3
( 1　南昌大学　南昌 330047; 2　中德联合研究院　南昌 330029; 3　江西中医学院药学系　南昌 330006; 4　江西京海云山制药厂　永修 330300)
　　摘要: 采用正交试验对田基黄注射液的吸附澄清工艺进行了初步研究 ,得出最佳工艺 ,即 :澄清剂用量为 1
m L /10m L,田基黄提取液浓度为 4 g /mL ,药液 p H值为 5. 3。 经薄层定性及稳定性初步观察 ,该法具有可行性。
　　　　关键词: 田基黄注射液 ;吸附澄清法 ;工艺研究 ;正交试验
　　中图分类号: R 283. 611
　　文献标识码: A
　　田基黄注射液是田基黄经提取而成的灭菌水溶
液 ,有效成分主要是黄酮类。生产过程中 ,厂家普遍
反映产品存在质量不稳定、澄明度差等问题 ,并且醇
沉成本高 ,周期长 [1 ]。 因此 ,积极探索其新工艺非常
有必要。
吸附澄清法是在中药提取液中加入吸附澄清剂
以吸附形式除去粗粒子 ,经滤过达到精制目的 ,使药
液澄明度符合要求。该法在田基黄提取液中的应用
尚未有报道 ,本文运用三因素三水平的正交试验对
其澄清工艺进行了初步研究 ,得出了最佳工艺 ,为进
一步研究奠定了基础。
1　仪器与药品
pHB-1型便携式 pH计 (上海三信仪表厂 ) ,
PU 8740型紫外 /可见分光光度计 ( Phi lips公司 ) ,
721型分光光度计 (上海天平仪器厂 ) ,田基黄 (江西
云山药厂提供 ,经鉴定为 Hypericum japonicum
Thurb) ,芦丁及槲皮素对照品 (中国药品生物制品
检定所 ) ,其它化学试剂均为分析纯。
2　实验方法与结果
2. 1　田基黄的提取
参考文献 [2]采用水提法提取。田基黄剪段称重
后 ,第 1次加药材的 10倍量水 ,浸 15 min,煮沸 30
min,滤过 ;第 2次加药材的 8倍量水 ,煮沸 20 min,
滤过。 合并 2次滤液 ,浓缩至不同浓度 ,得田基黄提
取液 ,备用。
2. 2　田基黄中总黄酮吸收波长的确定
2. 2. 1　样品及对照品的制备　原药材液: 取田基黄
提取液 ( 4 g /mL) ,静置 36 h ,取上清液离心 ,滤过 ,
稀释至 0. 005 g /mL,药液备用。
加澄清剂后药液: 取田基黄提取液 ( 4 g /mL) 10
m L,加入 0. 1%的澄清剂 1 mL,振摇 ,静置 36 h,滤
过 ,稀释至 0. 005 g /mL,药液备用。
醇温浸液: 田基黄药材剪段 ,取 2 g,加 70%乙
醇 30 mL,加盖于 50℃水浴温浸 12 h,滤过 ,滤液稀
释至 0. 005 g /mL,药液备用。
芦丁对照品溶液: 取芦丁对照品约 10 mg ,用
60%乙醇溶解 ,使含芦丁为 0. 025 mg /mL,备用。
2. 2. 2　绘制吸收光谱图　精密吸取 1 mL药液置
10 m L量瓶中 ,加入 30%乙醇 4. 0 mL, 5% NaNO2
溶液 0. 3 mL, 10% Al( NO3 ) 3溶液 0. 3 mL,静置 4
min,加入 1 mol /L NaOH溶液 4. 0 mL,静置 10
min,加蒸馏水至刻度 ,振摇 ;取 1 mL蒸馏水同法操
作 ,为空白对照 ,置紫外 /可见分光光度计在 300～
600 nm间扫描 ,得图谱。根据图谱并参考文献 [3, 4 ] ,
确定测定田基黄总黄酮的吸收波长为 500 nm。
2. 3　正交试验
以总黄酮的吸收值为考察指标 ,选用 L9 ( 3) 4正
交表。考虑其澄清效果与药液浓度、药液 pH值及澄
清剂加入量有关 ,经预试 ,各因素选取 3个水平 (见
表 1)。取提取液 10 mL调 pH值 ,加 1%澄清剂 ,振
摇 ,静置 36 h,滤过 ,取续滤液按 2. 2. 2项操作进行
实验 ,在 500 nm处测得吸收度 ,结果见表 2和表 3。
表 1　因素水平设计
水平
A B C
药液浓度
/ g· mL- 1 pH值
澄清剂加入量
/mL· 10 m L- 1
1 4. 0 5. 9 2. 0
2 2. 0 5. 3 1. 0
3 1. 3 4. 7 2. 5
表 2　正交实验与结果
实验号 因素
A B C D
吸收值 合计
Y i1 Y i2 Y i3 Y i
1 1 1 1 1 0. 110 0. 114 0. 114 0. 338
2 1 2 2 2 0. 140 0. 144 0. 145 0. 429
3 1 3 3 3 0. 098 0. 099 0. 107 0. 304
4 2 1 2 3 0. 138 0. 139 0. 137 0. 414
5 2 2 3 1 0. 103 0. 104 0. 104 0. 311
6 2 3 1 2 0. 116 0. 108 0. 115 0. 339
7 3 1 3 2 0. 102 0. 101 0. 103 0. 306
8 3 2 1 3 0. 110 0. 107 0. 105 0. 322
9 3 3 2 1 0. 136 0. 136 0. 140 0. 412
·24·
表 3　方差分析表
方差来源 离均差平方和× 10-5 自由度 方差× 10-5 F值
A 5. 111 2 2. 555 3. 150*
B 0. 667 2 0. 333 0. 411
C 677. 330 2 338. 660 417. 532* *
误差 16. 662 20 0. 811
　　* F 0. 005(2, 20)　　　　= 3. 49　* * F 0. 01(2, 20)　　　　= 5. 85
从表 3可知 , C因素即澄清剂加入量为主要因
素。综合考虑实际运用 ,确定最佳工艺为 C2A1 B2 ,即
澄清剂加入量为 1. 0 ml /10 mL药液 ,药液浓度为 4
g /mL, pH值为 5. 3。
2. 4　薄层色谱法定性鉴别
2. 4. 1　薄板制备　按《中国药典》 ( 1995年版 )要
求 ,取光滑洁净的玻板 ,用 0. 5% CMC-Na水溶液适
量将硅胶 G调成糊状 ,晾干后 105℃活化 30 min,
置干燥器中 ,备用。
2. 4. 2　样品及对照品溶液制备　原药材液: 取 2. 5
g生药 ,按水提法操作 ,浓缩至 10 mL,静置 36 h,离
心过滤 ,备用。
加入澄清剂后的药液:取 2. 5 g生药 ,按最佳工
艺条件操作 ,得澄清液 ,备用。
槲皮素对照品溶液:精密称取槲皮素 10 mg,用
60%乙醇溶解并定容于 100 mL量瓶中 ,备用。
2. 4. 3　薄层色谱　取样品及对照品溶液点于同一
薄板上 ,以乙酸乙酯-丙酮 -水 -冰醋酸 ( 5∶ 4∶ 1∶
0. 4)为展开剂 ,采用上行法 ,室下展开 ,展距 21 cm ,
取出 ,晾干 ,置紫外灯 ( 365 nm )下检视 ;再喷以 5%
三氯化铝乙醇 -水溶液 ,电炉上稍稍烘烤后 ,置紫外
光灯 ( 365 nm )下检视。未加澄清剂的原药材液和加
入澄清剂后药液的色谱中 ,在与对照品色谱相应的
位置上 ,显相同颜色的斑点。结果表明澄清剂的加入
对色谱斑点的颜色、数量无影响。
2. 5　澄清后药液稳定性初步观察
称取药材 ,按最佳工艺条件操作制得田基黄药
液 ,置 10 mL具塞刻度离心试管中 ,一批置冰箱 ( -
5℃ )中 ,一批置室温下 ,一批置水浴 ( 100℃ )中加
热 30 min后室温放置 ,观察药液变化 ,结果见表 4。
从表中可知 ,经澄清剂沉降后的药液较为稳定。
表 4　澄清后药液稳定性初步观察
冰箱 (- 5℃ ) 室温 水浴 ( 100℃ )
放置时间 7d 7d 30 min
现象 无变化 无变化 无变化
3　讨论
正交试验中 ,只是为了比较总黄酮的含量 ,而不
需要知道其确切含量是多少 ,因此 ,只测定了吸收
值 ,用以比较总黄酮的含量。
按最佳工艺制备的药液 ,经薄层定性及稳定性
初步观察 ,可以认为采用吸附澄清法具有可行性 ,但
本实验仅对吸附澄清法的工艺进行了探讨 ,与原工
艺的比较尚有待于进一步研究。
参考文献
[1 ]武秀项 ,吴联奎 ,张克 . 田基黄注射液的质量研究 [ J ]. 中成药研
究 , 1983( 4): 12
[ 2 ]上海市长征制药厂 . 田基黄治疗肝炎报导 [ J ] . 中草药通讯 ,
1972( 5): 36
[3 ]王昌利 ,宋小妹 ,胡亚迅 ,等 . 沙棘果皮总黄酮提取分离工艺研究
[ J ]. 中成药 , 1994, 16( 9): 6
[4 ]中华人民共和国卫生部药典委员会 . 中华人民共和国药典 [M ].
北京:化学工艺出版社、广东省科技出版社 , 1995. 311
(收稿日期: 2000-12-02)
Studies On The Technological Process Of Tianjihuang Injection
By Means Of Abxorption And Claification Method
Yi Xing1 , Xiao Xaionian2 , Shao Sihua3 , Hu Rensheng4 , Xie Chunsong3
( 1　 Nanchang Univ ersi ty , Nanchang 330004; 2　 Sino-German Joint Insti tute, Jiangx i-O AL;
3　 Jiangxi College o f Tradi tional Chinese M edicine; 4　 Jiangxi Yunshan Pha rmaceutical Facto ry )
　　 Abstract: A research has been ca rried out on the techno logical process of Tianjihuang Injection in
abso rption and clari fica tion by o rthogonal design. As a result , the best tech nological condition is obtained,
w hich is that the dosage o f clari ficant is 1m l /10ml est ract of Hypericum japonicum , th e concentration of
the est ract is 4. 0g the herb /ml and the pH value of the ex t ract i s 5. 3. This technique has been proved
fea sible by the qualitative experiment of TLC ( Thin Layer Ch romatog raphy ) and the prelininary
experiment of stabi li ty.
　　 Key words: Hypericum japonicum injection, Abso rption and Cla rification method, Technolo gical
process, Qrthogonal design
·25·
1期　　　　　　　　　　　　　　　易醒等: 田基黄注射液采用吸附澄清法新工艺的研究