全 文 ：中草115ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第11期2006年11月·1639·
制剂与质量
电致孔条件下不同电学参数对青藤碱透皮给药的影响
岳奇峰1，郝保华卜，邓周虎2，李伟泽1，郭耀武3，张寒1，王义潮1，刘 森1
(1．西北大学生命科学学院，陕西西安710069；2．西北大学信息科学与技术学院，陕西西安710069；
3．陕西省药品检验所，陕西西安710061)
摘 要：目的 探索电致孑L条件下不同电学参数(电压、波形、脉冲宽度、脉冲次数)对青藤碱透皮给药的影响。方法
用中药电致孔给药仪产生多种电学参数条件，并以双室扩散池法、HPI，C法检测青藤碱透过小鼠腹部皮肤的变化。
结果青藤碱的累积透过量与电参数密切相关，在单因素影响中，4个最佳电学参数分别为：600V电压、正弦波+
方波组合波形、500ps的脉冲宽度、240个脉冲次数。透过量有极显著的增大，与被动扩散相比增加幅度有5～100
倍。结论 优化的电致孔条件应用于中药有效成分透皮给药有良好的前景。
关键词：青藤碱；电致孔；透皮给药
中圈分类号：R284．2；R286．02文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2006)11—1639—03
Effectofdifferentelectricalparametersont ansdermaldelivery
ofsinomenineus geletroporation
YUEQi—feng‘，HAOBao—hua。，DENGZhou—hu2，I。IWei—ze1，GU()Yao—wu3，
ZHANGHan‘，WANGYi—cha01，I。IUSenl
(1．CollegeofLifeSciences，NorthwestUniversity，Xi7an710069。China：2．CollegeofInformationSc e ce
andTechnology，NorthwestUniversity，Xi7an710069，China；3．ShaanxiInstitute
forDrugControl，Xi7an710061，China)
Abstract：ObjectiveToobserveth ffectsofdifferentelectricalparameters(voltage，shapofwave，
pulsewidth，andnumberofpulses)ontra sdermaldeliveryofsinomenineusingeletroporation．Methods
ThetransdermalpenetrationinFra zdiffusioncelIforisolatedratskinofsinomeninewastudiedbydif—
ferentelectricalparametersof lectroporationequipmentforChinesemateriamedica，respectively．The
contentofsinomenineper—meatedbdomenskiofmicewasdeterminedbvHPI。C．ResultsTheaccumula—
tivepermeationofsi omeninewascorrelatedwithelectricalparameters。differentelectricalparameters
showedthesignificanteffectonsinomenine’Stransdermaldelivery．Theoptimumelectricalparameters
werevoltage：600V，shapofwave：thecombinationofsquarewaveandsinewave，pulsewidth：500弘s，
numberofpulses：240．Thepermeationincreasedsignificantlyandtheincreasingextentwas5——100times
comparedwitht epassivediffusion．ConclusionOptimumparametersof letroporationhaveanfavorable
futureforactiveconstituentsinChinesemateriamedicatobetransdermicallydeliveried．
Keywords：sinomenine；eletroporation；transdermaldelivery
透皮给药可以避免药物在胃肠道中的降解和肝
脏的首过作用，但是由于皮肤角质层的屏障作用，使
可以良好应用该方法的药物很少。因此发展了许多
促进透皮给药的方法，如促渗剂、激光、超声、离子导
人和电致孔等。电致孑L是应用瞬间高压脉冲电场使
脂质双层膜产生暂时性的亲水通道从而使大分子物
质进入细胞或膜内的方法。电致孔最先被应用于细
胞生物学中的DNA导入，膜内大分子插入等。20世
纪90年代以来，应用电致孔技术促进药物的透皮给
收稿日期：2006—03—13
*通讯作者郝保华Tel：(029)81970519
药方面已有不少报道，如促进肝素、芬太尼、胰岛素
等药物的透皮量，使这些药物有了体外给药的可能
性LlJ。青藤碱(sinomenine)是从青风藤中提取的生
物碱单体，现在已有口服片剂、缓释制剂和注射剂，
临床上常用来治疗风湿、类风湿性关节炎，心率失常
等疾病。青藤碱口服生物利用度低，不良反应多，需
长期给药，而透皮给药可以减少肠胃反应，减少副作
用[2]。尤其是在电致孔条件下可以加大透皮给药量
和透皮速率。本实验采用HPLC法测定青藤碱的透
万方数据
·1640· 中草115ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第11期2006年11月
皮给药量，考察随电致孑L条件下不同参数变化对青
藤碱透皮量的影B向，为以后进一步研究提供参考。
1药品与仪器
青藤碱(质量分数≥99％，陕西赛德高科生物公
司提供)；林格氏液、甲醇、乙二胺(天津科密欧化学
试剂有限公司)；HI。一2型恒流泵、79—1型磁力加
热搅拌器(上海泸西分析仪器厂)；自制改良Franz
双室扩散池；电致孔仪(西北大学信息科学与技术学
院制)；高效液相色谱仪(Waters：1525型泵，2487
型检测器)。
2方法与结果
2．1 离体皮肤的制备：实验用昆明种小鼠(体重20
g。健康、皮毛光泽，第四军医大学实验动物中心提
供)，将其脱颈处死，剥离腹部的皮肤，剃去腹部的
毛，小心除去脂肪，用生理盐水冲洗干净，显微观察
没有破损后即用。
2．2 青藤碱的HPI。(：法测定心]
2．2．1色谱条件：色谱柱：HypersilC1。(250mmx
4．6mF／l，10弘m)，流动相：甲醇一水一乙二胺[52：48
(300：10)]；体积流量：lml。／min；检测波长：262
nm；进样量：10肛l。。
2．2．2标准曲线的绘制：精密称取青藤碱40mg，
置于100mI。量瓶中，加双蒸水溶解，并加至刻度，
摇匀。分别取出0．25、0．50、1．00、1．50、2．00、2．50
mI，放入10mI。量瓶内，加双蒸水至刻度，摇匀备
用。分别取10弘I．进样(每个水平重复3次)，以峰面
积(A)对质量浓度((?)回归的标准曲线方程为A一
1 213．21C一24083，r一0．9996。
2．2．3接收液中青藤碱的测定：在线性范围内配青
藤碱对照品溶液，进样10．0牡I。(3次)；接收液经微孔
滤膜滤过后进样10．0pI。(3次)，采用外标法计算。
2．3透皮给药试验：取体重为20g的小鼠，脱颈处
死，剥离腹部的皮肤，剪净腹部的毛，仔细除去皮下脂
肪，用生理盐水反复冲洗干净，然后加于双室扩散池
中，角质层面向供给池，真皮层面向接收池，扩散池固
定在磁力搅拌器上，均匀搅拌，同时保持接收池的温
度在32C。供给池中加入青藤碱溶液(6mg／mI。)，
接收池中加入25mI。林格氏溶液，供给池中接正极，
接收池中接负极(接收池内以星状磁珠不断缓慢搅拌
以保持药物质量浓度的均匀)，分别进行被动扩散和
电致孔条件下不同参数电致给药试验，定时取出接收
液补加等量接收液，取出的接收液采用HPLC法测
定青藤碱的质量浓度，计算总的累积透过量。
2．4被动扩散：不加电压，做被动扩散1h，取样测
定青藤碱的质量浓度，计算得被动扩散lh末累积
透过量为57．12pg。
2．5 电致孔电压的影响：固定脉冲宽度1ms、脉冲次
数120次、波形为方波，使用100、200、300、400、500、
600、700、800、900、100V电压分别进行电致孔试验
2min，60次／rain，共120个脉冲，然后10min 取
样，测定青藤碱的质量浓度，计算青藤碱的累积透过
量，结果见表l。可以看出，电致孑L脉冲电压因素对青
藤碱累积透过量有一定影响，电压从10V到1000V
累积透过量最高电压是600V，其次是100V。600V
后电压越往高累积透过量越小，但相对被动扩散都有
了很大的增长。脉冲电压600V，10min末累积透过量
为被动扩散1h末累积透过量的5倍。
亵l 不同脉冲电压10min末累积透过量
Table1 Accumulativepermeationofsi omenine
invariousp lsevoltagesat10rain
电压／V 累积透过鞋／t,g 电¨i／V 累秽{透过鞋／pg
1【)() 96．93l 6(}() 2I()．：{l7
2()() 61．943 7()()88．(>25
3()(J 1，12．471 80(} 53．55l
4【){) l?17．0I6 9()1)87．211
5()(J 11r1．367 f)()() 61．835
2．6 不同波形的影响：固定脉冲宽度1ms、脉冲次
数120次、电压200V，分别使用正弦波、三角波、锯
齿波、方波、正弦波+方波、正弦波+三角波、正弦
波+锯齿波、方波+三角波、方波+锯齿波、三角
波+锯齿波进行电致孔试验2rain，60次／rain，共
120个脉冲，然后10min后取样，测定青藤碱的质
量浓度，计算青藤碱的累积透过量，结果见表2。可
以看出，电致孔波形因素对青藤碱累积透过量亦有
很大影响。与被动扩散相比，最佳波形为正弦+方波
的组合复合波，在该条件下10min末的累积透过量
约为被动扩散1h末累积透过量的50倍。本实验考
察了复合波电致孔条件下对青藤碱累积透过量的影
响，结果表明特定复合波的效果远远超过单纯使用
某一波形的效果。
表2不同波形10rain末累积透过■
Table2 Accumulativepermeationofsi omenine
invariousshapesofwaveat10rain
波形 累积透过量／旭 波形 累积透过量／腿
正弦波865．375正弦波+三角波419．733
方渡446．250正弦波+锯齿波 318．873
三角波 375。215方波+三角渡 2736．340
锯齿波463．218方渡+锯齿波 2230．308
正弦波+方渡4598．869三角波+锯齿波 3 324．033
2．7 脉冲宽度的影响：固定波形为方波、脉冲次数
120次、电压200V，分别使用500、600．700、800、
万方数据
中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第11期2006年11月·1641·
1 000、2000／xs脉冲时间进行电致孔试验2rnin，60
次／min，共120个脉冲，10min取样，测定青藤碱的
质量浓度，计算青藤碱的累积透过量，结果见表3。
可以看出，电致孔脉冲宽度因素对青藤碱累积透过
量亦有影响，并且电致孔脉冲宽度对累积透过量的
影响很大，500弘s条件下10min末的累积透过量为
被动扩散1h末累积透过量的13倍，并且随着脉冲
宽度的延长，累积透过量下降很快，超过1ms以后
累积透过量几乎已经不再增加。根据趋势来看，如果
脉冲时间更短，累积透过量应该还有增大的趋势，进
一步的实验有待于进行。
表3不同脉冲宽度10min末累积透过量
Table3 Accumulativepermeationofsi omenine
invariousp lsewidthsat10min
脉冲宽度／Ps 累{{}{透过塌／pg脉冲宽度／肛s 累积透过鲢／pg
500 792．25() 80() 625．522
6()0 696．575 1 0()0 33．395
700 698．25l 2(1f)() ll8．374
2．8 脉冲次数的影响：固定波形为方波、脉冲宽度1
ms、电压200V，分别使用60、120、180、240、300、
360、420、480脉冲次数进行电致孔试验2min，10
min后取样，测定青藤碱的质量浓度，计算青藤碱的
累积透过量，结果见表4。由结果可知，电致孔脉冲次
数因素对青藤碱累积透过量的影响很大。青藤碱累积
透过量没有随着脉冲次数的增加而增加，而是达到一
定的次数之后累积透过量下降。最佳脉冲次数为240
个脉冲，该脉冲条件下10min末青藤碱的累积透过
量约是被动扩散1h末累积透过量的91．4倍。，
裹4不同脉冲次数10rain末累积透过量
Table4 Accumulativepermeationofsi omenine
invariousn mbersofpulsesat10min
脉冲次数／个 累积透过量／,g 脉冲次数／个 累积透过量／pg
60 l 049．000 300 4 007．115
120 4 700．993 360 3 490．995
180 4 447．5l 420 3 000．000
240 5 220．682 48() 2725．236
3讨论
电致孔条件下的电学参数因素对青藤碱透皮给
药量有很大影响，各种参数影响程度各有不同，脉冲
宽度和脉冲波形影响最大，脉冲时间和脉冲电压影
响次之。本实验初步说明优化的电致孑L条件应用于
中药透皮给药将会有良好的前景。当然目前只进行
了体外实验，活体动物实验还未进行，体外实验是否
和体内实验密切相关，还有待于进一步的证实。
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仙人掌多糖的分离、纯化及性质研究
陶美华“2，曾富华1‘”，章卫民2，梁伊丽1，卢向阳3
(1．湛江师范学院生物系，广东湛江524048；2．广东省微生物研究所，广东广州510070；
3．湖南农业大学生物技术系，湖南长沙410128)
摘要：目的分离、纯化具有降血糖作用的仙人掌多糖组分。方法经热水提取、乙醇沉淀、DEAESepharosefast
flow离子交换色谱和SephadexG系列凝胶滤过色谱纯化得到5种仙人掌多糖组分。醋酸纤维薄膜电泳检测多糖
纯度，凝胶色谱测定相对分子质量，高效液相色谱测定糖的组成。结果5种多糖都已达到电泳纯。它们的相对分子
质量依次为2．0×103、1．0×106、4．0×103、9．2×105、5．0×103。ODPI由鼠李糖组成，ODP2可能由鼠李糖和葡萄糖
组成，ODP4可能由鼠李糖和D一半乳糖组成。ODP3和ODP5分别由鼠李糖和一未知糖组分组成。结论仙人掌多
糖的提取没有必要采用脱蛋白、脱色素步骤．本实验所提取的仙人掌多糖是均一的。
关键词：仙人掌；多糖；纯化；性质
摹全塑阜：亡巷宣高校自然科学基金资助项目(Z03062)；湛江市科技招标计划项目(湛财企[2004198号)
作者简介：堕美华(1978一)，女，湖南长沙人，硕士，从事天然产物开发与利用研究，现在广东省微生物研究所工作。
Tel：(020)31319860E—mail：taomeihua@yahoo．corn．ca
*通讯作者曾富华Tel：(0759)3183622E—mail：zengfuhua@tom．coITI
万方数据
电致孔条件下不同电学参数对青藤碱透皮给药的影响
作者： 岳奇峰， 郝保华， 邓周虎， 李伟泽， 郭耀武， 张寒， 王义潮， 刘森， YUE Qi-feng
， HAO Bao-hua， DENG Zhou-hu， LI Wei-ze， GUO Yao-wu， ZHANG Han， WANG Yi-
chao， LIU Sen
作者单位： 岳奇峰,郝保华,李伟泽,张寒,王义潮,刘森,YUE Qi-feng,HAO Bao-hua,LI Wei-ze,ZHANG
Han,WANG Yi-chao,LIU Sen(西北大学生命科学学院,陕西,西安,710069)， 邓周虎,DENG
Zhou-hu(西北大学信息科学与技术学院,陕西,西安,710069)， 郭耀武,GUO Yao-wu(陕西省
药品检验所,陕西,西安,710061)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2006,37(11)
被引用次数： 3次

参考文献(3条)
1.Murthy S N;Sen S A;Hui S Surfactant-enhaneed transdernai delivery by clectroporation[外文期刊]
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2.Zhang X Z Penetration of transdermal enhancers on percuta neous permeation of Sinomenine Gels in
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3.Mao X J Determination of sinomenine in Bike Granuls by HPLC 2003(02)

引证文献(3条)
1.胡竹芳.徐璐.杨莉 电致孔脉冲仪配合血栓通注射液对类风湿关节炎局部关节肿痛的疗效[期刊论文]-实用临床医
学 2012(11)
2.郝保华.王彦玲.李伟泽.李凡.刘森.杜书君.唐斌斌 青风藤电离巴布剂电致孔透皮给药的药动学研究[期刊论文]-
中草药 2009(7)
3.苏璇.吴素香 青藤碱新剂型研究进展[期刊论文]-海峡药学 2009(9)


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