全 文 ：中草黄ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第12期2008年12月·1891·
称定，共5份，制备供试品溶液，精密吸取5弘L，测
定峰面积，花旗松素质量分数为6．3855mg／g，
RSD为1．12％，表明本方法重现性良好。
2．7稳定性试验：取供试品溶液，精密吸取5pL，
分别于0、2、4、6、8h测定，比较峰面积，RSD为
1．03％，供试品溶液在8h内稳定。
2．8加样回收率试验：取已测定花旗松素的水红花子
样品1g，精密称定，共5份，分别精密加入花旗松素对
照品溶液5mL(o．247mg／mL)，制备供试品溶液，
精密吸取10弘L，注入液相色谱仪，测定峰面积。结果
平均加样回收率为99．2％，RSD为1．83％。
2。9样品测定：分别精密吸取对照品溶液(o．247
mg／mL)与供试品溶液10肛L，按上述色谱条件测
定，采用外标一点法计算质量分数，结果见表1。
表1不同采收期水红花子中花旗松素(一一3)
Table1 TaxifolininFructusPolygoniOrientalis
collectedinvariousperiods(一一3)
3小结与讨论
3．1 测定结果表明花旗松素的量从8月初开始逐
渐增高，至10月中旬达到最高点，然后又呈下降趋
势，总体分析10月份花旗松素的量高于其他月份，
10月中旬应为水红花子的最佳采收期，花旗松素的
量为11．6732mg／g。有文献报道[6]，不同商品药材
水红花子的花旗松素的量在0．4492～
9．1313mg／g。11月份果实已基本脱落，因此本实
验11月样品仅采集1份。
3．2样品是否脱脂处理对花旗松素的测定影响很
大，因此药材用石油醚(60～90℃)脱脂处理。
3．3 提取条件的选择：以回流时间(1、2、3h)、回
流温度(60、80、i00‘C)、酸度[甲醇一25％盐酸(2：
1)、甲醇一25％盐酸(4：1)、甲醇一25％盐酸(6：
1)]为考察条件进行筛选，结果在甲醇一25％盐酸
(4：1)，回流温度为100C，回流3h效果最好。
3．4检测波长的选择：取花旗松素对照品适量，加
甲醇溶解，在200400nm进行波长扫描，花旗松
素在290am处有最大吸收，故检测波长为290
nm。该测定方法简便准确，重现性好，可以很好地控
制水红花子的药材质量。
参考文献：
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予中花旗松索含量[J]．中国中药杂志，2007，32(20)t
2】90—2】9】．
HPLC—ELSD法测定千斤拔的不同种和不同药用部位中p一谷甾醇
刘 圆。，任朝琴
(西南民族大学少数民族药物研究所，四川成都610041)
摘要：目的测定千斤拔的不同种、不同药用部位中p谷甾醇的量，以期评价不同种的药材质量，为寻找新药源
和新的药用部位提供实验数据。方法采用HPLC—ELSD法。色谱柱为KromasilC18(250mm×4．6mm，5pm)，
以甲醇为流动相，体积流量1．0mL／min{柱温25‘C；蒸发光散射检测器检测参数为漂移管温度35℃，载气(N2)
体积流量2mL／min。结果该方法简便、快速、准确，p谷甾醇在0．65～3．25肛g呈良好的线性关系。平均回收率为
99．4％(行一9)，RSD为0．87％。球穗千斤拔与《中国药典》收载种蔓性千斤拔，大叶千斤拔比较，其根、茎和叶中p
谷甾醇的量低很多，蔓性千斤拔茎、叶中p谷甾醇的量远高于其根的量，大叶千斤拔茎、叶中p-谷甾醇的量也相近
或略高于其根中的量。结论球穗千斤拔不宜替代蔓性千斤拔、大叶千斤拔入药；蔓性千斤拔和大叶千斤拔的茎、
，
收稿日期：2008—04—29
基金项目：国家科技支撑计划重点项目(2007BAl25805)；四川省青年基金项目(07ZQ026—011)，国家中医药管理局(06—07ZP43)
*通讯作者刘圆Tel：(028)8552887813808091609E—mail：yuanliul63@yahoo．corn．ca
万方数据
·1892· 中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第12期2008年12月
叶可以与其根同等人药。
关键词：HPI．C—El。SD法；肛谷甾醇；蔓性千斤拔；大叶千斤拔；球穗千斤拔
中图分类号：R282．6 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2008)12—1891一04
常见妇科疾病以经前期综合征、阴道炎症、乳腺
增生3大疾病最为明显，其中阴道炎症为常见和多
发妇科疾病，严重影响患者的生活质量。目前市面上
治疗效果和销量较好的妇科千金片对阴道炎症有良
好的治疗作用；千斤拔为其君药，2005年版《中国药
典》中收载千斤拔为豆科植物蔓性千斤拔
Moghaniaphilippinensis(Merr．etRolf )Li、大叶
千斤拔M．macrophylla(Willd．)0．Kuntze或锈
毛千斤拔肘．力删gine口(Wall．exBenth．)Li的
干燥根【1]，具有镇痛、抗炎作用，可治疗妇科病[23；地
方药用的还有球穗千斤拔M．strobilifera(Linn．)
Ait．等种，其中蔓性千斤拔、大叶千斤拔分布较广，
主产于江西、福建、台湾、湖北、湖南、广西、广东、四
川等省区；球穗千斤拔未形成大宗商品，但可见到混
杂于蔓性千斤拔的商品药材中口]。
文献报道千斤拔含有黄酮、多糖、生物碱、p谷
甾醇等多种成分[2]。p谷甾醇具有明显的降胆固醇、
抗炎、止咳、抗癌等药理作用n3；p一谷甾醇的分析方
法有薄层扫描法、气相色谱法、高效液相一紫外检测
法，高效液相色谱一蒸发光散射检测法[4]。本实验拟
采用高效液相色谱一蒸发光散射检测法测定3个种、
不同药用部位p谷甾醇的量，以期评价其不同种的
药材质量，为寻找新药源和新的药用部位提供实验
数据。
1仪器与试药
LabAlliance分离系统，EI。SDmodel200检测
器，N2000色谱工作站；KQ～250B型超声波清洗器
(昆山市超声仪器有限公司)，METTLERAE240
电子分析天平[梅特勒一托利多仪器(上海)有限公
司]。p谷甾醇对照品(110851—200403，中国药品生
物制品检定所)，甲醇、乙腈为色谱纯(美国迪玛公
司)，水为重蒸水，其余试剂均为分析纯。蔓性千斤拔
采于湖北宜昌，大叶千斤拔采于四川成都，球穗千斤
拔采于广西举城。经刘圆和戴斌副教授鉴定分别为
蔓性千斤拔Moghaniaphilippinensis(Merr．et
Rolfe)Li、大叶千斤拔M．macrophylla(Willd．)
o．Kuntze、球穗千斤拔M．strobilifera(Linn．)
Air．的干燥根、茎、叶。
2方法与结果
2·1流动相选择：进行色谱流动相系统选择时，分
别用不同比例的甲醇一水、乙腈一水、甲醇对样品进行
分离，结果甲醇的分离效果为佳。
2．2提取条件的选择
2．2．1 提取溶媒的选择：分别用石油醚、乙醚、氯
仿、甲醇作提取溶媒。分别称取千斤拔根药材(24
目)约5g，4份，精密称定，分别用石油醚、乙醚、氯
仿、甲醇对样品进行索氏提取4h，滤过，挥去溶剂，
残渣加入甲醇溶解。结果以氯仿提取液样品中p谷
甾醇的量最高，故本试验采用氯仿溶液提取。
2．2．2提取方法的选择：分别称取千斤拔根药材
24目)约5g，3份，精密称定，用料液比为1：20
氯仿分别对3份样品进行超声处理1h，加热回流
提取、索氏提取2h，滤过，挥去溶剂，残渣加入甲醇
溶解。结果索氏提取方法的p谷甾醇提取率高，故本
试验采用索氏提取法。
2．2．3粉碎度的考察：分别称取过10、24、50目的
千斤拔药材约5g，精密称定，加入料液比为1：20
的氯仿溶液，索氏提取2h，挥去溶剂，残渣加入甲
醇溶解。结果过10目的千斤拔药材p谷甾醇量高，
故本试验采用过lO目的药材。
2．2．4 提取时间的考察：分别称取千斤拔根药材
(20目)约5g，6份，精密称定，料液比为1：20的
氯仿溶液，挥去溶剂，残渣加入甲醇溶解。考察提取时
间1、1．5、2、2．5、3、3．5h的p谷甾醇的量。结果3h
时p谷甾醇的量较高；延长提取时间，p谷甾醇的量
增加很少，考虑节约成本，故选择提取时间为3h。
2．2．5料液比的考察：分别称取千斤拔根药材(10
目)约5g，5份，精密称定，分别加入料液比为1。
14、1：16、1：18、1：20、1：22的氯仿，索氏提取3
h，滤过，挥去溶剂，残渣加入甲醇溶解。结果料液比
为1：16时，p谷甾醇提取率高，增加溶液其差别不
大，为节约试剂，采用料液比为1：16。
2．3色谱条件：色谱柱为KromasilC18(250mm×
4．6mm，5btm)，柱温25‘C，体积流量
1．0mL／min，流动相甲醇，蒸发光散射检测器检测
参数为漂移管温度35℃，载气(N。)体积流量2L／
rain。在此色谱条件下，p谷甾醇峰与样品中的其他
组分峰达到基线分离，峰形对称，阴性无干扰。按
p谷甾醇峰计算，色谱柱的理论塔板数不低于
10000。
万方数据
中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第12期2008年12月·1893·
2．4对照品溶液制备：精密称取p谷甾醇对照品适
量，用甲醇溶解，制成0．130mg／mLp谷甾醇对照
品溶液。
2．5供试品溶液制备：分别称取干燥的大叶千斤拔、
蔓性千斤拔、球穗千斤拔药材的根、茎、叶粉末(10
目)各5．0g，精密称定，精密加入氯仿80mL，提取
3h，挥去溶剂，加入甲醇使之溶解，定容至25mL，取
溶液用0．45弘m微孔滤膜滤过，即得供试品溶液。
2．6 线性关系考察：分别精密量取对照品溶液
5．0、7．5、10．0、12．5、15．0、17．5、20．0、22．5、25肛L，
按色谱条件进行测定，以对照品质量的自然对数为
横坐标，峰面积的自然对数为纵坐标，进行线性回
归，得回归方程为：Y一1．988X+11．211×104，
，．=O．9991，线性范围为0．65～3．25弘g。
2．7精密度试验：精密吸取对照品溶液10弘L，重
复进样6次，测得峰面积的RSD为1．2％。结果表
明精密度良好。
2．8重现性试验：取同一批样品，精密称取6份，制
备供试品溶液，测定p谷甾醇的量，结果质量分数为
0．0068％，RSD为0．8％，表明重现性良好。
2．9稳定性试验：精密量取供试品溶液10肛I。，分
别于0、2、4、6、8h测定，按照p谷甾醇对照品峰面
积计算RSD为0．7％，结果表明供试品溶液在配制
后8h内稳定。
2．10加样回收率试验：精密称取已测定的药材
(根)样品约2．5g，分为3组分别加入p谷甾醇对
照品溶液(0．130mg／mL)20、25、30mL，制备供试
品溶液，按色谱条件测定，计算回收率。结果9份样
品平均回收率为99．40％，RSD为0．87％。
2．11样品的测定：按色谱条件分别进样大叶千斤
A
——，，．．．．．．．．．．．．．．．．．。．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．J
五一百1—砭1矿菊1河‘
0 4 8 12162024
图1
Fig．1
百1—r了r话．乏矿丽一
拔、蔓性千斤拔、球穗千斤拔药材的根、茎和叶供试
品溶液10弘L，测定峰面积，外标法计算p谷甾醇的
量，结果见表1。色谱图见图1。
表1样品中p-谷甾醇的测定(辟=3)
Table1 Determinationofp-sitosterolinsamples(露=3)
3讨论
3．1 本实验分别考察了RP—HPLC—UV和RP—
HPLC—ELSD法，发现用HPI．C—ELSD法可以避免
用UV检测器p谷甾醇在紫外区域吸收峰临近流
动相的末端吸收，色谱峰容易被淹没的问题。
3．2 采用RP—HPLC—EI。SD测定玉米须中p谷甾
醇的量曾有报道[4]，但未见关于千斤拔药材p谷甾
醇的量测定研究的报道。本实验建立了千斤拔药材
中p谷甾醇的量测定方法，方法简便、准确，重现性
好，可用于千斤拔的质量评价方法之一。
3．3从结果中可以看出，球穗千斤拔与《中国药典》
收载的蔓性千斤拔、大叶千斤拔比较，其根、茎和叶
中p谷甾醇的量低很多，故从有效化学成分p谷甾
醇角度考虑，建议球穗千斤拔不宜替代蔓性千斤拔、
大叶千斤拔入药。蔓性千斤拔茎、叶中p谷甾醇的量
远高于其根的量，大叶千斤拔茎、叶中p谷甾醇的量
也相近或略高于其根中的量，故从有效化学成分p
0 4 8 12162024 0 4 8 12162024
t／rain
C—l
根
～讯⋯i．一JIL百1—i_1广话1丽
对照品p-谷甾醇(A)与大叶千斤拨(B)、蔓性千斤拔(C)、球穗千斤拔(D)色谱图
ChromatogramsfB-sitosterolr ferencesubstance(A)，M．muerophylla(B)，
M．philippinensis(C)·andM． trobilifera(D)
万方数据
·1894· 中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第12期2008年12月
谷甾醇、资源的综合及可持续利用角度考虑，建议蔓性
千斤拔和大叶千斤拔的茎、叶可以与其根同等人药。
3．4本次实验材料采于国内不同地区的野生药材，
很难确定其准确的生长年限，同产地、同采收期的千
斤拔药材有待进一步研究。
参考文献：
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RP—HPLC法测定绵马贯众药材中绵马贯众素
司云珊1，徐暾海2，韩 冬1，赵洪峰1，解生旭1，徐雅娟1。
(1．吉林省中医中药研究院，吉林长春130021；2．北京中医药大学，北京100102)
摘要：目的分离纯化绵马贯众素，建立RP—HPI。C法测定绵马贯众中绵马贯众素的方法。方法采用ODS柱
(250mm×4．6mm，5um)，流动相为异丙醇一甲醇一氯仿一水一磷酸(102：20：12l 24l 0．1)，检测波长283am。结
果该方法的线性范围为0．4～1．6pg，r=0．995(行一5)，平均回收率101．23％，RSD=2．11％(珂一5)。结论绵
马贯众素质量分数达到99．13％，可作为对照品。绵马贯众素定量测定方法简便，准确，重现性好，可用于该药材及
其制剂中该成分的定量测定。
关键词：HPLC法；绵马贯众；绵马贯众素；定量测定
中图分类号：R282．6 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2008)12—1894—02
绵马贯众为鳞毛蕨科植物粗茎鳞毛蕨
Dry@terisc a sirhizomaNakai的干燥根茎及叶柄
残基。具有清热解毒、驱虫的功效，广泛用于临床n]。
绵马贯众中主要含绵马贯众素、绵马素、绵马次酸等
成分[2]。绵马贯众已被广泛应用于I临床制剂中，《中
国药典》尚无可质量控制的定量测定，为控制药材及
其制剂质量，笔者从绵马贯众药材中分离纯化得到
绵马贯众素，测定了绵马贯众中绵马贯众素的量。
1仪器与试药
美国Waters600E高效液相色谱仪，486紫外
检测器，7725手动进样器。对照品绵马贯众素实验
室自制，质量分数为99．13％。药材采自全国各地
区，经长春中医药大学邓明鲁教授鉴定。
2方法与结果
2．1 色谱条件和系统适用性实验：色谱柱为
NovapakC18(250mmx4．6mm，5弘m)。流动相为
异丙醇一甲醇一氯仿一水一磷酸(102：20：12t 24：
0．1)。进样量：10止，理论塔板数按绵马贯众素计算
不得少于2500。
2．2对照品溶液制备：精密称取绵马贯众素适量，
加甲醇制成0．1mg／mL的溶液。
2．3供试品溶液的制备：取绵马贯众粉末(过4号
筛)0．5g，精密称定，置50肛L量瓶中，加乙醚30
mL冷浸24h，补乙醚至刻度，取1mL置10mL量
瓶中，加乙醚至刻度，摇匀即得。
2．4专属性试验：精密吸取供试品溶液、对照品溶
液和阴性对照溶液各5“L，按色谱条件进样，结果
供试品色谱中，在与绵马贯众素对照品色谱相同的
保留时间处有色谱峰，与其他组分能基本达到基线
分离(R>1．5)；阴性对照色谱中，在与绵马贯众素
对照品色谱峰相同的保留时间处无色谱峰，表明阴
性对照无干扰，具有专属性。见图1。
2．5标准曲线的绘制：精密吸取对照品溶液4、5、
O 5 10 0 5 10 15
t，min
*一绵马贯众紊
*一dryocrassin
图1东北贯众素对照品(A)和样品(B)HPLC图
Fig．1HPLCChromatogramsofd yocrassinreference
substance(A)andsample(B)
收稿日期：2008—06—25
基金项目；国家科技部十五公关项目(项目编号03—929—01—30)
作者简介：司云珊(1970～)，1996年毕业于长春中医学院中药学专业．获理学学士学位，现任职于吉林省中医中药研究院重点实验室，
主要从事中药化学的基础研究和新药研发。 E—mail：siyunshanl970@126．com
*通讯作者徐雅娟Tel：0431．86816848Fax：0431—85910067
万方数据
HPLC-ELSD法测定千斤拔的不同种和不同药用部位中β-谷甾
醇
作者： 刘圆， 任朝琴
作者单位： 西南民族大学少数民族药物研究所,四川,成都,610041
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2008,39(12)
被引用次数： 3次

参考文献(4条)
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本文读者也读过(9条)
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计微波法提取玉米须中β-谷甾醇[期刊论文]-食品研究与开发2010,31(9)
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8. 刘慧琼.郭书好.沈英森.李晓蒙 半夏中β-谷甾醇的抗氧化作用研究[期刊论文]-广东药学院学报2004,20(3)
9. 王莉.归绥琪 β-谷甾醇抗肿瘤作用研究[期刊论文]-国际肿瘤学杂志2009,36(9)

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1.魏玉海.王慧春.刘亚蓉.刘学良.逯雯洁.刘海青 藏药材珠芽蓼中β-谷甾醇含量的超高液相色谱-蒸发光散射检测
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验方剂学杂志 2013(1)
3.任朝琴.戴先芝.刘圆 千斤拔药材资源开发与利用的调查报告[期刊论文]-西南民族大学学报(自然科学版)
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本文链接：http://d.wanfangdata.com.cn/Periodical_zcy200812046.aspx