全 文 ：中革菊ChineseTraditionalandHerbalDrags第37卷第3期2006年3月·383·
C
*次野鸢尾黄幕
*一irisflorentin
圈1坎野鸢尾黄素对照品(A)和射千利咽口服液(B)
的HPLC圈谱
Fig．1HPLCChromatogramsofi isflorentinference
substance(A)andSheganLiyanSolution(B)
试品溶液，按上述方法测定，计算次野鸢尾黄素的质
量浓度，平均值为0．0442rag／支，RSI)为1．16％。
2．8 回收率试验：采用加样回收法。取0．0442
mg／支的样品5mL，精密加入0．00528mg／mL对
照品溶液5mI。，按供试品溶液制备方法操作，按上
述方法测定，计算回收率。结果平均回收率为
97．9％，RSD为1．44％(n=6)。
2．9样品测定
2．9．1 薄层扫描法：参照WS3—372(Z一057)一2002
(z)标准方法。精密量取本品15．0ml，，置分液漏斗
中，滴加硫酸调pH3，振摇，放置10min，加乙醚提
取3次，每次20mL，分取乙醚层于另一分液漏斗
中，用0．1％氢氧化钠液提取3次，每次20mL，分
取乙醚层，50℃水浴浓缩至干，残渣加乙醇溶解，定
量转移至zmL量瓶中，并稀释至刻度，摇匀。另取
次野鸢尾黄素对照品，加乙醇制成0．2mg／mL的溶
液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取供试
品溶液5“I。，对照品溶液1．5和2．0vL，分别交叉
点于同一硅胶G高效薄层板上，以苯一甲醇(10；
0．4)为展开剂，展开，取出，晾干，进行扫描，^一270
nm，k=340nm，以供试品吸收度积分值与对照品
吸收度积分值计算即得。结果见表1。
2．9．2高效液相色谱测定方法：分别吸取对照品溶
液及供试品溶液各20pL，注入色谱仪，按上述色谱
条件测得峰面积，以外标法计算次野鸢尾黄素量。结
果见表1。
表1射干利咽口服液中次野鸢尾黄素的测定结果抽一3)
Table1 lrisflorentininSheganLiyanSolution(一一3)
3讨论
两种测定方法的比较，测定的结果相差不大，说
明两种方法均可作为射干利咽口服液测定的方法，
但高效液相色谱法较薄层扫描法操作简单，重现性
好，能更好的控制产品质量。
HPLC法测定鸦胆子油中脂肪酸
项 琪1，周莉玲1，姚崇舜2，李校堑2，周志丹+
(i．广州中医药大学中药学院，广东广州510405；2．暨南大学医药生物技术研究开发中心．广东广州510405)
鸦胆子，别名为老鸦胆、苦参子，《中国药典》收
载为苦木科植物鸦胆子]3rucea弘vanica(L．)Merr
的成熟果实，始载于《本草纲目拾遗》。鸦胆子种仁含
油56．23％，油中不皂化物占1．36％；皂化物
92．47％-“。人们一直用鸦胆子治疗阿米巴痢疾、疟
疾等疾病，为较常用中药。20世纪80年代初起，国
内学者对鸦胆子油抗肿瘤活性及效果做了大量研
究，并开发出鸦胆子油乳抗癌药，临床应用治疗消化
系统肿瘤，如胃癌、食管癌、原发性肝癌、大肠癌、胰
腺癌等。特别是随着介入放射学的发展对治疗原发
性肝癌方面有很大用处[2】。目前鸦胆子油中脂肪酸
些銎最曹：声紧客≮差药局科研课题。，。。。。，。，
*沈阳药科大学2005届实习生
的测定有滴定法”]、气相色谱法n]、薄层扫描法“1和
高效液相色谱法“]。但滴定法测得的是总酸，气相色
谱法采用了较高的柱温，薄层扫描法不易控制。文献
报道的HPLC法试剂昂贵，流量高柱压大，对仪器
和色谱柱不利。本实验建立的柱前衍生化HPLC
法，采用国产试剂，流量为1．0mI，／rain，在45min
内可完成一次色谱分离过程，为鸦胆子油的质量控
制提供思路。
1仪器与试剂
ShimadzuLC2010C高效液相色谱仪；sPD—
M10Avp检测器(日本岛津公司)；TGL一16G台式
；；一藿；一
万方数据
中革蒋ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第3期2006年3月
离心机(上海安亭科学仪器厂)iHH2数显恒温水
浴锅(金坛市富华仪器有限公司)。精制鸦胆子油(浙
江九旭药业有限公司)。油酸、亚油酸、十七烷酸对照
品(Sigma公司)。甲醇(色谱纯，江苏汉邦科技有限
公司)，乙腈(色谱纯)，丙酮(AR)，冰醋酸(AR)和三
乙醇胺(分析纯)购至天津市科密欧化学试剂开发有
限公司。”溴代苯乙酮(o】-bromoacetophenone，国药
集团化学试剂有限公司，批号：T20041103，化学纯)。
2方法与结果
2．1色谱条件：色谱柱：Shim—packVP—ODS(150
mm×4．6mm，5”m)，保护柱：Shim—packGVP—
ODS(10mm×4．6mm)(Shimadzu)；流动相：甲
醇乙腈一H。O(65：27：8)；柱温：25℃；检测波长：
242i1m；体积流量：1．0ml，／rain。在上述色谱条件
下，各脂肪酸衍生物均达到基线分离(图1)。理论板
数按油酸计为10000，油酸衍生物与软脂酸衍生物
峰的分离度为2．6。
L』。也匕k
1一亚袖酸衍生物2一软脂酸衙生蜘3抽鲮衙生物
4一十t烷般衍生物 5疆脂酸衍生物
1一linoleicaciderivative2palmiticaciderivmive
3-oleicacidderivative4-heptadecanoicacidderivative
5 stearicaciderivative
图1空白样品(A)、对照品衍生物(B)和鸦胆子油
衍生物(c)的HPLC圈
Fig．1HPLCChromatogramofneg tivesample(A)，
referencesubstancederivative(B)．and
B．javanieao lderivative(C)
2．2衍生化反应：取脂肪油丙酮溶液适茸，加氢氧
化钾甲醇溶液(0．5mol／L0．4mL，旋涡振摇1
min，于60℃水浴加热30min，冷却至室温后加异
丙醇一正庚烷一冰醋酸(40：10：I)溶液2．5mL，涡
旋1min，间断超声2rain(间隔30S，强度500W)，
室温下放置10rain。再精密加入正庚烷tmI。．双蒸
水1．5mL，涡旋1min，间断超声2rain(间隔30S，
强度500W)，离心(2500r／min)10rain后精密吸
取上清液lmL，N。吹干。精密加入20mg／ml。一溴
代苯乙酮和25mg／mL三乙醇胺丙酮各50pI，，乙
腈300止，试管加塞密封，混合摇匀，于100-(-加热
15min，冷却至室温后，精密加入10mg／mL醋酸溶
液75pL，于100℃加热5min，N。吹干，备用。
2．3溶液的制备：取油酸对照品约20mg，精密称
定，置10mL量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇
匀，即得(此液在一20C保存，可使用1个月)。分别
取亚油酸、软脂酸和硬脂酸对照品各约10mg，精密
称定，置10mL量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，
摇匀，即得(此液在4℃保存，可使用1个月)。
取十七烷酸10mg，精密称定，置10mL量瓶
中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为内标溶液
(此液在4℃保存，可使用1个月)。
2．4标准曲线的制备：精密量取4种对照品溶液各
5、50、100、150、300pL于5m【，具塞离心试管中，分
别精密加入内标溶液50pI。，N：吹干，精密加入m一
溴代苯乙酮(20mg／ml，)和三乙醇胺(25mg／mL)
各50pL，乙腈300pI，，混合摇匀，于loo℃加热15
min．冷却至室温后，精密加入10mg／mL醋酸溶液
75”I，，于100℃继续加热5min，N。吹干，精密加甲
醇500“I．，振摇1min，离心(10000r／rain)10min，
取l清液10t,L注入高效液相色谱仪，记录色谱图。
以质量浓度c和对应的峰面积比y计算回归方程，
数据由SPSS软件处理，见表1。
表1各脂肪酸标准曲线回归方程和线性范围
Table1 Regressionequationofstandardcurveand
linearrangeforvariousfattyacids
2．5精密度试验：精密吸取4种对照品溶液各100
pL按照标准曲线的制备项下重复操作5次，记录峰
面积，由回归曲线计算油酸、亚油酸、软脂酸和硬脂
酸的质量浓度，计算RSD值分别为2．16％、
2．83％、3．29％和3．02％。
2．6稳定性试验：精密吸取供试品溶液各loopL
按照标准曲线的制备项下方法操作，分别在制备后
0、12、24、48、72、120h进样测定各脂肪酸衍生物色
谱峰峰面积，计算对应的脂肪酸质最浓度，RSD值
分别为1．79％、3．03％、2．56％、3．12％，表明供试
品溶液在5d内稳定。
2．7加样回收率试验：取精制鸦胆子40mg，精密
称定，置25mI，量瓶中，用丙酮溶解并稀释至刻度。
用微量移液器吸取50pL置10mL具塞试管中，按
1：1分别精密加入油酸、软脂酸、亚油酸和硬脂酸
对照品各25、l2．5、1．3、2mg，混匀后操作，平行测
定5份样品，由回归曲线计算各脂肪酸的质量浓度，
并tt-算出加样回收率，结果油酸、亚油酸、软脂酸、硬
万方数据
中草1|sChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第3期2006年3月·385·
脂酸的平均回收率分别为100．8％、101．1％、
99．32％、101．6％，RSD分别为1．76％、2．13％、
2．36％、0．65％(n一5)。
2．8样品的测定：供试品溶液的制备：取精制鸦胆
子油80mg，精密称定，置25mL量瓶中，用丙酮溶
解并稀释至刻度。用微量取样器精密量取50L，置
10mI．具塞离心试管中，按以上方法测定，N。吹干
后精密加甲醇500pL，振摇1min，离心(10000r／
min)i0m n。上清液即为供试品溶液。精密吸取供
试品溶液10”L注入高效液相色谱仪，记录色谱图，
由回归方程计算，结果见表2。
表2鸦胆子油中脂肪酸的测定结果抽=3)
Table2 Determinationoffattyacids
inB．J口vanicaoil(n一3)
3讨论
3．1 Mehta等01详细讨论了2，4-二溴苯乙酮在
18一冠一6醚催化下和a一澳苯乙酮在三乙醇胺催化
下，脂肪酸的衍生化反应及相关的色谱行为。本实验
对上述方法均进行了考察，结果发现一溴苯乙酮在
三乙醇胺催化下的酯化反应操作简便快捷，而且在
相同色谱条件下，所得脂肪酸酯的保留时阿只相当
于2，4一二溴苯乙酮衍生物的一半。在本实验色谱条
件下，45min内可分析完1个样品，而2，4一二澳苯
乙酮衍生物需要75min。
3．2对鸦胆子油的HPLC测定已有相关报道啪，
但采用进13试剂，流动相为乙腈一水(80t 20)，价格
昂贵；色谱柱为c。柱，应用范围不如c，。柱广泛；流
速较高，柱压也相应较高。本实验所建立的方法结合
国情，既达到分析的目的又降低了分析成本。
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分心木的质量标准研究
付文焕，孙黎教，朱婷，谈娜嘉，钟明康
(复旦大学附属华山医院，上海200040)
分心木来源于胡桃科植物胡桃JugZansregia
I。．果核的干燥木质隔膜，又称胡桃衣、胡桃夹、胡桃
隔等，味苦、涩，性平，入脾、肾经，固肾涩精，临床主
治遗精、淋病、血尿、带下、泻痢等。胡桃始载于《开宝
本草》，在我国主产于河北、山西、山东等地。本实验
对分心木中鞣质进行了定性分析，并建立了测定该
药材中活性鞣质的方法．建立了该药材质量标准。
1仪器与材料
分心木药材购自上海虹桥药业饮片厂，经笔者
鉴定为胡桃科植物胡桃d．regiaLt果核的干燥木
质隔膜；没食子酸对照品(中国药品生物制品检定
所)；鞣酸fAR，国药集团化学试剂有限公司)；干酪
素fAR，上海光铧科技有限公司)；其余试剂均为分
析纯。
岛津uV2201型紫外分光光度计；Deata320型
pH计。
2方法与结果
2．1分心木鞣质类型的分析：分心术药材粉碎成粗
粉．称取5．0g，加70％丙酮浸泡30min，超声处理
15min，滤过，取滤液作为鞣质类型分析试液，进行
定性分柝，结果见表1。结果表盟分心木中鞣质既有
可水解鞣质，也存在缩合鞣质，为两类鞣质共存。
壤薯晶羿：嚣雯嚣乞哿4一)，女，山东省苍山县人．中药学硕士，主管药师，主要从事中药新药开发工作
Tel}(021)62511127381Fax：(02I)32120059E—majllwenh咖f@sohu．com
万方数据
HPLC法测定鸦胆子油中脂肪酸
作者： 项琪， 周莉玲， 姚崇舜， 李校堃， 周志丹
作者单位： 项琪,周莉玲(广州中医药大学中药学院,广东,广州,510405)， 姚崇舜,李校堃(暨南大学医
药生物技术研究开发中心,广东,广州,510405)， 周志丹(沈阳药科大学)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2006,37(3)
被引用次数： 7次

参考文献(7条)
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4.罗淑文.邓远辉.朱艳红 柱前衍生化HPLC法测定鸦胆子油中油酸和亚油酸的含量[期刊论文]-中药新药与临床药理
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5.辛海量.侯银环.李敏.路金才.凌昌全 高效液相色谱法测定马齿苋提取物中α-亚麻酸和亚油酸的含量[期刊论文]
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