全 文 ：·910· 中草蒋ChineseTraditionalandHerbalDrags第37卷第6期2006年6月
在细胞受到刺激剂激活的最初几十秒到几分钟内。
细胞[Ca”]，迅速升高，可激活钙调蛋白激酶；使一
系列特异蛋白底物的磷酸化水平增加，其中包括细
胞因子的转录因子，如核因子*B(NF”B)，使细胞
因子的mRNA水平升高，大量细胞因子生成。本研
究发现，小鼠脾脏淋巴细胞被ConA激活后，细胞
[Ca”]．增高。蓝萼甲素可降低[Ca2+]。，使之接近正
常水平，进而可能抑制与细胞因子有关的基因的表
达，从而抑制T细胞增殖。以往研究表明蓝萼甲素
具有免疫抑制作用，蓝萼甲素抑制小鼠脾脏淋巴细
胞内钙释放可能是其产生免疫抑制作用的机制
之一。
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苦味叶下珠不同制剂对鸭体内乙肝病毒的抑制作用
韩林，梁睿敏，刘斌
(北京汉典中西药研究开发中心，北京100071)
苦味叶下珠Phyllanthusa?llaru5Schum．et
Thonn，为大戟科叶下珠属植物，昧苦、性凉，具有
清肝明日、收敛利水和解毒的功效o]。1982年印度
学者Thyagajan等首次报道苦味叶下珠体外对
HBsAg(乙型肝炎病毒表面抗原)有灭活作用o]，
引起国内外研究的热潮，被认为是一种极具潜力的
抗乙肝药物。苦味叶下珠含有大量化合物，主要包括
酚类、三萜类及生物碱类物质o]，初步研究表明鞣质
为主要活性成分，但是目前尚无统一的质量标准。有
关苦昧叶下珠的基础及临床研究日渐增多，但是结
论不一，药材的产地和制剂都对活性产生很大的影
响。目前国内还没有对此进行系统的比较研究。为
了研究制剂对药物活性的影响，为苫味叶下珠药物
生产提供依据，本实验选用云南景洪产苦味叶下珠
作为药物原料．分别采用提取和粉碎的方法获得受
试药物，比较两种制剂体内抗鸭乙型肝炎病毒
(DHBV)活性的差异。
1材料
1．1动物：1日龄北京鸭，购自北京前进种鸭饲
养场。
1．2药物：苦味叶下珠采自云南西双版纳景洪，经
中国中医研究院胡世林老师鉴定为大戟科植物苦味
叶下珠。苦味叶下珠粉剂(P1，苦味叶下珠全草粉
碎，过80目筛，经分光光度法及滴定法测定，含鞣
质2．48％)、苦味叶下珠提取剂(P2，苦味叶下珠粉
末先用80％乙醇回流提取1．5h，提取3次，合并
提取液，浓缩；提取残渣继续用水煮3次，每次1．5
h，合并水液，浓缩。两次浓缩液合并得到苦味叶下
珠提取液，质量浓度为0．5mg／mL，含鞣质
2．87％)均为自制；阳性药物拉米夫定(葛兰素威
康制药公司，批号00211004)。
1．3主要试剂：鸭乙型肝炎病毒DNA(DHBV
DNA)强阳性鸭血清(采自上海麻鸭，一70c保
存)；n32pdcTP(北京福瑞生物技术工程公司)；
作,投稿者简t3卉101：,韩2005林-1(ji9f63一)。女。山东人．工程师．执业药师，研究方向为中药、化学药品及生物制品等新药研究开发
万方数据
中草蒋ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第6期2006年6月·911·
缺口翻译药盒(普洛麦格公司)}SephadexG一50、Fi—
collPVP(瑞典Pharmacia公司)；SDs(Merck公
司)；鱼精DNA、牛血清白蛋白(中国科学院生物物
理研究所)；硝酸纤维素膜0．45pm(Amersham公
司)。
2方法
2．1 DHBV感染：1日龄北京鸭，经腿胫ivDHBV
DNA强阳性鸭血清，感染后7d取血，分离血
清，一70℃保存待检。
2．2药物治疗试验：DHBV感染鸭随机分组，给药
组分3个剂量加药物，分别为25、50、100mg／kg，
每天2次，连续给药10d；病毒对照组，以生理盐水
代替药物；阳性药物(拉米夫定)组，加药物50
mg／kg，每天2次，连续10d。给药前，给药5、10d
和停药后3d，分别自鸭腿胫静脉取血，分离血清，
于一70C保存待检。
2．3检测方法：取上述待检鸭血清，每批同时点膜，
测定鸭血清中DHBV—DNA的动态水平。按缺口翻
译试剂盒说明书方法，用32p标记DHBVDNA探
针，作鸭血清斑点杂交，放射自显影膜片斑点，测定
吸光度∽)值(490rim)，计算血清DHBV—DNA密
度，以杂交斑点A值作为标本DHBVDNA水平值。
2．4药效计算：计算每组不同时间点血清DHBV—
DNA水平的j±5，各组用药前后比较采用配对t
检验，计算DHBVDNA抑制率，比较各组鸭血清
DHBV—DNA抑制率的动态变化。给药组与病毒对
照组比较，采用成组t检验。
DHBVDNA抑制率一(给药前A值一给药后A值)／给
药前A值×100％
3结果
DHBV—DNA感染鸭各组用药前后血清
DHBV—DNA水平半定量结果见表1。P125、50mg／
kg组给药后与病毒对照组比较，鸭血清DHBV
DNA水平无显著性降低；P1100mg／kg组给药10
d，鸭血清DHBVDNA水平较给药前显著降低
(尸<0．05)，与病毒对照组比较，P1100mg／kg组
给药后10d及停药后3d，鸭血清DHBVDNA抑
制率显著提高(P<0．05，0．01)，药效较显著，且随
疗程增长而效果更明显，停药后鸭血清DHBV—
DNA持续降低。3个剂量组P2在给药后鸭血清
DHBV—DNA均降低，100mg／kg剂量组给药5、10
d与给药前比较，DHBV—DNA显著降低(P<
0．01、0．05)；与病毒对照组比较，给药5、10d鸭血
清DHBV—DNA抑制率显著提高(P<0．05、
0．叫)，药效显著，停药后鸭血清DHBV—DNA有回
升现象。 7
表1苦味叶下珠两种制剂(P1和P2)对DHBV盛染鸭血清DHBV—DNA水平的影响(H一6)
Table1 EffectsofP1andP2onDHBV—DNAlevelinduckserumwithDHBVinfection(H一6)
与对照组比较：’J’<05‘。尸<()·01
+P4讨论
刘庄等研究了苦味叶下珠不同品种和制剂体外
抗乙型肝炎病毒(HBV)作用，以该植物浓缩水提
物效果最好“]。Venkateswaran证实苦味叶下珠水
溶性提取物可抑制HBV内源性DNA多聚酶“]。
Thyagarajan等首次利用苦味叶下珠干粉胶囊600
mg／d口服治疗HBsAg携带者，转阴率为59％“3。
Venkateswaran应用鸭乙肝动物模型还发现，同一
苦昧叶下珠全草浸液ip给药有效，而iv给药无效。
目前普遍认为苦味叶下珠给药方式以全草粉末口服
效果最佳，原因是全草粉末活性成分不易丢失，而煎
服不能提取全部有效成分。
本实验通过鸭乙型肝炎模型证明了苦味叶下珠
提取液具有更好的抗鸭乙肝病毒活性，对病毒
DNA的抑制率为全草粉末抑制率的2倍。说明利用
水和乙醇可以充分提取出各种有效成分，可以减少
苦味叶下珠的服用量。而全草粉末虽然保留了大量
的括性成分，但是服药量少效果不明显，且短期内不
万方数据
·912· 中革芮ChineseTradit}ona|andHerba／Drugs第37卷第6期2006年6月
易吸收。本实验结果对苦昧叶下珠类药物产品生产
具有重要的参考价值，对I临床用药也具有重要的指
导意义。加大给药量，增加治疗时间，增加实验动物
数量，有可能获得更好的实验结果，进一步的研究正
在进行中。
致谢：本实验得到中国医学科学院生物技术研
究所李壮老师的帮助。
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荆防解毒合剂治疗感冒临床观察
王艳玲，张曾譬
(天津中医药研究院附属医院，天津300120)
感冒是临床上最常见的上呼吸道感染性疾病，
又分为普通感冒和流行性感冒，以秋、冬季多见，但
一年四季均可出现，其中尤以风寒型感冒最常见。感
冒的病源有多种，如鼻病毒、流感病毒、副流感病毒、
腺病毒等，其中流感病毒可以导致很多并发症，如诱
发鼻窦炎、气管一支气管炎、肺炎等，严重时可因病毒
感染造成中毒性体克、心力衰竭、呼吸衰竭而死亡。
本院张曾罾教授根据多年的临床经验，在明代王肯
堂的“荆防败毒散”基础上化裁而成“荆防解毒合
剂”，治疗感冒608例，取得显著疗效。现报道如下。
1临床资料
病例来源：自2002年至2003年底，分别在天津
中医药研究院附属医院、天津市和平区中医医院、京
津名中医门诊部3个医疗单位，选择符合观察条件
的感冒患者l144例，分组分型进行疗效观察。患者
年龄：2～86岁，平均年龄39岁。性别：男性581例，
女性563例。
2诊断标准
符合周家中医药管理局1994年颁布的《中医病
症诊断疗效标准*：(1)鼻塞流涕，喷嚏，咽痒或痛，咳
嗽。(2)恶寒发热，无汗或少汗，头痛，肢体酸楚。凡
符合以上诊断标准，且发病在48h以内，午后体温
在38。C以上或清晨体温在37．5℃以上并无合并
收精日期：20051118
或并发症者，将其分为4个证型：(1)风寒型626例：
恶寒多，发热少，头痛无汗，鼻塞流清涕，肢体酸痛，
或兼有咳嗽喉痒，苔薄自，脉浮或浮紧。(2)风寒化热
型(含寒包热型)180例：恶寒、无汗、身痛、喉痒等风
寒闭表之证未解，已见咽干、便秘、苔薄黄等化热之
征，或咳嗽不爽、|1干咽痛、喑哑气喘等寒包热之征。
(3)风热型199例：发热恶风，汗泄不畅，咳呛喉燥，
头胀口干；或咽部红肿作痛，便秘，痰稠黄，舌苔薄
黄，脉浮数。(4)挟湿型(胃肠型)139例：发热不扬，
恶寒头重，肢体困倦，口淡胸闷，恶心呕吐，腹胀，大
便或溏或泄，舌苔厚腻，脉濡。
3治疗方法
3．1荆防解毒合剂：羌活、防风、柴胡、连翘、薄荷、
芦根、桔梗、枳壳等15味，制成口服液，含生药lg／
mL。药物来源于天津中医药研究院附属医院制剂
室。制剂批准文号[津药制字(2001)z第0356号]。
该药符合2005版《中国药典》口服液项下标准。
3．2治疗方法：采用随机表方式．随机抽取608例
单纯性感冒患者，为荆防解毒合剂观察组，抽取536
例分别作为清瘟解毒片(】60例)、通宣理肺片(45
例)、银翘解毒片(50例)、藿香正气软胶囊(35例)、
康泰克(76例)、天津感冒片(1lo例)和抗病毒口服
液(60例)对照组。观察组与对照组病例数之比为
万方数据
苦味叶下珠不同制剂对鸭体内乙肝病毒的抑制作用
作者： 韩林， 梁睿敏， 刘斌
作者单位： 北京汉典中西药研究开发中心,北京,100071
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2006,37(6)
被引用次数： 2次

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报2009,34(5)

引证文献(2条)
1.孙伟 苦味叶下珠的化学成分研究[期刊论文]-中草药 2012(1)
2.王玉.吴中明.敖弟书.周艳萌 紫花地丁水浸出物对HepG2.2.15细胞分泌HBsAg的影响[期刊论文]-遵义医学院学报
2009(6)


本文链接：http://d.wanfangdata.com.cn/Periodical_zcy200606045.aspx