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Extraction technique of polysaccharide from Hedyotis diffusa by T‘S correlation degree

T型关联度分析法优化白花蛇舌草中多糖提取工艺



全 文 :中草莠ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第12期2007年12月·1819·
必造成最终制剂产品质量难以稳定均一。实验结果表
明,在多元指纹图谱质量控制标准下,通过混合均一
化,可保证不同批次提取物质量的稳定均一,这为中
药生产过程实现指纹图谱质量控制提供了新思路。
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T型关联度分析法优化白花蛇舌草中多糖提取工艺
沈鸿
(南京脑科医院,南京210029)
摘要;目的优化白花蛇舌草多糖的提取工艺。方法用T型关联度分析法对白花蛇舌草中多糖提取工艺进行
研究。结果 根据浓缩液总多糖量关联度结果,各因素相关度大小顺序为X。>X:>x。,各因素与指标浓缩液总多糖
的量呈正相关。结论将T型关联度分析法用于白花蛇舌草多糖提取工艺优化,简便、可行。
关键词:白花蛇舌草;T型关联度分析法;多糖;提取
中图分类号:R284.2;R296.02文献标识码:A 文章编号:0253—2670(2007)12—1819一02
ExtractiontechniqueofpolysaccharidefromHe yotisdiffusabyTScorrelationdegree
SHENHong
(NanjingBrainHospital,Nanjing210029,China)
Keywords:Hedyotisiffu aWilld.;T’Scorrelationdegree;polysaccharde
白花蛇舌草HedyotisdiffusaWilld.广泛应用
于治疗各种肿瘤,其中多糖能显著抑制小鼠移植性
S。。。实体瘤的生长,而且与环磷酰胺合用,可以明显
改善环磷酰胺所致的免疫器官萎缩和造血系统的损
伤[1矗]。对白花蛇舌草中多糖提取工艺运用传统的正
交试验法或均匀设计试验可以分析每一个因子对每
一项指标的影响程度,然而,在综合考察多项指标的
情况下,利用正交试验法试验次数多[1],而采用均匀
设计方法则对实验数据进行进一步的整理、分析较
为困难。关联度分析来源于华中理工大学邓聚龙教
授创立的灰色系统理论,是分析灰色系统内部各因
素之间发展变化的关联程度的一种方法[2]。根据因
素间发展态势的相似或相异程度来衡量因素间关联
的程度。它提示了事物动态关联的特征与程度,由于
以发展态势为立足点,因此对样本量的多少没有过
分的要求,也不需要典型的分布规律,计算量少到可
以用手计算,且不会出现量化结果与定性分析不一
致的情况。通过关联度分析,可以指出影响关键变量
发展变化的主要因素。因此本实验应用关联度分析
中的T型关联度分析法对数据进行处理,得出优化
提取工艺。
1 实验材料
白花蛇舌草购于南京市药材公司,产地广东,经
笔者鉴定。751一GW分光光度(上海分析仪器有限
公司);标准葡萄糖对照品(中国医药上海化学试剂
公司,批号000926)。
2方法与结果
2.1硫酸一苯酚法测定多糖
2.1.1苯酚溶液的配制:取苯酚200g,加铝片0.2
g和碳酸氢钠0.1g,常压蒸馏,收集182℃馏份,称
取此馏份30g,加水使溶解,置500mL棕色量瓶内
稀释至刻度,即得6%的苯酚溶液,4℃备用。
2,1.2对照品溶液的制备:精密称取在105℃干燥
至恒重的葡萄糖对照品20mg,置100mL量瓶中,
加水溶解并稀释至刻度,摇匀,即得,4℃备用。
2.1.3标准曲线的绘制:精密称取葡萄糖对照溶液
收稿日期:2007—04—22
作者简介:沈鸿(1974一),女,浙江湖州人,主管药师,硕士,2002年获中国药科大学中药药理专业硕士学位,主要从事中药学和临床
药理的研究。E—mail:shenhon91974cn@hotmait.tom
万方数据
·1820· 中草喃 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第12期2007年12月
0.0、0。2、0.4、0.6、0.8、1.0mL分置10mL具塞离
心管中,依次添加蒸馏水使最终体积为2.0mL,各
管再加入1.0mL苯酚试液,混匀,迅速加入浓硫酸
(勿沿壁加,直接加在液面上),摇匀,静置5min,水
浴加热15min后,取出冷却至室温,于490nm处测
定吸光度。以质量浓度(C)为横坐标,吸光度(A)为
纵坐标,绘制标准曲线,得回归方程A=0.0646
C一0.0039,r一0.9991。表明多糖在3~200弘g/
mL与吸光度具有良好线性关系。
2.1.4样品溶液的制备:每份25g白花蛇舌草饮
片试验安排重复两次。提取液经滤过、浓缩,定容至
25mL,得浓缩液。取1mL浓缩液,定容到100mL,
即得样品溶液,4℃备用。
2.1.5测定:精密吸取样品溶液1mL,照标准曲线
绘制项下自“依次添加蒸馏水使最终体积为2.0mL”
起依法操作,测定吸光度,计算多糖的质量浓度。
2.2 T型关联度分析:先确定特征序列Xo和因素
序列Xi,Xo={zo(1),zo(2),⋯,zo(以)},Xi={Xi
(1),五(2),⋯,五(,z))。,再分别计算两个序列各对应
点的关联系数:
e1.f(五)=sgnE△yo(愚)·Ayi(k)-I·min(IAy0(志)I,IAyi
Q)1)/max(}△执Q)J,IAyl(h)J)(1)
式中△皿(曼)=熬Q)一∞(五一1)=[嚣Q)--Xi(量一1)]/玖,
D;一∑[Iz,(愚)一z。Q一1)1]/(以一1),(志=1,2,3,⋯⋯,靠),
sgnEAy0强)·AylQ)]作为运算符号,即△帅Q)·Ayl(矗)>o
时,手1.t强)>O,△∞Q)·△弘强)最后计算关联度:
ro.。一乏手1.fQ>/(行一1) (2)
70,i绝对值越大,X,对X。的影响程度越大;若,0.。<
0,二者呈负相关;托。,=0,则表示二者不相关。
2.3试验因素与设计:以浓缩液中多糖质量浓度为
指标,采用T型关联度分析对白花蛇舌草中多糖提
取工艺进行优化,结果见表1。
2.4 T型关联度系数的计算:对象序列(各提取因
素)和因子序列(浓缩液中多糖质量浓度)计算结果
见表2。由式(2)计算关联度,结果X,、噩、X。的关联
度分别为0.193、0.312、0.438。根据浓缩液中多糖
质量浓度关联度结果,各因素相关度大小顺序为
裹1试验设计和结果
Table1 Designandresultsoftest
序 因 素 指标(xo)
号X·(iltl)/tx2(提取时阿)/hX3(提取次数)/次多糖质量浓度/(mg·mL一1)
慨(^)一矗O—1)l 2
}如旺)一如(王一1)I ‘o.5
I墨“)一凰(1一I)i ‘l
I‰(I)一‰(1—1)I 3.95
4靠(^)=【x1(t)-Xl(t-u]/Dl1
娘O)=陬旺)一如证一1)]/D20.56
4拍(t)=[/3(tt-13(t-1)]/Dl0.83
4抽(I)=[‰(1)一Xo(t-1)],Do.10
£o.暑(^) o.912
矗.A(t)0.507
如.c(t)0.760
X。>X:>X。,各因素与指标呈正相关,即加水量越
多,提取时间越长,提取次数越瑟浓缩液中多糖质
量浓度越高。综合考察指标,采用目测法,并结合提
取周期、节能降耗等全面考察,可酌情减少加水量,
缩短提取时间。提取工艺最佳条件为:煎煮2次,加
水4倍量,煎煮时间2.5h。
3讨论
本实验将T型关联度分析应用于优化白花蛇
舌草多糖提取工艺筛选,可以在影响因素相对较多
的情况下减少试验次数,得到各因素与指标间的关
联度,筛选出主次的影响因素,从而优化提取工艺,
该方法简单、易行。
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万方数据
T型关联度分析法优化白花蛇舌草中多糖提取工艺
作者: 沈鸿, SHEN Hong
作者单位: 南京脑科医院,南京,210029
刊名: 中草药
英文刊名: CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年,卷(期): 2007,38(12)
被引用次数: 1次

参考文献(2条)
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