全 文 ：中草蔼 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第12期2008年12,el·1853·
表2吸收促进剂对豆腐果苷大鼠小肠吸收的影响
(；士s，n一5)
Table2 Effectofabsorptionenhanceronhelicidabsorption
insmallintestineofrats(；士s，n=5)
4讨论
酚红在肠吸收实验中用于测定肠对水分的吸
收，以计算肠循环液中药物质量浓度的变化。
实验中考察了低、中、高质量浓度豆腐果苷K。
无显著性差异，说明K。不随质量浓度变化，认为豆
腐果苷的大鼠小肠吸收属于一级动力学过程，吸收
机制为被动扩散。
在本实验研究过程中发现，豆腐果苷不同质量
浓度下，tl／z较长，而P只有不到10％，属于吸收较差
的药物。为提高豆腐果苷口服生物利用度，考察了多
种吸收促进剂[73对豆腐果苷肠吸收的影响。胆酸盐
是常规的黏膜吸收促进剂，其作用机制是可逆性调
节紧密连接，毒性低。实验考察了两个质量浓度牛胆
盐对豆腐果苷小肠吸收的影响情况，结果表明，牛胆
盐具有较明显的促吸收效果，且质量浓度越高促吸
收效果越明显。卡波姆是生物黏附性高分子聚合物，
由于生物黏附性和安全性使其应用前景广阔。作为
促进剂，卡波姆能够打开紧密连接，增加旁细胞转
运，同时抑酶效应和生物黏附性也可促使药物肠吸
收增加。实验结果表明，卡波姆对豆腐果苷有较强的
促吸收作用。中医认为，冰片味辛苦、微寒，归心、肝、
肺，有开窍醒神、通诸窍等作用，常作为多种中药的
“药引”，但其促吸收机制还未明确。实验考察
0．04％的冰片即可使豆腐果苷的K。增加1．3倍。
冰片对豆腐果苷吸收具有促进作用。十二烷基硫酸
钠促吸收机制是溶解肠黏膜成分，释放蛋白质和磷
脂，影响乳酸脱氢酶和线粒体乳酸脱氢酶的活性，一
般来说促吸收效应强但毒性大，在研究中常作为对
照物。实验中由于溶解度的关系，为得到澄明供试
液，十二烷基硫酸钠浓度仅为0．7mmol／L，结果表
明，该浓度下对豆腐果苷肠吸收并无影响。
大鼠在体吸收实验应能代表药物在正常剂量下
的吸收。成年人正常服用豆腐果苷的剂量约为50
rag／次，根据人与大鼠之间的体表面积换算法[8]，得
到大鼠正常服用剂量为o．89rag／次。本实验豆腐果
苷质量浓度确定为4．464-40．179p．g／mI。，即循环
液含药物o．22～2．01mg，基本可以代表药物在正
常剂量下的吸收情况。实验结果提示在肠道的吸收
较差，但是多种常用吸收促进剂可在一定程度上改
善其吸收，这为豆腐果苷剂型设计和开发提供了科
学依据，对制剂处方具有一定的指导意义。
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大黄素对大鼠肝移植排斥反应相关细胞因子的影响
林文琴1，杨 潇2，荆 河2，徐贤绸2，童洪飞2，林胜璋”
(1．温州医学院附属第一医院，浙江温州 325027；2．温州医学院附属第二医院，浙江温州325027)
摘 要：目的探讨大黄素对肝移植大鼠排斥反应中相关细胞因子表达的影响。方法采用大鼠原位肝移植模型，
随机分为3组：对照组、移植组、大黄素组，于术后第5天取血。用ELISA法检测血清中白细胞介素一2(IL一2)、7一千
收稿日期：2008—03—12
基金项目：国家自然科学基金资助项目(30572395)
作者简介：林胜璋(1969)，男，教授．硕士，研究方向为肝胆胰外科基础与临床。Tel：13858864450
*通讯作者林胜璋E—mail：wzf21sz@163．com
万方数据
·1854· 中草喃 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第12期2008年12月
扰素(INF一7)、白细胞介素-4(IL一4)、白细胞介素一10(IL一10)、白细胞介素一12(IL一12)、肿瘤坏死因子一a(TNF—a)
水平。结果 移植组IL一2、IL一12、IFN一-r、TNF—a表达明显升高，II。一4、II。一10表达显著降低，与对照组相比，差异非常
显著(P<0．01)。大黄素组IL一2、IL一12、INF一丫、TNF—a表达显著降低，而IL一4、IL一10表达显著升高，与移植组相
比，差异非常显著(P
关键词：大黄素；肝移植；移植物排斥；细胞因子
中图分类号：R286．1 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2008)12—1853一03
大黄素是一种从大黄中提取的蒽醌类化合物，
能延长肝移植后大鼠的存活时间，有效减轻排斥反
应，具体机制有待阐明[1]。目前众多实验证实，细胞
因子在移植排斥反应中发挥重要作用。移植物排斥
反应时，Thl型细胞因子能促进同种抗原特异性的
细胞毒性T细胞活化、增殖、分化，从而加速移植排
斥反应，Th2型细胞因子则通过抑制Thl型细胞因
子表达而调控移植排斥反应[2]。常见的Thl型核心
细胞因子有白细胞介素一2(IL一2)、白细胞介素一12
(IL一12)、丫一干扰素(INF一7)和肿瘤坏死因子一a
(TNF—a)等，Th2型核心细胞因子有IL一4和IL一10
等[3]。大黄素对IL一2、IFN一7、IL一4、IL一10、IL一12和
TNF—a等这些在移植排斥反应中调节T细胞增殖
分化的细胞因子的表达有无影响，目前国内外尚未
见报道。本研究拟通过大鼠原位肝移植模型，探讨大
黄素对大鼠肝移植排斥反应中IL一2、IFN—y、IL一4、
IL一10、IL一12和TNF—a表达的影响。
1材料与方法
1．1 实验动物分组与模型制备：健康雄性近交系
LEW大鼠32只和BN大鼠16只，体质量250～
280g，购自北京维通利华公司，饲养条件符合SPF
级。随机分为3组，对照组：供、受体各8只，均为
LEW大鼠(同基因移植，无排斥反应)；移植组：供、
受体各8只，LEW大鼠为供体，BN大鼠为受体；大
黄素组：供、受体各8只，供体为LEW大鼠，受体为
BN大鼠，肝移植术后每天ip大黄素(购自西安华
萃公司，质量分数98％)50．0mg／kg。大鼠原位肝
移植模型是笔者根据文献介绍的两袖套法进行适当
改进与简化制成的L4]，入选模型动物均为排除手术
并发症者。
1．2指标检测：于术后第5天麻醉后，下腔静脉穿
刺取血。ELISA法检测血清中IL一2、IFN一7、IL一4、
IL一10、IL一12和TNF—a的水平。ELISA试剂为
Biorapid公司产品。切取肝组织作病理切片，观察排
斥反应程度与细胞因子水平的关系。
．3 统计学处理：所得计量资料以z±5表示，
SPSS10．0统计分析软件包对数据进行处理。
2结果
2．1 肝移植排斥反应病理观察结果：移植组大鼠肝
组织发生严重排斥反应，肝组织汇管区大量炎性细
胞浸润，胆管内皮有坏死。与移植组相比，大黄素组
大鼠肝组织排斥反应明显减轻，汇管区少量炎性细
胞浸润，胆管内皮基本完整，见图l。
2．2大黄素对肝移植大鼠血清各相关细胞因子的
影响：见表1。移植组大鼠血清中IL一2、IFN一7、IL一12
和TNF—a水平明显升高，而IL一4和IL一10水平显
著降低，与对照组相比，差异非常显著(尸<0．01)；
大黄素组血清中IL一2、IFN一7、IL一12和TNF-a水平
明显降低，而IL一4和IL一10水平显著升高，与移植
组比较，差异均非常显著(P<0．01)。
3讨论
本研究结果显示，肝脏移植急性排斥反应时，
lL一2、IL一12、IFN一7和TNF—a水平明显升高，而
IL一4和IL一10水平显著降低，表明肝脏移植急性排
对照组 移植组 大黄索组
图l各组肝移植大鼠肝组织病理变化
Fig．1Pathologicalchangesoflivertissuein verygroupoflivert ansplantedrats
万方数据
中草嫣 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第12期2008年12月· 855-
8．68士1．86
68．58土6．484
39．39±5．96‘’
274．35土28．40
614．58士56．15。
249．33±29．38’。
与对照组比较：4P
心脏移植排斥反应中IL一2、IL一12、IFN一7和TNF—a
等Thl型细胞因子的表达，促进Th2型细胞因子
IL一4和IL一10的表达。
II。一2、II，一12、IFN一7和TNF—a是Thl型核心
细胞因子，在诱导Thl型免疫反应中起重要作用。
移植排斥反应越严重，Thl型细胞因子水平越高。
文献报道[5]，肝脏移植后，发生排斥时，移植肝单核一
巨噬细胞内表达TNF—a增加，与血清中的变化同
步。II。一2、IFN一7水平是与急性排斥反应移植血管疾
病(GVD)密切相关的¨]。而IFN一7与IL一12被证
实在异基因移植排斥中有调节作用[7]。Thl型细胞
因子具有相似的生物学作用，表现在：促进活化的T
细胞及NK细胞增殖、分化，诱导多种细胞产生
Thl型细胞因子，促进Thl细胞发育，抑制Th2细
胞发育，从而加速移植排斥反应。
IL一4和IL一10是主要的Th2型细胞因子。IL一4
主要由CD4+T细胞产生，它可与IL一2竞争IL一2R
的7链，抑制IL一2的生物学作用，它还可以自分泌方·
式促进其他Th2型细胞因子产生及Th2细胞的增
殖分化，抑制Thl型细胞因子的产生及Thl细胞的
增殖与分化[3]。IL一10通过与其受体结合，发挥如下
功能：①抑制Thl细胞因子IL一2、IFN一7、TNF—a等
的合成；②抑制巨噬细胞产生活性氧的中间体；③抑
制单核细胞HLAⅡ类抗原DP、DR、DQ的表达；④
抑制B7、细胞黏附分子ICAM一1的表达[8舟]。
本研究发现大黄素组IL一2、IL一12、IFN一7和
TNF—a水平明显下调，也就是说，大黄素通过减少
IL一2、IL一12、IFN—y和TNF—a的产生，广泛抑制了
以Thl型免疫反应为特征的移植排斥反应。本研究
还发现，大黄素组IL一4和IL一10水平有上调，说明
大黄素对Th2型细胞因子的产生有较强的促进作
用。综上所述，大黄素通过抑制IL一2、IL一12、IFN一7
和TNF—a产生和促进IL一4和IL一10的上调，使免
疫反应向Th2型偏移，从而较好地解释了其抗肝移
植排斥反应的效应。至于大黄素对上述细胞因子表
达调控的具体机制尚有待进一步研究。
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万方数据
大黄素对大鼠肝移植排斥反应相关细胞因子的影响
作者： 林文琴， 杨潇， 荆河， 徐贤绸， 童洪飞， 林胜璋
作者单位： 林文琴(温州医学院附属第一医院,浙江,温州,325027)， 杨潇,荆河,徐贤绸,童洪飞,林胜璋
(温州医学院附属第二医院,浙江,温州,325027)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2008,39(12)
被引用次数： 4次
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