全 文 ：中草焉 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第11期2008年11月· 665·
口
图2天花粉租多糖(A)和精制多糖(B)的核磁共振谱圈
Fig．2NMRofcrude(A)andrefi ed(B)
ofRadixTrichosanthispoIysaccharide
柱、凝胶色谱柱等手段进行纯化，解决了天花粉中淀
粉、蛋白等水溶性高分子化合物以及柠檬酸等阴离
子化合物的干扰问题。经苯酚一硫酸分光光度法测
定，核磁共振波谱验证，表明获得了纯度较高的天花
粉多糖。此结果为进一步开展天花粉多糖的组成及相
对分子质量等分析研究，对探讨天花粉多糖的药理、
药效，进一步开发天花粉多糖新药具有重要的意义。
参考文献： u
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淡竹叶中荭草苷的微波萃取一HPLC法测定
薛月芹，袁珂‘，楼炉焕，葛斌斌
(浙江林学院天然药物研发中心，浙江临安311300)
擒要：目的从淡竹叶中提取黄酮苷类成分，并测定荭草苷的量。方法采用微波萃取技术提取黄酮苷，在640W
的功率下，用10倍量70％乙醇为溶剂微波萃取2rain制备供试品溶液。并采用RP—HPLC法测定荭草苷。色谱条件：
色谱柱为DiamonsiC18色谱柱(250mm×4．6mm，5肛m)；流动相为甲醇一水一冰醋酸(40：70：1)；柱温：25℃；检测
波长：340am。结果荭草苷在0．014～0．280mg／mL线性关系良好；荭草苷的平均回收率为96．18％，RSD为
1．96％。浙江、福建产淡竹叶中黄酮苷成分的量比较高，而广西、重庆等地生长的淡竹叶中有效成分的量较低。结论
采用微波萃取技术提取淡竹叶中的荭草苷，并采用HPLC法定量的方法简便、准确，结果稳定、重现性好，可作为淡
竹叶及其制剂质量控制的方法。
关键词：淡竹叶I荭草苷；微波萃取；高效液相色谱
中图分类号：R286．1 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2008)11—1665—03
淡竹叶主要分布于江苏、安徽、浙江、福建、湖
南、湖北、贵州、云南等省，性淡、微涩、寒，味甘、苦，
具有清热除烦、解渴利尿、明目解毒和止血的功
能[1]。淡竹叶在我国具有悠久的药用历史，是一味著
名的清热解毒良药。淡竹叶中含有大量对人体有益
的活性物质，包括黄酮类、生物活性多糖、氨基酸类、
芳香成分和其他微量元素[2]。竹叶提取物的功能因
子主要是黄酮苷，淡竹叶黄酮具有多方面的生物活
性，如抗脂质过氧化、抗衰老、清除自由基，阻断亚硝
基化，降低血脂及血胆固醇，抗菌消炎、抗病毒，增强
免疫功能，抑制移植性肿瘤在宿主体内的生长等方
面的作用[3“]。淡竹叶黄酮以其巨大的资源优势，良
好的药理活性已成为一种非常有前途的天然药物，
是具有广阔开发前景的新型药用资源。微波萃取技
术以其具有的快速、高效、安全，节省溶剂和能源、尤
其是可以避免长时间高温加热引起的有效成分分解
等特点已被广泛应用于多种植物的提取，并取得了
显著成效[5]。本实验采用微波萃取方法快速提取淡
收稿日期：2007—12-20
基金项目：浙江省森林培育重中之重学科开放基金项目(200510)
作者简介：薛月芹(1980一)，女，山东泰安人，硕士，主要从事药用植物质量控制研究。E—mail：yueqinxue2007@yahoo．com．cn
*通讯作者袁珂Tel：(0571)63743607E—mail：yuan—ke001@163．com
眩
万方数据
·1666· 中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第11期2008年11月
竹叶中的黄酮苷，同时采用HPLC法测定了不同产
地淡竹叶中荭草苷。所建立的微波萃取一HPLC法方
法简便、结果稳定，为淡竹叶及其制剂的质量控制提
供参考依据。
1仪器与试药
Waters515型高效液相色谱仪、Waters2487
双波长检测器(美国Waters公司)；英谱2000HS工
作站；NJL07—3型实验专用微波炉(南京杰全微波
设备有限公司，额定功率800W)，Millipore
Simplicity型超纯水器(美国Millipore公司)；RE一
52A旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂)f101—1型
电热恒温干燥箱；瑞士MettlerAE240微量分析天
平，微孔滤膜(上海医药工业研究院)。
淡竹叶分别采自浙江、福建、广东、广西、湖北、
湖南、重庆、江苏、安徽，经浙江林学院楼炉焕教授鉴
定为淡竹叶LophatherumgracileBrongn．。荭草苷
对照品自制，由HPLC面积归一化法标定质量分数
为99．18％。色谱纯甲醇，双蒸水，其他试剂均为分
析纯。
2方法与结果
2．1 色谱条件：色谱柱为DiamonsiC18色谱柱(250
mm×4．6mm，5pm)；流动相为甲醇一水一冰醋酸
(40l 70l 1)；柱温：25℃；检测波长：340nm；灵敏
度：0．5AUFS。荭草苷的理论塔板数为6257，分离
度为2．3。
2．2标准曲线的制备：精密称取荭草苷对照品2．80
mg，加超纯水定容至10mL量瓶中，摇匀，配成0．28
mg／mL荭草苷对照品溶液。分别取溶液0．25、1．0、
1．5、2．5、5．0mL置5．0mL量瓶中，加超纯水定容
至刻度，分别进样10肛L，记录峰面积。结果荭草苷在
0．014～0．280mg／mL线性关系良好，回归方程为
y=2．601×10—8X一1．906×10～，r=0．9990。
2．3供试品溶液的制备：分别精密称定干燥并过60
目筛的淡竹叶样品各1g，在640W的功率下，用10
倍量70％乙醇为溶剂微波萃取2rain。抽滤后放冷，
转移至量瓶中，加70％乙醇定容至25mL量瓶中，
即得。
2．4 稳定性试验：取供试品溶液10pL，在室温分
别放置0、2、3、4、6、8h后进样测定荭草苷峰面积，
结果峰面积的RSD为1．24％。
2．5精密度试验：精密吸取0．28mg／mL荭草苷对
照品溶液10弘L，重复进样5次，计算，结果峰面积的
RSD为1．49％。
2．6重现性试验：精密称取浙江临海产的淡竹叶样
品5份，每份1g，制备供试品溶液，分别吸取10pL
进样，测定，记录峰面积，计算，结果荭草苷质量分数
的平均值为1．2060％，RSD为1．26％。
2．7加样回收率试验：精密称取5份浙江临海产的
淡竹叶样品，每份0．5g，分别精密加入0．28mg／mL
荭草苷对照品溶液2．0mL，制备供试品溶液，进样
测定，计算回收率。结果荭草苷的平均回收率为
96．18％，RSD为1．96％。
2．8样品测定：取不同产地淡竹叶样品，制备供试
品溶液，分别吸取10弘L进样，记录荭草苷峰面积，
由对应回归方程计算荭草昔的质量分数，结果见表
1。荭草苷对照品及样品色谱图见图1。生长在不同
地区的竹叶中的荭草苷的量存在较大差异，结果显
示浙江、福建等竹类生长大省的淡竹叶中黄酮碳苷
类成分的量比较高，而广西、重庆等地生长的淡竹叶
中有效成分的量较低。
衰1不同产地淡竹叶中荭蕈苷的测定结果
Table1 DeterminationoforentinInL．grac／／e
fromdifferenthabitats
10 20304050∞ lO 20 304050∞
t／rain
-一荭草苷
*一orentin
图1荭草苷对照品(A)和浙江临海产淡竹叶(B)的HPLC图
Fig．1HPLCChromatogramsfo entinreference
substance(A)andL．gracilefromLinhai
inZhejiangProvince(B)
3讨论
本研究进行微波萃取时，选用70％乙醇做溶剂
提取，是通过选用20％、50％、70％、80％乙醇提取，
通过紫外法测定总黄酮，发现采用70％乙醇提取总
万方数据
中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第ll期2008年11月· 667·
黄酮的提取率最高，总黄酮的平均质量分数达
1．853％。因此实验选择用70％乙醇做提取用的
溶剂。
流动相的选择：黄酮碳苷的测定多采用水一甲醇
系统，但在此流动相的不同比例条件下荭草苷与异
荭草苷极性很接近，使样品中的两个成分很难达到
基线分离，因而实验尝试加入适量酸以增大流动相
的极性，结果发现选择甲醇一水一冰醋酸(40：70：1)
可以达到理想的分离效果。
本实验采用微波萃取法提取淡竹叶中的黄酮
苷，具有溶剂用量少，提取快速，有效成分的提取率
较高的特点。所建立的RP—HPLC测定方法具有方
法简便、准确，结果稳定、重复性好的特点，可作为淡
竹叶及其制剂质量控制的定量方法。
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HPLC法测定大豆异黄酮的不确定度评定
饶毅1，张洁2，李新南2，魏惠珍1，吴有根2，王跃生1
(1．中药固体制剂制造技术国家工程研究中心，江西南昌 330006；2．江西中医学院，江西南昌330004)
擒耍：目的对HPLC法测定大豆异黄酮中的大豆苷和染料木苷的测定不确定度进行分析，找出影响不确定度
的因素。方法采用HPLC法测定大豆苷和染料木苷，并根据《测量不确定度评定与表示》(JFL059—1999)中有关规
定评估其不确定度。结果 不确定度评估大豆苷为±0．51％、染料木苷为士0．79％。结论大豆苷不确定度各分量
均较小，而染料木苷不确定度主要由对照品的稀释、样品及对照品的峰面积所引入。
关键词：大豆异黄酮I大豆苷}染料木苷；高效液相色谱；测量不确定度
中图分类号：R286．1 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2008)11—1667一04
测量不确定度是表征合理地赋予被测量之值的
分散性的参数[1]。《检测和校准实验室能力的通用要
求》规定，检测和校准实验室都必须有对测量结果进
行不确定度评定的程序，并应用这些程序对实验结
果进行测量不确定度的评定。本实验通过HPLC法
测定大豆异黄酮中大豆苷、染料木苷的不确定度评
定，建立HPLC测定法的不确定度评定方式。
1材料
岛津LC一10A高效液相色谱仪，岛津AUW
220D电子天平，所用玻璃器皿均为天玻牌A级。
甲醇、乙腈均为色谱纯，所用试剂水均为超纯
水；大豆苷对照品由中国药品生物制品检定所提供，
染料木苷对照品由深圳TAUT0生物技术公司提
供，质量分数≥99％；大豆异黄酮由华北制药股份有
限公司提供，批号：Y0607003。
2方法与结果
2．1大豆异黄酮中大豆苷和染料木苷的HPLC法
测定
2．1．1 色谱条件：大连依利特公司C。。色谱柱(250
mm×4．6mm，5pm)；流动相：乙腈一水(15：85)；
体积流量：1．0mL／min；检测波长：254nm；柱温：40
℃；进样量：10弘L。
2．1．2对照品溶液的配制：精密称取大豆苷对照品
10．20mg置50mL量瓶，用50％乙醇稀释至刻度，
摇匀，即得大豆苷对照品储备液。精密称取染料木苷
对照品12．31mg置25mL量瓶，用50％乙醇稀释至
刻度，摇匀，再从中取1mL置10mL量瓶中，用50％
乙醇稀释至刻度，摇匀，即得染料木苷对照品储备
液。分别取大豆苷、染料木苷对照品储备液各1mL，
置10mL量瓶中，用50％乙醇稀释至刻度，摇匀，
即得。
2．1．3供试品溶液的配制：精密称取大豆异黄酮样
品10mg置100mL量瓶中，加入适量50％乙醇，超
声溶解，用50％乙醇加至刻度，摇匀，即得。
收稿日期：2008—03—22
作者简介：饶毅(1964一)，男，江西南昌人，教授，博士，主要从事中药质量控镧研究工作．
Tell(0791)7119609E—mail：raoyi．99@126．corli
万方数据
淡竹叶中荭草苷的微波萃取-HPLC法测定
作者： 薛月芹， 袁珂， 楼炉焕， 葛斌斌
作者单位： 浙江林学院天然药物研发中心,浙江,临安,311300
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2008,39(11)
被引用次数： 1次

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引证文献(1条)
1.胡慧媛.孟舒.孙雪菲.陈再兴 HPLC法测定导赤冲剂中异牡荆苷和异荭草苷的含量[期刊论文]-中国药事 2012(6)


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