全 文 ：·1154· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第8期2005年8月
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HPLC法测定雷公藤及其片剂中雷公藤红素
夏 焱1，王文燕2，张彦文3，贺江萍1，高文远1，段宏泉护
(1．天津大学药学院，天津300027；2．天津药物研究院，天津300193；3．天津医科大学药学院，天津300070)
摘 要：目的建立雷公藤及其片剂中雷公藤红素的HPLC测定方法。方法HPLC外标法。AgilentZorbaxSC—
c。。柱为色谱柱，甲醇一1％醋酸溶液(87：13)为流动相，检测波长为425nm，体积流量为1．0mL／min。结果雷公
藤红素线性范围为40．96～204．8pg／mL(r一0．9996)，药材的平均回收率为98．37％，RSD为1．01％(”一9)，制
剂的平均回收率为98．59％，RSD为1．18％(n一9)。结论本方法操作简便、准确，可作为雷公藤类药物中雷公藤
红素的定量分析方法。 ·
关键词：雷公藤；雷公藤红素；高效液相色谱
中图分类号：R286．02 文献标识码：B 文章编号：0253—2670(2005)08—1154一03
Determinationoftr pterineinTripterygiumwilfordiianditstabletsbyHPLC
XIAYanl，WANGWen—yan2，ZHANGYan—wen3，HEJiang—pin91，
GAOWen—yuanl，DUANHong—quan3
(1．CollegeofPharmaceuticsandB otechnology，TianjinUniversity，Tianjin300072，China；
2．TiaiinInstituteofPharmaceuticalResearch，Tianjin300193，China；3．College
ofPharmacy，TianjinMedicalUniversity，Tianjin300070，China)
Abstract：ObjectiveTodeterminethecontentoftripterineinTripterygiumwilfordiiandtstablets
byHPLC．Methods‘AnexternalstandardmethodbyHPLCwithZorbaxC】8columnasfixedphaseand
methanol一1％HAc(87：13)asmobilephasewasdopted．Thedetectionwavelengthwas425nmandthe
flowratewas1．0mL／min．ResultsThelinearrangefortripterinewas40．96～204．8}￡g／mL(r一
0．9996)．TheaveragerecoveryofChinesemedicinalmaterialsw s98．37％andRSDwas1．01％(竹一9)；
，theaveragerecoveryofpreparationsamplewas98．59％andRSDwas1．18％(胛一9)．ConclusionThe
methodissimpleandaccurate，whichcanbeadoptableforquantitativeanalysisoftripterineinthplants
of丁ripterygiumL．
Keywords：TripterygiumwilfordiiHook．f．；tripterine；HPLC
雷公藤系卫矛科雷公藤属植物，其根茎为主要
药用部位，具有抗炎、抗免疫、抗肿瘤、抗HIV等多
收稿日期：2004—10-08
基金项目：教育部优秀青年教师资助计划资助项目
*通讯作者段宏泉
种药理活性，对类风湿性关节炎、慢性肾炎等自身免
疫性疾病具有显著疗效m2|。同属植物还包括昆明山
万方数据
中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第8期2005年8月·1155·
海棠、东北雷公藤等。由于此类药材毒性大，且缺乏
有效的质量控制手段，因此应用受到很大影响。雷公
藤红素是雷公藤类中药的主要毒性成分[3]，因此准
确测定雷公藤红素对控制雷公藤药材及相关制剂的
质量具有重要意义。本实验建立了雷公藤红素的
HPLC测定方法，操作简单，结果稳定，可作为雷公
藤类药材及其制剂中雷公藤红素的定量分析方法。
1仪器与试药
Agilent1100型高效液相色谱仪，G1311A系列
四元梯度泵，G1322A脱气机，手动进样器，G1314A
VWD可变波长紫外检测器，HPRev．A．0501化
学工作站(Agilent公司)。
雷公藤红素对照品为本实验室自制，质量分数
为98．97％(面积归一化法测得)。HPLC流动相中
甲醇为色谱纯，冰醋酸为分析纯，水为超纯水，药材
经天津大学药学院高文远教授鉴定。
2方法与结果
2．1 色谱条件：色谱柱：AgilentZorbaxSC—C18
(250mm×4．6mm，5肛m)；流动相：甲醇一1％醋酸
溶液(87：13)；检测波长：425nm；柱温：25‘C；体积
流量：1．0mL／min。
2．2对照品溶液的制备：精密称取雷公藤红素对照
品约5mg，置25mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至
刻度，摇匀，作为对照品溶液。
2．3供试品溶液的制备
2．3．1药材供试品溶液的制备：取10g药材，精密
称定，置索氏提取器中，加入甲醇100mL，回流提取
4h，浓缩至干。3倍量硅藻土拌样，挥尽溶剂，氯仿
超声提取3次，每次50mL，每次30min，静置后，滤
取上清液，浓缩至干。4．0g硅胶干法装柱(10cm×
1．5cm)，以1mL氯仿溶解样品，上柱，先取50mL
氯仿洗脱，弃去，再取氯仿一甲醇(95：5)i00mL洗
脱，回收溶剂，浓缩至干。残渣用甲醇溶解，移入10
mL量瓶中，稀释至刻度，摇匀，作为药材供试品
溶液。
2．3．2制剂供试品溶液的制备：取制剂10片压碎，
氯仿超声提取3次，每次50mL，每次30min，静置，
滤取上清液，浓缩至于。称4．0g硅胶装柱(10cm×
1．5cm)，以1mL氯仿溶解样品，上柱，先取50mL
氯仿洗脱，弃去，再取氯仿一甲醇(95：5)100mL洗
脱，回收溶剂，浓缩至干。残渣用甲醇溶解，移人10
mL量瓶中，稀释至刻度，摇匀，作为制剂供试品
溶液。
2．4线性关系考察：精密吸取雷公藤红素对照品溶
液1、2、3、4、5mL于5mL量瓶中，加甲醇稀释至刻
度，摇匀，分别吸取20肛L进样。以峰面积为纵坐标，
溶液质量浓度为横坐标作图，得雷公藤红素的回归
方程为Y一2．1169×104X一65．7，r一0．9996，线
性范围为40．96～204．8／丝g／mL。
2．5精密度试验：取0．12mg／mL雷公藤红素对照
品溶液，连续重复进样6次，测定雷公藤红素峰面
积，计算得其RSD为0．33％。
2．6重现性试验：取湖南岳阳产雷公藤(带皮)制备
供试品溶液，平行操作6份，测定峰面积，计算得雷
公藤红素的质量分数为0．1050％，RSD为1．74％。．
取三九黄石制药厂生产的雷公藤片制备供试品溶
液，平行操作6份，测定峰面积，计算得雷公藤红素
的质量分数为287．7弘g／片，RSD为0．88％。
2．7稳定性试验；取湖南岳阳产雷公藤(带皮)供试
品溶液，分别于0、2、4、6、8h测定峰面积，计算得雷
公藤红素的质量分数为0．1051％，RSD为1．15％。
取三九黄石制药厂生产的雷公藤片供试品溶液，分
别于0、2、4、6、8h测定峰面积，计算得雷公藤红素
的质量分数为287．6pg／片，RSD为0．70％。
2．8 回收率试验：取湖南岳阳产雷公藤(带皮)约
10．2g(含雷公藤红素约10．0mg)，分别按低、中、
高3个水平精密加入5．0、10．0、15．0mg雷公藤红
素对照品，制备供试品溶液，进样测定雷公藤红素的
峰面积，计算其平均回收率为98．37％，RSD为
1．01％(咒一9)。取三九黄石制药厂生产的雷公藤片
约1．0g(含雷公藤红素约2．8mg)，分别按低、中、
高3个水平精密加入1．4、2．9、4．3mg雷公藤红素
对照品，制备供试品溶液，进样测定雷公藤红素的峰
面积，计算其平均回收率为98．59％，RSD为
1．18％(咒一9)。
2．9样品测定：吸取供试品溶液和对照品溶液分别
进样，进样量20弘L，以外标法进行测定，结果见表1
和2。色谱图见图1。
表1不同药材中雷公藤红素的测定结果(行一3)
Table1 Determinationoftr pterineindifferentm dicinal
plantsofTripterygiumL．(辟一3)
3讨论
雷公藤红素的UV吸收光谱，其吸收主要集中
万方数据
·1156· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第8期2005年8月
表2不同片剂中雷公藤红素的测定结果(n=3)
Table2 Determinationoftr pterineinvarious
tabletsofTripterygiumL．(屁一3)
药品 厂家 批号恙髫，絮
雷公藤片 三九黄石制药厂020201
雷公藤多苷片上海复旦复华制药厂021001
雷公藤多苷片湖南株州市制药三厂 20030101
雷公藤多苷片浙江德恩得制药有限公司0207113
昆明山海棠片云南植物药业公司 20040204
287．7 0．88
21．30 0．81
4．193 1．19
86．33 1．77
32．58 1．80
一⋯』，，～√L一一⋯，⋯J’、一、-·_-_．_．___。-．。_。～
*一雷公藤红素
*一tripterine
图1雷公藤红素对照品(A)、雷公藤药材(B)
和雷公藤片(C)HPLC图谱
Fig．1HPLCchromatogramsoft ipterineref rence
substance(A)，T．wilfordii(B)，andtablets
ofT．wilfordii(C)
在长波长处，选定最大吸收波长425am为测定波
长。雷公藤红素中具有羧酸基团，因此1％醋酸溶液
为流动相，使其保持稳定的游离分子状态，峰形更
好。本方法稳定可靠，准确度高。
在前处理过程中采用硅藻土拌样，是因硅藻土
吸附性较低，既可作为固相萃取的固定相，又不会使
所测定部分损失；用氯仿超声提取完全，效果好。采
用氯仿一甲醇(95：5)作为流动相，通过薄层色谱结
合预试验，既达到洗脱完全，又可除去其他极性的杂
质，使雷公藤红素色谱峰分离无干扰，与其他峰分离
度更好。
实验结果显示，不同产地的药材和不同厂家生
产的制剂的雷公藤红素有很大差异，带皮的湖南产
雷公藤中雷公藤红素量很高，而去皮的较低，也证实
了雷公藤红素主要在皮部中，提示在选用药材时对
雷公藤根皮的取舍应慎重对待。雷公藤红素毒性很
大，危害远远超过其活性作用[4]。雷公藤片中雷公藤
红素最高的为287．7／_tg／片，大约是其主要有效成
分雷公藤甲素标示量的10倍。目前国内市场上的雷
公藤类口服制剂，多为原药材的乙醇粗提取物，仅有
雷公藤多苷片是经过初步提纯的，而且毒性成分雷
公藤红素既没有监控也没有测定标准，不能保证安
全用药。因此对其进行监控，制定合理的质量控制标
准势在必行。本实验只建立了雷公藤红素的测定方
法，今后还应对其毒理研究进行深入细致和相关的
探讨，为合理的雷公藤红素限量标准提供理论依据，
使雷公藤类药物能达到疗效稳定、不良反应小的现
代化中药的质量要求。
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敬 告 读 者
《中草药》杂志编辑部尚存部分过刊合订本，包括：1974—1975年、1976年、1979年、1985—1994年(80元／
年)，1995～1997年(110元／#-)、1998年(120元／#-)、1999年(135元／年)、2000年(180元／年)、2001—2003
年(200元／年)、2004年(220元／年)。1996年增刊(50元)、1997年增刊(45元)、1998年增刊(55元)、1999年
增刊(70元)、2000年增刊(70元)、2001年增刊(70元)、2002年增刊(65元)、2003年增刊(65元)、2004年增
刊(65元)。欢迎订购。订阅者请直接与《中草药》杂志编辑部联系。
电话：(022)2747491323006821传真：(022)23006821E—mail：zcyzzbjb@tiipr．corn
万方数据
HPLC法测定雷公藤及其片剂中雷公藤红素
作者： 夏焱， 王文燕， 张彦文， 贺江萍， 高文远， 段宏泉， XIA Yan， WANG Wen-yan，
ZHANG Yan-wen， HE Jiang-ping， GAO Wen-yuan， DUAN Hong-quan
作者单位： 夏焱,贺江萍,高文远,XIA Yan,HE Jiang-ping,GAO Wen-yuan(天津大学药学院,天津
,300027)， 王文燕,WANG Wen-yan(天津药物研究院,天津,300193)， 张彦文,段宏泉,ZHANG
Yan-wen,DUAN Hong-quan(天津医科大学药学院,天津,300070)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2005,36(8)
被引用次数： 14次
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