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RP-HPLC法同时测定野菊花中木犀草素-7-O-葡萄糖苷和蒙花苷



全 文 :中草药 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第8期2006年8月·1261·
RP—HPLC法同时测定野菊花中木犀草素一7一D一葡萄糖苷和蒙花苷
谭晓杰1,贾 英2,李 清1,陈晓辉1,毕开顺1
(1.沈阳药科大学药学院,辽宁沈阳110016;2.沈阳药科大学中药学院,辽宁沈阳110016)
野菊花为菊科植物野菊Chrysanthemum
indicumL.的头状花序,作为常用中药收载于《中
国药典))2005年版中。味苦、辛,性凉,清热解毒、疏
风平肝,用于疔疮、痈肿、丹毒,风热感冒,咽喉肿痛,
高血压眩晕,头痛等症。野菊花中富含黄酮类化合
物,木犀草素一7一。一葡萄糖苷和蒙花苷为其中的代表
性成分。据报道,木犀草素一7一。一葡萄糖苷对黄嘌呤
氧化酶具有强的抑制活性,对cAMP磷酸二酶酯的
IC。。为79/lmol/L[1]。蒙花苷又名野菊花黄酮苷,其
具有抑制磷酸二酯酶作用,醛糖还原酶抑制作用,保
肝作用,并对慢性气管炎有一定疗效[1]。两者均为野
菊花中的主要成分,量较高,本研究选择木犀草素一
7一。一葡萄糖苷和蒙花苷作为指标性成分,采用RP—
HPLC法同时测定木犀草素一7一。一葡萄糖苷和蒙花
苷,为野菊花药材的质量控制提供方法。
1仪器与试药
Agilent1100系列高效液相色谱仪;Chem—
station色谱工作站。
木犀草素一7一。一葡萄糖苷(自制,质量分数大于
98%)、蒙花苷(购自中国药品生物制品检定所),乙
腈和磷酸为色谱纯,水为二次蒸馏水。从不同产地收
集9批野菊花药材(表1),均经沈阳药科大学孙启
时教授鉴定确认为正品。
2方法与结果
2.1 色谱条件:色谱柱:Shim—packVP—ODS(250
mm×4.6mm,5弘m);流动相:A相为0.04%磷酸
水溶液,B相为乙腈,进行梯度洗脱,在o~20min,
B相从20%线性改变至30%,20~30min,B相从
30%线性改变至40%,柱温:室温;紫外检测波长:
348nm;体积流量:1.0mL/min;进样量:20弘L。对
照品及样品色谱图见图1。
2.2对照品溶液的制备:取木犀草素一7一。一葡萄糖
苷约1.0mg,精密称定,置于10mL量瓶中,加甲醇
溶解并定容至刻度,摇匀,再精密移取1.0mL置10
mL量瓶中,加甲醇稀释并定容至刻度,摇匀,即得
A
a
_J。
l
b
0 10 20 300 10 20 30
tImin
a一木犀草素一7一O一葡萄糖苷b一蒙花苷
a—luteolin一7一O—glycosideb-linarin
图1对照晶(A)和样品(B)色谱图
Fig.1HPLCChromatogramsfreferencesubstance
(A)andsample(B)
质量浓度为10.0弘g/mL的木犀草素一7一O一葡萄糖
苷对照品溶液。取蒙花苷约1.0mg,精密称定,置于
10mL量瓶中,加甲醇溶解并定容至刻度,摇匀,即
得103.0弘g/mL的蒙花苷对照品溶液。
2.3供试品溶液的制备:取野菊花药材粉末0.2g,
精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入60%乙醇50
mL,称定质量,加热回流提取1h,放冷,称定质量,
用60%乙醇补足减失质量,摇匀,精密移取0.5mL
置5mL量瓶中,加甲醇定容至刻度,摇匀,经0.45
肛m微孔滤膜滤过,即得。
2.4线性关系的考察:分别精密移取木犀草素一7一
。一葡萄糖苷,蒙花苷对照品溶液0.1、0.2、0.4、0.8、
1.0、2.0mL置5mL量瓶中,加甲醇定容至刻度,
摇匀。分别取上述溶液各20pL进样,在上述色谱条
件下进行分析。以各对照品质量浓度为横坐标,峰面
积为纵坐标,绘制标准曲线并进行回归计算,得木犀
草素一7一O一葡萄糖苷、蒙花苷标准曲线回归方程分别
为:Y一23.45X一0.76,r=0.9998,Y一27.56
x+13.92,r一0.9998。木犀草素一7—0一葡萄糖苷和
蒙花苷分别在0.2~4.2和2.1~41.2弘g/mL与峰
面积呈良好的线性关系。
收稿日期:2005一ll一20
作者简介:谭晓杰(1978一),女,山东省龙口人,沈阳药科大学助教,从事中药现代化研究。
Tel:(024)23986296E—mail:xiaojiesmail@sina.corn
万方数据
·1262· 中草药 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第8期2006年8月
2.5 精密度试验:取木犀草素一7—0一葡萄糖苷和蒙
花苷混合对照品溶液,在上述色谱条件下,重复进样
6次,峰面积的RSD分别为0.8%与0.5%。
2.6稳定性试验:取样品溶液,于室温下放置,分别
在0、2、4、8、16、24h进样,结果表明,木犀草素一7一
。一葡萄糖苷和蒙花苷在24h内稳定,峰面积的
RSD分别为2.0%,0.3%。
2.7 重现性试验:精密量取同一样品6份,依“2.4”
项下的方法操作,在上述色谱条件下分析测定。木犀草
素一7—0一葡萄糖苷平均质量分数0.25%,RSD为
2.0%;蒙花苷平均质量分数为1.64%,RSD为
1.2%。
2.8 回收率试验:精密称取适量野菊花药材9份,分
别精密加入一定量的对照品,按“2.4”项下的方法操
作,在上述色谱条件下进行分析测定,结果木犀草素一
7一O一葡萄糖苷平均回收率为98.6%,RSD为1.8%;
蒙花苷平均回收率为99.4%,RSD为1.7%。
2.9样品测定:按“2.4”项下的方法操作,测定9批
野菊花中木犀草素一7一。一葡萄糖苷和蒙花苷质量分
数,结果见表1。
3讨论
3.1 本实验采用了超声提取法考察了水、20%乙
醇、60%乙醇、80%乙醇、95%乙醇的提取效率,结果
表明60%乙醇提取效率最高;又以60%乙醇作为提
取溶剂比较了回流提取与超声提取两种提取方法,
发现回流提取效率大大高于超声提取。在此基础上,
考察了回流提取的次数对实验结果的影响,结果表
明回流提取一次即可将药材中木犀草素一7一。一葡萄
表1木犀草素一7一D一葡萄糖苷和蒙花苷测定结果(一=3)
Table1 Determinationofluteolin。。7·-O-·glycoside
andlinarin(砧一3)
糖苷和蒙花苷基本提取完全。
3.2 木犀草素一7一。一葡萄糖苷的最大吸收波长为
348nm,蒙花苷的最大吸收波长为326nm,考虑到
木犀草素一7—0一葡萄糖苷色谱峰峰面积较小,为提高
对其的检测准确度,选择348nm作为检测波长。
3.3野菊花应用广泛,《中国药典92005年版中采
用高效液相色谱法测定蒙花苷的量[2]。本实验首次
建立了高效液相色谱同时测定野菊花中木犀草素一
7—0一葡萄糖苷和蒙花苷的分析方法,同时检测两个
主要黄酮成分,方法简便、快速、准确,重现性好,可
以为野菊花的质量控制提供依据。
3.4本实验考察了多种流动相系统,结果表明使用
乙腈一磷酸水溶液系统可对样品中待测成分得到满
意的分离,且分析时间最短。
References:
[1]ChenHF.DictionaryfPhyto—BioactiveCompounds(植物活
性成分辞典)[M].Beijing:ChinaMedico—Pharmaceutical
ScienceandTechnologyPublishingHouse,2001·
E23ChP(中国药典)[s].VolI.2005.
RP—HPLC法测定芒果皮中芒果苷
黄敏琪1,甄汉深2,熊万娜2,姜建萍2,党美琼1
(1.广西卫生管理干部学院,广西南宁530021;2.广西中医学院,广西南宁530001)
芒果系漆树科植物芒果MangiferaindicaL.,
是我国常见食药两用的中药,在广西有丰富的资
源m2|。在食品中,以果实见多,而在药用中以芒果叶
的报道较多,曾有文献报道有关芒果苷的测定方
法‘3~6|,但关于芒果皮目前尚未有关于其质量分析
方面的报道。本实验建立RP—HPLC外标法测定芒
果皮中芒果苷的方法,并对不同产地的芒果皮进行
考察,为进一步研究开发芒果、开展GAP种植提供
科学依据。
1仪器与试药
收稿日期:2005—12—05
基金项目:广西科学基金资助项目(桂科基0448044)
作者简介:黄敏琪(1958一),女,广西百色市人,壮族,副教授,研究方向为中药成分及制剂。
Tel:(0771)2853630E—mail:gxhmq888@163.corn
万方数据
RP-HPLC法同时测定野菊花中木犀草素-7-O-葡萄糖苷和蒙花

作者: 谭晓杰, 贾英, 李清, 陈晓辉, 毕开顺
作者单位: 谭晓杰,李清,陈晓辉,毕开顺(沈阳药科大学药学院,辽宁,沈阳,110016), 贾英(沈阳药科大
学中药学院,辽宁,沈阳,110016)
刊名: 中草药
英文刊名: CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年,卷(期): 2006,37(8)
被引用次数: 14次

参考文献(2条)
1.Chen H F 植物活性成分辞典 2001
2.中华人民共和国药典(一部) 2005

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