全 文 ：中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第9期2006年9月·1325·
克感利咽口服液中挥发油的超临界萃取工艺研究
丁金龙，施少斌，秦春梅，冯 冲，冼健民
(广州王老吉药业股份有限公司，广东广州 510450)
摘要：目的研究克感利咽口服液处方4味药材超临界萃取的最佳方法。方法分别以萃取率、薄荷醇萃取量作
为指标，通过正交试验、气相色谱测定、SAS统计分析，研究超I临界萃取工艺。结果试验工艺水平范围内，温度和
时间对萃取率和薄荷醇萃取量都有显著影响，压力对萃取率和薄荷醇萃取量都无显著影响；影响萃取的超临界萃
取较优工艺为温度55℃，时间150min，压力27MPa；影响薄荷醇萃取量的超f|缶界萃取较优工艺为温度45℃，时
间150min，压力22MPa。结论克感利咽口服液原料超临界萃取是可行的。
关键词：克感利咽口服液；超临界萃取；正交设计；SAS统计
中图分类号：R284．2；R286．02文献标识码：B 文章编号：0253—2670(2006)09—1325—04
Supercriticaiextr ctiontechniqueforessentialo lsinKeganliyanOralLiquor
DINGJin—long，SHIShao—bin，QINChun—mei，FENGChong，XIANJian—min
(GuangzhouWanglaojiPharmaceuticalComp nyLimited，Guangzhou510450，China)
Abstract：ObjectiveTooptimizesupercriticalextractionechniquefromfourmedicinalmaterials，
whicharethepartcomponentsintherecipeofKeganliyanOralLiquorandarextractedtra itionallyfor
essentialo ls．MethodsExtractionratioa dmentholextractionquantityweretakenasevaluatedindexes．
Supercriticalextr ctiontechniquewasresearchedwithorthogonaltests，gaschromatography，andSAS
statistic．ResultsWithinthetestlevels，temperatureandtimeshowedevidentffectonextractionratio
andmentholextractionquantity，whilepressuredidnotshowanyevidentffectonthem、Thepreferable
techniquetoextractionratioStemperature55℃，timefor120min，andextractedpr ssureat27MPa；
andthepreferabletechniquetomentholextractionquantityis emperaturet45℃，timefor120min，and
extractedpressureat22MPa．ConclusionTheptimizedsupercriticalextractionechniquefor
KeganliyanOralLiquorisfeasible．
Keywords：KeganliyanOralL quor；supercriticalextraction；orthogonaldesi n；SASstatistic
克感利咽口服液是广州王老吉药业股份有限公
司(原广州羊城药业股份有限公司)和中国中医研究
院广安门医院合作研制的中药三类新药，具有疏风
清热、解毒利咽之功效[1]，1999年正式投产上市，
2004年成为国家中药保护品种。克感利咽口服液传
统提取工艺包括挥发油的提取、黄芩的乙醇提取和
其他药材的水提取。其中，挥发油的提取是对处方中
金银花、荆芥、薄荷、防风综合进行水蒸气蒸馏，提取
分离出挥发油，从而作为克感利咽口服液配方的一
种组成，不过挥发油提取率较低。超临界萃取技术是
当今方兴未艾的一门新技术，由于其可低温萃取且
萃取时间短、产品纯度高、污染少等原因，因而近些
年来其在中药有效成分的提取、分离等方面格外引
人注目。为此，本实验拟对克感利咽口服液的传统的
挥发油蒸馏提取工艺进行改革，改用超临界萃取工
艺，并研究了压力、温度、时间等超临界萃取工艺参
数对药材萃取率、指标成分薄荷醇萃取量的影响，并
通过SAS统计分析对超临界萃取工艺进行优化。
1仪器与试剂
5L～SFE超临界C0。萃取装置(广州市轻工
研究所)；VARIAN一3900气相色谱仪(美国Varian
公司)；20B型粉碎机(广州市德章机械设备有限公
司)；Bp211一D型电子天平(德国Sartorous公司)。
金银花(河南登封)、荆芥(河北承德)、薄荷(江
苏太仓)、防风(黑龙江泰康)经本公司质量管理部药
材组陈志伟鉴定分别为金银花Lonicerajaponica
Thunb．的干燥花蕾、荆芥Schizonepetatenuifoli
Briq．的干燥梗、薄荷MenthahaplocalyzBriq．的
收稿日期：2005—11-20
基金项目：广东省关键领域重点突破项目(2003A30907)
作者简介：丁金龙(1976一)，男，江苏淮安人，广州医药集团有限公司博士后，主要从事中药学研究，已发表学术论文10多篇。
Tel：(020)86200716E—mail：alon931@tom．com
万方数据
·1326· 中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第9期2006年9月
干燥茎叶，防风Saposhnikoviadivaricata(Turcz．)
Schisehk．的干燥根；薄荷醇(中国药品生物制品检
定所，批号：728—200005)；氮气、氢气和空气为色谱
纯(广州气体厂有限公司)；甲醇(分析纯)；醋酸乙酯
(分析纯)。
2方法与结果
2．1 薄荷醇的GC法测定[2~41
2．1．1色谱条件：色谱柱：美国Phenomenex公司
ZB—WAX毛细管柱(30rrl×0．25mm×0．25肛m)；
固定液：聚乙二醇，涂布浓度为100％；柱流量：1．0
mL／rnin；载气：N225mL／min；H230mL／min，空气
300rnL／min，FID检测器；检测器温度为250℃；
进样口温度210℃，进样量2肛L，分流进样，分流比
为20：1，柱温程序升温50～235℃，初始温度保持
2min后，60℃／min升至120℃后保持5min，10
℃／min升至150℃后，再60℃／min升至235℃后
保持10min。每样重复3次测定。
2．1．2标准曲线的制备：精密称取薄荷醇对照品
20．50mg，置50mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，
制成0．41mg／mL的对照品溶液。分别精密吸取对
照品溶液l、2、4、6、8、10弘L，置10mL量瓶中，加醋
酸乙酯至刻度，摇匀，0．45弘m微孑L滤膜滤过，分别
取续滤液2肛L，注入气相色谱仪中，测定峰面积。以
质量为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标准曲线图，
计算回归方程为Y一537297X一4423．2，r=
0．9996，表明薄荷醇在0．041～o．41,ug／,uL与峰面
积呈良好的线性关系。 一
2．1．3供试品溶液的制备及测定：分别取克感利咽
超临界萃取正交试验样品，搅匀，取约1g，精密称
定，置50mL量瓶中，加醋酸乙酯至刻度，摇匀；精
密吸取lmL，置5mL量瓶中，加醋酸乙酯至刻度，
摇匀，0．45btm微孑L滤膜滤过，取续滤液2,uL，注入
气相色谱仪中，测定峰面积。根据标准曲线及稀释度
计算薄荷醇的质量分数。每样重复3次测定。
2．2萃取率和薄荷醇萃取量的计算：萃取率一萃取
物质量／药材质量×100％。 薄荷醇萃取量(mg／
g)为每克药材中萃取得薄荷醇量。根据气相色谱分
析结果，计算出每克萃取物中薄荷醇的质量，再结合
相应的萃取率，即可计算出每次实验的薄荷醇萃取
量。
2．3 试验结果的统计分析：采用统计分析软件
SAS进行统计分析。
2．4超临界萃取与测定：将金银花、荆芥、薄荷、防
风药材粉碎至约40目。经预试验，实验按3因素3
水平正交试验设计，其中萃取压力分别为17、22、27
MPa，萃取温度分别为35、45、55℃，萃取时间分别
为90、120、150rain。金银花、荆芥、薄荷和防风按质
量比72：72：43：43混合均匀，进行超临界萃取。
将混匀药粉填满萃取罐，称量罐中物料质量，然后进
行萃取。解析时保持解析压力5MPa，解析温度50
℃。每隔30min收集一次萃取物，并称量萃取物质
量。计算萃取率和薄荷醇萃取量。每个试验重复3
次。实验结果见表1。
表1超临界萃取芷交试验结果
Table1 Orthogonaltestsresultsof
supercriticalextr ction
2．5 超临界萃取工艺对萃取率和薄荷醇萃取量的
影响
2．5．1Duncan分析：经SAS统计软件Duncan分
析，不同因素对萃取率的影响见表2。可见，在实验
水平范围内，随着萃取压力的增大，萃取率呈现出逐
渐提高的趋势，但不同的压力水平对萃取率的影响
并没有显著的差异；在实验水平范围内，随着萃取温
度的升高，萃取率呈现出逐渐提高的趋势，但35℃
与45℃之间萃取率提高水平并不显著，而55℃时
萃取率则有显著的提高；随着萃取时间的延长，萃取
率也呈现出逐渐提高的趋势，萃取120rain与萃取
90rain相比，萃取率显著提高，但120min后，萃取
时间的延长对萃取率的提高并无显著影响。
经SAS统计软件Duncan分析，不同因素对薄
表2不同因素对萃取率的影响
Table2 Effectsofdifferentfac orsnextractionratio
万方数据
中草蔼ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第9期2006年9月．1327．
荷醇萃取量的影响见表3。可见，在实验水平范围
内，随着萃取压力的增大，薄荷醇萃取量先呈现出逐
渐提高的趋势，到一定程度后又呈现出下降趋势，但
不同的压力水平对薄荷醇萃取量的影响并没有显著
的差异；在实验水平范围内，随着萃取温度的升高，
薄荷醇萃取量先呈现出逐渐提高的趋势，到一定程
度后又呈现出下降趋势，但不同的萃取温度水平对
薄荷醇萃取量的影响具有一定的差异，其中，35℃
与55℃、45℃与55℃之间对薄荷醇萃取量的影响
并无显著差异，但35℃与45℃之间对薄荷醇萃取
量的影响有显著差异；随着萃取时间的延长，薄荷醇
萃取量呈现出逐渐提高的趋势；但不同的萃取时间
水平对薄荷萃取量的影响具有一定的差异，其中，萃
取120min与萃取90min相比，薄荷醇萃取量显著
提高，但120min后，萃取时间的延长对薄荷醇萃取
量的提高并无显著影响。
表3不同因素对薄荷醇萃取量的影响。
Table3 Effectsofdifferentfac orsnmenthol
extractionqua tity
影响因素 薄荷醇萃取量／(mg·g一1)Duncangrouping
压力／MPa 22 0．509 A
17 0．471 A
27 0．461 A
温度／℃45 0．525 A
55 0．479 B
35 0．444 B
时间／min 150 0．510 A
120 0．495 A
90 0．440 B
2．5．2 回归分析：在考虑交互作用的基础上采用
SAS统计软件进行萃取率的多元回归分析，结果见
表4。其中z。代表压力，z：代表温度，X。代表时间，
*代表交互作用，Model为回归模型。在压力、温度、
时间3个因素中，压力对萃取率影响不显著，温度和
时间对萃取率影响显著。该结果与前述不同因素对
萃取率的影响效果相一致。同时，压力与温度之间存
在着交互作用，而且对萃取率影响显著；而压力与时
间、温度与时间之间对萃取率的影响则不存在交互
作用。
在考虑交互作用的基础上采用SAS统计软件进
行薄荷醇萃取量的多元回归分析，结果见表5。在压
力、温度、时间3个因素中，压力对薄荷醇萃取量的影
响最不显著，温度对薄荷醇萃取量影响最显著。同时，
压力与温度之间存在着一定的交互作用，但对薄荷醇
萃取量的影响并不显著；而压力与时间、温度与时间
之间对薄荷醇萃取量的影响则不存在交互作用。
表4萃取率的多元回归分析
Table4 Multivariateregressionanalysis
forextractionratio
表5薄荷醇萃取■的多元回归分析
Table5 Multivariateregressionanalysis
formentholextractionqua tity
2．6超临界萃取工艺的优化及验证：若单纯从萃取
率的角度考虑，在实验水平范围内，超临界萃取最优
工艺为温度55℃，时间120rain，压力27MPa。若
单纯从薄荷醇萃取量的角度考虑，在实验水平范围
内，超临界萃取最优工艺为温度45℃，时间120
min，压力22MPa。若从挥发油的角度考虑，则不能
仅仅看重超临界萃取率的高低，更应注重挥发油指
标性成分萃取率的高低，同时考虑到实际生产的效
率和经济效益，因而在本实验研究条件下，确定超临
界萃取的较优工艺为温度45℃，时间120min，压
力22MPa。
根据优化工艺，在萃取压力22MPa、萃取温度
45℃、萃取时间120min条件下，保持解析压力5
MPa，解析温度50℃，每隔30min收集一次萃取
物，进行超临界萃取，实验重复3次，结果萃取率为
2．01％，薄荷醇萃取量为0．578％，该结果与前述正
交试验结果基本一致。
3讨论
超临界萃取技术在中医药方面已得到了日益广
泛的应用，但迄今大量的研发工作几乎都集中在单
味药物的提取方面，而中药复方由于其成分多而复
杂，且各成分之间可能存在协同或拮抗作用，药理作
用复杂。因此利用超临界萃取技术研究复方难度较
大，目前国内外的研究报道也很少口]。但可以预计这
万方数据
·1328· 中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第9期2006年9月
种技术将为中药应用开辟出更为广阔的新领域。
影响中药材超临界萃取的因素有很多，包括超
临界流体的流量、夹带剂、物料粒度以及萃取过程的
萃取参数如压力、温度、时间和解析压力、温度等邙]。
本实验由于实验条件的限制，仅研究了萃取压力、萃
取温度及萃取时间对克感利咽口服液中处方药材超
临界萃取效果的影响，未能进行更系统的研究。
超临界萃取是否可以替代传统的水蒸气蒸馏挥
发油的提取，其实还有很多的工作要做，包括传统挥
发油与超临界萃取物的化学组成的异同，提取产物
应用方法上的异同，特别是两者间在药效学方面的
异同等。关于这些方面的研究工作，部分正在进行之
中，部分工作已经完成，研究结果将另文阐述。
致谢：超临界萃取实验得到广州中医药大学新
药中心苏子仁老师、李耿同学和广东药学院梁润芳
同学的大力帮助。
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人参皂苷R93与羟丙基一13一环糊精包合作用的研究
林东海1，侯茂奇1，陈继永2，李金明2，刘珂1
(1．烟台大学药学院，山东烟台264005；2．山东省天然药物工程技术研究中心，山东烟台264003)
摘要：目的研究人参皂苷Rgs与羟丙基一p一环糊精(HP—pCD)在水溶液中的包合作用、包合比及包合过程中的
热力学参数变化。方法 采用相溶解度法、薄层色谱法、红外光谱法、核磁共振法测定人参皂苷Rg。与HP—pCD在
水溶液中包合作用、包合比及包合过程中热力学参数变化。结果 在水溶液中人参皂苷Rg。与HP一}cD均可形成
1：1摩尔比可溶性包合物；人参皂苷Rg。的苷元部分可能嵌入HP一8一CD分子的疏水性空穴中，两个葡萄糖裸露在
环糊精腔外。对包合物进行了鉴定和确证，表明人参皂苷Rg。与羟丙基一p环糊精已经形成包合物。人参皂苷Rgs与
HP一口一CD在水溶液中的包合过程可自发进行(△G
合温度将有利于包合作用的进行。
关键词：人参皂苷Rg。；羟丙基一p环糊精；溶解度；包合比；热力学参数
中图分类号：R283．6；R286．02文献标识码：B 文章编号：0253—2670(2006)09—1328—04
InclusionofginsenosideR93withhydroxypropyl—p—cyclodextrin
LINDong—hail，HOUMao—qil，CHENji—yon92，LIJin—min92，LIUKel
(1．SchoolofPharmacy，YantaiUniversity，Yantai264005，China；2．ShandongEngineering
andTechnologyResearchCenterforNaturalDrugs，Yantai264003，China)
Abstract：ObjectiveToinvestigatetheinclusionofginsenosideR93withydroxylpropyl一肛
cyclodextrin(HP一13-CD)inaqueoussolutions，inclusionmo arratiofhostandguestmolecules，and
changeofthermodynamicparametersduringtheinclusionprocess．MethodsThemeasurementsofthe
inclusionmechanism，inclusionmo arofthehostandguestmolecules，andcha geofthermodynamic
parameterswerecarriedoutbythefollowingmethods：phasesolubility，IR，NMR，andTLCmethods，
respectively．ResultsThresultsindicatedthattheinclusioncompoundofginsenosideR93一HP—pCDwas
formed．Thecontenta alysisoftheinclusioncompoundshowedthattheinclusionratioofginsenosideR93一
收稿日期：2005—11一08
作者简介：林东海(1954)，烟台大学药学院药剂教研室副教授，从事新药开发及药物新剂型方面研究。
Tel：(0535)6706022E—mail：Idh@ytu．edu．en
万方数据
克感利咽口服液中挥发油的超临界萃取工艺研究
作者： 丁金龙， 施少斌， 秦春梅， 冯冲， 冼健民， DING Jin-long， SHI Shao-bin， QIN
Chun-mei， FENG Chong， XIAN Jian-min
作者单位： 广州王老吉药业股份有限公司,广东,广州,510450
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2006,37(9)
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本文链接：http://d.wanfangdata.com.cn/Periodical_zcy200609018.aspx