全 文 ：·438· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第3期2005年3月
和叶片显微结构，综合鉴定加倍植株，是一种快速、
有效而且更可靠的方法。
致谢：黄涛老师在染色体根尖压片方面，张君芝
副教授在实验过程中给予了热情帮助。
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束花石斛快繁育苗技术的研究
史永锋，付开聪，张宁，沈栋侠，姚德兴
(云南金陵植物药业股份有限公司，云南思茅665000)
摘要：目的寻找束花石斛快繁育苗的有效途径。方法采用组织培养和野生自然栖息的束花石斛诱导高位腋
芽萌发等途径进行探索。结果在组织培养中，改良1／2MS培养基的原球茎形成效果最好，调整不同浓度的N、P、
K及外源激素对诱导束花石斛原球增殖、生根壮苗极为明显；外源激素对诱导束花石斛的高位腋芽萌发无明显效
果，高位芽萌发与茎株生理年龄和营养状况有关。结论 人工种植束花石斛采用现代生物技术组培育苗和腋芽繁
殖是目前快繁育苗的最有效途径，不仅育苗量大、周期短，且生长快、成活率高，两条途径对于束花石斛的产业化发
展有重要意义。
关键词：束花石斛；组织培养；快繁育苗；夕h源激素；高位芽
中图分类号：R282．21 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2005)03—0438—04
RapidpropagationndbreedingseedlingtechnequeforD ndrobiumchrysanthum
SHIYong—feng，FUKai—cong，ZHANGNing，SHENDong—xia，YAODe—xing
(YunnanJinlingBotanicalMedicineCo．，Ltd，Simao665000，China)
Keywords：DendrobiumchrysanthumWall．ex．Lindl．；tissueculture；rapidpropagationndbreed
ingseedling；exo—hormone；highbud
束花石斛DendrobiumchrysanthumWall．ex
Lindl．为兰科石斛属植物，主要分布于云南、广西、贵
州等省，是《中华人民共和国药典》收载入药的石斛中
药材之一[1]。味淡、性微寒，有滋阴养胃、清热解毒的功
效，在临床上多用于治疗慢性咽喉炎、眼科疾病、血栓
闭塞性疾病，效果十分明显。因此，成为脉络宁、通塞脉
片、石斛液光丸等著名中成药的主要原料之一，近年来
由于过量挖采，野生资源已经濒临灭绝而成为稀缺药
材[2]。为探索束花石斛快速育苗的最佳途径，笔者从
2001年起开始采用组织培养、野生自然栖息的种源诱
收稿日期：2004—06—12
导高位芽等方法进行探讨，取得了满意的效果。
1 实验材料
组织培养的各种设备、实验苗床。硝酸铵、磷酸
二氢钾、氯化钾、NAA(萘乙酸)、6一BA(6一苄基嘌
呤)、GA(赤霉素)、IBA(吲哚丁酸)等。
采用思茅市民族传统医药研究所石斛品种园中
人工栽培的束花石斛为实验材料，果实采用其成熟
果实；河沙清洗干净。
2方法与结果
2．1 组织培养
万方数据
中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第3期2005年3月·439·
2．1．1原球茎的培养：2001年2月采用无菌播种
的方法，用马铃薯提取液制作MS、1／2MS等8种培
养基，每种30瓶，外加6一BA0．2～0．5mg／L和
NAA0．5～1mg／L。结果多种培养基都能使束花石
斛种子的胚萌发形成原球茎，但不同培养基影响束
花石斛形成原球茎的时间不同。其中，改良1／2MS
60d可形成原球茎，1／2MS需要75d，最长的需要
100d以上。见表1。
2．1．2N、P、K比例的变化对束花石斛形成小苗的
影响：根据对原球茎培养基的选择比较，改良后的
1／2MS生长速度最快，因此就以该培养基为基本培
养基。本实验所用的N主要是硝酸铵，P主要是磷
酸二氢钾，K主要是氯化钾，种源为以上培养的原球
茎30瓶。结果：在组培中缺N、P、K，束花石斛组培
苗均不能正常生长，而缺N、K更严重：N、P、K的比
例以2：1：3最好，2：2：3和3：2：2次之，高N
或高K、低P也不行，高P低N、K最差。见表2。
2．1．36一BA及NAA对束花石斛组培苗生长的影
响：根据张明等研究[33认为6-BA可以产生大量的丛
生芽，曾宋君等人[43认为6一BA质量浓度超过1．0
mg／L时，对胚发育和成苗均起抑制作用，低浓度的
NAA对胚发育和成苗有促进作用。为了确定束花组培
表1 束花石斛种子对培养基的选择
Table1 SelectionofmediumforD．chrysanthumseed
条件
30d
根增长／cm 茎增长／cm 叶增加／片 根增长／cm 茎增长／cm 叶增加／J牛 根增长／cm 茎增长／cm 叶增加／片
缺N 0
缺P 0
缺K 0
Nl P：K 0．2
(I：2：3)
N’：P；K 0．1
(2：2：3)
N：P：K 0．4
(2l 1：3)
N：P：K 0．2
(3l2：2)
N：P：K 0．1
(3：2：1)
N：P：K 0．2
(2l 3：1)
万方数据
·440· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第3期2005年3月
苗在各个培养期对6-BA、NAA的最佳需要量，分别用
了每个浓度30瓶的培养基做实验。结果：在束花石斛
的培养过程中，随着6-BA质量浓度的增加束花石斛发
芽数也随着增加，但过多的增殖小苗影响组培苗的质量
(植株变得非常瘦小)，在不需要增殖的时候可以不用
mg／L时发芽、生根和壮苗效果最好。NAA小于1
mg／L时，根细而小，苗出瓶后成活率低；NAA大于2
mg／L时，根过度粗壮，甚至出现肉质根；NAA4mg／
L时，有少量愈伤组织出现；NAA正常在1～2mg／L，
质量浓度为1．5mg／L时，发芽、生根和壮苗效果最好。
或少用，6-BA质量浓度正常不超过2．0mg／L，1．5见表3(表中各组发芽数以均值计)。
表3不同质量浓度NAA和6一BA对幼苗生长的影响
Table3 Effectofdifferentco centrationsofNAAand6-BAonD．chrysanthumseedlinggrowth
外源激素
质量浓度
发芽数／个株高／。m根数／条叶片数／片 外源激素
质量浓度
发芽数／个株高／c。根数／条叶片数／片
(mg·LT--1／ ·) ／(mg·L一1)
6一BA CK 1，8 1．3 1．2 1．8 NAA CK 6．9 1．79 9．7 3．71
0．1 2．1 1．17 4．2 1．2 0．1 6．47 1．97 16．9 4．12
0．5 2．8 1．2 1．2 1．7 0．5 8．1 1．24 19．38 1．91
1 2．91 1．2 1．45 1．1 1 11．00 2 21．33 1．65
1．5 2．66 1．08 4．00 1．8 1．5 2．2 2．4 15．00 4．4
2 3．00 1．37 3．4 1．1 2 3．00 1．38 9．5 4．5
2．5 2．83 1．05 2．6 1．65 2．5 3．8 3．5 12 4．8
3 3．2 1．3 1．4 1．14 3 6．3 2．9 18．4 4．8
4 3．4 1．63 3．4 3．18 3．5 9．33 1．02 21．33 1．07
4．5 5．2 1．74 5．6 2．5 4 5．6 2．04 12．6 3．79
2．2高位腋芽培养实验：2002年5月6日一2003
年1月6日，利用束花石斛有隐腋芽存在，一定条件
下可以萌发形成高位芽，并生长成根、茎、叶齐全的
植株的特性，从各角度做了以下实验，探索促进高位
芽萌发的基本方法。
2．2．1根据束花石斛合轴生长的特性，分别选取
1～6年生茎株各10株(不剪段)，按年龄分为6组，
置于沙床上，室温、60％～90％空气湿度，经各种处
理后，培养120d。结果在同等条件下3年生的茎株
发芽效果最好；4年生的次之；2年生、5年生和6年
生的最差。见表4。
2．2．2将3年生茎株每3个节剪为一段，10段为
一组置于沙床上，室温、60％～90％空气湿度，培养
120d。结果剪段后发芽数大大降低，外源激素处理
后效果并不明显。见表4。
2．2．3将野生自然栖息的种苗整簇(平均7根茎株
为1簇)置于沙床上，室温、60％～90％空气湿度，培
养120d，结果整丛平均发芽数低于3年生植株高位
芽发芽数，外源激素对野生种源的侧芽萌发无明显
效果。见表4。
表4不同年龄完整茎株、剪段培养和整簇培养对高位芽产生的影响
Table4 Effectofdifferentageofcompletestem，stemsegment，andcompleteplantonhighbudformation
CK组
NAA0．1
6～BA0．5
GA 0．25
IBA0．1
3讨论
3．1 本实验从束花石斛组培育苗和野生自然栖息
的植株高位芽培殖两条途径进行探索，结果在组织
培养中，调整不同的N、P、K及外源激素浓度对诱
导束花石斛原球茎增殖、生根壮苗效果极为明显；外
源激素对诱导束花石斛的高位芽萌发无明显效果。
3．2组培快繁是束花石斛快速育苗的重要途径，具
有速度快，数量大的优点，但组培成本高，技术复杂，
组培苗移栽后生长周期长，推广难度大。实验证明，
当外源激素6-BA、NAA不超过2．0mg／L时，对束
花石斛的胚发育和成苗有促进作用，质量浓度为
1．5mg／L时，对发芽、生根和壮苗效果最佳，激素质
量浓度比有关文献的报道略高，可能是束花组培的
特点；N、P、K为束花石斛形成小苗不可缺少的条
万方数据
中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第3期2005年3月·441·
件，比例为2：1：3时效果最好。
3．3利用束花石斛植株上具有隐腋芽的特性，进行
了高位芽培殖实验，该法操作简单，并且大大缩短了
育苗周期，降低了成本。实验结果发现在同等条件下
3年生的枝条发芽效果最好；4年生的次之；2年生、
5年生和6年生的最差。而剪段后发芽率比例比整
丛培养更差。
3．4 组培育苗和腋芽繁殖都是束花石斛快繁育苗
的有效途径，各有优缺点，本实验只做了初步的探
索，大量的工作还有待进一步完善。根据实际情况，
合理应用组培和高位芽培殖两条途径快繁育苗，对
于束花石斛人工产业化发展有重要意义。
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HPLC法测定金荞麦中(一)一表儿茶素含量
何美珊，钱炳辉，王兆龙，顾理群，王志勇，闫玉梅，王凤如
(南通精华制药有限公司，江苏南通 226005)
金荞麦为蓼科植物金荞麦Fagopyrumdibotrys
(D．Don)Hara的干燥根茎。其有效成分为原花色
素类缩合鞣质及其前体的混合物[1]，包括(一)一表儿
茶素[(一)-epicatechin]及其衍生物的单体、二聚体
和多聚体。金荞麦收载于《中华人民共和国药典》
2000年版一部[2]，其质量标准中无含量测定项。文
献报道的金荞麦药材含量测定方法采用比色法[33和
薄层扫描法r4]，本实验采用HPLC法测定金荞麦中
(一)一表儿茶素的含量。
1仪器、试药与样品
Waters600E高效液相色谱仪、2487双波长紫
外检测器、Millennium32色谱管理系统，Variancary
50conc紫外一可见分光光度计，sartoriusBP211D
电子天平，pHS一25型pH计(上海雷磁仪器厂)。聚
酰胺30～60目，批号F20000817，中国医药(集团)
上海化学试剂公司。乙腈为色谱纯，乙醇、甲醇、磷酸
均为分析纯，水为去离子双蒸水。
(一)一表儿茶素对照品：批号878—200001，中国
药品生物制品检定所提供，高效液相色谱归一化法
测定其纯度为99．63％。
金荞麦药材由江苏省药品检验所和南通精华制
药有限公司提供，经江苏省药品检验所刘舞霞主任
药师鉴定为蓼科植物金荞麦F．dibotrys(D．Don)
Hara的根茎。
2方法与结果
2．1 色谱条件：SymmetryC18色谱柱(150mm×
3．9mm，5Fm)；流动相：水(用磷酸调pH值至
3．00±0．02)一乙腈(92：8)；体积流量：0．8mE／
min。检测波长280nm；柱温35℃；进样量10弘L。
在此条件下金荞麦供试品溶液的(一)一表儿茶素峰
与相邻峰能达到基线分离，其保留时间为15．35
min，色谱柱理论板数按(一)一表儿茶素峰计算为
6109，对照品与供试品的色谱图见图1。
B
A
0．00 5．130 1o_00 15．∞20．∞
时间t／min
图1 (一)一表儿茶素(A)与金荞麦(B)的HPLC图谱
Fig．1HPLCchromatogramof(一)-epicatechin(A)
andF．dibotrysrhizome(B)
2．2测定波长的选择：(一)一表儿茶素对照品的乙
腈一水(1：9)溶液，经Variancary50conc紫外一可
见分光光度计在190～400nm进行光谱扫描，280
nm左右峰形较好，最大吸收波长为280．0nm。
收稿日期：2004—05—28
作者简介：何美珊(1959一)，女，江苏如皋人，高级工程师，学士，主要从事中药研究及开发工作。
Tel：(0513)5609133Fax：(0513)5609115E—mail：hemsl36@sina．eom
万方数据
束花石斛快繁育苗技术的研究
作者： 史永锋， 付开聪， 张宁， 沈栋侠， 姚德兴， SHI Yong-feng， FU Kai-cong， ZHANG
Ning， SHEN Dong-xia， YAO De-xing
作者单位： 云南金陵植物药业股份有限公司,云南,思茅,665000
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2005,36(3)
被引用次数： 1次

参考文献(4条)
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引证文献(1条)
1.唐德英.李学兰.段立胜 流苏石斛扦插繁殖试验[期刊论文]-中药材 2009(1)


本文链接：http://d.wanfangdata.com.cn/Periodical_zcy200503045.aspx