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Yield and quality of Coptis chinensis from different varieties

不同品系黄连产量和质量的研究



全 文 :·1866· 中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第12期2006年12月
不同品系黄连产量和质量的研究
朱强1,王有为1’,齐海涛1,王庆1
(1.中国科学院武汉植物园,湖北武汉430074;2.武汉大学药学院,湖北武汉430072)
摘 要:目的 考察和比较湖北黄连GAP基地选育的3个不同品系黄连(大花叶、无光叶、小花叶)的产量和质
量。方法采用田间随机区组设计,连续3年采集3个品系黄连根茎样品,分别以烘干法测定其质量,用紫外分光
光度法和高压液相色谱法分别测定其总生物碱和盐酸小檗碱的量。结果在考察的3个品系药材样本中,各品系
三年生黄连产量没有显著差异(P>0.05),在四年生和五年生黄连中,大花叶和无光叶品系产量均明显高于小花
叶品系(P<0.05);在三年生、四年生、五年生黄连中,各品系总生物碱和盐酸小檗碱的量无明显差异(尸>o.05)。
结论大花叶和无光叶品系的黄连产量高、质量合格,可作为黄连规范化种植的种子基原。
关键词:黄连;产量;总生物碱;盐酸小檗碱
中图分类号:R287..2 文献标识码:A 文章编号:0253—2670(2006)12—1866—04
YieldandqualityofCoptischinensisfromdifferentvarieties
ZHUQian91,WANGYou—weih2,QIHai—ta01,WANGQin91
(1.WuhanBotanicalGarden,ChineseAcademyofSciences,Wuhan430074,China;
2.CollegeofPharmacy,WuhanUniversity,Wuhan430072,China)
Abstract:ObjectiveTos udyandcomparethyieldandqualityofCoptischinensisfromthree
varieties(Dahuaye,Wuguangye,andXiaohuaye)thatbredinGAPcultivationhabitatinFubaoshan,
HubeiProvince.MethodsThreesamplesw recollectedev ryyearinthefield.whichwerestochastically
designedinpastthree—yearsandweightedbyroastingfordryness.Theweightandthecontentsof otal
alkaloidsandberberineweredeterminedbvUVandHPLC。respectively.ResultsTherwasno
significantdifferenceamongthethreevarietiesontheyieldofthree—year—oldsamples(P>O.05),butthe
yieldsoffour——year——oldanfive——year——oldDahuayendWuguangyesamplesw resignificantlyhigherthan
thatofXiaohuayes mple(P<0.05),therewerenosignificantdifferencesamongthethreevarietiesonthe
contentsoftotalalkaloidsandberberine(P>0.05).ConclusionThevarietiesofDahuayend
Wuguangyearexcellentinhigheryieldandbetterquality,andbothofthemcanbeusedasoriginseedsin
theGAPplantationofC.chinensis.
Keywords:C01)tischinensisFranch.;yield;totalalkaloids;berberine
黄连CoptischinensisFranch.为毛茛科黄连属
植物,又名味连,为多年生常绿草本植物,以根茎入
药,始载于东汉《神农本草经》并被列为上品口],具有
泻火、解毒、清热燥湿等功效。黄连的化学成分以季
胺型生物碱类物质为主,如盐酸小檗碱、巴马汀、药
根碱、黄连碱,其中盐酸小檗碱是其主要成分[2],现
代药理学研究证明其有抗菌、抗肿瘤、保护肝脏等作
用[3~6]。长期以来,黄连在生产上以种子繁殖和分兜
繁殖为主,一般由药农自行采集留种或者在采挖时
剪取分兜苗,没有进行规范的人工选种,导致后代群
体良莠混杂,植株性状参差不齐,出现多种变异类
型[7]。利川I市福宝山黄连GAP基地根据长期经验,
从多种变异类型中选育了3个品系(大花叶、小花
叶、无光叶)拟作为黄连规范化种植的种子基原。笔
者在福宝山黄连GAP基地采用随机区组设计进行
小区试验,对3个品系黄连三年生、四年生、五年生
药材的产量、总生物碱及盐酸小檗碱的量进行测定
分析,希望最终确定黄连种质,为黄连GAP种植基
地提供优良种子基原。
1仪器与材料
1.1 仪器与试剂:DZF一真空干燥箱(上海精密试
验设备有限公司),722紫外一可见分光光度计(上海
市第三分析仪器厂),日本岛津LC—loA高效液相
色谱仪,SPD一10Avp紫外检测器,浙大智达N2000
收稿日期:2006—02—26
基金项目:湖北省“十五”重大科技攻关项目(2001AA304A)
作者简介:朱强(1980),男,陕西宝鸡,硕士,研究方向药用植物资源学。Email:zql037@yahoo.corn.cn
*通讯作者王有为Tel:(027)87510392E—mail:wyw@wbgcas.cn
万方数据
中草药 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第12期2006年12月·1867·
色谱工作站,盐酸小檗碱(中国药品生物制品检定
所,批号:0713—9906,110713—200208),甲醇、乙腈为
色谱醇,其余试剂均为分析醇。
1.2 材料:样品采自湖北省利川市福宝山黄连
GAP基地试验小区,经中国科学院武汉植物园李建
强研究员鉴定为毛茛科黄连属植物黄连Coptis
chinensisFranch.。标本保存于中国科学院武汉植物
园植物标本馆。
2方法与结果
2.1产量测定
2.1.1样品采集:2003--2005年每年10下旬在利
川I市福宝山黄连GAP基地试验小区采集黄连样
品。每个重复随机采样15株,去净泥沙,于100。C
下烘5min,将根茎取下,除去须根。
2.1.2质量的称定:将黄连样品根茎置于80℃下
烘至恒重,分别称质量并计算平均值,结果见表l
(各重复中的样品质量均为15株的平均值)。方差
分析结果见表以
表1不同品系黄连单株质量
Table1 SingleplantweightofC·chinens妇
fromvariousvarieties
品 系
生长
年限
三年
四年
五年
三年
四年
五年
三年
四年
五年
单株质量/g
重复I 重复Ⅱ 重复Ⅲ
平均值/
大花叶黄连
无光叶黄连
小花叶黄连
表2不同品系黄连单株质量方差分析
Table2 Varianceanalysisofsingleplantweight
ofC.chinensisfromvariousvarieties
生长年限 平方和 自由度 均方 F值 显著性P
三年生 组间0.8152 0.407 2.8060.138
组内0.8716 0.145
总体 1.686 8
四年生 组间 6.035 2 3.01820.4500.002
组内0.8856 0.148
总体 6.921 8
五年生 组间 10.223 2 5.11236.2010.000
组内0.8476 0.141
总体 11.070 8
2.2总生物碱测定
2.2.1 对照品溶液的制备:精密称取盐酸小檗碱
9.9mg,置于25mL量瓶中,用甲醇溶解并定容至
刻度,摇匀,备用。
2.2.2 标准曲线的制作:吸取对照品溶液0.5、
1.0、1.5、2.0、2.5mL分别置于100mL量瓶中,以
0.05mol/LH2SO。水溶液定容至刻度。在345am
处测定吸光度,以吸光度(y)为纵坐标,质量浓度
(X)为横坐标绘制标准曲线,得回归方程为Y一
0.1521X+0.0137,r=0.9984,线性范围为
1.98~9.9ttg/mL。

2.2.3供试品溶液的制备:精密称取干燥黄连粉末
0.5g,置于圆底烧瓶中,加入50%甲醇40mL,于
水浴锅中回流2h,滤过;重复提取2次,合并滤液
并置于100mL量瓶中,以50%甲醇定容至刻度,
吸取此滤液1mL,置于100mL量瓶中,以0.05
mol/I。H。SO。水溶液定容至刻度,待测。
2.2.4稳定性试验:取供试品溶液,在0、0.5、1、2、
4、8、12h测定吸光度,计算RSD为1.6%(扎一5)。
表明供试品溶液在12h内稳定。
2.2.5精密度试验:取一定质量浓度的盐酸小檗碱
对照品溶液测吸光度,计算RSD为0.9%(咒=5)。
2.2.6重现性试验:取同一供试样品5份,制备供
试品,测定总生物碱的质量分数,计算RSD为
2.1%,表明本方法具有较好的重现性。
2.2.7加样回收率试验:取已测定的样品5份,每
份约0.25g,精密加入盐酸小檗碱对照品适量,按
2.2.3项制备供试品溶液,测定,平均回收率为
95.61%,RSD为2.10%。
2.2.8样品的测定:取各品系黄连样品干燥粉末约
0.5g,精密称定,按2.3项下方法制备供试品溶液,
以分光光度法测定总生物碱的量。结果见表3。方差
分析见表4。
2.3盐酸小檗碱测定
2.3.1色谱条件:日本岛津SB—C。。色谱柱(150
mm×4.6mm,5弘m);流动相:乙腈一0.05mol/L
磷酸二氢钾一三乙胺(30:70:2,磷酸调pH3.5);
体积流量:1.0mL/min;检测波长345nm;灵敏度
0.i000Aufs;柱温为室温;进样量:10弘L。
2.3.2对照品的制备:精密称取盐酸小檗碱对照品
10.8mg,置于25mL量瓶中,加甲醇溶解并定容至
刻度,混匀,备用。
2.3.3标准曲线的制备:吸取对照品溶液0.5、
1.0、1.5、2.0、3.0、4.0、5.0mI。分别置于100mL
量瓶中,以盐酸一甲醇(1:100)定容至刻度。将配制
的不同质量浓度的对照品溶液进样10pL,以峰面
积(y)为纵坐标,质量浓度(X)为横坐标,绘制标
准曲线,回归方程为Y一4808X一7505.8,r一
;一弘n弘%曲跗弧踮
一2
4
5
2
3
5
1
2
3
万方数据
·1868· 中草药ChineseTratliuonalandHerbalDrugs第37卷第12期2006年12月
表3不同品系黄连总生物碱的量(万一3)
Table3 Total像aloidsnC.e脯nensis
fromvariousvarieties(辟一3)
生长 总生物碱/%
品 系
年限—i五———1氧i了——。三夏1
平均值/
g
大花叶黄连
无光叶黄连
小花叶黄连
三年 16.54
四年 17.45
五年 18.50
三年 16.51
四年 17.20
五年 18.60
三年 15.73
四年 16.75
五年 17.30
15.46
17.35
18.70
17.11
16.95
18.25
14.52
17.30
17.70
表4不同品系黄连总生物碱量的方差分析
Table4 Variancea alysisoftotalkaloids
inC.ehinensisfromvariousvarieties
年限 平方和 自由度 均方 j’值 显著性P
三年生 组间 3.394 2 1.697 2.424 0.169
组内 4.200 6 0.700
总体 7.594 8
四年生 组间0.285 2 0.142 4.071 0.076
组内0.210 6 0.035
总体0.495 8
五年生 组间0.184 2 0.092 0.858 0.470
组内0.643 6 1.100
璺签 !:!!! 1
0.9995,线性范围为15.9~174.1弘g/mL。
2.3.4供试品溶液的制备:取黄连样品粉末约50
mg置于100mL量瓶中,加盐酸一甲醇(1:100)
50mL,于60℃水浴锅中温浸30min,然后超声
30min,以盐酸一甲醇(1:100)定容至刻度,摇匀,
以微孔滤膜滤过,取滤液作为供试品溶液。
2.3.5稳定性试验:取供试品溶液,在0、0.5、1、2、
4、8、12h分别进样,记录峰面积,计算RSD为
1.9%(咒一5),表明供试品溶液在12h内稳定。
2.3.6精密度试验:取一定浓度的盐酸小檗碱对照
品溶液,吸取10弘L进样,记录峰面积,计算RSD
为2.0%(以=6)。
2.3.7重现性试验:取同一供试样品5份,精密称
定,制备供试品,进样,测定盐酸小檗碱的量,计算
RSD为1.3%。
2.3.8回收率试验:取已测定的样品5份,每份约
50mg。分别精密加入盐酸小檗碱对照品适量,按
2.3.4项制备供试品,进样测定,结果平均回收率为
97.22%,RSD为0.65%。
2.3.9样品测定:取不同品系黄连样品干燥粉末
50mg,精密称定,按3.3项下方法制备供试品溶
液,进样测定。结果见表5,方差分析见表6。
表5不同品系黄连盐酸小檗碱的■(弹=3)
Table5 BerberineinC. 胍nensisfrom
variousvarifies(一一3)
表6不同品系黄连盐酸小檗碱■的方差分析
Table6 Variancea alysisotberberineinC.chinensis
fromvariousvarieties
年限 平方和自由度 均方 j’值 显著性P
三年生 组间 1.075 2 o.537 2.718o.144
组内 1.187 6 o.198
总体 2.262 8
四年生 组间 o.527 2 o.264 4.061 o.077
组内 o.390 6 o.065
总体 o.917 8
五年生 组问 o.553 z o.2772.917 o.130
组内 o.569 6 o.095
璺堡 !:!!! 1
3讨论
3.1从表1、2可以看出,三年生不同品系黄连在产
量上没有显著差异(P>O.05)。但是四年和五年生
大花叶和无光叶品系与相同年份的小花叶品系在产
量上存在极显著差异(P和无光叶品系的产量没有显著差异(P>0.05)。结
果显示大花叶和无光叶品系从第四年起根茎生长明
显快于小花叶品系。
3.2表3、4表明各品系三年生、四年生和五年生样
品黄连总生物碱的量没有显著差异(P>0.05)。表
5、6显示各品系三年生、四年生和五年生样品盐酸
小檗碱的量也没有显著差异(P>O.05)。由此可见,
大花叶、无光叶品系与小花叶品系之间的差别主要
体现在产量上,而在质量上并无多大差异。
3.3 经历年测产情况得知,五年生黄连产量为
3750~4500kg/hm2,以9×105株/hm2计,折合单
株药材质量为4.16~5g。有报道说五年生黄连的
单株质量可达5.2gE8|。而笔者测得大花叶和无光叶
品系五年生单株平均干质量分别为5.71和5.49
g,表明这两个品系确为高产品系。从质量上看,大
花叶和无光叶品系各年份样品黄连总生物碱的量在
14.48%~18.70%,盐酸小檗碱的量在7.22%~
万方数据
中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第12期2006年12月·1869·
9.12%,均达到《中国药典))(2005年版一部)规定的
标准,与黄小平和钟国跃最近报道的黄连总生物碱
和盐酸小檗碱的量测定结果相近[9’1⋯,表明湖北利
川市福宝山黄连GAP基地选育的大花叶和无光叶
品系质量较好,高产性状突出,适合作为黄连种子基
原用于GAP栽培。建议黄连产区在实施规范化种
植的过程中将大花叶和无光叶品系作为优良种子予
以推广。
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金银花与山银花原植物叶表皮特征的}匕较研究
耿世磊1,赵晟1,姚飞平1,徐鸿华2
(1.华南农业大学生命科学学院药用植物研究中心,广东广州 510642;2.广州中医药大学中药学院,广东广州510405)
摘要:目的探求一种准确、简便、快速鉴定金银花药材和山银花药材植物来源的方法。方法利用光学显微镜
和扫描电子显微镜观察比较忍冬属5种植物(忍冬、华南忍冬、红腺忍冬、水忍冬、大花忍冬)的叶表皮特征。结果
在光学显微镜和扫描电镜下该属不同植物的叶表皮特征存在显著差异。结论 叶表皮特征可有效地用于金银花和
山银花药材原植物的物种鉴别,并据此分别列出了光学显微镜和扫描电镜下忍冬属5种植物叶表皮特征的分种检
索表。
关键词:金银花;山银花;叶表皮特征;忍冬属;扫描电镜
中图分类号:R282.7一 文献标识码:A 文章编号:0253—2670(2006)12—1869—04
ComparisonofleafepidermischaractersonFlosLoniceraeandLoniceraconfusa
GENGShi—lei1,ZHAOShen91,YAOFei—pin91,XUHong—hua2
(1.ResearchCenterofMedicinalPl nt,CollegeofLifSciences,SouthChinaAgricutureUniv rsity,
Guangzhou510642,China;2.CollegeofChineseMat riaMedica,GuangzhouU iversity
ofTraditionalChineseMedicine,Guangzhou510405,China)
Abstract:ObjectiveToexploreanapproachtoidentifyingtheplantsourceofFlosLoniceraeand
Loniceraconfusarapidly,precisely,andefficie tly.MethodsUsingLMandSEMtoobserveandcompare
thecharactersofleafepidermisofthefivespeciesofLonicerL.includingL.japonica,L.confuse,L.
hypoglauca,L.dasystyla,andL.macr ntha.ResultsThereareobviousdifferencesi leafepidermis
amongthefivespeciesofLoniceraL.underLMandSEM.ConclusionThecharacteristicsoflear
epidermiscanbeusedtoidentifytheplantsourceofFlosLoniceraeandL.confusa.Accordingtotheir
characteristicsunderLMandSEM.theretrievalkeystothefivespeciesofLoniceraL.haveb en
compiled.
Keywords:FZ∞Lonicerae;LoniceraeconfusaDC;l afpidermischaracters;Lonicerae.;SEM
收稿日期:2006—02—19
基金项目:广东省自然科学基金项目(5006633);广东省中医药局科研项目(1040102);华南农业大学校长基金科研项目(K03156)
作者简介:耿世磊(1965一),男,博士,副教授,主要从事中药资源开发与利用方向的研究。
万方数据
不同品系黄连产量和质量的研究
作者: 朱强, 王有为, 齐海涛, 王庆, ZHU Qiang, WANG You-wei, QI Hai-tao, WANG
Qing
作者单位: 朱强,王有为,王庆,ZHU Qiang,WANG You-wei,WANG Qing(中国科学院,武汉植物园,湖北,武
汉,430074), 齐海涛,QI Hai-tao(中国科学院,武汉植物园,湖北,武汉,430074;武汉大学药
学院,湖北,武汉,430072)
刊名: 中草药
英文刊名: CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年,卷(期): 2006,37(12)
被引用次数: 4次

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引证文献(4条)
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2.曾烨.薛翔楠.司海倩.卢超.王学奎.孙先忠 不同品系黄连叶片光强和CO2响应曲线的研究[期刊论文]-湖南农业科
学 2012(19)
3.高玉琼.刘文炜.李凤.刘建华.霍昕.杨迺嘉 小儿泻痢片质量标准[期刊论文]-中国实验方剂学杂志 2011(20)
4.耿志鹏.郑海杰.张艺.罗维早.瞿显友 RP-HPLC测定不同产地黄连中6种生物碱的含量[期刊论文]-中国中药杂志
2010(19)


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