全 文 ：中革菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第4期2006年4月·497·
黑乳海参中两个新的三萜皂苷
巫军“2，易扬华“，邹峥嵘3，昊厚铭4，汤海峰1
(1．第二军医大学药学院海洋药物研究中心，上海200433l2．宁波医药技术研究所，浙江宁波315201；3．江西师范大学
生命科学院，江西南昌 330022}4．中国科学院上海有机化学研究所生命有机化学国家重点实验室，上海200032)
摘要：目的从黑乳海参中分离活性皂苷类成分。方法从黑乳海参体内得到的总皂苷溶于吡啶一二氧六环(1；
1)的混合液中，120C加热2，5h，应用多种色谱技术对回流产物进行分离纯化，分离得到2个三萜皂苷类化台物。
结果应用现代光谱技术(尤其是2D—NMR和ESI—MS技术)和化学方法鉴定其结构；3一。一[3”0甲基一pD毗喃
葡萄糖(1—3)一p_D一吡喃奎诺糖(1—4)—pD吡哺奎诺糖(1—2)一pD一吡喃木糖]一海参烷一9一烯一3B，12a．17a，25}四醇
(I)，命名为黑乳海参皂苷la；3—D[38一。甲基一日·D一吡喃葡萄糖(1—3)-9一D一毗哺葡萄糖(1斗4)一pD一吡喃奎诺糖
(1—2)一pD一吡喃术糖]一海参烷一22，25一环氧9一烯一3p，12a，17a一三醇(I)，命名为黑乳海参皂苷2a。结论2个化合
物均为新化台物。
关键词：黑乳海参；三萜皂苷；黑乳海参皂苷la；黑乳海参皂苷2a
中图分类号：R284．1 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2006)04一049704
TwolleWtriterpeneglycosidesfromseacucumberHolothurianob lis
WUJun“2，YIang—hual，ZOUZheng—ron93，WUHou—ruin94，TANGHai—feng‘
(1．ResearchCenterfoMarineDrugs，SchoolofPharmacy，SecondMilitaryMe icalUniversitytShanghai200433一China；
2．NingboMedicalResearchInstitute，Ningbo315201，China；3．SchoolofLifeSciences．JiangxiNormalUn versity，
Nangchang330022，China；4．StateKeyLaboratoryofBioorganicandNaturalProductsChemistry，Shanghai
InstituteofOrganicChemistry，ChineseAcad myofSciences-Shanghai200032．China)
Abstract：ObjectiveTri erpeneglycosideswereexpectedtobeisolatedfromtheseacucumber
Hotothurlano&Tis．MethodsT ecrudesaponinsofseacucumberwered sulfatedwithpyridine—dioxane
(1：1)，thedesulfatedpro uctswereeparatedbymulti—chromatographytOaffordtwocompounds．Re—
suitsOnthebasisofchemicalmethodsandspectralevidences，especially2DNMRndESI—MStechnolo—
gies，thesetwocompoundswereidentifiedas3-O一[3”O—methyl—pD—glucopyranosyl(1—3)一}D—
quinovopyran08yl(1—4)一肛D-quinovopyranosyl(1—2)一pD—xylopyranosyl]+holosta一9一ene一36，l2a，17d，
z56一tetraol(I)，namedasnobilisidela；3-0-[3”一O-methyl—pD-glucopyranosyl(1—3)一}D—xylopyra—
nosyl(1—，4)一pD—quinovopyranosyl(1—’2)-4’一O-sulfate一}D—xylopyranosyl3-holosta一22，25一epoxy9-ene一
3B，12a，17a，2513triol(Ⅱ)，namedasnobiliside2a．ConclusionTwcompoundsarenewtriterpenegly—
cosides．
Keywords：HolothurianobilisSelenka；triterpeneglycosides；nobilisidela；nob liside2a
黑乳海参HolothurianobilisSelenka属棘皮动
物门(Echinodermata)海参纲(Holothuroidea)檐手
目(Aspidochirotida)海参科(Holothuriidae)动物。体
形较大，一般长为300mm，宽约60mm。体宽而厚，
两端钝圆。口小，偏于腹面，具触手20个。肛门稍偏
于背面，周围有5个钙化疣，各疣周围有一圈小疣。背
面有分散的小疣足，两侧各有几个大的乳房状突起。
该物种在我国从福建东山到海南岛的海域均有广泛
分布；东非、马尔代夫群岛、印度尼西亚、日本琉球群
岛和澳大利亚北部海域也有分布。资源丰富，有可能
作为药物开发的有效资源9]。有研究机构对该种海参
体内多糖和糖蛋白的分离纯化、化学特征和药理活性
进行了研究，但有关该种海参体内小分子化学成分的
研究较少报道。本课题组采用稻瘟霉模型生物活性和
警鍪是曹：罂霉薯襄銎展攻关项目。。。Dz，。，。，，
尊翥景器挚毒雹晕’博士研究生，主管药师。 Tel“057们86695983F““05“)866“308Bm出1：wu919067@”6com
万方数据
中革蒋ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第4期2006年4月
体外细胞毒活性追踪方法，对其体内的三萜皂苷类成
分进行了系统研究[2]。本研究报道从黑乳海参中得到
的2个新的三萜皂苷类化合物。
l材料和方法
1．1仪器和试剂：XT5显微熔点仪(温度未校正)，
北京市科仪电光仪器厂；BrukerVector22型红外
光谱仪；VarianI ova一400核磁共振仪；Qualrro质
谱仪，Micromass公司；SephadexI。H20为Phar—
macia公司产品；色谱用硅胶和HSGF。；。硅胶预制
板，烟台芝罘黄务硅胶开发试验厂；HPI。C：Aglient
1100Seties，RID检测器Aglie．nt公司；反相柱为
Zorbax300SB—C18，250mm×9．4miD．Zorbax公
司；洗脱剂为色谱纯甲醇；其余试剂均为分析纯。
1．2实验材料：黑乳海参于2003年5月采自福建
东山，经厦门国家海洋三所易瑞灶研究员鉴定，标本
现存放于第二军医大学药学院海洋药物研究中心，
样品编号HYsC2003—02。
1．3提取和分离：新鲜黑乳海参材料洗净、切碎后，
用85％乙醇冷浸提取，回收乙醇得流浸膏。将流浸
膏均匀分散在水中，用二氯甲烷萃取，待二氯甲烷萃
取液颜色变得极浅后，再用正丁醇萃取。回收正丁醇
即可得到黑乳海参粗皂苷。取粗皂苷60mg，溶于
120ml。由吡啶一二氧六环等体积混合的溶剂中，120
c加热2．5h。反应物冷却后，回收溶剂，所得浸膏
用硅胶低压柱色谱处理，氯仿甲醇水(7．5：2．5：
l，下层)洗脱，得到的主成分再进行高效液相柱色谱
纯化，色谱柱为ZobaxSBC18型ODS反相柱，洗
脱剂为80％甲醇，体积流量为1．5mL／min，得到2
个化台物，应用现代光谱技术和化学方法鉴定以上
2个化合物的结构。
2结构鉴定
这两个化合物均为新的三萜皂苷类化合物，分
别命名为：黑乳海参皂苷1a和黑乳海参皂苷2a。结
构式见图1。
化合物I：C⋯H⋯O，无色结晶性粉末，nap
206～207C(MeOH—H20)，[d]口一25．6。(c一0．2，
Me0It)，LiebermannBurehard反应呈阳性。由电喷
雾一正离子质谱ESI—MS+提供的准分子离子峰m／z
1 127[M+Na]+和电喷雾一负离子质谱ESI—MS提
供的准分子离子峰m止1103[MH]，推测化合
物I的相对分子质量为l104。结合1HNMR，
”C—NMR谱，确定该化合物的分子式C；。H。。0。
根据化合物I的1H—NMR，”C—NMR和HMQC
谱，对化合物各个碳原子及其所连接的质子的化学
图1化台物1和Ⅱ的化掌结构
Fig．1Structuresofcompoundsl andⅡ
位移进行归属(表1)。结果表明：化合物I为三萜皂
苷类成分，与化合物黑乳海参皂苷A的结构极为相
似⋯，只是组成皂f}=糖链的个别单糖化学位移值有
明显不同。化台物I中与苷元直接相加的木糖C4
7
(76．4，69．9)化学位移向高场移动d6．5，而C3‘
(75．7，77，9)和C5‘(62．3，64．4)分别向低场移动d
2．2和d2．1。比较黑乳海参皂苷A和化合物1的
ESI—MS数据发现，化合物I的相对分子质量为
1 104，比黑乳海参皂苷A少102。综合以上数据推
测，I为黑乳海参皂苷A的脱硫衍生物。
将化合物I用三氟乙酸水解后，衍生得到糖腈乙
酸酯衍生物，采用GC—MS分析，经与标准糖的糖腈
乙酸酯衍生物对照，表明化合物I中存在D一木糖，D一
奎诺糖，3一甲氧基一D一葡萄糖，比例为1：2；1。
ESI—MS中的碎片离子峰ⅢA1 103[M—
H】一、927lMH一3一OMeglcI、781lMH
3--OMeglcqui]，635EM—H一3一OMe—
glc—quiqui]、493[M—H一3一OMe—glc—
xyl--quixyl]，进一步表明化合物I中糖链的组
成，同时也证实了其单糖连接顺序与化合物黑乳海
参皂苷A完全一致。
综上所述，I的结构为3o[3“一O一甲基一口～D一吡
喃葡萄糖(1—3)口D吡喃奎诺糖(1—4)一t3-D一吡喃
奎诺糖(1—2)8D一吡喃木糖]海参烷9烯一3口，
12a，17n，25口四醇，现有资料表明化合物i尚未有
公开报道，为一新化合物，命名为黑乳海参皂苷la。
化合物Ⅱ：c。。H⋯O；，无色结晶性粉末，mp
l94～195C(MeOH—H。O)[a]口22．1。(C=0．2，
万方数据
中革葛ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第4期2006年4月·499·
表1 黑乳海参皂苷la的昔元和糖部分的”c—NMR}g]1H-NMR的化学位移
Table13C-NMRand1H—NMRChemicalshiftsforaglyeonandsugarmoietiesofnobilisdela
赴 dH(m，JinHz)
36．4 1．34(1H，m，d)，
l 76(1H，m，0)
27．1 1 80(1H，m．n)．
糖
——
Xyl
位置 赴 “(m，JinHz)
1055 4．67(1H．d．7．6)
842 3．96(1H，m)
779 4．2l(1H．m)
69．g 4 89(1H，m)
623 3．?2(1H，m，a)，
4．32(1H，m，B)
105，6 5．03(1H，d，7．2)
75．0 3．95(1H，m)
76．4 4．00(IH，m)
87．4 3．56(1H，m)
707 3 86(1H．m)
18，2 1．63(3H，s)
104，9 4．82(1H，d，7．2)
73．7 3．98(1H，m)
760 4．0Z(1It．m)
879 4．2l(1H，m)
70．8 404(IH，m)
20，0 1．65(3H，s)
105．6 5 10(1H，d，7．6)
78．1 3 92(1H．m)
88．0 3 60(1H．Ⅱ1)
71．4 4．09(IH，m)
78．0 3．93(1Htnl)
666 3．52(1H，ITI．a)，
4 18(1H，m，8)
60．6 3．83(3H，s)
2．13(IH，dd。3．6，13．2，B)
3，13(1H，Jd，3．6。11．6，d)
5．52(1H，d．48．8)
4 88(1H．d，48 B)
1．66(3H，s)
2．03
1．62
0．78(3H．s)
076(3H．s)
1 04(3H，S)
1．23(3H，s)
1．57(3H，8)
3-OMeGlc
MeOH)，Liebermann—Burchard反应呈阳性。由电喷
雾一正离子质谱ESI—MS+提供的准分子离子峰m止
1141[M+Na]1和电喷雾一负离子质谱ESI—MS一提
供的准分子离子峰m／z1117[M—HI，推测化合
物Ⅱ的相对分子质量为1118。结合1H—NMR，
”CNMR谱，确定该化合物的分子式C；。H。。0。。。
根据化合物Ⅱ的1H—NMR，”C—NMR和HMQC
谱，对化合物各个碳原子及其所连接的质子的化学
位移进行归届(见表2)。结果表明：化合物I为三萜
皂苷类成分，与化合物海参素A(holothurinA)的结
构极为相似o]，只是组成皂苷糖链的单糖化学位移
值有明显不同。化合物Ⅱ中与苷元直接相连的木糖
c一47(75．7，70．7)化学位移各高场移动a5．0，而C一
3’(75．5，78．1)和C一5’(64．3，66．7)分别向低场移动
d2．6和d2．4。比较海参素A和化合物II的ESI—
MS数据发现，化合物Ⅱ的相对分子质量为118，
比化合物海参素A少102，这是由于海参素A失去
硫酸酯基引起的。
将化合物Ⅱ用三氟乙酸水解后，衍生得到糖腈
乙酸酯衍生物，采用GC—MS分析，经与标准糖的糖
腈乙酸酯衍生物对照，表明化合物Ⅱ中存在D一木
糖，D一奎诺糖，D葡萄糖，3甲氧基一D一葡萄糖，比例
为1：1：1：1。
ESI—MS中的碎片离子峰m止i117[M
H]、941[M—H一3一oMe—glc]、781[M—H
3一OMe—glc—glc]一、635EM—H一3一OlVle—
glc—gle—qui]、493[M—H3 OMe—glc—
q口；B
m
m
m
m
m
m
H
H
H
H
H
H％他蚰∞n船i!
i曲跎柙；
，
，6舞勰mⅢmⅢ他曲∞鸭
2
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捕珀曲虬牡拈孔巧；毫盯∞钉弛
万方数据
中革喃ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第4期2006年4月
衰2黑乳海参皂苷2a的苷元和糖部分的”C—NMR和‘H—NMR的化学位移
Table2”C-NMRand1H—NMRChemicalshiftsforaglyconandsugarmoietiesofnobilisde2a
碳位 赴 “(m，JinHz) 糖
1 36．5 lt38(IH，m，a)，Xyl
1．85(1H，m，0)
2 272 1．92(1H删m)，
8．10(1HtmB)
位置 6c 靠(m．JinHz)
04．9 4．67(1H+d。7，S)
“2 4．04(1H．m)
78．1 4．26(1H．m)
707 4．00(1H，m)
66．7 3 65(1H，m，d)，
4 2z(1H．Ⅲ，8)
055 5 02(1H，d，78)
76．4 3．95(1H．m)
73．7 4．02(1H，m)
88．6 3．62(1H，m)
7I，7 3．70(1H．m)
18．Z 1．62(3H，d，8O)
08．6 4．82(1H，d．76)
76．0 4 10(1H，m)
88．2 4．24(1H，ITI)
89．9 4．08(1H，m)
77，9 4．00(1H。m)
88．3 4．50(1H．m)
4．34<1l{+m)
05，6 5．10(1H．d．78)
75．0 4．04(1H．m)
88．9 3．68(1H．m)
70．8 4．儿(1H．m)
783 3．94(1H．Ill【)
62．3 4．24(1H删133)。
4．45(1H，m．B)
80．6 3．74(3H．s)
o．97(1H．m，Ⅱ)
l-88(1H，m．n)．
1．46<1H㈣B)
1．44(1H，m，n)，
1．70(1H，m，B)
3．27<1H，d，11．6，B)
5 54(1H．d。4．4，日)
4．86(iH，d，4．8，日)
xyl--qui--xyI]，进一步表明化合物Ⅱ中糖链的组
成，同时也证实了其单糖连接顺序与化合物海参素
A的顺序是完全一致的。
综上所述，化合物I的结构为3一。一[3”一。甲基一
pD一吡喃葡萄糖(1—3)一pD一吡喃葡萄糖(1—4)一p—
D一吡喃奎诺糖(1—2)一B—D一吡喃木糖]一海参烷22，
25一环氧一9一烯一3口，122，172一三醇。现有资料表明化合
物I尚未有公开报道，为一新化合物，命名为黑乳海
参皂苷2a。
3讨论
对黑乳海参活性皂苷类成分的研究结果表明，
黑乳海参体内的抗肿瘤活性成分主要为三萜皂苷，
作为海参体内主要的有毒物质和化学防御物质，其
具有较强的抗肿瘤和抗真菌活性，是一类很有前景
的抗肿瘤药物的先导化合物，对其进行深入的构效
关系研究，将有助于抗肿瘤新药的研究与开发。本研
究所报道的两个化合物均为新化合物，有可能作为
抗肿瘤药物的先导化合物。
RefereDces：
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万方数据
黑乳海参中两个新的三萜皂苷
作者： 巫军， 易杨华， 邹峥嵘， 吴厚铭， 汤海峰， WU Jun， YI Yang-hua， ZOU Zheng-rong
， WU Hou-ming， TANG Hai-feng
作者单位： 巫军,WU Jun(第二军医大学药学院,海洋药物研究中心,上海,200433;宁波医药技术研究所
,浙江,宁波,315201)， 易杨华,汤海峰,YI Yang-hua,TANG Hai-feng(第二军医大学药学院
,海洋药物研究中心,上海,200433)， 邹峥嵘,ZOU Zheng-rong(江西师范大学生命科学院,江
西,南昌,330022)， 吴厚铭,WU Hou-ming(中国科学院上海有机化学研究所生命有机化学国
家重点实验室,上海,200032)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2006,37(4)
被引用次数： 3次

参考文献(2条)
1.Liao Y L 中国动物志,棘皮动物门,海参纲 1997
2.Kitagawa I.Nishino T.Kobayashi M Marine natural products.Ⅶ.Bioactive triterpene-oligoglycosides
from the sea cucumber Holothuria leucospilota Brandt (Ⅰ) Structure of holothurin B 1981(07)

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