全 文 ：’1130· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第8期2005年8月
[a]分=+10．3。(e0．01，MeOH)．High—resolution
ESI—MS(pos．)gaveanionpeakatm／z：
557．2547(cal．forC34H3707as557．2539)．
”C—NMRsignaltd：181．8suggestedth pre—
senceofacarboxylgroup．Aromatic1H—NMRsig—
nalsat艿：7．35～7．96andtwelve13C—NMRsignals
betweend：128．2and艿：134．1andtwocarbonyl
carbonsignalst艿：166．1and艿：165．9showed
twobenzoatemoieties．Interpretationof he
1H—NMR，13C—NMRrevealedthestructureofcom—
poundⅡ[43．
Comparisonof physicochemicalproperties
withthereporteddatallowedtoidentifycom—
poundsⅢ一Ⅺ。isolatedfromthsamefungus．as
36一hydroxy一5a，8a—epidioxyergosta一6，22一dien
(Ⅲ)[引，(22E，24R)-ergosta一7，22一diene～36，5a，
61]-triol(IV)[7]，(22E，24R)一ergosta一7，22一diene一
3口一ol(v)[8]，benzoicacid(V1)，4-hydroxylbenz—
aldehyde(V1)，4一monopropanoylbenzenediol(Ⅶ)，
ethyl—p—D—91ucopyranoside(Ⅸ)[9|，thioaeetican—
hydride(X)[⋯，and(2S，2’R，3S，4R)一2一(2一hy—
droxyoctadecanoylamino)docosane一1，3，4一triol
(XI)[1⋯，respectively．
Refereneeso
[1]YuanMS，SunPQ，SichuanMushroom(四川覃菌)[M]．
Chengdu：SichuanScienceandTechnologyPress，1995．
[23MorelliI，PistelliL，CatalanoS．S meconstituentsofCli o—
cybenebularisndHydnumrepandum口]．Fitoterapia，
1981，52：45—47．
[3]TakahashiA，EndoT，NozoeS．Repandi01．anewcytotoxie
diepoxidefromthemushroomsHydnumrepandumandH．
repandumvat．album[J]．ChemPharmBull，1992，40：
3181—3184．
[43TakakoK，YoshiakiT，YoshiteruO．ScabroninesB，C，D，
E，andF，novelditerpenoidsshowingtimulatingctivityof
nervegrowthfactor—sythysis，fromthemushroomSarcodon
$cabTosu$[J]．丁krahedron，1998，54：11877—11886．
[5]HisaoS，TakashiT，Den7eiK，ela1．Isolationndcharac—
terizationofnewbitterditerpenoidsfromthefungusScar—
codonscabrosus口]．AgricBiolChem，1989，53：3373—3375．
[6]RoseckeJ，KonigWA．ConstituentsofthefungiDaedalea
quercinaa dDaedaleopsisconfragosavar．tricolorI-j]．P协一
tochemistry，2000，54：757—762．
L7JGaoJM，HuL，LiuJK．AnovelsterolfromChinese
trufflesTuberindicun口]．Steroids，2001，66：771—775．
[8]KellerAC，MaillardMP，HostettmannK．Antimicrobial
steroidsfromthefungusFomitopsispin cloaEJ]．P钞toche—
mistry，1996，41：1041—1046．
L9JGaoJM，ShenJ，YangX，eta1．TheconstituentsofRus ula
ochroleucabasidiomycetes[J]．ActaBotYunnan，2001，23：
385—393．
[10]InagakiM，IsobeR，KawanoY，ela1．Isolationndstruc—
turesofthreen wceramidesfromStarfishacanthaster由lanci
[J]．EuroJOrgChem，1998，1：129一131．
耙齿菌糖蛋白11-2-,的化学研究
杨真威1，姜瑞芝2，陈英红2，高其品3’
(1．吉林大学生命科学学院，吉林长春130023；2．吉林省中医中药研究院，吉林长春130021；
3．吉林省药品检验所，吉林长春130062)
摘 要：目的 对均一耙齿菌Irpexlacteus糖蛋白Ii-z-1进行化学研究。方法利用化学方法和光谱方法分析其结构
特征。结果Iz。，的相对分子质量为40000，由Ara、Xyl、Man、Gal、Glu组成，甲基化分析表明I。。。的主链主要以
1—2，1—6linkedManp为主。结论112 为结构复杂的糖蛋白，为首次从耙齿菌中获得。
关键词：耙齿菌；糖蛋白；甲基化分析
中图分类号：R284．1 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2005)08—1130—03
Giycoprotein11—2—1fromIrpexlacteus
YANGZhen—weil，JIANGRui—zhi2，CHENYing—hon92．GAOQi—pin3
(1·CollegeofLifeScience，JilinUniversity，Changchun130023，China；2．AcademyofTraditionalChineseMedicineand
MateriaMedicaofJilinProvince，Changehun130021，China；3．JilinInst tuteforDrugControl，Changehun130062，China)
Abstract：ObjectiveTostudythchemicalstructureofapureglycoproteinIl一2一lfromIrpexlacteus．
收稿日期：2004—10-13
作者简介：杨真威(1979一)，女，硕士研究生。
*通讯作者高其品Tel：(0431)7939919
万方数据
中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第8期2005年8月·1131·
MethodsBasedonchemicalandspectralanalysis，thetructuralcharacterizationof11一z一1wasi vestigated．
Results11—2—1wascomposedofAra，Xyl，Man，Gal，andluwithitsmeanmolecularweightof40000．
MethylationnalysisshowedthatthemainchainofIa-z-1wasall1÷2，1÷6linkedManp．Conclusion11芬l
isacomplicatedglycoproteinobtainedforthefirsit mefromJ．1acteus．
Keywords：IrpexlacteusFr．；glycoprotein；methylationanalysis
耙齿菌系多孔菌科真菌乳白耙齿菌Irpexlac—
teusFr．的菌丝经深层发酵而成的产物[1]，临床主
要用于治疗因肾小球肾炎所导致的尿少、浮肿、腰
痛、血压升高等症，能明显消除或减少慢性病人的尿
蛋白、血尿。笔者曾对耙齿菌经水提、醇沉、透析所得
粗品I，做组分分析，初步确定为糖蛋白，并以二甲
苯所致小鼠耳肿胀实验作为依据考察其抗炎活性，
证实靶齿菌的活性部位确为大分子部分。本实验研
究耙齿菌糖蛋白粗品I，的纯化样品I。}。的化学
结构。
1实验部分
1．1试剂和仪器：耙齿菌J．1acteusFr．由吉林通
化林海药业有限公司提供。DEAE—SephadexA一50
和SephadexG一150均为Sigma公司产品。标准品：
葡萄糖、牛血清白蛋白、Fuc、Ara、Xyl、Man、Gal、
Glu均购自Sigma公司，质量分数均为99％。其余
试剂均为国产分析纯。比色用752紫外分光光度计
为上海精密科学仪器有限公司产品。气相色谱仪为
温岭福立分析仪器公司GC一9790及N一2000双通道
色谱工作站，1％OV一225不锈钢填充柱(2mm×2
m)。岛津高效液相色谱系统：10AT—VP泵，示差折
光检测器，OHPaKSB一804HQ凝胶色谱分析柱(8
mm×300ram)，GPC软件。气质联用仪(GC—MS)为
Trace—MS美国FINGAN产品，IR用岛津FTIR
8400S傅里叶转换红外分光光度计，核磁共振仪为
BrukerAM一500型。
1．2 分离纯化：粗品11经DEAE—SephadexA一50
柱色谱，依次用蒸馏水，0．2、0．6、1．0mol／LNaCl
溶液洗脱，在A。。。及A。。。(苯酚一硫酸显色)处分别对
蛋白质和糖进行间管(每管10mL)监测。分离得到
11_l、Il-2、IH、11如Il-2经SephadexG一150(6cm×65
cm)凝胶柱色谱(流动相为蒸馏水)纯化得I。芬。。
1．3质量分数检查及相对分子质量测定：采用高效
液相凝胶色谱分析系统，以标准葡聚糖DextranT
系列制作标准曲线，然后根据多糖样品在相同色谱
条件下的保留时间，利用GPC软件，测定其样品的
质量分数及相对分子质量。
1．4 总糖和蛋白质测定：中性多糖量采用苯酚一硫
酸法(以标准葡萄糖为标准品)[23测定，蛋白质量采
用Lowry法(以牛血清白蛋白为标准品)[31测定。
1．5单糖组成分析：样品5mg，用2mol／LTFAl
mL溶解，封管，121℃水解1．5h。水解液气泵吹干
彻底除尽TFA。完全酸水解产物以NaBH。还原，醋
酐乙酰化制成相应的糖醇乙酸酯衍生物，进行GC
分析。
1．6甲基化分析：取样品15mg，按改良Hakomori
法进行甲基化，以IR检测样品，确认样品已甲基化
完全后，将甲基化产物以甲酸解聚，2mol／LTFA
121℃水解1．5h，NaBH。还原，醋酐乙酰化制备部
分甲基化糖醇乙酸酯衍生物后进行GC—MS分析。
1．7 IR分析：取样品少量，采用KBr压片法在
4000500cm_1处进行红外扫描。
1．8 NMR分析：取样品50mg，溶于D200．5mL
中，在核磁共振仪上测定样品的1H—NMR、
13C—NMR。
2结果与讨论
糖蛋白11-2_1系粗品11经DEAE—SephadexA一50
(图1)和SephadexG一150柱色谱分离纯化所得样
品。笔者已初步确定I。为糖蛋白，含蛋白质33％，几
乎含有所有天然氨基酸。图1结果进一步证实I，为
蛋白质与糖以共价键结合的糖蛋白。
1．4
1．2
1．0
弋0．8
0．6
O．4
0．2
0
管数
——42鼬
一A490
图1 Il经DEAE—SephadexA一50的洗脱形式
Fig．1Elutionpatternof11onDEAE—SephadexA一50
I。}。为白色絮状物，收率为0．69％。IR光谱表
现出糖蛋白的特征振动峰，30003600cm_1宽峰
是0一H的伸缩振动，1653、1625cm_1为肽键上酰
胺基的吸收峰，1150～1080cm-1宽峰是多糖分子
中C—O键的振动吸收，810、870cm。为甘露糖的特
万方数据
·1132· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第8期2005年8月
征吸收[2]，另外在900em-1附近有一弱的吸收峰，表
明样品中有p构型的糖环存在[4]。
IⅥ一，为HPLC纯多糖，相对分子质量为40000。
GC结果表明Il-2一l由Ara、Xyl、Man、Gal、GIu组成，
摩尔比为1：T(微量)：19．2：1．1：1。含中性糖
95．46％；含蛋白质6．23％。
II-z-1经两次甲基化后，IR谱检测，3ooo～3600
cm_1处的羟基宽峰基本消失，相反2900em-1处的
甲基特征吸收峰显著增大，表明甲基化己完全。甲基
化完全样品的GC—MS分析结果见表1。甲基化碎片
以峰面积之比作为摩尔比，但戊糖和己糖相比，以各
自的响应因子校正[5]。从表中可以看到，Ivzq主要以
1—2，1—6linkedManp为主链，末端主要为
Manp。主链Man的分支点主要在3—0、4一。上，支点
可能连接着不同长度的侧链和非还原末端。
表1 I。+。的甲基化分析
TableI MethylationnalysisofIl一2．I
I。鲁。的13C—NMR中，C1的化学位移艿一
101．321，表明糖苷键为p构型，这与IR的分析结
果是一致的。I。}，的1H—NMR分辨率较差，未能给出
信息。由于样品中并不含有糖醛酸和鼠李糖，且含有
较多甘露糖，所以NMR不能清楚的给出更多信息。
IH一。的精细结构及糖和蛋白质的连接方式的研
究正在进行中。
用二甲苯所致小鼠耳肿胀实验考察DEAE—
SephadexA一50纯化样品的抗炎活性(I。，。收率低，未
做药理实验)，11-3显示出较好抗炎作用，而IH、II-z作
用不明显。3个样品含的糖的量依次降低，而蛋白的
量依次升高。提示，具有抗炎作用的耙齿菌糖蛋白，
其活性部位是蛋白部分还是糖与蛋白存在着比例关
系，这一构效及量效关系正在研究中。
References：
[1]YanZK，LiWL．ColourPicturesofMedicinalPl ntsof
ChangbaiMountainofChina(中国长白山药用植物彩色图
志)I-M]．Peking：People’SM dicalPublishingHouse，
1992．
E23ZhangWJ．ChemicalResearchTechniquesofCompound
Polysaccharides(复合多糖生化研究技术)l-M]．Shanghai：
ShanghaiScientificandTechnicalPublishers，1987．
[3]LiJW，XiaoNG，YuRY，ela1．TheoriesandMethodsf
BiochemicalExperiment(生物化学实验原理方法)[M]．
Beijing：PekingUniversityPress，1994．
[4]ZhangJS，HanWW，PanYJ．Studiesonchemicalstruc—
tureofpolysaccharidefromfruitbodyofCoriolusversocolor
I-j]．ActaPharmSin(药学学报)，2001，36(9)：664—667．
[53SweetDP，ShapiroRH．Quantitativeanalysisbyvarious
GLCresponse—factortheoriesforpartiallymethylatednd
partiallyethylatedalditolcetatesEJ]．CarbohydrateRes，
】975(40)．217—2 5．
川白芷化学成分研究
梁波，徐丽珍，邹忠梅+，杨世林
(中国医学科学院中国协和医科大学药用植物研究所，北京100094)
摘 要：目的 研究川白芷Angelicadahuricavar．formosana的化学成分。方法利用硅胶柱色谱，SephadexLH一
20等分离纯化，光谱法鉴定结构。结果分离得到19个化合物，分别为异欧前胡素(I)、欧前胡素(Ⅱ)、佛手柑内
酯(Ⅲ)、别欧前胡素(1V)、花椒毒酚(-q)、8一甲氧基一5一羟基补骨脂素(91)、比克白芷素(Ⅶ)、水合氧化前胡内酯
(Ⅷ)、珊瑚菜内酯(IX)、花椒毒素(x)、异回芹内酯(Ⅺ)、别异欧前胡素(XⅡ)、psoraIenquinone(xⅢ)、3一甲氧基一1H一
吡咯(XIV)、棕榈酸(xV)、硬脂酸(XVI)、p谷甾醇(XVI)、豆甾醇(ⅫⅢ)、胡萝b苷(XIX)。结论化合物VI、xⅢ、xⅣ
为首次从该植物分离得到，化合物I～xⅡ均为线性呋喃香豆素衍生物。
关键词：川白芷；线性呋喃香豆素；8一甲氧基一5一羟基补骨脂素
中图分类号：R284．I 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2005)08—1132—04
收稿日期：2005—01—24
基金项目：北京市自然基金重点项目(7011003)
作者简介：梁波，女，博士研究生。Tel：(0791)7119632E—mail：beibeitiang@263．net
*通讯作者邹忠梅Tel：(Olo)62899756E—mail：zhongmeizou@hotmail．eom
万方数据
耙齿菌糖蛋白Ⅰ1-2-1的化学研究
作者： 杨真威， 姜瑞芝， 陈英红， 高其品， YANG Zhen-wei， JIANG Rui-zhi， CHEN Ying-
hong， GAO Qi-pin
作者单位： 杨真威,YANG Zhen-wei(吉林大学生命科学学院,吉林,长春,130023)， 姜瑞芝,陈英红
,JIANG Rui-zhi,CHEN Ying-hong(吉林省中医中药研究院,吉林,长春,130021)， 高其品
,GAO Qi-pin(吉林省药品检验所,吉林,长春,130062)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2005,36(8)
被引用次数： 1次

参考文献(5条)
1.Yan Z K.Li W L 中国长白山药用植物彩色图志 1992
2.Zhang W J 复合多糖生化研究技术 1987
3.Li J W.Xiao N G.Yu R Y 生物化学实验原理方法 1994
4.Zhang J S.Han W W.Pan Y J Studies on chemical structure of polysaccharide from fruit body of
Coriolus versocolor[期刊论文]-药学学报 2001(09)
5.Sweet D P.Shapiro R H Quantitative analysis by various GLC response-factor theories for partially
methylated and partially ethylatedalditol acetates[外文期刊] 1975(40)

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5. 杨真威.姜瑞芝.陈英红.高其品.YANG Zhen-Wei.JIANG Rui-zhi.CHEN Ying-hong.GAO Qi-pin 耙齿菌糖蛋白的
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引证文献(1条)
1.戴玉成.杨祝良 中国药用真菌名录及部分名称的修订[期刊论文]-菌物学报 2008(6)


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