全 文 ：·制剂与质量·
全缘千里光碱体外透皮特性的研究
徐月红1, 徐莲英2, 蔡定国3Ξ
(11 中山大学药学院 药剂实验室, 　广东 广州　510080; 21 上海中医药大学 药剂教研室,
上海　200032; 31 海军 411 医院, 上海　200081)
摘　要: 目的　研究全缘千里光碱的体外透皮特性, 为全缘千里光碱的抗肿瘤制剂设计提供依据。方法　采用V 2C
扩散池, 以裸鼠皮肤为渗透屏障, 渗透系数为指标, 采用 R P2H PL C 法测定全缘千里光碱, 考察氮酮、4% 聚山梨酯2
80、8% 丙二醇的影响。结果　以水为释放介质, pH 618 PBS 为接收液, 其渗透系数为 11184×10- 2 cm öh。2% 氮酮、
8% 丙二醇对它的增渗比分别为 218、115, 而聚山梨酯280 却表现出阻碍作用。结论　全缘千里光碱适合制备成经皮
给药抗肿瘤的新制剂, 并可据此实验优化其透皮给药新制剂的处方。
关键词: 全缘千里光碱; 促渗剂; 氮酮; 聚山梨酯280; 丙二醇
中图分类号: R 28316; R 286102　　　文献标识码: A 　　　文章编号: 0253 2670 (2004) 09 0983 03
Perm eab il ity of in tegerr im ine in vitro
XU Yue2hong1, XU L ian2ying2, CA ID ing2guo 3
(11 Schoo l of Pharm aceu tical Sciences, Sun Yat2sen U niversity, Guangzhou 510080, Ch ina; 21 D epartm ent
of Pharm aceu tics, ShanghaiU niversity of T radit ional Ch inese M edicine, Shanghai 200032, Ch ina;
31 N o1 411 Ho sp ita l of Ch inese N avy, Peop le’s L iberat ion A rm y, Shanghai 200081, Ch ina)
Abstract: Object　T he perm eab ility of in tegerrim ine w as studied in v itro to design its an t icancer
p repara t ion s1M ethods　V ilia2Ch ien diffu sion cells w ere adop ted as appara tu s fo r in v itro sk in perm eat ion,
nude mou se sk in s w ere u sed as perm eat ion barrier and perm eat ion coeff icien t (P ) w as calcu la ted1 T he
concen tra t ion s of in tegerrim ine in samp les w ere m easu red by R P2H PL C, and the effects of A zone, 4%
Tw een280, 8% p ropylene glyco l on it w ere studied1 Results　 Its P is 11184×10- 2 cm öh w ith w ater
so lu t ion as dono r and pH 618 PBS as recep to r1 Its enhancem en t ra te (ER ) of 2% A zone and 8% p ropylene
glyco l is 218 and 115, w h ile Tw een280 inh ib its its penetra t ion1 Conclusion 　 In tegerrim ine is a good
candidate of an t isk in cancer fo r t ran sderm al drug delivery, and the op t im al fo rm u la t ion can be designed
acco rd ing to the experim en ts1
Key words: in tegerrim ine; perm eat ion enhancers; A zone; Tw een280; p ropylene glyco l
　　全缘千里光碱 ( in tegerrim ine, IN T ) 是从峨眉
千里光 S enecio f aberi H em sl1 中提取的有效成分,
为细胞毒类抗肿瘤药物, 其结构与美国已进入Ê 期
临床的主治急性淋巴白血病的N 2O 2去甲天荠菜碱
( ind icine2N 2ox ide) [1 ]具相似性, 同为双稠吡咯环生
物碱 (pyrro lizid ine alk lo ids)。 IN T 的抗肿瘤作用明
确, 但在国内外肿瘤临床上其应用受到限制, 主要是
全身给药途径用药后经肝脏代谢产生吡咯, 对肝脏
具蓄积的、不可逆的毒性作用。因此, 寻找新的给药
途径, 拓展 IN T 在肿瘤临床的应用具有重要意义。
透皮给药制剂具有可避免胃肠道酶解和肝脏的首关
效应、降低不良反应、提高病人的顺应性及随时可中
断给药等优点[2 ] , 为当今药剂学的研究热点。本实验
对 IN T 的体外透皮特性进行研究, 为制备 IN T 透
皮给药抗肿瘤的新制剂提供参考。
1　仪器与材料
H P1100 高效液相色谱仪, 改良 F ranz 扩散池及
V 2C 扩散池 (中国科学院上海有机化学研究所定
制) , 501 超级恒温器 (上海市实验仪器厂) , 78—1A
磁力加热搅拌器 (上海南汇电讯器材厂)。全缘千里
光碱 ( in tegerrim ine, IN T , 又称千里光A 碱) 为课
题组自制, 经 H PL C 面积归一化法测定其纯度在
·389·中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 9 期 2004 年 9 月
Ξ 收稿日期: 2003211217
基金项目: 上海市科委科技攻关项目 (02D Z19121)
作者简介: 徐月红 (1970—) , 女, 湖北武穴人, 副研究员, 博士, 1992 年和 1997 年毕业于沈阳药科大学药剂专业, 分别获学士和硕士学位,
2002 年毕业于上海中医药大学中药药剂专业, 获博士学位, 2004 年广州中医药大学博士后出站, 现任中山大学药学院药剂室
副主任, 主要从事药物新剂型新技术研究。T el: (020) 87331160　Fax: (020) 84038840　E2m ail: lssxyh@zsu1edu1cn
95%以上; 1, 22丙二醇 (A R 级, 上海化学试剂一
厂)、氮酮 (A zone, 福建寿宁美菲思生物化学品厂)、
聚山梨酯280 (Tw een280, 上海大众制药厂)。裸鼠,
雄性, 10 周龄, 中国科学院上海实验动物中心提供。
2　实验方法
211　体外透皮试验: 采用V ilia2Ch ien 扩散装置, 将
裸鼠皮肤固定于V 2C 扩散池的供给池和接收池之
间, 使角质层朝向供给池, 渗透面积 01785 cm 2, 供
给池中加入释放液 5 mL , 接收池中加入接收液 5
mL。恒温水浴 (32±015) ℃, 搅拌速度 100 röm in,
定时于接收池中取样 015 mL , 并补充等量空白接收
液。所取样品经H PL C 分析。计算各时间点 ( t)的实
测浓度 (C n测) , 并按下式进行数据处理:
　　C n校= C n测+ 015ö5∑n- 1
i= 1
C i, Q = C n校×V öA ,
P = J söC 0, ER = P eöP
C n校: 校正浓度; Q : 单位面积累积渗透量; V : 接收液的体积;
A : 扩散池横截面积; J s: 稳态透皮速率, 以不同时间的Q 对
时间 t 作图, 斜率即是 J s; P : 渗透系数; P e: 增渗后的渗透系
数; ER: 增渗比。
212　全缘千里光碱的H PL C 测定
21211　色谱条件: 色谱柱: K rom asil KR 10025 C 18
( 250 mm ×416 mm , 215 Λm ) ; 流动相: 甲醇2水2磷
酸2三乙胺 (300∶700∶1∶015, pH 217) ; 体积流量:
1 mL öm in; 检测波长: 213 nm。
21212　标准曲线的制备: 精密称取干燥至恒重的
IN T 对照品 8169 m g, 置 50 mL 量瓶中, 用 pH 618
PBS 配制成 17318 ΛgömL 的贮备液。临用前精密吸
取上述溶液 015、1、2、3、4、5、6、7 mL 于 10 mL 量瓶
中, 并用 pH 618 PBS 稀释至刻度, 摇匀, 备用。精密
吸取上述溶液 10 ΛL , 分别注入液相色谱仪, 按上述
色谱条件进行测定, 以质量浓度对相应的峰面积作
线性回归, 得标准曲线A = 31008 8+ 131607 0 C ,
r= 01999 6, 表明 IN T 在 8619 ng～ 11215 6 Λg 与峰
面积线性关系良好。每次样品测定时采用外标两点
进行校正。
21213　精密度试验: 分别取 17138、69152、121156ΛgömL IN T 对照品溶液各测定 7 次, IN T 峰面积
R SD 分别为 2134%、1136%、1102%。
21214　加样回收率试验: 分别取贮备液 1、4、7 mL
各 3 份, 用空白皮肤透过液稀释至 10 mL , 依法进行
H PL C 测定, 3 种质量浓度的平均回收率分别为
100194%、101180%、99198% (n= 3)。
3　实验结果
311　 IN T 的溶解度测定: 配制 IN T 过饱和水溶液
适量, 分别置 3 个改进 F ranz 扩散池中, 以 (32±
015) ℃水外循环 24 h 后, 取上清液迅速滤过, 并取
1 mL 分别用水稀释至 10 mL , 经 H PL C 分析, 计算
IN T 在水中的溶解度为 (1149±01082 0) m gömL。
312　 IN T 的油水分配系数测定: 分别取 01101 0
m gömL IN T 水溶液 2 mL 置于 4 只 20 mL 具塞试
管中, 各加入 2 mL 正辛醇, 旋涡混合 5 m in, 再于
(32±015) ℃水浴振荡 3 h 至分配平衡, 取水层 (下
层) 进行 H PL C 分析, 并根据公式 P = (C - Cw ) öCw
计算得油水分配系数 P = 6139 (n= 4)。
313　 IN T 的体外渗透特性研究
31311　氮酮对 IN T 渗透的影响: 分别以 0%、2% ,
5% 和 8% 氮酮[3 ]为促进剂, 以 IN T 的过饱和水溶液
为释放液 (n= 3) , 以pH 618 PBS 为接收液, 进行渗
透试验, 并于不同时间点取样进行H PL C 测定, 见
图 1。
A 28% 　B22% 　C25% 　D 20%
图 1　氮酮对全缘千里光碱的渗透促进作用
F ig1 1　Permeation enhanc ing effect
of Azone on in tegerr im ine
　　渗透动力学方程: 0% : Q = - 64120+ 24166 t,
r= 01998 5, J s= 24166 Λgö(cm 2·h) , P = 11184×
10- 2 cm öh; 2% : Q = - 154187 + 69110 t, r =
01997 4, J s = 69110 Λgö(cm 2 ·h ) , P = 31318×
10- 2 cm öh, ER = 218; 5% : Q = - 108129+ 54132
t, r = 01998 7, J s = 54132 Λgö( cm 2 · h ) , P =
21608×10- 2 cm öh, ER = 212; 8% : Q = - 101147+
80158 t, r= 01999 8, J s= 80158 Λgö(cm 2·h) , P =
31870×10- 2 cm öh, ER = 313。
　　从不同体积分数氮酮对 IN T 渗透的作用可得
出, 不同体积分数的氮酮对其渗透都有促进作用, 考
虑成本和处方设计的需要, 选择低体积分数的氮酮
即 2% 氮酮就可满足要求。
31312　4% 聚山梨酯280 的影响: 经过增溶预试验,
4% 聚山梨酯280 对 IN T 具增溶作用。以 4% 聚山梨
酯280 与上述试验同质量浓度的过饱和溶液为释放
液 (n= 3) , 以 pH 618 PBS 为接收液进行渗透试验,
于不同时间点取样进行H PL C 测定。结果见图 2。
　　渗透动力学方程: Q = - 47106+ 11185 t, r=
·489· 中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 9 期 2004 年 9 月
图 2　4 % 聚山梨酯-80 对全缘千里光碱的渗透作用
F ig1 2　Effect of 4 % Tween -80 on permeation
of in tegerr im ine
01998 1, J s= 11185 Λgö(cm 2·h) , P = 7149×10- 3
cm öh, ER = 0163。
　　与单纯过饱和溶液比较, 4% 聚山梨酯280 对
IN T 的渗透表现出阻碍作用, 使 P 减小。
31313　8% 丙二醇的影响[3 ]: 以 8% 丙二醇与上述
试验同质量浓度的过饱和溶液为释放液 (n= 3) , 以
pH 618 PBS 为接收液, 进行渗透试验, 并于不同时
间点取样进行H PL C 测定。结果见图 3。
图 3　8 % 丙二醇对全缘千里光碱的渗透作用
F ig1 3　Effect of 8 % propylene glycol
on permeation of in tegerr im ine
　　渗透动力学方程: Q = - 110162+ 29178 t, r=
01998 7, J s= 29178 Λgö(cm 2·h) , P= 11738×10- 2
cm öh, ER = 115。从上述数据可得出 8% 丙二醇对
IN T 的渗透表现为促进作用, 能使渗透系数增加。
4　讨论
411　经测得全缘千里光碱在水中的溶解度为
(11497 2±01082 0) m gömL , 表明作为一种脂溶性
药物, 它仍具备一定的水溶性, 这种性质有利于对皮
肤角质层的渗透。其适中的油水分配系数 6139 也有
利于皮肤给药[4 ]。
412　不同促进剂对药物的促透作用的考察是制备
皮肤给药的药物剂型的处方前工作。本研究考察了
2%、5%、8% 氮酮对全缘千里光碱经皮肤渗透的促
进作用, 发现不同体积分数的氮酮对它均有促渗作
用, 其 ER 分别为 218、212、313, 氮酮对全缘千里光
碱促渗作用与体积分数的关系有待进一步研究。
　　聚山梨酯280 (Tw een280)常被用来作为难溶性
药物的增溶剂, 本研究考察了 4% 聚山梨酯280 对全
缘千里光碱渗透的影响。含 4% 聚山梨酯280 的全缘
千里光碱过饱和溶液的渗透系数是其原来的 0163
倍, 表明 4% 聚山梨酯280 对它的渗透起阻碍作用。
主要原因可能是聚山梨酯280 作为非离子型无刺激
性的表面活性剂, 是一种张力活性剂, 它可通过增加
药物在赋形剂中的溶解度, 从而降低角质层ö赋形剂
的分配系数和渗透系数[5 ]。丙二醇常作为难溶性药
物的溶剂, 同时又是应用较广泛的渗透促进剂。实验
证明, 8% 丙二醇对全缘千里光碱的增渗比为 115。
413　通过对全缘千里光碱体外透皮特性的研究, 证
实了它对皮肤具一定的渗透性, 表明全缘千里光碱
适合制备成透皮给药的新制剂, 并可据此实验优化
其透皮给药新制剂的处方。
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　　 (上接第 982 页)
　　化合物Ð : 白色粉末 (M eOH ) , mp 286～ 291
℃, 根据 IR、E I2M S、1H 2NM R、13C2NM R 数据确定
为熊果酸。
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·589·中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 9 期 2004 年 9 月