全 文 ：固醇、调节血脂和提高血清 SO D活性的药效作用 ,
这些作用对于治疗高脂血症、预防血管内皮损伤 ,阻
止血管粥样硬化的形成都有重要的意义。 说明这两
种化合物均为山楂降血脂的有效成分 ,用以分析山
楂质量是有药效学依据的。
参考文献:
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双黄连粉针剂抗病毒作用
李　凡 ,易世红 ,赵春艳 ,魏　强 ,王　放
(白求恩医科大学 病原生物学教研室 ,吉林 长春　 130021)
摘　要: 目的　明确双黄连粉针剂体内外抗病毒谱及作用机制。 方法　采用组织细胞培养法、染料摄入法 ,检测双
黄连粉针剂对不同种病毒的作用 ,改变给药时间、途径 ,探讨双黄连粉针剂抗病毒作用环节。建立病毒性心肌炎、胰
腺炎、流感动物模型 ,通过组织病理学检查法 ,观察双黄连粉针剂对感染动物的保护作用。 结果　双黄连粉针剂具
有明显抗流感病毒、呼吸道合胞病毒、腺病毒Ⅲ型、单纯疱疹病毒 Ⅰ 及 Ⅱ 型、柯萨奇病毒 B3, A16、新型肠道病毒
71型的作用。对脊髓灰质炎病毒 Ⅲ 型、埃可病毒 6型、麻疹病毒、水泡性口炎病毒有一定的抑制作用。并能显著抑
制肺炎、心肌炎、胰腺炎的发生 ,疗效与清开灵相似 ,优于穿琥宁粉针剂、鱼腥草、莪术油注射液。结论　双黄连粉针
剂是一个较广谱的抗病毒针剂 ,抗病毒作用是多途径的。
关键词: 双黄连 ;抗病毒 ;细胞病变
中图分类号: R285. 5; R286. 87　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253 2670( 2002) 01 0052 04
Studies on antivirus effect of SHUANGHUANGLIAN INJECTION*
LI Fan, YI Shi-hong , ZHAO Chun-yan, WEI Qiang , WANG Fang
　　 ( Depa rtment o f Pathogenobio log y, No rman Bethune Univ er sity o f Medical Sciences, Changchun Jilin 130021, China )
Abstract: Object　 It was to expound antiv irus spect rum and the mechanism o f antivi ral action of
SHU ANGHUANGLIAN IN JECT ION ( SHLI) . Methods　 To observ e the inhibi tion o f va rious v irus by
SHLI, the methods of tissue cul ture, cell cul ture as w ell as dye abso rption test w ere used. The antivi ral
ef fect of SHLI was studied by using SHLI wi th dif ferent administ ration procedure and route. The animal
models of myocarditi s, insuli tis and pneumonia w ere made and the protection o f SHLI in these animal mod-
els was observ ed. Results　 SHLI has significant antivi rus ef fect against inf luenza virus, measles v irus,
respiratory syncy tial vi rus, adenovi rus, herpes simplex vi rus and w as mo re excellent than CHUANHUN-
IN G, YUXIN GCAO, EZHUYOU IN JECTIONs. It also can strongly inhibi t the development of myocardi-
tis, insuli tis and pneumonia, and has a li t tle antiv irus effect against enterov irus. Conclusion　 SHLI is a
w ide-spectrum antivi rus medicine and has various antivi ral mechanism.
Key words: SHU ANGHUANGLIAN IN JECTION ( SHLI) ; antivi rus; cy topathic effect
* SHUANGHUANGLIAN is a Chinese herbal prepa ra tion wi th Flos Lonicerae , Fructus Forsythiae,
and Radix Scutellariae.
　　双黄连粉针剂是由金银花、连翘、黄芩 3味中药
组成 , 80年代已被提取制成无菌粉针剂 ,广泛应用
于临床。 主要用于抗病毒、细菌感染和增强免疫力
等 ,具有较广泛应用前景 [1～ 3 ]。鉴于该药在临床应用
多年 ,迄今为止未见进一步深入、详细抗病毒药效学
研究及作用机制探讨的报道。 为了更好挖掘其多种
·52· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2002年第 33卷第 1期
收稿日期: 2001-02-22作者简介:李　凡 ,女 ,免疫学博士 ,现任白求恩医科大学病原生物学教研室主任 ,博士生导师 ,主要从事分子病毒学研究 ,抗菌药、抗病毒药效学研究。
功效及临床用途 ,明确作用机制 ,本研究室在以往工
作基础上 ,从整体水平和细胞水平对双黄连粉针剂
进行了应用基础理论方面的药效学研究。
1　材料与方法
1. 1　细胞系: 人羊膜细胞 ( FL)长春生物制品所提
供 ,人胚肾细胞 ( 293)加拿大引进 ,人宫颈癌细胞
( HeLa)为本室保存。
1. 2　动物:昆明种小鼠 ,♀ 各半 ,由白求恩医科大
学实验动物部提供 ; 18～ 20 g , 4周龄。
1. 3　病毒:柯萨奇病毒 B3、 B4 ( CVB3、 CVB4 )为美国
引进 ,本教研室保存。柯萨奇病毒 A16 ( CV A16 )、新型
肠道病毒 71型 ( EV71 )为日本仙台国立医院赠。脊
髓灰质炎病毒Ⅲ型 ( PVⅢ )购于北京生物所。埃可病
毒 6型 ( ECHO6V ) ,本校流行病学教研室提供。腺病
毒Ⅲ型 ( AdVⅢ )来自本校第一附属医院儿科。单纯
疱疹病毒Ⅰ型 ( HSV-1)、呼吸道合胞病毒 ( RV )购于
中国药品生物制品检定所。 单纯疱疹病毒Ⅱ型
( HSV-2)、流感病毒 ( A3V)购于中国预防科学院病
毒学研究所。 麻疹病毒 ( MV )为长春生物制品所提
供。风疹病毒 ( RV )、水泡性口炎病毒 ( V SV )为本室
保存。
1. 4　药品和试剂: 双黄连粉针剂为棕黄色粉末 ,由
哈尔滨医药股份有限公司中药二厂生产 ,卫药准字
Z-73号。穿琥宁 ( CHN)为微黄色的冻干粉末 ,清开
灵 ( QKL)注射液为棕黄色澄明液体 ,鱼腥草 ( HC)
针剂为无色澄明液体 ,莪术油 ( ZTO)葡萄糖注射液
为微黄澄明液体 ,均由哈尔滨医药股份有限公司中
药二厂提供。 培养基: IMDM (美国 GIBC产品 )。
1. 5　仪器与方法
1. 5. 1　仪器:酶标测定仪、 LBK紫外可见分光光度
计均由美国产 , LC-9A输液泵 ,低温离心机 , Olym-
pus相差显微镜均为日本岛津公司产品。
1. 5. 2　细胞的筛选与制备: 所用 14种病毒分别接
种于 FL、 HeLa及 293细胞以测定敏感性 ,细胞按
常规方法传代。同时制成 2× 10- 5 /mL细胞悬液 ,每
孔 0. 1 mL, 24 h后形成单层细胞备用。
1. 5. 3　病毒毒力测定:采用 TCID50微量法 ,本实验
室采用不同病毒的 100～ TCID50 /0. 1 mL。
1. 5. 4　初筛与分组实验:形成单层细胞孔弃去培养
液 ,加入对细胞无毒性浓度的药物作用 24 h,吸出
药液加入病毒液 ,按一般病毒吸附的时间 ,均采用
37℃ 吸附 1 h吸出 ,加入含药的维持液 ,置 37℃、
5% CO2恒温箱培养 48～ 96 h,待病毒对照孔病变
达+ + + ～ + + + + ,细胞对照正常时测结果。将初
筛有意义的病毒分 4组进行实验 ,探讨药物的具体
作用环节。 Ⅰ 组: 感染前 24 h给药 ,吸出药液 ,用
Hank s液洗 3遍 ,加入病毒液。 Ⅱ组: 感染后给药 ,
先加液置 37℃ 吸附 1 h洗去病毒加含药维持液。
Ⅲ组:药液与病毒同时加入细胞层。 Ⅳ组:药液与病
毒混合置 37℃、 2 h后加入细胞层。 以上均设正常
对照及病毒对照。
1. 5. 5　感染动物模型的建立及给药方案:病毒性心
肌炎、胰腺炎 ,肺炎模型建立参见文献 [4 ]。 实验动物
随机分为病毒感染模型组、正常对照组、双黄连不同
浓度给药组 ,其他同类药比较组 ,每组 10只 ,均在
相同条件下饲养 ,均为 ip给药 ,剂量如下: 双黄连
500, 150, 50 mg /kg;穿琥宁 50, 5, 2. 5 mg /kg;清开
灵 5, 2. 5, 0. 05 mL /kg;鱼腥草 5, 2. 5, 0. 05 mL /
kg;莪术油葡萄糖注射液 75, 15, 7. 5 mL /kg。
1. 5. 6　结果测定: ①光镜下观察细胞病变 ( CPE) ;
②染色摄入法 [5 ] ;③药物对组织细胞保护率计算 [6 ];
④连续给药 1周 ,无菌取小鼠胰腺、肺、心脏 ,分别
作病理学、组织学检查 ,判断药物疗效。
2　结果与讨论
2. 1　药物对细胞毒性: 双黄连在 1∶ 32以上稀释、
莪术油葡萄糖注射液在 1∶ 8以上稀释、清开灵在
1∶ 16以上稀释、穿琥宁 1∶ 32以上稀释、鱼腥草
1∶ 16以上稀释时 ,对 FL、 HeLa、 293细胞均无毒性
作用。
2. 2　药物的保护浓度:选用药液与病毒液同时加入
上述 3种细胞层的方法 ,测定了 1∶ 16, 1∶ 32,
1∶ 64, 1∶ 128, 1∶ 256等 5个浓度的双黄连、穿琥
宁、鱼腥草、清开灵、莪术油的抗病毒作用。①结果
1∶ 32, 1∶ 64, 1∶ 128三个稀释度的双黄连均有明
显的抗病毒效应 ( P < 0. 01)。 ②莪术油在 1∶ 16、
1∶ 32有一定的抗病毒作用 ;清开灵的 1∶ 16、
1∶ 32、 1∶ 64三个稀释度均有明显抗病毒作用 ;鱼
腥草、穿琥宁在 1∶ 32稀释时抗病毒作用较好。
2. 3　初筛结果: 利用光镜检查 CPE,结果表明双黄
连可以不同程度地抑制 14种病毒对组织细胞的
CPE,见表 1。
2. 4　双黄连与其他 4种药物抗病毒作用比较: 见
表 2。可以看出 ,双黄连抗病毒作用谱相似于清开
灵 ,广于鱼腥草、穿琥宁、莪术油。
2. 5　分组结果:在镜下观察 CPE基础上 ,用结晶紫
染色细胞 ,测定吸光度 ,以便进一步客观地反映加药
与不加药之差别。Ⅰ 组:实验目的是观察药物能否进
入细胞或吸附于细胞表面 ,以阻止病毒的吸附与穿
·53·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2002年第 33卷第 1期
表 1　双黄连对病毒致 CPE的影响
病毒株 细胞对照 病毒对照 实　验
CV B3 - + + + + -
CV B4 - + + + + -
CV A16 - + + + + -
PVⅢ - + + + + ±
BCHO6V - + + + + ±
EV71 - + + + + -
HSV -1 - + + + + -
HSV -2 - + + + + -
RSV - + + + + -
MV - + + + + ±
AdVⅢ - + + + + ±
A3V - + + + + -
RV - + + + + + +
V ZV - + + + + ±
　　注: - 无细胞病变 ;± 有延缓细胞病变作用 ; + 1 /4以下的细
胞病变 ; + + 1 /4～ 1 /2的细胞有病变 ; + + + 1 /2～ 3 /4的细胞有
病变 ; + + + + 3 /4以上的细胞有病变。 (下表同 )
入。 结果表明 ,双黄连此法对 A3V , AdVⅢ , RSV,
HSV-1, HSV-2, EV71 , CV B3 , CV B4 , CV A16 9种病
毒有意义 ( P < 0. 05)。Ⅱ组:实验目的是观察药物能
否对已进入细胞内的病毒起作用 ,抑制其生物合成
及成熟释放。 结果表明 ,双黄连此法对 A3V, AdV
Ⅲ , MV , RSV , HSV-1, HSV-2, CVB3 , CV B4 ,
CV A16 , EV71 10种病毒有意义 (P < 0. 05)。 Ⅲ 、Ⅳ
组:为药物与病毒在不同条件下作用 ,观察药物对病
毒直接灭活作用 ,结果表明 ,双黄连对除 RV以外
的 13种病毒均有作用。 说明双黄连无论是药物与
病毒同时加入细胞层或是药物与病毒先作用 2 h然
后加入细胞层 ,均具有抗病毒效应。对细胞的保护率
最高可达 96% ,见表 3。
2. 6　组织病理学检查:双黄连对 CVB4病毒感染所
表 2　双黄连与其他 4种药物抗病毒作用比较
病　毒 SHL QKL ZTO CHN HC 病毒对照 细胞对照
CVB3 - - + + ± + + + + -
CVB4 - - + + ± + + + + -
CV A16 - ± + + ± + + + + -
PVⅢ ± ± + ± + + + + + -
BCHO6V ± ± + + ± + + + + -
EV 71 - - - - - + + + + -
HSV-1 - - ± - ± + + + + -
HSV-2 - - - - - + + + + -
RSV - - - - - + + + + -
MV ± ± ± ± ± + + + + -
AdVⅢ ± - - - - + + + + -
A3V - - - ± - + + + + -
RV + + + - - + + + + + + + -
V ZV ± + - - + + + + + -
表 3　双黄连对组织细胞的保护率 (% )
组　别 CVB3 CVB4 CV A16 PVⅢ BCHO 6V RSV MV HSV-1 AdVⅢ A3V EV 71 HSV-2 V ZV
Ⅰ 90. 8 92. 3 82. 3 44. 3 50. 0 90. 0 70. 1 88. 0 94. 5 80. 4 95. 0 93. 0 76. 9
Ⅱ 92. 1 93. 4 83. 4 50. 1 52. 1 80. 5 82. 3 85. 2 93. 0 86. 0 90. 0 89. 0 65. 7
Ⅲ 70. 1 80. 0 70. 5 54. 5 60. 3 69. 0 68. 5 93. 0 70. 1 96. 5 75. 0 76. 8 57. 2
Ⅳ 69. 0 81. 2 70. 0 60. 5 75. 3 60. 2 70. 0 79. 4 68. 9 80. 1 70. 0 70. 0 50. 4
致的胰腺炎和心肌炎有明显的保护作用 ,治疗组胰
腺组织结构基本正常 ,有少量淋巴细胞侵润。心肌仅
见小灶状坏死 ,病毒对照鼠胰腺有大量淋巴细胞及
分叶核细胞侵润 ,心肌大片灶状坏死。双黄连对小鼠
病毒肺炎的保护作用 ,见表 4。
综上结果可见 ,双黄连粉针剂的抗病毒作用不
仅在细胞水平上得以证实 ,即能显著的抑制、延缓细
胞病变出现 ,也表现在整体水平上 ,即可有效抑制流
感病毒性肺炎、病毒性心肌炎、胰腺炎的发生与发
展 ,有着较好的疗效。
关于双黄连抗病毒作用机制 ,从分组实验结果
可以看出 ,作用是多途径的 ,不仅有直接灭活病毒的
表 4　双黄连对小鼠病毒性肺炎的治疗效果
组　别 剂　量
( mg /kg )
数　量
(只 )
肺指数
(x± s )
抑制率
(% )
病毒对照 - 10 1. 504± 0. 290
正常对照 - 10 0. 980± 0. 130
SHL 10 10 1. 182± 0. 074 21. 40*
3 10 1. 125± 0. 095 25. 19* *
1 10 1. 290± 0. 220 14. 22
　　同病毒对照组比较: * P < 0. 05　* * P < 0. 01
作用 ,而且对吸附于细胞表面和进入细胞内的病毒
也有抑制作用。 从比较研究可以看出双黄连与清开
灵抗病毒作用谱相似 ,但明显优于莪术油、穿琥宁、
鱼腥草。我们的研究结果 ,将为进一步开发双黄连提
供理论依据。
·54· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2002年第 33卷第 1期
参考文献:
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中药复方有效成分淫羊藿苷的药代动力学研究
邹节明 1 ,孟　杰 1 ,颜正华 2 ,龙致贤 2 ,施雪筠 2
( 1. 桂林三金药业集团公司中药研究所 ,广西 桂林　 541004;　 2. 北京中医药大学 ,北京　 100029)
摘　要: 目的　探讨中药复方有效成分的变化 ,了解复方配伍后药物成分之间的相互作用。方法　放射性同位素追
踪技术 ,观察复方中有效成分淫羊藿苷在动物体内的分布状态。结果　 3 H-淫羊藿苷在复方状态 ,经 ig给予小鼠后 ,
体内动力学行为符合开放性二室模型 ,并发现复方中其他成分有促进 3H-淫羊藿苷的吸收和促进与其靶器官结合
的作用。 结论　证实了中医复方配伍应用的科学性与合理性 ,也为淫羊藿的归经理论提供了科学依据。
关键词: 中药复方 ;有效成分 ;淫羊藿苷 ;体内分布 ;药代动力学
中图分类号: R285. 61　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253 2670( 2002) 01 0055 04
Pharmacokinetic studies of icariin in Chinese formulated medicine
ZOU Jie-ming
1
, M ENG Jie
1
, Y AN Zheng-hua
2
, LONG Zhi-xian
2
, SHI Xue-jun
2
( 1. Guilin Sanjin Pha rmaceutical G roup CO. , Guilin Guangxi 541004, China;
2. Beijing Univ er sity o f TCM , Beijing 100029, China)
Key words: Chinese formulated medicine; activ e consti tuents; ica riin; internal dist ribution; pha rma-
cokinetics
　　中药有效成分是发挥药效的物质基础 ,中药复
方配伍应用后 ,体外过程中的化学成分之间的相互
作用可概括为增溶、络合、化合三种现象。 但复方药
物进入体内后 ,成分之间有无这种现象尚不清楚。由
于复方中药的成分繁多 ,成分之间在体内的相互作
用更是复杂多样。 目前对复方中药的体内过程的研
究还较少 ,本研究用放射性同位素追踪技术 ,观察了
复方中有效成分淫羊藿苷在动物体内的分布状态 ,
研究了3 H-淫羊藿苷在复方状态下 ,经 ig 在动物体
内的分布和各种动力学参数的差异 ,并发现复方中
其他成分有促进 3H-淫羊藿苷的吸收和促进与其靶
器官结合的作用 ,实验结果也为淫羊藿的归经理论
提供了科学依据。
1　材料
1. 1　动物:二级 N IH雄性小鼠 ,体重 16～ 18 g ,由
卫生部北京生物制品研究所提供 ,合格证号: 医动字
( 01)第 ( 3071)号。
1. 2　淫羊藿苷:由中国药品生物制品检定所提供 ,
纯度大于 96% 。3 H-淫羊藿苷:用微波激活法作氚标
记 ,放射性比活度为 74 MBq /mg ,放射性浓度为 37
MBq /mg· mL甲醇 ,由原子能科学研究院 401所
提供。
1. 3　示踪剂:取 3 H-淫羊藿苷用生理盐水按 1∶ 1稀
释。 剂量: 0. 74 GBq /只 , ig给药。闪烁液:取 PPO
15 g、 PO PO P 0. 3 g ,加二甲苯 3 000 m L,混匀避光
保存备用。
·55·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2002年第 33卷第 1期
收稿日期: 2000-10-12作者简介:邹节明 ( 1943-) ,湖南省常德市人 , 1966年 6月毕业于武汉大学生物系药用植物专业 (五年本科 ) ,高级工程师 ,桂林三金药业集团有限责任公司董事长、总裁兼总工程师 ,中国药典委员会委员 ,中国中医药管理局中医药工业专家咨询委员会委员 ,“中草药”杂志副主任编委 ,广西科协常委 ,北京中医药大学客座教授 ,博士生导师。作为第一项目完成人和设计者 ,研究开发并依法获准生产的新中成药 38种 (其中重组配方制剂新中药 15种 ,剂型改进新中药 23种 ) ,已有 9种列入国家中药保护品种 , 16种列入国家基本药物。获国家科学大会重大科技成果奖 1项 ,国家科技进步奖三等奖 1项 ,广西科学大会优秀成果奖 2项 ,广西科技进步二等奖 1项 ,广西重奖研制推广科技成果有功人员特等奖 1项 ,均排名第一。首创的西瓜霜新工艺 ,在国内外独家实现工业化规模生产 ,是我国中药炮制改革的典范。 创制的西瓜霜润喉片和三金片是中国中药名牌产品 ,并通过澳大利亚治疗性药品管理局 ( TGA) 的药品注册审查。 发表科技论文 12篇 ,主编《中成药的应用与药理》和独著《现代中成药的研究开发》二部专业著作。 Tel: 0773-5842588　 E-mai l: s anjin@ gl. gx. cninfo. net