全 文 ：RP-HPLC法测定胃肠静胶囊中大黄素和大黄酚的含量
黎炳华 ,王　蔚
(广州中一药业有限公司 ,广东 广州　 510140)
　　胃肠静胶囊由大黄、苏梗、川楝子等组成 ,以清
热解郁、理气止痛、活血祛瘀为治疗原则 ,主要用于
胃及十二指肠溃疡郁热证或兼有气滞血瘀证。其中 ,
大黄为君药 ,所含大黄素有明显的抗菌作用 ,大黄酚
也有不同程度的抑菌作用 [1 ] ,为本品有效成分之一 ,
故制定大黄素、大黄酚的含量测定方法 ,以有效地控
制产品质量。
1　仪器与试剂
HP-1100高效液相色谱仪 (美国惠普公司 ) ,甲
醇 (色谱纯 ) ,大黄素、大黄酚 (中国药品生物制品检
定所提供 ) ,其他试剂均为分析纯。胃肠静胶囊 (广州
中一药业有限公司生产 )。
2　方法与结果
2. 1　色谱条件: 色谱柱: Alltech-C18柱 ( 4. 6 mm×
150 mm , 5μm);柱温: 室温 ;流动相: 甲醇 -0. 1%磷
酸溶液 ( 85∶ 15) [2 ] ;流速: 1 mL /min;检测波长: 440
nm;进样量: 10μL。 色谱柱的理论板数按大黄素计
不低于 5 000。 色谱图见图 1。
1-大黄素　 2-大黄酚
1-emodin　 2-chrys oph anol
图 1　空白对照 (A)、大黄素对照品 (B)、大黄酚对照品 (C)和胃肠静胶囊供试品 (D)的 HPLC图谱
Fig. 1　 HPLC chromatograms of blank (A) , emodin reference substance (B) , chrysophanol
ref erence substance (C) and Weichangjing Capsule sample (D)
2. 2　线性关系的考察: 精密称取大黄素对照品
2. 02 mg、大黄酚对照品 1. 92 mg,分别置 50 mL, 25
m L量瓶中 ,用甲醇溶解并稀释至刻度 ,摇匀 ;分别
精密量取大黄素溶液、大黄酚溶液各 5 mL,分别置
25 m L量瓶中 ,加甲醇至刻度 ,摇匀 ,即得 (大黄素含
量为 8. 08μg /mL、大黄酚含量为 15. 36μg /m L)。分
别吸取 2, 6, 10, 14, 18μL注入液相色谱仪 ,测定峰
面积积分值。 以峰面积为纵坐标 ,进样量为横坐标 ,
绘制标准曲线 ,得其回归方程。 大黄素: Y =
- 17. 241 284+ 2. 367 725X , r= 0. 999 30;大黄酚:
Y= - 32. 507 734+ 2. 343 850X , r= 0. 999 89。表明
大黄素在 16. 16～ 145. 44 ng、大黄酚在 30. 72～
276. 48 ng与峰面积呈良好线性关系。
2. 3　空白试验:取除大黄外的其他药材按处方组成
的剂量 ,按工艺要求制备成缺大黄的阴性样品 ,按供
试品溶液的制备方法操作 ,制得空白对照液。取空白
对照液注入液相色谱仪 ,结果在大黄素、大黄酚的主
峰位置无其他干扰峰出现。
2. 4　重现性试验: 取同一批样品 (批号 D00010) 6
份 ,按供试品测定项下方法测定。结果大黄素含量为
0. 092 mg /粒 , RSD= 2. 27% ,大黄酚含量为 0. 165
mg /粒 ,RSD= 2. 10%。
2. 5　加样回收试验: 取已知含量的样品 (批号
D00010) 5份 ,各约 0. 55 g,精密称定 ,分别加入相当
于 202μg大黄素对照品溶液和相当于 378. 12μg
大黄酚对照品溶液 ,挥去溶剂后按供试品测定项下
方法操作 ,计算得大黄素的平均回收率为 103. 9% ,
RSD = 2. 07% ; 大黄酚平均回收率为 97. 1% ,
·609·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　第 34卷第 7期 2003年 7月
收稿日期: 2002-11-01
RSD= 2. 36% 。
2. 6　精密度试验: 取同一供试品溶液 (批号
D00010)连续进样 6次 ,每次 10μL,分别测定其峰
面积。 结果大黄素峰面积 RSD= 1. 93% ,大黄酚峰
面积 RSD= 1. 19%。
2. 7　稳定性试验: 取同一供试品溶液 (批号
D00010)按上述条件分别在 0, 1, 2, 4, 24和 72 h进
样 ,每次进样 10μL,结果表明供试品溶液在 72 h内
稳定。大黄素峰面积 RSD= 2. 89% (n= 6) ,大黄酚
峰面积 RSD= 3. 36% (n= 6)。
2. 8　供试品溶液的制备及测定 [2 ]: 取胃肠静胶囊内
容物 1. 1 g ,精密称定 ,置 50 mL锥形瓶中 ,精密加
甲醇 25 mL,称定质量 ,加热回流 30 min,放冷 ,用甲
醇补足减失的质量 ,摇匀 ,滤过。精密量取续滤液 5
m L,置 50 mL圆底烧瓶中 ,挥去甲醇 ,加 2. 5 mol /L
硫酸溶液 10 mL,加热水解 20 min,再加氯仿 10
m L,加热回流 1 h,冷却 ,移至分液漏斗中 ,用少量氯
仿洗涤容器 ,并入分液漏斗中 ,分取氯仿层 ,酸液用
氯仿提取 2次 ,每次约 8 mL,合并氯仿液 ,以无水硫
酸钠脱水 ,氯仿液移至 100 mL锥形瓶中 ,挥去氯
仿 ,残渣精密加甲醇 10 m L,称定质量 ,置水浴中微
热溶解残渣 ,放冷后 ,用甲醇补足减失的质量 ,摇匀 ,
滤过 ,取续滤液 ,即得。 分别精密吸取上述两种对照
品溶液与供试品溶液各 10μL,注入液相色谱仪 ,照
上述色谱条件测定 ,计算含量。 结果见表 1。
表 1　胃肠静胶囊中大黄素及大黄酚的含量 (n= 2)
Table 1　 Content of emodin and chrysophanol in
Weichangj ing Capsule (n= 2)
批　号 大黄素含量 / ( mg· 粒 - 1 ) 大黄酚含量 /( mg· 粒 - 1 )
D00010 0. 092 0. 165
D00009 0. 096 0. 189
D00008 0. 095 0. 167
3　讨论
3. 1　目前市场上大黄药材质量不稳定 ,仅用大黄素
作为定量指标不足以控制胃肠静胶囊的质量 ,所以
同时以大黄酚作为定量指标 ,通过对 HPLC法的方
法学考察 ,认为该含量测定方法准确、可靠、快速、重
现性好 ,可用于控制该药的质量。
3. 2　测定波长的选择: 检测波长在 254 nm时 [2 ] ,供
试品 HPLC图基线漂移 ,组分间分离度不理想 ,说
明此检测波长不适用于本品 HPLC测定。经过全波
长扫描及进一步摸索 ,发现被测组份在 430 nm左
右有较好的吸收 ,经过对此范围内的波长进行选择 ,
最后选定 440 nm作为本法的检测波长 ,在此波长
下基线较平且稳定 ,且被测组份无干扰。
References:
[1 ]　 Information Center of Chinese Herbal Medicin e, State Phar-
maceutical Adminis t ration of China. Handbook of Active Com-
ponents in Phytomedicines (植物药有效成分手册 ) [M ]. Bei-
jing: People s Medical Publishing House, 1986.
[2 ]　Ch P (中国药典 ) [S ]. 20000 ed. VolⅠ .
进口药材西洋参、番泻叶中有机氯类农药残留量分析
李玲玲 ,袁文杰 ,张水龙 ,黄惠琼
(厦门市药品检验所 ,福建 厦门　 361012)
　　有机氯农药是一类高效广谱杀虫剂 ,曾成为世
界各国使用量最大的杀虫剂 ,它属于神经毒物和实
质脏器毒物 ,可致癌。有机氯类农药的全球性环境污
染及对人类健康的危害正引起世界各国有关部门的
高度重视。 虽然日本于 1971年起限制使用该类农
药 ,美国于 1973年宣布禁用六六六 ( BHC)和滴滴涕
( DDT) ,我国也于 1978年宣布停止生产六六六和
DDT,但由于该类农药化学性质稳定 ,不易分解 ,能
长期在水域、土壤和生物有机体内储存 ,特别是生物
链有极强的富集作用 ,致使在禁用 20年后仍在土壤
以及天然药物和动物脂肪中检出有机氯类农药的残
留 [1, 2 ]。因此 ,对天然药物中农药残留进行检测 ,预防
慢性中毒是十分必要的。
本实验收集口岸进口的西洋参、番泻叶药材 ,采
用 GC-ECD检测 ,对其中的有机氯类农药残留分析
测试 ,以了解国外在禁用 BHC、 DDT 20余年后 ,该
类农药在天然药材中的残留水平 ,制订安全措施。
1　仪器与试药
日本岛津 Shimadzu GC-17A气相色谱仪 (包括
63
Ni电子捕获检测器 ) , DB-5弹性石英毛细管柱 ( 30
·610· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　第 34卷第 7期 2003年 7月
收稿日期: 2002-11-06