全 文 ：均匀设计在丹心痛最佳配比筛选中的应用
高　鹏1 ,安宁飞2,赵明宏3,刘玉兰2

( 1. 沈阳药科大学 药剂教研室, 辽宁 沈阳　110016; 2. 沈阳药科大学 药理教研室,辽宁 沈阳　110016; 3. 北方医院 药剂
科, 辽宁 沈阳　110016)
摘　要: 目的　确定丹心痛 ( DXT ) 4种成分在处方中的最佳配比。方法　应用均匀设计处理手段与药效学相结合
的方法(大鼠急性心肌缺血模型)对 DXT 中各味药所占比例进行筛选。结果　DXT 中川芎、香附、冰片、丹皮酚的
最佳配比为5∶1. 7∶1. 4∶4. 4, 138 mg / kg 能明显抑制垂体后叶素( Pit )及异丙肾上腺素( I so )致大鼠急性心肌缺
血, 初步药效学实验研究证明, DXT 有抗心肌缺血的作用。结论　应用均匀设计确定复方药最佳配比的方法是可
行的。
关键词: 丹心痛;均匀设计; 心肌缺血
中图分类号: R283. 3; R286. 2　　　文献标识码: B　　　文章编号: 0253 2670( 2003) 02 0123 03
Application of uniform-design method used to select best proportion
of ingredients in Danxintong
GAO Peng
1
, AN Ning-fei
2
, ZHAO M ing-hong
3
, L IU Yu-lan
2
( 1. Depart ment of Pha rmacy , Shenyang Pharmaceutical Univ ersit y, Shenyang 110016, China; 2. Depar tment
o f Pharmacolog y , Shenyang Pharmaceutical Univ ersity , Shenyang 110016, China;
3. Departm ent o f Pharmacy , Nor th Hospital, Shenyang 110016, China)
Abstract: Object　T o define the opt imal proport ion of four ing redients in Danx intong ( DXT ) . Meth-
ods　U niform-design method combined w ith pharmacodynam ics ( Rat acute myocar dial ischemia model w as
used in this study) w as used. Results　The opt imal proport ion and components o f DXT ( Composed of
Rhiz oma Chuanx iong, Rhiz oma Cyp eri , Borneolum Syntheticum, and paeonol ) w er e 5∶1. 7∶1. 4∶4. 4;
DXT 138 mg/ kg could obviously inhibit acute myocardial ischemia o f rats induced by iso-prenal ine ( Iso )
and pituiturin ( Pit ) . DXT has ant imyocardial ischem ia effects in preliminary exper imental studies. Conclu-
sion 　Uniform-design method is an effect ive method to def ine the opt imal proport ion of ingr edients in
DXT ;
Key words : Danx intong ( DXT) ; uniform-design method; myocardial ischemia
　　丹心痛是综合速效救心滴丸(牡丹皮、川芎、冰
片) [ 1]和心痛宁滴丸(肉桂、川芎、香附) [ 1]的药方。心
痛宁滴丸有温经活血、理气止痛之功效,用于寒凝气
滞,血瘀阻络,胸痹心痛遇寒发作,舌苔色白、有瘀斑
者。而速效救心滴丸有凉血活血、宽胸止痛之功效,
用于血热瘀阻的轻、中度胸痹心痛,烦热口渴,舌红
苔黄[ 1]。本方君药为川芎、臣药为牡丹皮、佐药为香
附、使药为冰片,旨在寻找既适用寒凝气滞的胸痹心
痛,又适用于血热瘀阻型胸痹心痛的良方。
丹心痛中各单味药均为经超临界流体萃取法
( supercrit ical fluid ext raction, SFE)提取的有效部
位。为确定丹心痛中 4味药用量的最佳配比,本试验
采用均匀设计与药效学相结合的方法对各味药所占
比例进行筛选, 经数理统计方法确定了其处方用量
的最佳配比。
1　材料
1. 1　动物: Wistar 大鼠, 雌雄各半, 体重 200～250
g ,沈阳药科大学动物实验中心提供,合格证号:辽实
动质字[ 2000] 042号。
1. 2　药品:川芎提取物(Ⅰ) , 香附提取物(Ⅱ) ,冰片
( 50%
-环糊精包合物) (Ⅲ)和牡丹皮提取物(丹皮
酚含量 95%) (Ⅳ)。其中Ⅰ,Ⅱ,Ⅳ均为有效部位的
超临界提取物, 含量均 50%以上。
1. 3　其他试药: 垂体后叶素( Pit ) , 上海第一生化制
药公司上海生物化学制药厂, 批号 001019; 氨基甲
酸乙酯, 北京通县育才化工厂, 批号 990623;盐酸异
·123·中草药　Chinese T raditional and Herbal D rug s　第 34 卷第 2 期 2003年 2月

收稿日期: 2002-04-12作者简介:高　鹏( 1977—) , 男,河北人,药师, 1998年毕业于沈阳药科大学药物分析专业,获学士学位, 1998～2000年工作于天津天士力制药公司药物研究所, 2000年至今攻读沈阳药科大学药物制剂专业硕士学位,研究方向为中药的掩味及口腔速溶制剂。
E-mail : penggao1@ sina. com
丙肾上腺素( Iso) , 上海禾丰制药公司,批号 000201;
冠心苏合丸, 沈阳天益堂中药厂,批号 0012017。
1. 4　仪器: EK10型单道自动心电图机, 上海伯迪
克医疗仪器有限公司; FSH-Ⅱ型高速电动匀浆器,
江苏金坛金城国胜实验仪器厂。
1. 5　受试品及配比设置:丹心痛中 4味药分别制得
后,依据单味药药效试验结果,数据的整齐性,《中华
人民共和国药典》及文献中单味药的药效剂量 3个
原则设定各味药剂量范围, 结果Ⅰ的用量为:
0. 048～0. 336 g/ kg , Ⅱ为0. 012 5～0. 087 5 g / kg,
Ⅲ为 0. 013 5～ 0. 094 5 g/ kg , Ⅳ 为0. 04～ 0. 028
g / kg。将上述 4因素各等分为 7个水平, 按均匀设计
U 7 ( 7
6)试验表(表 1)的安排进行,得出 7个组方中各
味药的配比。7个组方按表中剂量配制, 并加1 g 泊洛
沙姆, 1 g HPMC 于乳匀机混悬制成 100 mL 乳剂。
表 1　均匀设计 U7( 76)因素水平表
Table 1　Four factors and seven levels
of U7( 76) uniform design
试验号 川芎提取物 香附提取物 冰片 牡丹皮提取物
组方 1 1 2 3 6
组方 2 2 4 6 5
组方 3 3 6 2 4
组方 4 4 1 5 3
组方 5 5 3 1 2
组方 6 6 5 4 1
组方 7 7 7 7 7
2　方法与结果
2. 1　7种组方对垂体后叶素诱导的大鼠心肌缺血
的影响[ 2] :将动物随机分组, 雌雄各半, 分别为溶剂
对照组、冠心苏合丸组 ( 1 396 mg/ kg )、组方 1～7
组。各组分别 ig 10 mL/ kg , 1 h后 20%乌拉坦麻醉,
背位固定,记录正常心电图(Ⅱ导联) ,然后由大鼠舌
下 iv 垂体后叶素( P it ) 0. 6 U / kg ,记录给 Pit 后 10,
20, 30, 60, 120, 300 s的心电图, 测定给 Pit 前后 T
波峰值的变化, 以 30 s 内 T 波抬高峰值为指标,结
果见表 2。
2. 2　7种组方对异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌缺
血的影响 [ 3] : 将动物随机分组, 雌雄各半, 分组同
2. 1,各组按 2. 1连续给药 5 d, 于第 4天测正常心电
图(Ⅱ导联) , 给药 1 h 后 sc 盐酸异丙肾上腺素
( Iso) 2 mg/ kg ,末次 ig 给药 1 h 后,追加相同剂量
Iso ( 2 mg / kg ) , 测定给药后 2, 5, 10, 15, 20, 30 s的
Ⅱ导心电图, 以 ST 段偏移正常值的总 mV 数为指
标,求各组均值,结果见表 3。
2. 3　结果分析: 综合两种模型的实验结果, 以
给药组 30 s 内 T 波抬高峰值
空白组 30 s 内 T 波抬高峰值+
给药组
ST
空白组
ST × 100% / 2
作为药效指标, 结果见表 4。
表 2　对 Pit 致心肌缺血 T波高度的影响( x±s, n= 10)
Table 2　Ef fect on T wave height of myocardial ischemia
induced by Pit ( x±s, n= 10)
组　别 　　　T 波高度/ mV
溶剂对照 　　　0. 262±0. 100
冠心苏合丸 0. 140±0. 064*
组方 1 0. 154±0. 100*
组方 2 0. 131±0. 036* *
组方 3 0. 152±0. 095*
组方 4 0. 181±0. 070
组方 5 0. 121±0. 082*
组方 6 0. 147±0. 071*
组方 7 0. 138±0. 054* *
　　与溶剂对照组相比: * P < 0. 05　* * P< 0. 01
　　* P < 0. 05　* * P < 0. 01 v s cont rol group
表 3　抗 Iso 致心肌缺血
ST变化值 ( x±s, n= 10)
Table 3　Ef fect on
ST segment drif t of myocardial
ischemia induced by Iso ( x±s, n= 10)
组　别
ST 变化值/ mV
溶剂对照 　　　1. 568±0. 363
冠心苏合丸 0. 891±0. 287* *
组方 1 0. 935±0. 021* *
组方 2 1. 010±0. 391
组方 3 1. 099±0. 411*
组方 4 1. 134±0. 498*
组方 5 0. 906±0. 248*
组方 6 0. 819±0. 304*
组方 7 1. 544±0. 456
　　与溶剂对照组相比: * P < 0. 05　* * P< 0. 01
　　* P < 0. 05　* * P < 0. 01 v s cont rol group
表 4　不同剂量配比对大鼠心肌缺血的影响 ( n= 10)
Table 4　Ef fect on myocardial ischemia rats
in dif ferent dosage ( n= 10)
试验号 川芎/ g 香附/ g 冰片/ g 牡丹皮/ g 药效指标
1 0. 48 　0. 250 0. 041 2. 64 0. 592
2 0. 96 0. 500 0. 081 2. 20 0. 572
3 1. 44 0. 750 0. 027 1. 76 0. 641
4 1. 92 0. 125 0. 067 1. 32 0. 707
5 2. 40 0. 375 0. 014 0. 88 0. 520
6 2. 88 0. 675 0. 054 0. 44 0. 542
7 3. 36 0. 875 0. 094 3. 08 0. 756
　　将以上结果输入计算机, 用沈阳药科大学编写
的均匀设计软件处理,进行平方项的逐步回归,得回
归方程: Y= 0. 578 1+ 0. 014 9X 22- 0. 069 1X 23-
0. 009 5 X 1X 2+ 0. 000 9 X 1X 4, 复 相 关系 数 R=
21. 000 0, F= 9 043. 693 3, 回 归 显 著 性 检 验
ALFA= 0. 007 9。计算机得出的优化结果为: 100
mL 乳剂含川芎提取物 0. 504 g ,香附提取物 0. 166
g ,冰片 0. 27 g ,牡丹皮提取物 0. 44 g。
·124· 中草药　Chinese T raditional and Herbal D rug s　第 34 卷第 2 期 2003年 2月
2. 4　优化组方的验证:将各单味药按优化结果配成
组方,利用以上方法分别检测药效。结果见表 5。
表 5　优化方对大鼠急性心肌缺血的影响( x±s, n= 10)
Table 5　Ef fect of optimized compound on acute
myocardial ischemia rats ( x±s, n= 10)
组　别 T 波高度/ mV
ST /m V
溶剂对照 0. 26±0. 12　 1. 25±0. 51　
优化方　 0. 14±0. 60* 0. 57±0. 29*
　　与溶剂对照组相比: * P < 0. 05
　　* P < 0. 05 v s cont rol group
　　指标值为 0. 507, 其值最小,说明药效优于其他
组方,证明川芎、香附、冰片、牡丹皮的最佳配比为
5∶ 1. 7∶1. 4∶4. 4(原提取物的质量比) , 剂量为
138 mg / kg(折生药 2. 78 g / kg )。
3　讨论
　　均匀设计是有别于正交设计的实验设计,它的
特点是有关因素的各个水平与水平数相等, 减少了
多次试验,且实验结果可用计算机处理,通过回归方
程得出理论的最佳实验条件。因此均匀设计广泛应
用于工艺筛选,近年来也越来越多的应用于复方药
物筛选的药理研究 [ 4, 5]。
本试验研究表明, 经均匀设计所得优化处方丹
心痛 138 mg/ kg 能对抗大鼠注射 Pit 后造成的冠状
动脉收缩痉挛, 血氧供应障碍, 降低大鼠心电图 T
波的抬高( P< 0. 05) ;对
受体兴奋剂 Iso 引起的心
率加快,心肌收缩力增加等增加氧耗,在心电图上主
要表现为 ST 段(
ST )的偏移也有显著的对抗作用
( P< 0. 05)。同时证明均匀设计可作为有效筛选组
方最佳配比的方法,初步药效学实验证明其优化方
丹心痛对缺血心肌有一定的保护作用。
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液相色谱法制备丹参素钠
潘　见,徐　涛

(合肥工业大学 农产品生物化工教育部重点实验室,安徽 合肥　230069)
摘　要: 目的　分离纯化丹参中的水溶性活性成分丹参素钠。方法　采用亲脂性吸附树脂与制备型反相高效液相
色谱组合分离技术, 将丹参水提粗制品经亲脂性吸附树脂柱色谱预分离后, 再由制备型 RP-HPLC 纯化精制。结果
产品经熔点、MS, IR , UV 和HPLC 图谱鉴定,并与文献、标准对照品比较,证明为丹参素钠,纯度> 98%。结论　该
方法简单, 重复性较好,采用的溶剂系统价廉易得、沸点低、易于回收。
关键词: 丹参素钠;分离; 纯化;制备色谱
中图分类号: R284. 2; R286. 0　　　文献标识码: B　　　文章编号: 0253 2670( 2003) 02 0125 03
Preparative separation of D( + ) -
-( 3, 4-dihydrophenyl) -lactate sodium
from Salvia miltiorrhiza by HPLC
PAN Jian, XU T ao
( Key Labor ato ry for Biochemical Eng ineer ing o f Agr icultur al P roducts o f M inistr y o f Education,
Hefei Univ ersit y o f Techno lo gy , Hefei 230069, China )
Abstract: Object　T o develop a method for the isolat ion and purificat ion of D ( + ) -
-( 3, 4-dihy-
drophenyl ) -lactate sodium from Salvia miltr orr hiz a Bge. Methods　Combined lipophilic adsorption resin
and prepar at ive RP-HPLC, the water ex t ract of S. mil trorrhiz a was pre-isolated by lipophilic adsorption
·125·中草药　Chinese T raditional and Herbal D rug s　第 34 卷第 2 期 2003年 2月

收稿日期: 2002-08-02基金项目:国家自然科学基金重点项目( 20136020)作者简介:潘　见( 1955—) ,男,博士,教授,博士生导师,主要从事天然产物分离纯化技术及装备研究。T el : ( 0551) 2900134