全 文 ：状、哑铃状, 核仁常边集, 胞浆中可见片状或块状不
规则空泡变性、坏死, 线粒体大小不一, 粗面内质网
扩张, 表明肝纤维化形成。秋水仙碱组, 肝细胞外形
不规则, 核形规则, 光面内质网增生, 可见空泡样变
性。大蒜素组, 肝脏结构基本接近正常, 线粒体发达,
未见明显肝细胞坏死。
3　讨论
　　前期研究表明大蒜素对DM N 致大鼠肝纤维化
具有防治作用[1 ] , 秋水仙碱作为抗肝纤维化阳性对
照药物已得到国内外一致认可, 本研究以秋水仙碱
为对照, 进一步研究大蒜素对肝纤维化模型大鼠肝
功能和肝细胞病理学的影响, 观察大蒜素作为抗氧
化剂对DM N 所致肝损伤的防治作用。
DM N 是一种具有肝毒性的化学制剂[2 ] , 目前
用 DM N ip 制备急性肝损伤、肝纤维化模型, 是国
内外一致认可较为理想的制备动物模型的方法[3 ]。
ip DM N 后 7 d 开始出现中央小叶肝细胞纤维化和
出血坏死, 14 d 可见中性粒细胞浸润, 伴随肝细胞
脂肪变性、胆管增生、桥样坏死并可观察到肝纤维化
在中央静脉周围的形成[4 ]。本实验光镜及电镜结果
均表明模型组肝纤维化已经形成。研究表明DM N
在肝纤维化动物模型中对肝细胞损伤作用与脂质过
氧化有关[5 ]。大蒜素能明显增强还原型谷胱甘肽
(GSH ) 及其相关酶活性确保 GSH 氧化还原过程顺
利进行, 加速对肝内毒物的代谢和灭活[6 ]。大蒜素作
为抗氧化剂, 其抗化学毒物致肝损伤机制主要在于其
抗氧化活性而抑制脂质过氧化物对膜结构的损伤。
　　肝细胞坏死几乎是各型肝硬化形成的基本因
素, 肝细胞坏死为点状或灶状时则通过肝细胞再生
而迅速修复, 如反复的点状、灶状坏死, 纤维增生则
变得活跃, 坏死为带状或大块时, 由于网状支架塌
陷, 网状纤维互相聚集, 黏合形成胶原纤维。本实验
模型组大鼠肝脏切片光镜、电镜下均提示肝细胞内
和细胞间大量脂滴沉积, 肝细胞脂肪变性, 肝细胞之
间见炎性细胞浸润。大蒜素可使DM N 所致肝细胞
脂肪样变性、炎症、坏死明显减轻, 生化检查表明其
使 A ST、AL T 活性降低, T G、TC 含量减少, 肝
ALB 合成增加, 表示肝细胞再生和合成功能进一步
加强。由此可见, 大蒜素较秋水仙碱具有较好的肝脏
保护作用, 可以阻止肝纤维化的进一步发展, 对肝纤
维化的防治起积极作用。
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青龙衣提取物对荷瘤小鼠细胞膜流动性的影响
季宇彬, 马宏图Ξ
(哈尔滨商业大学药物研究所 博士后科研工作站, 黑龙江 哈尔滨　150076)
摘　要: 目的　探讨青龙衣提取物对 S180和 H 22荷瘤小鼠细胞膜脂流动性的影响。方法　选取 S180和 H 22作为瘤株,
于正常小鼠腋下接种 S180瘤液, 腹腔接种 H 22瘤液, 荷瘤小鼠分别每天 ip 青龙衣冷醇提取物 (191137、95168、47184
m gökg)、热醇提取物 (121117、60158、30129 m gökg)、环磷酰胺 (20 m gökg, 为阳性对照)、生理盐水 (阴性对照) , 给
药 7 d 后处死小鼠, 制备肿瘤细胞和红细胞悬液。以 1, 62diphenyl21, 3, 52hexatriene (D PH ) 为探针剂, 用荧光偏振
法测定荧光偏振度 (P ) 值和微黏度 (Γ) , 观察青龙衣提取物对细胞膜脂流动性的影响。结果　青龙衣冷醇、热醇提
取物均能使 S180小鼠的肿瘤细胞膜流动性提高, 使 H 22小鼠的肿瘤细胞膜流动性降低, 与生理盐水组比较, 两种提
取物均能降低 H 22小鼠红细胞膜流动性 (P < 0105)。结论　青龙衣提取物可能通过对肿瘤细胞膜的影响起到抑瘤
作用, 而对维持红细胞膜的稳定性起积极作用。
·7831·中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 12 期 2004 年 12 月
Ξ 收稿日期: 2004204201
基金项目: 黑龙江省自然科学基金项目
作者简介: 季宇彬 (1956—) , 男, 博士, 教授, 博士生导师, 多年来一直致力于中药药理、肿瘤药理、分子药理学研究。
关键词: 青龙衣提取物; 膜流动性; 红细胞膜
中图分类号: R 286191　　　文献标识码: A 　　　文章编号: 0253 2670 (2004) 12 1387 04
Effect of Qinglongy i extracts on cell m em brane f lu id ity of tum or-bear ing m ice
J I Yu2b in, M A Hong2tu
(Po stdocto ral P rogramm e, Inst itu te of M ateria M edica, H arb in U niversity of Comm erce, H arb in 150076, Ch ina)
Abstract: Object　To study the effects of the differen t Q inglongyi ex tracts (Q E) on cell m em b rane
flu id ity of S180 and H 22 tumo r2bearing m ice. M ethods　T he tumo r models of S180 and H 22 w ere u sed. T he ox2
ter of the no rm al m ice w ere in jected S180 tumo r cell liqu id and the abdom en of tho se w ere in jected H 22 tumo r
cell liqu id. T umo r2bearing m ice w ere given Q E by ip co ld alcoho l ex tract (191. 37, 95. 68, 47. 84 m gökg) ,
ho t a lcoho l ex tract (121. 17, 60. 58, 30. 29 m gökg) , and cytoxan (20 m gökg as po sit ive con tro l) , no rm al
sa line (as negat ive con tro l) fo r 7 d then the m ice w ere k illed, and the tumo r cell m em b rane liqu ids w ere
m ade acco rd ing to the m ethods. T he m em b rane flu id ity w as studied w ith fluo rescence po lariza t ion (P ) and
m icrovisco sity (Γ) w ith 1, 62dipheyl21, 3, 52hexatriene (D PH ) as a p robe. Results　T he Q E by bo th co ld
and ho t a lcoho l can m ake the m em b rane flu id ity of S180 tumo r cell imp rove, the m em b rane flu id ity of H 22 tu2
mo r cell decline. Compared w ith the no rm al sa line con tro l group , Q E by bo th co ld and ho t a lcoho l can
m ake the m em b rane flu id ity of RBC ( red b lood cell) decline (P < 0105). Conclusion 　T he inh ib ito ry
effects of Q E on tumo r cell can be th rough influencing the tumo r cell m em b rane and the act ion s of m ain2
ta in ing the m em b rane stab ility of RBC can be act ive.
Key words: Q inglongyi ex tracts (Q E) ; m em b rane flu id ity; m em b rane of red b lood cell
　　前期研究表明, 青龙衣提取物具有抗肿瘤作用
并对荷瘤小鼠细胞膜唾液酸含量有影响[1 ]。为进一
步研究青龙衣提取物的抗肿瘤作用及机制, 本实验
以 1, 62diphenyl21, 3, 52hexatriene (D PH ) 为荧光
探针剂, 通过测定 S180和 H 22荷瘤小鼠肿瘤细胞膜和
红细胞膜的荧光偏振度 (P ) 和微黏度 (Γ) , 观察青
龙衣提取物对细胞膜流动性的影响。
1　材料
111　动物: 昆明种小鼠, 体重 18～ 22 g, 雌雄兼用,
由黑龙江中医药大学动物室提供。
112　药物及试剂: 青龙衣冷醇提取物 (含胡桃醌
4516% ) 及热醇提取物 (含胡桃醌 5515% ) 均由哈
尔滨商业大学药物研究所博士后科研工作站自制,
应用时以生理盐水配制。环磷酰胺 (上海旭东海普
药业有限公司, 批号 000706) ; D PH (Sigm a) , 蛋白
定量试剂盒 (购自南京建成生物公司)。
113　瘤株: 小鼠肝癌 (H 22)、肉瘤 (S180) 均由黑龙
江肿瘤研究所提供, 本所移植传代。
114　仪器: R F—540 荧光分光光度计, 日本岛津公
司生产, 低速离心机 (北京离心机厂) , 低温高速离
心机 (Beckm an)。
2　方法
211　分组、荷瘤小鼠模型的建立及给药[2 ]: 选择体
重 (20±2) g 昆明种小鼠, 雌雄各半, 随机分为青龙
衣冷醇提取物 (191137、95168、47184 m gökg) 组、
青龙衣热醇提取物 (121117、60158、30129 m gökg)
组、环磷酰胺 20 m gökg 组、生理盐水组, 每组 8 只。
各组小鼠于右前腋皮下常规接种 S180瘤细胞悬液
012 mL , 约 1×106～ 2×106个细胞 (H 22瘤细胞悬液
由腹腔接种)。小鼠接瘤 24 h 后 ip 给药, 每日 1 次,
连续给药 7 d。停药次日处死动物, 测定相关指标。
212　细胞膜的制备
21211　肿瘤细胞膜的制备: 对于实体瘤 S180型则取
瘤组织经研磨稀释制成一定浓度的细胞悬液, 对腹
水瘤 H 22型则抽取小鼠腹水 015 mL , 800 röm in 离
心 10 m in, 弃上清液。加入 0185% N H 4C l 除去红细
胞, 适量 PBS 洗涤 3 次, 蒸馏水破膜 1 h。再以 3 000
röm in 离心 10 m in, 弃上清液, 最后将沉淀悬浮在适
量 PBS 液中。
21212　红细胞膜的制备: 取小鼠全血, 生理盐水
3 000 röm in 离心, 生理盐水 (1∶3) 洗涤 3 次, 悬浮
在生理盐水 (1∶1) 中。加入 5 mmo löL N aHCO 3
(1∶20) , 同时加入蛋白酶抑制剂 PM SF, 4 ℃ 溶血
1 h, 12 000 röm in 离心 30 m in, 弃上清液。5 mmo lö
L N aHCO 3洗涤 3 次, 悬浮在 5 mmo löL N aHCO 3、
0115 mo löL N aC l 溶液 (1∶1)中。
213　膜流动性的测定
21311　细胞膜的荧光标记: 取新配制的 2 mmo löL
D PH 四氢呋喃液 10 ΛL , 分别加入 1010 mL 红细胞
(RBC ) 膜缓冲液 (膜蛋白总量 980 ΛgömL ) 及
·8831· 中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 12 期 2004 年 12 月
1010 mL 瘤细胞悬液, 25 ℃ 温浴 30 m in, 用 PBS
液洗涤 1 次, 最后将细胞悬浮于 410 mL PBS 液中,
即得D PH 标记的细胞膜。
21312　P 和 Γ的测定: 细胞膜的流动性用 P 和 Γ表
示。Κex: 362 nm , Κem : 432 nm , 狭缝 10 nm , 测量温
度 25 ℃, 按公试计算 P 值和 Γ值[3 ]。膜蛋白定量采
用考马斯亮蓝法。
3　结果
　　青龙衣提取物对荷瘤小鼠细胞膜流动性的影
响: 结果见表 1～ 3。与生理盐水组比较, 青龙衣两种
提取物均能使 S180小鼠肿瘤细胞膜的 P 值降低, Γ
减小, 而膜脂流动性 (L FU ) 则增大, 表明膜的流动
性在提高; 对于 H 22小鼠则恰恰相反, 青龙衣提取物
能使其肿瘤细胞膜流动性降低。结果还可以看出, 与
S180相比, H 22小鼠肿瘤细胞膜流动性明显升高, 青龙
衣提取物对其作用更明显。表 3 结果表明青龙衣提
取物对 H 22小鼠的红细胞膜的流动性有降低作用,
但其幅度较小。
表 1　青龙衣提取物对 S180小鼠肿瘤细胞膜流动性的影响 (x±s, n= 8)
Table 1　Effect of QE on tumor cell membrane f luid ity of S180 m ice (x±s, n= 8)
组　别 剂量ö(m g·kg- 1) P Γ L FU
生理盐水 　　　　- 01199 0±01021 1 11537 8±01294 5 71654 5±01634 8
环磷酰胺 　　　　20 01181 1±01019 4 11307 7±01234 0 91726 0±01479 53
冷醇提取物 191137 01181 0±01018 5 11312 5±01253 2 91564 2±01513 23
95168 01184 2±01017 6 11339 8±01213 4 91231 1±01485 03
47184 01189 0±01019 1 11395 0±01265 0 81612 2±01594 23
热醇提取物 121117 01175 0±01017 9 11230 5±01215 5 101653 3±01462 13
60158 01179 4±01018 3 11279 6±01195 2 91986 3±01512 33
30129 01190 2±01019 7 11412 3±01207 7 81632 1±01433 3
　　　与生理盐水组比较: 3 P < 0105
　　　3 P < 0105 vs N S group
表 2　青龙衣提取物对 H22小鼠肿瘤细胞膜流动性的影响 (x±s, n= 8)
Table 2　Effect of QE on tumor cell membrane f luid ity of H22 m ice (x±s, n= 8)
组　别 剂量ö(m g·kg- 1) P Γ L FU
生理盐水 　　　　- 01157 7±01007 4 11027 5±01086 3 141951 5±11583 6
环磷酰胺 　　　　20 01176 5±01007 8 11249 6±01089 5 101511 9±11646 93
冷醇提取物 191137 01179 0±01009 8 11274 1±01101 9 101017 3±11675 63
95168 01180 8±01006 9 11296 9±01082 9 91887 5±11502 13
47184 01154 7±01006 5 11015 0±01078 5 141519 1±11425 5
热醇提取物 121117 01175 1±01010 2 11233 0±01112 9 101709 8±11713 43
60158 01167 9±01008 9 11184 7±01105 6 111479 2±11694 13
30129 01167 7±01008 3 11147 0±01095 6 111828 9±11601 2
　　　与生理盐水组比较: 3 P < 0105
　　　3 P < 0105 vs N S group
表 3　青龙衣提取物对 H22小鼠红细胞膜流动性的影响 (x±s, n= 8)
Table 3　Effect of QE on RBC membrane f luid ity of H22 m ice (x±s, n= 8)
组　别 剂量ö(m g·kg- 1) P Γ L FU
生理盐水 　　　　- 01226 7±01006 3 11945 8±01105 2 51331 4±01432 7
环磷酰胺 　　　　20 01237 4±01008 9 21139 4±01167 9 41681 2±01583 13
冷醇提取物 191137 01226 4±01007 4 11939 1±01132 2 41610 9±01453 13
95168 01235 0±01006 8 21094 9±01113 9 41825 7±01419 93
47184 01238 8±01008 5 21167 4±01154 8 51341 7±01496 0
热醇提取物 121117 01236 5±01004 3 21117 4±01080 2 41715 9±01256 03
60158 01232 0±01009 2 21048 1±01195 5 51052 8±01596 03
30129 01227 3±01007 9 11864 5±01127 8 51686 7±01574 1
　　　与生理盐水组比较: 3 P < 0105
　　　3 P < 0105 vs N S group
4　讨论
　　前期实验表明青龙衣冷、热醇提取物均对实验
性肿瘤小鼠确有明显的抑瘤作用[1 ]。已有的研究表
明, H 22小鼠肿瘤细胞膜的流动性与正常小鼠相比异
常增高, 而 S180小鼠的肿瘤细胞膜流动性比正常
低[3, 4 ]。本实验研究表明, 青龙衣两种提取物对 S180
·9831·中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 12 期 2004 年 12 月
小鼠的肿瘤细胞膜流动性有显著提高作用, 而对
H 22小鼠的肿瘤细胞膜流动性有显著降低作用, 表明
青龙衣对肿瘤细胞具有一定的抑制作用, 其作用之
一是改变了细胞膜的力学特征, 从而干扰肿瘤细胞
膜的功能而达到抗肿瘤的目的, 提示青龙衣对肿瘤
细胞膜的作用可能是其抗肿瘤作用的机制之一。
研究发现, 许多疾病除实质性器官的细胞膜病
变外, 常伴有红细胞膜功能的异常[5 ]。细胞膜的流动
性是细胞膜的主要动力学特性。许多研究表明, 细胞
膜的这一特性与细胞的发育、分化、增殖、免疫反应
和信息传递等生物学基本功能密切相关[6 ]。在细胞
周期的不同时相、代谢过程中疾病条件下以及药物
作用后都会有流动性的变化。但对恶性肿瘤患者, 红
细胞膜的改变报道很少。本实验表明, 荷瘤小鼠红细
胞膜的流动性增加, 青龙衣提取物可使其流动性降
低, 这与有关报道是相符的[7, 8 ] , 表明肿瘤的发生及
青龙衣提取物的治疗对小鼠红细胞膜组份、分布及
膜中胆固醇与磷脂的比值都有一定的影响。
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雾化吸入复方丹参注射液对肺切除病人术后痰流变学性质的影响
王建荣, 谷岩梅, 马燕兰Ξ
(解放军总医院 护理部, 北京　100853)
摘　要: 目的　探讨超声雾化吸入复方丹参注射液对降低肺叶切除病人术后呼吸道黏液流变学性质的影响。方法
对照组病人常规方案雾化吸入蒸馏水, 实验组病人超声雾化吸入复方丹参注射液。结果　实验组术后 (除第 2 日)
痰黏性明显低于对照组 (P < 0101、01001) , 术后 1～ 2 d 痰弹性明显低于对照组 (P < 01001)。两组病人术后痰屈服
应力差异不显著。实验组患者的心率、血压及血氧饱和度在雾化吸入复方丹参注射液前、后 30 m in 无明显变化。结
论　超声雾化吸入复方丹参注射液有降低肺叶切除病人术后痰黏弹性的作用, 是一种安全可靠的、较常规雾化吸
入更为有效的术后排痰措施。
关键词: 肺切除术; 痰流变学; 复方丹参注射液; 雾化吸入
中图分类号: R 28614　　　文献标识码: A 　　　文章编号: 0253 2670 (2004) 12 1390 03
Effect of aerosol inha la tion of Com pound Sa lvia M iltior rh iza In jection on sputum rheology
of postopera tive pa tien ts af ter pneum otectom y
W AN G J ian2rong, GU Yan2m ei, M A Yan2lan
(N ursing D epartm ent, General Ho sp ita l of Peop le’s L iberat ion A rm y, Beijing 100853, Ch ina)
Abstract: Object　To study the effects of aero so l inhala t ion of Compound S a lv ia M iltiorrh iz a In jec2
t ion (CSM I) on the spu tum rheo logy p ropert ies in resp ira to ry tract of po stopera t ive pat ien ts after pneumo-
tectom y. M ethods　Pat ien ts in con tro l group inhaled dist illed w ater by u lt rason ic nebu lizer, pa t ien ts in the
experim en t group inhaled CSM I by the sam e u lt rason ic nebu lizer. Results　T he spu tum visco sity on the
first, th ird, fou rth, and fif th day po stopera t ion (P < 0101, 01001) and spu tum elast icity on the first and
second day po stopera t ion (P < 01001) in experim en t group s w ere m uch low er than tho se in the con tro l
·0931· 中草药　Ch inese T radit ional and H erbal D rugs　第 35 卷第 12 期 2004 年 12 月
Ξ 收稿日期: 2004201226
基金项目:“九五”全军医药卫生科研基金资助项目 (98M 143)
作者简介: 王建荣 (1957—) , 女, 山西浑源人, 硕士学位, 护理部主任, 主任护师, 教授, 主要从事外科护理和护理管理研究。
T el: (010) 66939766　Fax: (010) 66939476　E2m ail: w angjr@p lagh. com. cn