全 文 ：2. 2. 2　制剂供试品溶液的制备:取芩暴红胶囊内容
物 5. 0 g ,按药材供试品溶液的制备方法 ,将残渣用
甲醇溶解并转移至 10 mL量瓶中 ,加甲醇至刻度 ,得
制剂供试品溶液。
2. 3　对照品溶液的制备:精密称取杜鹃素对照品适
量 ,加甲醇溶解 ,制成每 1 mL含有 0. 2 mg的溶液 ,作
为对照品溶液。
2. 4　标准曲线的制备:精密量取杜鹃素对照品溶液
1, 2, 3, 6, 7, 9 mL置 10 mL量瓶中 ,加甲醇稀释至刻
度。按上述色谱条件进行分析 ,每次进样 20μL,以
峰面积 ( Y )为纵坐标 ,样品浓度 ( X )为横坐标 ,绘制
标准曲线 ,得线性回归方程为 Y= 3. 55× 107X+
1. 41× 105 , r= 0. 999 1,杜鹃素在 0. 1～ 2. 0μg范围
内呈现良好线性关系。
2. 5　精密度实验: 按上述色谱条件 ,用上述药材供
试品溶液进样 5次 ,每次 20μL,分别测得各次的峰
面积 ,RSD为 0. 77%。
2. 6　回收率测定:精密称取已知杜鹃素含量的满山
红叶 5份 ,分别准确加入杜鹃素 0. 10 mg ,依上述色
谱条件测定 ,计算加样回收率 ,测得杜鹃素平均回收
率为 96. 60% , RSD= 1. 07% (n= 5)。
2. 7　样品含量测定:精密吸取药材供试品溶液和制
剂供试品溶液 ,分别注入色谱仪 ,每次 20μL,记录峰
面积 ,根据峰面积值 ,计算出药材供试品溶液和制剂
供试品溶液中杜鹃素的含量。 见表 1。
表 1　满山红叶及芩暴红胶囊中杜鹃素的含量
　品　名 含　量
满山红叶 　　　　 0. 054 7 mg /g
芩暴红胶囊 ( 990303) 0. 001 4 mg /粒
芩暴红胶囊 ( 001002) 0. 000 4 mg /粒
3　讨论
在实验中 ,曾选用乙醇超声提取和乙醇回流提
取处理样品 ,但杂质干扰大 ,特征峰不明显。 而用乙
醇回流提取后 ,提取液挥干无醇味 ,残渣用乙醚溶
解 ,其余操作同上实验 ,所测得的峰面积值低于实验
中所用方法的测得值。由于乙醚的沸点低 ,不适于超
声处理。 故采取乙醚回流提取法。
本法测定满山红叶和芩暴红胶囊中杜鹃素的含
量 ,有效成分峰 ( tR= 8～ 9 min)与其相邻峰分离较
好 ,药材及其制剂中的其它成分对测定基本不形成
干扰。本方法简便、准确、重现性好 ,可作为该制剂中
杜鹃素含量测定的方法。
前列腺炎冲剂质量标准的研究
王艳萍 ,赵文萃 ,孟庆彪 ,谢华通⒇
(中国人民解放军第 208医院 ,吉林 长春　 130062)
摘　要: 目的　建立前列腺炎冲剂的质量标准。方法　采用 TLC法对处方中黄柏、赤芍进行定性鉴别 ;用 HPLC法
测定盐酸小檗碱的含量。结果　在 TLC法中均能检出黄柏和赤芍。盐酸小檗碱在 0. 06～ 0. 3μg范围内有良好的线
性关系。 平均回收率为 100. 2% , RSD为 2. 0%。结论　所建立的方法简单、准确、可靠 ,可作为控制该制剂的质量
标准。
关键词: 前列腺炎冲剂 ;盐酸小檗碱 ;芍药苷 ; TLC; HPLC
中图分类号: R286. 02　　　文献标识码: B　　　文章编号: 0253 2670( 2002) 01 0129 03
Studies on quality standard of PROSTATITIS GRANULE
WANG Yan-ping, ZHAO Wen-cui , M EN G Qing-biao , X IE Hua-tong
( 208 Hospital of Chinese People s Liberation Arm y, Changchun Jilin 130062, China )
Key words: PROSTATIT IS GRANU LE; berbe rine hydro chlo ride; paeoniflo rin; TLC; HPLC
　　前列腺炎冲剂是由王不留行、黄柏、赤芍、薏米、
茯苓、小茴香、赤小豆 7味中药制成的复方制剂 ,是
在前列腺炎丸的基础上进行剂型改进制得 ,具有祛
瘀活血、清热利水之功效。我院临床观察治疗慢性前
列腺炎患者 338例 ,其中显效率 64. 8% ,有效率
31. 3% ,总有效率为 96. 1%。为了有效地控制本品的
质量 ,采用 HPLC法对方中黄柏中的盐酸小檗碱进
行含量测定 ,并对黄柏、赤芍进行了 TLC鉴别 ,结果
·129·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2002年第 33卷第 2期
⒇ 收稿日期: 2001-04-19
满意。
1　仪器与试剂
日本岛津 LC-6A高效液相色谱仪 ,包括 SPD-
6A紫外检测器、 C-R4A数据处理机 ;美国惠普 HP-
8452型分光光度计。 硅胶 G(青岛海洋化工厂 ) ;盐
酸小檗碱、芍药苷对照品 (中国药品生物制品检定
所 ) ;试剂均为 AR级 ;前列腺炎冲剂 (自制 )。
2　定性鉴别
2. 1　黄柏的鉴别
2. 1. 1　供试品液的制备:取前列腺炎冲剂 4 g ,加甲
醇 20 mL,置水浴上加热回流 15 min,滤过 ,滤液浓
缩至 5 mL作为供试液备用。 取黄柏 0. 1 g,加甲醇
5 mL,置水浴上加热回流 15 min,滤过 ,滤液补至
5 mL,作为对照药材液备用。 精取盐酸小檗碱对照
品适量 ,加甲醇制成每 1 mL含盐酸小檗碱 0. 5 mg的
对照液。取除去黄柏的阴性品 4 g,同供试溶液操作 ,
得到阴性对照液。
2. 1. 2　薄层色谱:吸取上述 4种供试液各 50μL,分
别点于同一含 CMC-Na的硅胶 G板上 ,以苯 -醋酸
乙酯 -甲醇 -异丙醇 -浓氨液 ( 6∶ 3∶ 15∶ 15∶ 0. 5)为
展开剂 ,置氨蒸气饱和的层析缸内展开 ,取出 ,晾干 ,
置紫外光灯下 ( 365 nm)检视。 样品色谱中 ,分别在
与对照药材和对照品色谱相应的位置上显相同的黄
色荧光斑点 ,而阴性对照液无此斑点。见图 1-A。
2. 2　赤芍的鉴别
2. 2. 1　供试液的制备: 取前列腺炎冲剂 10 g ,加
75%乙醇 40 mL,振摇 5 min,滤过 ,滤液蒸干 ,残渣
加无水乙醇 2 mL使溶解 ,作为供试液备用。 取芍药
苷对照品适量 ,加无水乙醇制成每 1 mL含 2 mg芍药
苷的对照溶液备用。取除去赤芍的阴性对照品 10 g ,
同供试液操作 ,得到阴性对照液。
2. 2. 2　薄层色谱:吸取上述 4种供试液各 50μL,分
别点于同一含 CMC-Na的硅胶 G薄板上 ,以氯仿 -
醋酸乙酯 -甲醇 -甲酸 ( 40∶ 10∶ 20∶ 0. 2)为展开剂 ,
展开 ,取出后晾干 ,喷以 5%香草醛 -硫酸溶液 ,热风
吹至斑点显色清晰。样品色谱中 ,分别在与对照药材
和对照品色谱相应的位置上显相同的蓝色斑点 ,阴
性对照液无此斑点。见图 1-B。
3　前列腺炎冲剂中盐酸小檗碱的含量测定 [1 ]
3. 1　色谱条件: Shim-pack CLC-C18 ( 5μm, 4. 6
mm× 150 mm) ;流动相: 醋酸乙酯-甲酸 -无水乙醇
( 15∶ 3∶ 2) ;检测波长: 354 nm;柱温: 室温 ;流速:
1. 0 mL /min;灵敏度: 0. 01 AU FS。
3. 2　空白试验:按本品处方加入除黄柏以外的各味
A-黄柏　　　　　　　 B-赤芍
1-样品溶液　 2-对照药材液 ( A-黄柏 , B-芍药苷 )
3-对照品液 ( A-盐酸小檗碱 , B-芍药苷 )　 4-阴性对照液
图 1　前列腺炎冲剂的 TLC图谱
药材 ,依法制成空白对照液。按前述色谱条件进样 3
次 ,进行测定。 结果表明 ,空白对照品未检出盐酸小
檗碱峰 ,且不干扰盐酸小檗碱的测定。 见图 2。
A-盐酸小檗碱对照
品 B-样品 C-空白
a-盐酸小檗碱
图 2　前列腺炎
冲剂中盐
酸小檗碱
HPLC 图
谱
3. 3　标准曲线绘制:精取盐酸小
檗碱对照品 6 mg置 5 mL量瓶中 ,
加甲醇溶解并稀释至刻度 ,摇匀。
精 取上 述 0. 1, 0. 2, 0. 3, 0. 4,
0. 5 m L分别置于 10 mL量瓶中 ,
加甲醇稀释至刻度 ,摇匀。分别吸
取上述稀释液各 5μL按前述色谱
条件测定峰面积 ,以峰面积 Y 对
进样量 X (μg )进行回归处理。 回
归方程 Y= 1 162. 9+ 36 780. 0X ,
r= 0. 999 9。结果表明盐酸小檗碱
在 0. 06～ 0. 3μg范围内呈良好线
性关系。
3. 4　精密度试验:精取上述盐酸
小檗碱对照品液 0. 5 mL于 10 mL
量瓶中 ,加甲醇稀释至刻度 ,摇
匀。 按上述色谱条件 ,重复进样 5
次 ,求得日内 RSD为 1. 75% ,日
间 RSD为 0. 63%。
3. 5　重复性试验:取同一批号样品溶液 5份 ,按样
品含量测定项下的方法操作测定。 结果 RSD为
1. 51%。
3. 6　稳定性试验: 取同一样品溶液 ,间隔 24 h依样
品溶液项目下方法操作测定 ,结果在 48 h内稳定。
RSD为 0. 3% 。
3. 7　加样回收率试验:精密称取已知含量的样品共
5份 ,分别加入盐酸小檗碱对照品适量。依样品溶液
项下方法操作测定 ,平均回收率为 100. 2% , RSD为
2. 0% (n= 5)。
·130· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2002年第 33卷第 2期
3. 8　样品测定: 取样品适量 (约相当于药材 2. 5 g )
于锥形瓶中 ,加甲醇 50 mL,水浴回流提取 40 min,
滤过 ,取续滤液 20 ml ,离心 ( 3 000 r /min) 5 min,上
清液用 0. 45μm滤膜滤过。精密吸取 10 mL作为样品
溶液。 取样品液 5μL进样 ,按上述色谱条件测定 , 3
批样品测定结果见表 1。
表 1　 3批样品中小檗碱含量 ( n= 3)
批号 小檗碱含量 ( mg /g ) RSD(% )
990506 0. 385 1. 51
990508 0. 375 1. 50
990510 0. 385 1. 51
4　讨论
4. 1　前列腺炎冲剂中黄柏与赤芍的定性鉴别 ,采用
T LC法 ,并分别与各自的阴性对照液进了对照试验 ,
结果没有干扰 ,斑点明显 ,专属性好 ,收到良好效果。
4. 2　复方制剂中盐酸小檗碱的含量测定 ,据文献 [2 ]
报道 ,有酸性染料比色法、 HPLC法等。实验结果显
示 HPLC法简便 ,结果准确 ,无干扰 ,为制定前列腺
炎冲剂的质量标准提供了灵敏、快速的方法。
4. 3　测定的盐酸小檗碱含量转移率较低 ,可能是工
艺中水提取方法造成的 ,若用有机溶媒提取 ,盐酸小
檗碱含量可能提高 ,但这将增加制剂成本 ,另外 ,从
中医药理论和临床实践考虑 ,古方多采用汤剂 ,盐酸
小檗碱含量不会太高。故对盐酸小檗碱提取方法问
题 ,尚须进一步探讨。
参考文献:
[1 ]　陈发奎 . 常用中草药有效成份含量测定 [M ]. 北京:人民卫生
出版社 , 1997.
[2 ]　孔广英 ,于立佐 ,于海鹏 ,等 . 酸性染料比色法测定牛黄益金片
中总生物碱的含量 [ J] .中成药 , 1992, 14( 1): 12.
HPLC法测定心达康胶囊中槲皮素和异鼠李素的含量
翁水旺 1 ,赖京华 2⒇
( 1. 福建省药品检验所 ,福建 福州　 350001; 2. 福建医科大学 ,福建 福州　 350004)
中图分类号: R286. 02　　　文献标识码: B　　　文章编号: 0253 2670( 2002) 02 0131 02
　　心达康胶囊具有化瘀通脉的功效 ,主要用于心
血瘀阻型冠心病。原标准采用比色法 ,只能测定其中
总黄酮的含量。本实验采用 HPLC法测定心达康胶
囊中槲皮素、异鼠李素两个组分 ,效果好 ,准确可靠。
1　仪器和试药
高效液相色谱仪 (美国 Waters公司 ): 510泵 ,
717自动进样器 , 481可调波长紫外检测器 ;色谱工
作站 (中国科学院大连化学物理研究所 ) ; UV-260
型分光光度计 (日本岛津 )。
槲皮素对照品 (中国药品生物制品检定所 )、异
鼠李素对照品 (四川省药品检验所 ) ,心达康胶囊 (批
号: 010101, 010102, 010302,四川美大康药业有限公
司 ) ,甲醇为色谱纯 ,其余试剂均为分析纯。
2　方法与结果
2. 1　色谱条件: 色谱柱: Diamonsi l C18 ( 250 mm×
4. 6 mm , 5μm);流动相: 甲醇 -0. 02 mol /L磷酸溶
液 ( 56∶ 44) ; 流 速: 1. 0 m L /min; 检 测 波 长:
368 nm;进样量: 20μL。
2. 2　 检测波长的确定: 用 甲醇配制槲皮素
5μg /mL、异鼠李素 4μg /mL的对照品溶液 ,另取心
达康胶囊的内容物用甲醇配制约 0. 23 mg /mL的溶
液 ,照分光光度法在 300～ 430 nm波长范围内扫描 ,
绘制紫外吸收光谱图 ,结果在 368 nm波长处有最大
吸收 ,故确定 368 nm为测定波长。
2. 3　分析方法的选择:精密称取槲皮素和异鼠李素
对照品适量 ,用甲醇配成约 35和 25μg /mL的溶液 ,
另取心达康胶囊内容物配成约 2. 5 mg /mL的溶液 ,
在选定色谱条件下进样 ,记录色谱图 (图 1)。
1-槲皮素　　　 2-异鼠李素
A-空白辅料 B-槲皮素对照品 C-异鼠李素对照品 D-心达康胶囊
图 1　HPLC图
·131·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2002年第 33卷第 2期
⒇ 收稿日期: 2001-07-10