全 文 ：·药理与临床·
当归多糖促进慢性粒细胞白血病细胞性树突状细胞的诱导生成
陈国安 1,肖希斌 1,袁利亚 2,戎吉平 2
( 1. 江西医学院第一附属医院 血液科 ,江西 南昌　 330006; 2. 江西省医学科学研究所 血液研究室,江西 南昌　 330006)
摘　要: 目的　探讨当归多糖 (APS)对慢性粒细胞白血病细胞诱导生成树突状细胞 ( DC s)的影响。方法　取慢性
粒细胞白血病 ( CM L ) 患者骨髓单个核细胞, 分别予粒 -巨噬集落刺激因子 (GM -CSF ) /白介素 -4( IL-4)培养或
GM -CSF /IL-4联合各浓度 APS ( 50, 100, 200 m g /L ) 培养,普通光镜和电镜观察细胞形态,台盼蓝拒染法检测细
胞成活率, 流式细胞仪检测 DC s的免疫表型 (CD80, CD 86, CD 83 ),自体或异体混合淋巴细胞反应检测 DC s刺激 T
淋巴细胞的增殖能力。 结果　GM -GSF /IL -4或 GM -CSF /IL-4 /A PS 诱导培养的慢性粒细胞白血病骨髓单个核细
胞均表现出典型的树突状形态而且表达高水平的免疫表型。GM -C SF /IL-4 /A PS培养的 DC s的细胞成活率和增殖
能力显著提高, CD 83, CD80, CD86表达显著升高, APS组慢性粒细胞白血病细胞诱导的树突状细胞 (CM L-DC s)刺
激 T 淋巴细胞的增殖能力更强。结论　GM -CSF /IL-4 /APS培养的 DC s的 CD83、CD 80、 CD 86表达率明显高于 GM -
CSF /IL-4组。 GM -CSF /IL-4 /APS诱生的 CM L-DC s刺激 T 淋巴细胞增殖能力强于 GM -CSF /IL -4组。 APS能
促进 IL-4和 GM -CSF对 CM L-DC s的诱生与成熟。
关键词: 当归多糖; 慢性粒细胞白血病; 树突状细胞; T淋巴细胞
中图分类号: R285. 5　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253 2670( 2004) 05 0531 05
Promotion ofAngelica polysacchar ide on inducing chronicmye locytic
leukem ia cells into dendritic cells
CHEN G uo-an
1
, X IAO X i-bin
1
, YUAN L i-ya
2
, RONG Ji-p ing
2
( 1. Depa r tm en t o f H em a to logy, the F ir st A f filia ted H ospita l o f Jiangx iM edica lU nive rsity, N anchang 330006, C hina;
2. Depa r tm en t o f Exper im enta lH em a to logy, Jiangx i Ins titu te o fM edica l S cien ce, N anchang 330006, Ch ina )
Abstract: Object　 T o investig a te the e ffect o f A ng elica po ly saccha ride (A PS ) on the induc tion o f
chron icm ye lo cy t ic leukem ia ce lls into ch ronic mye locy tic leukaem ia dend rit ic ce lls (CM L-DC s). Methods
Bonem a rrow m onocy te s f rom CM L pa tientsw ere cu ltured in GM -CSF /IL -4 o r in GM -CSF /IL-4 com b ined
w ith A PS in each concen trat ion ( 50, 100, 200 mg /L ), respect ive ly. T he m o rpho type o f CM L-DC s w as
iden t if ied by op tica lm icro scope o r e lectronm icro scope, CM L-DC s v iab ility w as ca lcu la ted by T rypan B lue
exclusion. T he pheno type o f CM L-DC s (CD80, CD86, and CD83 ) w as ident if ied by f low cy tom e try. T he
capab ility o f stimu lat ing auto-lym phocy te o r allo-lym phocy te p ro liferat ion w as tested w ithm ixed leukocy te
reac tion (M LR ). Results　Bonem arrow m onocy tes from CM L pa tients, w h ich w e re cu ltu red in GM -CSF /
IL-4 o r in GM -CSF /IL-4 /A PS show ed typ ica l mo rpho type and exp ressed the h igh leve l pheno type o f
CM L -DC s. T he capab ility o f p ro liferat ion and the su rv iv a l ra te o f CM L-DC s w e re enhancedm a rked ly and
the expression o f CD83, CD80, and CD 86 on CM L-DC s w ere sign if ican t ly increa sed w hen CM L-DC s w ere
cu ltu red in GM -CSF /IL-4 /A PS. T he capab ility o f stimu la t ing lym phocy te pro life ra t ion w as mo re com pe-
ten t in 100mg /L A PS g roup. Conc lusion　T he exp ression o f CD 83, CD 80, and CD 86 on CM L-DC s cu ltu red
in GM -CSF /IL -4 /APS is sign if ican t ly h ighe r than tho se in GM -CSF /IL-4. T he capab ility o f CM L -DC s o f
st im u lat ing lym phocy te p ro liferat ion is m o re po ten t ia l in GM -CSF /IL-4 /A PS than in GM -CSF /IL-4. A PS
can prom o te the induct ion and m atu re o f CM L-DC s cu ltured in IL-4 andGM -CSF.
Key words: A ng elica po ly sacchar ide (A PS ); chronic m yelo cy t ic leukem ia ( CM L ); dendr it ic ce lls
(DC s); T -lymphocy te
　　树突状细胞 (dend ritic ce lls, DC s) 是启动 T 细胞初始免疫反应最重要的抗原呈递细胞,近年来
·531·中草药　Ch ine se T raditiona l and H erba l D rug s　第 35卷第 5期 2004年 5月
收稿日期: 2003-08-12基金项目:国家自然科学基金资助项目 ( 39960028)作者简介:陈国安 ( 1955— ),男,江西省人,江西医学院第一附属医院主任医师、研究员,主要从事血液细胞生物学研究。
T e l: ( 0791) 2971677　E-m ai l: gach en923@ 163. com
已成为肿瘤免疫治疗研究的新热点。 DC s的诱生大
多数来源于造血祖细胞和外周血单核细胞, 但近年
来也有从白血病细胞诱导分化生成 DC s的研究 [1 ]。
笔者用慢性粒细胞白血病 (CM L ) 患者的骨髓,经
多种细胞因子联合诱导,成功地诱导培养出 DC s[2 ]。
这些 CM L性树突状细胞已经证明来自于白血病细
胞克隆, 并具有激活 T 淋巴细胞的功能 [3, 4 ]。 但
CM L 细胞诱导的 DC s (CM L-DC s) 与来自正常骨
髓细胞诱导的 DC s相比,其抗原共刺激分子表达较
低,提示其激活 T 细胞的作用受限 [4 ]。因此,有必要
进一步探索提高诱生 CM L-DC s效果的方法。
当归多糖 (A ngelica po ly sacchar ide, A PS )是
从中药当归中提取出来的。 A PS能促进血细胞生
成,提高机体的免疫力, A PS在体外不仅能够抑制
K 562细胞的增殖,而且能够诱导 K 562细胞向红系
和粒系分化 [5 ]。另外, A PS可诱导细胞因子如白介
素 -2( IL-2)、γ-干扰素 ( IFN -γ)的生成。因此,本实验
在以往采用粒 -巨噬集落刺激因子 (GM -CSF) /白介
素 -4( IL -4)诱导 CM L-DC s方案的基础上, 同时加入
A PS, 观察其对 CM L-DC s诱生的影响。
1　材料
1. 1　药品: A PS (含量> 99% ),由上海中医药大学
中药标准化研究中心提供。 真空干燥的 A PS用
IM DM 细胞培养基配成所需浓度的工作液 ( 1 g /
L ),滤过除菌。
1. 2　主要试剂:淋巴细胞分离液 (F ico ll-P aque)购
于中国医学科学院血液学研究所, GM -CSF、 IL -4
和丝裂霉素 C均购于 S igm a公司, IM DM 细胞培养
基和胎牛血清购于 G ib co公司, 抗 CD 80-F IT C、抗
CD 83-F IT C和 CD86 -F IT C单克隆抗体购于 BD公
司,噻唑蓝 (M T T ) 购于 Am eresco公司。
1. 3　主要仪器:洁净工作台和恒温 CO 2细胞培养箱
(T herm o Fo rm a公司 ),低温低速离心机 (Backm an
公司 ), 倒置光学显微镜 (O lympus公司 ), 流式细胞
仪 (FA CS C a libu r,美国 BD公司 ), M B-Ⅲ型酶标仪
(北京 B in ta公司 )。
1. 4　CM L 细胞:取自江西医学院第一附属医院血
液科住院的 16例 CM L 初治期患者, 其中男性 9
例,女性 7例,平均年龄 46. 5岁,所有患者 Ph染色
体和 bcr /ab l融合基因检测均为阳性。
2　方法
2. 1　CM L-DC s的生成:取 CM L初期患者肝素抗
凝骨髓细胞, 用淋巴细胞分离液密度梯度离心法分
离 CM L患者骨髓单个核细胞 (白血病幼稚细胞占
大多数, 平均百分比为 92. 4% , 范围为 76% ～
98% ), 用磷酸盐缓冲液 ( PBS )洗涤 3次, 悬浮于
IM DM 培养液中,调整细胞浓度为 1× 107 /L, 置入
25 cm
2培养瓶中, 完全培养液包括青霉素 ( 100 IU /
m L ), 链霉素 ( 100μg /m L), 10% 胎牛血清和 GM -
CSF ( 1× 106 U /L ) / IL-4 ( 1× 106 U /L ) 或 GM -
CSF / IL -4联合不同浓度的 A PS ( 50, 100, 200
m g /L )。置于 37℃, 5% CO 2培养箱体外孵育,每周
半量换液 2次, 补充新鲜培养基及相应的细胞因
子。 7～ 10 d后,收集细胞进行以下实验。
2. 2　细胞计数和细胞存活率检测:骨髓单个核细胞
培养体系中加入 GM -CSF /IL-4为 GM -CSF /IL-4
组; 加入 GM -CSF /IL-4 /A PS ( 50, 100, 200 m g /
L )为 GM -CSF /IL-4 /A PS各组; 未加任何细胞因
子和 A PS为对照组。倒置光学显微镜下动态观察细
胞的生长情况, 分别在培养第 0, 1, 3, 5, 7, 10天取
样,在血细胞计数器上计细胞数,并用台盼蓝拒染法
计算细胞存活率。
2. 3　电镜检测: DC s在上述条件下生成,并于第 10
天收集。 PBS洗涤, 塑料培养板上用 2. 5% 戊二醛
直接固定 30m in, 0. 1m o l /L 磷酸缓冲液 ( pH 7. 2)
漂洗 18 h, 1% O SO 4在 4℃ 下固定 1 h, 用系列浓
度的乙醇脱水, 环氧丙烷浸透, 环氧树脂 - 812包
埋, 切片, 醋酸双氧铀和枸橼酸铅双染色, JEM -
100CX透射电镜 (N ihon Densi,日本 ) 观察形态。
2. 4　CM L -DC s的免疫表型分析: 细胞悬液中加入
抗 CD 80-F ITC、抗 CD 83-F ITC和抗 CD 86-F IT C单克
隆抗体,分别标记培养前及培养不同时间后的细胞,
流式细胞仪分析细胞免疫表型, C e llquest软件
(B ecton D ick inson) 分析数据。
2. 5　自体和异体混合淋巴细胞反应:取健康人和治
疗后达完全缓解的 CM L 患者的外周血, 用淋巴细
胞分离液密度梯度离心法分离单个核细胞,置入 25
cm
2培养瓶中, 37℃ 孵育 2 h,收集非吸附细胞即 T
淋巴细胞。收集培养生成的 CM L-DC s细胞, IM DM
培养液洗涤 3次,加入含终浓度 25μg /m L丝裂霉
素 C的 IM DM 培养基, 37℃孵育 45m in。培养生
成的 CM L-DC s细胞 (刺激细胞 )和自体或异体 T
淋巴细胞 (反应细胞 ), 以不同比例 ( 1∶ 200, 3∶
200, 1∶ 20)共同接种在 96孔板中 (每孔中含 2×
105自体或异体 T 淋巴细胞 )。在 37℃, 5% CO 2细
胞培养箱中培养 96 h,在培养终止前 4 h,每孔加入
0. 5m g /m L M T T 20μL,培养结束后每孔加入二甲
基亚砜 (DM SO ) 100μL,用酶标仪于 560 nm 波长
·532· 中草药　Ch ine se T raditiona l and H erba l D rug s　第 35卷第 5期 2004年 5月
检测吸光度 (A )值。
2. 6　统计学分析:实验结果用 x± s表示, 单变量两
组资料均数间比较用 t检验, 多个样本均数间两两
比较用 q检验。
3　结果
3. 1　CM L-DC s的生成:刚分离的骨髓单个核细胞
分散不集中, 细胞呈球形, 且表面光滑。 经 GM -
CSF /IL-4联合诱导培养 10 d后的骨髓单个核细
胞,部分出现了细胞体积增大,并伸出突出。随培养
时间延长,树突样的 CM L-DC s比例增多, 但总细胞
数量减少, 大部分细胞死亡。而加入 A PS培养的细
胞,培养次日即出现了呈树枝状突起的细胞,到培养
3～ 5 d时出现 CM L-DC s形态细胞比例明显增加,
且细胞生长状态比未加 A PS好, 细胞总数亦增多。
培养 10 d时细胞总数也未减少。 透射电镜下见
CM L-DC s胞膜伸出大量树枝状突起,胞浆内含大
量空泡,细胞核染色较深且偏于一侧,形态不规则。
3. 2　细胞计数和细胞存活率:取不同培养时间的细
胞,细胞计数和成活率检测结果见表 1和 2。当 A PS
浓度为 100m g /L 时,细胞的增殖和成活率为最好,
最佳时间是培养 3～ 5 d。 在培养后第 10天, GM -
CSF /IL-4 /A PS ( 100m g /L )组细胞数是 GM -CSF /
IL-4组的 10倍 ( 1. 83× 109 /L v s 1. 8× 108 /L, P<
0. 01),前者细胞存活率是后者的 2倍 (P< 0. 05)。
表 1　APS对培养细胞数的影响 (x± s, n= 16)
Tab le 1　Ef fect of APS on number of cu ltured ce lls (x± s, n= 16)
组　别 A PS
/(m g· L- 1 )
细胞数 /( 1× 109· L- 1)
0 d 1 d 3 d 5 d 7 d 10 d
对照 0 1. 00 0. 79± 0. 13 0. 73± 0. 16 0. 66± 0. 08 0. 38± 0. 06 0. 10± 0. 02
GM -C SF /IL-4 0 1. 00 1. 10± 0. 12* 0. 93± 0. 10* 0. 82± 0. 09* 0. 43± 0. 08* 0. 18± 0. 03*
GM -CSF /IL-4 /A PS 50 1. 00 1. 01± 0. 13* △ 1. 08± 0. 12* △ 0. 80± 0. 09* △ 1. 02± 0. 11* △ 0. 83± 0. 14* △
100 1. 00 1. 02± 0. 15* * △△▲ 1. 53± 0. 16* * △△▲ 2. 02± 0. 18* * △△▲ 1. 91± 0. 19* * △△▲ 1. 83± 0. 13* * △△▲
200 1. 00 0. 89± 0. 11* △ 1. 02± 0. 12* △ 1. 12± 0. 17* △ 1. 23± 0. 15* △ 1. 45± 0. 11* △
　　　与对照组比较: * P < 0. 05　* * P < 0. 01;　与 GM -CSF /IL-4组比较: △ P < 0. 05　△△ P < 0. 01; 　与 GM -CSF /IL-4 /A PS ( 50,
200m g /L ) 组比较: ▲P < 0. 05
　　　 * P < 0. 05　* * P < 0. 01 v s con t ro l g rou p; 　△P < 0. 05　△△P < 0. 01 v s GM -CSF /IL-4 g rou p;　▲P < 0. 05 v s GM -CSF /IL -4 /APS
( 50, 200 m g /L) g roup s
表 2　APS对培养细胞成活率的影响 (x± s, n= 16)
Tab le 2　Ef fect of APS on viab ility of cu ltured ce lls (x± s, n= 16)
组　别 A PS
/ (m g· L- 1)
细胞成活率 /%
0 d 1 d 3 d 5 d 7 d 10 d
对照 0 100 　　 86± 11 　　 50± 7 　　 30± 7 　　 16± 4 　　　 9± 3
GM -CSF /IL-4 0 100 95± 5* 82± 10* 62± 11* 45± 8* 35± 8*
GM -CSF /IL-4 /A PS 50 100 90± 8* △ 90± 10* △ 83± 10* △ 70± 11* △ 60± 11* △
100 100 96± 4* * △△▲ 94± 6* * △△▲ 90± 8* * △△▲ 89± 10* * △△▲ 87± 12* * △△▲
200 100 94± 5* △ 76± 13* △ 86± 11* △ 78± 12* △ 63± 13* △
　　　表注同表 1
　　　N otes are sam e to T ab le 1
3. 3　CM L-DC s的免疫表型: 动态观察中发现加入
100m g /L A PS时,细胞增殖和成活率达到最佳,因
此,选择加入 100m g /L A PS组的 CM L-DC s作免
疫表型分析, 并与不加 A PS的 GM -CSF /IL-4组比
较,结果见表 3。可见,加入 APS组, CM L-DC s相关
表面分子表达率明显升高,且在培养后的第 1天就
开始上升, 在第 3～ 5天时升高最为明显。 CD83,
CD 80, CD86表达率分别为 40. 6% , 44. 6% , 50. 6%;
而未加 A PS组, CM L -DC s相关表面分子表达率升
高不明显, 到第 10天时 CD 83才为 18. 6%, CD80为
14. 1% , CD 86为 15. 1% 。 GM -CSF /IL-4 /A PS诱生
的 CM L-DC s的 CD83, CD 80和 CD86的表达显著高于
GM -CSF /IL-4诱生的 CM L-DC s (P< 0. 05)。
3. 4　刺激自体或异体淋巴细胞增殖的能力: 由于
CM L-DC s的免疫表型 (CD83, CD80, CD 86 ) 在 100
m g /L A PS组的第 5天表达为最高, 故收集 GM -
CSF /IL-4 /A PS ( 100m g /L ) 培养第 5天的 CM L-
DC s和培养第 10天的 GM -CSF /IL-4组 CM L-DC s
用于混合淋巴细胞反应。 未加细胞因子与 A PS培
养的 CM L 患者骨髓单个核细胞作为对照组。结果
见表 4和 5。GM -CSF /IL-4组的 CM L-DC s和 GM -
CSF /IL-4 /A PS组的 CM L-DC s具有刺激 T 淋巴细
胞增殖的能力,而对照组 CM L-DC s没有或仅有弱的
刺激能力。同时可见GM -CSF / IL -4 /A PS诱导的
·533·中草药　Ch ine se T raditiona l and H erba l D rug s　第 35卷第 5期 2004年 5月
表 3　APS对培养的 CML-DCs的细胞免疫表型表达的影响 ( x± s, n= 16)
Tab le 3　Ef fect ofAPS on phenotype expression s of cell imm unocompetence for CML-DCs (x± s, n= 16)
细胞表型 A PS
/(m g· L- 1 )
表达率 /%
0 d 1 d 3 d 5 d 7 d 10 d
CD83 　　　 0 　　 1. 2± 0. 4 　　 1. 8± 0. 8 　　 4. 6± 2. 3 　　 6. 8± 2. 1 　　 9. 1± 1. 9 　　 18. 6± 2. 4
100 1. 2± 0. 4 19. 3± 1. 9* 36. 4± 5. 2* 40. 6± 7. 0* 39. 8± 6. 6* 35. 5± 10. 1*
CD80 0 3. 4± 1. 1 2. 9± 1. 1 41. 1± 1. 3 8. 3± 2. 9 10. 1± 2. 3 14. 1± 3. 4
100 3. 4± 1. 1 16. 2± 2. 2* 42. 3± 6. 4* 44. 6± 5. 9* 42. 1± 7. 0* 39. 7± 12. 1*
CD86 0 2. 8± 0. 9 3. 4± 1. 2 5. 3± 1. 8 9. 1± 2. 2 11. 8± 2. 3 15. 1± 3. 7
100 2. 8± 0. 9 17. 3± 3. 4* 39. 4± 4. 2* 50. 6± 11. 6* 48. 1± 10. 6* 45. 1± 7. 6*
　　　与相应不加 A PS组比较: * P < 0. 05
　　　* P < 0. 05 v s correspond ing g roup w ith ou tA PS
表 4　APS对 CML-DCs刺激自体 T淋巴细胞
增殖的影响 (x± s, n= 6)
Tab le 4　E ffec t of APS on T auto-lymphocyte proliferation
st imu lated by CML-DCs ( x± s, n= 6)
组　别 A PS
/(mg· L- 1 )
CM L-DC s细胞数
/( 1× 103·孔 - 1) A
对照 　　 0 　　　 1 0. 08± 0. 02
0 3 0. 09± 0. 03
0 10 0. 11± 0. 03
GM -CSF /IL-4 0 1 0. 28± 0. 10*
0 3 0. 51± 0. 11*
0 10 0. 81± 0. 17* *
GM -CSF /IL-4 /APS 100 1 0. 54± 0. 12* * △
100 3 0. 83± 0. 11* * △
100 10 1. 22± 0. 16* * △
　　表注同表 1
　　N otes are sam e to T ab le 1
表 5　APS对 CML-DCs刺激异体 T淋巴细胞
增殖的影响 (x± s, n= 6)
Tab le 5　E ffec t of APS on T allo-lymphocyte proliferation
st imu lated by CML-DCs ( x± s, n= 6)
组　别 A PS
/(mg· L- 1 )
CM L-DC细胞数
/( 1× 103·孔 - 1) A
对照 　　 0 　　　 1 0. 08± 0. 02
0 3 0. 09± 0. 03
0 10 0. 11± 0. 03
GM -CSF /IL-4 0 1 0. 33± 0. 14*
0 3 0. 67± 0. 18*
0 10 0. 89± 0. 16* *
GM -CSF /IL-4 /APS 100 1 0. 68± 0. 20* * △
100 3 1. 22± 0. 14* * △
100 10 1. 46± 0. 17* * △
　　表注同表 1
　　N otes are sam e to T ab le 1
CM L -DC s激活 T 淋巴细胞增殖的能力强于 GM -
CSF /IL-4组诱导的 CM L -DC s (P < 0. 05)。
4　讨论
　　DC s是最有效的专职抗原呈递细胞。大量的动
物实验表明, 在体外用编码肿瘤抗原的 DNA 或
mRNA 脉冲 DC s,可以产生保护性的抗肿瘤的免疫
反应 [6, 7 ]。 随着许多人类特异性肿瘤相关抗原的确
定,如此类似的治疗人类肿瘤的途径引起了关注 [8 ]。
然而,在白血病中,确定具有潜在的诱导肿瘤特异性
免疫反应的肿瘤抗原还存在很多的问题。如果可以
诱导恶性细胞自身向 DC s的分化,这些问题将会得
以解决。研究表明,在体外,成熟的 DC s能够通过利
用 GM -CSF, IL-4和肿瘤坏死因子 -α (TN F-α) 诱
导 CM L患者外周血单个核细胞生成 DC s[ 9～ 11]。这
种白血病 DC s能有效地刺激异体淋巴细胞增殖, 且
无需加入外源性抗原便可在自体 T 淋巴细胞中诱
导抗白血病效应。然而,利用以往的培养方法诱生的
CM L-DC s,不仅表达低水平的共刺激分子 [12 ], 而且
成熟的时间比较长, DC s刺激 T 淋巴细胞反应的能
力受限,而培养时间延长,细胞成活率明显降低。 为
了克服这些不足, 许多研究人员寻求更有效的能提
高 DC共刺激分子的表达,缩短 DC s的成熟时间的
诱生 DC s的方法。
基于以往利用 GM -CSF /IL-4诱生 CM L-DC s
的方法,本实验加入 A PS诱导培养 DC s, A PS浓度
的选择参照文献 [13 ]报道的方法适当改进。本实验结
果与文献 [14 ]相符, 即联合 GM -CSF 和 IL -4培养
CM L 细胞可以诱导生成具有树突状形态的 Ph染
色体阳性细胞。 然而本实验不同于后者在于联合
A PS能更有效地诱导 DC s的生成和成熟。本实验
表明, GM -CSF /IL-4 /A PS诱生出与 DC s形态、免
疫表型和功能上相一致的细胞。 在细胞表型方面,
GM -CSF /IL-4 /A PS 诱生的 DC s的共刺激分子
(CD86, CD80 )和人成熟 DC 标志物 (CD83 ) 的表达
显著高于 GM -CSF /IL -4诱生的 DC s。抗原呈递细
胞上共刺激分子 B7 (CD86, CD 80 ) 的表达对于激活
抗原特异性 T 淋巴细胞是必不可少的。这提示如果
临床应用 IL -4, GM -CSF和 A PS,在体内可能会提
高 DC s的抗原呈递能力。这种免疫表型的不同表明
有 A PS存在的条件下诱生的 DC s更为成熟。 在
·534· 中草药　Ch ine se T raditiona l and H erba l D rug s　第 35卷第 5期 2004年 5月
A PS存在的条件下诱生的 DC s刺激自体和异体 T
淋巴细胞的能力显著高于无 A PS存在条件下诱生
的 DC s,再次表明前者诱生的 DC s具有更为成熟的
免疫表型。
A PS是当归中的重要成分,已有实验表明 A PS
能从 mRNA 水平与蛋白质水平调控 GM -CSF 的
表达, A PS可能通过直接或间接途径促进淋巴细
胞、造血微环境中的基质细胞、巨噬细胞合成和分泌
GM -CSF或其他造血生长因子。 研究表明, A PS能
在体外促进小鼠脾淋巴细胞 IFN -γ的分泌和提高
IFN -γ的生物活性 [15 ]。 而 IFN -γ能促进 DC s的成
熟 [16 ]。在本实验中,推测 A PS对 DC s的刺激作用
机制可能为: ( 1)增强骨髓细胞 GM -CSF 自分泌作
用。 ( 2)诱导骨髓细胞 IFN -γ分泌增加。
目前, DC s用于肿瘤免疫治疗存在两个方面难
题,一方面,尚未找到能大量扩增 DC s的因子。另一
方面,扩增到一定时间和一定数量规模的 DC s是否
仍能保留其良好的抗原呈递功能。本研究结果表明
A PS能提高 DC s的表面共刺激分子的表达, 促进其
成熟并提高存活率,延长 DC s的生存时间。这预示
A PS与其他细胞因子联合诱导 CM L-DC s,对慢性粒
细胞白血病的治疗可能有良好的前景。
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( 1. Depar tm ent o f C a rd io logy, Co lleg e o f C linica lM edicine; 2. Depar tm en t o f Pha rm aco log y, C o lleg e o f Ba sicM ed ic ine;
C hongqing M edica lU n ive rsity, C hongq ing 400016, Ch ina; 3. C hongq ing Em ergency C are C en te r, C hongq ing 400020,
C h ina; 4. L ib ra ry, Co lleg e o f C linica lM edicine, Ch ongq ingM edica l U n iv er sity, Chongqing 400016, Ch ina)
　　Abstract: Object　T o study the e ffect o f po lyda tin (PD ) and asymm e tric dim e thy la rg in ine (A DM A )
·535·中草药　Ch ine se T raditiona l and H erba l D rug s　第 35卷第 5期 2004年 5月
收稿日期: 2003-09-19作者简介:秦　俭 ( 1966— ),女,四川隆昌人,副教授,博士,主要从事动脉粥样硬化的防治工作。 E-m ail: H JQ J2001@ Y ahoo. com. cn