全 文 ：图 8　山茱萸不同分枝环割后花内二糖含量的变化
后葡萄糖、果糖和总糖的含量下降更快些。 而三、四
次分枝环割后葡萄糖、果糖和总糖的含量一开始就
逐步降低 ,与对照明显不同。由于三、四次分枝被环
割 ,来自一、二次分枝中糖的运输通道被阻断 ,由此
对花内葡萄糖、果糖和总糖的供给产生了较大的影
响 ,说明山茱萸开花时所需的糖营养主要来自一、二
次分枝中。蔗糖是植物体内二糖的主要存在方式 ,盛
花期后正值植物受精期 ,二糖的积累可能与胚的形
成和早期发育有关。
参考文献:
[ 1]　毕　平 ,牛子勉 ,王贤平 .枣花内源激素和可溶性糖含量的变
化与座果的关系 [ J ]. 园艺学报 , 1996, 23 ( 1): 8-21.
[2 ]　张恩汉 ,刘桂英 . 山茱萸的花芽分化与发育 [ J ]. 中药材科技 ,
1983, ( 3): 1.
[3 ]　刘先齐 ,唐耀宗 ,袁林华 .四川安县山茱萸的生物特性观察 [ J] .中
药通报 , 1985, 10 ( 7): 8.
不同产地和采集季节叶下珠中鞣料云实精含量的比较
张　岚 ,任丽娟 ,李克明⒇
(中日友好临床医学研究所 ,北京　 100029)
摘　要: 目的　对全国 10个地区及同一地区不同采收期的叶下珠进行了鞣料云实精的含量测定比较。方法　分光
光度法测定 ,测定波长 270 nm。 结果　海南和贵州的鞣料云实精含量最低为 0. 58% ,西安的含量最高达 1. 78%。
采收期以 8, 9月份含量最高 ,为 1. 24%。 结论　不同产地的叶下珠中鞣料云实精的含量有较大差异 ,且同一产地
不同的采收期的鞣料云实精含量相差也较大。
关键词: 叶下珠 ;鞣料云实精 ;分光光度法
中图分类号: R282. 21　　　文献标识码: B　　　文章编号: 0253 2670( 2002) 02 157 03
Content of corilagin in Phyllanthus urinar ia from
different regions and different harvest time
ZHANG Lan, REN Li-juan, LI ke-ming
( Sino-Japanese Friendship Institute o f Clinical Medical Sciences, Beijing 100029, China )
Abstract: Object　 To compare the content in co ri lagin of Phyllanthus urinaria L. harvested f rom ten
di fferent regions of China in dif ferent months. Methods　 The content of corilagin was determined by UV
spect ropho tometry , detectiv e waveleng th is 270 nm. Results　 The content of co ri lagin in P. urinaria f rom
Hainan and Guizhou province w as the low est , 0. 58% . The highest content w as giv en by the plant f rom
Xi an zone, Shanxi prov ince, 1. 78% . The best harv est time is in August and September, content of
corilagin is 1. 24% . Conclusion　 The dif ference o f the corilagin contents in P. urinaria . harv ested f rom
di fferent regions and in di fferent harv est time in the same region is g rea t.
Key words: Phyullanthus urinaria L. ; co rilagin; spect ropho tometry
　　叶下珠 (又名珍珠草 ) 为大戟科植物叶下珠
Phy llanthus urinaria L. 的全草 ,性味甘苦、凉 ,具
有平肝清热、利水解毒之功效。用以治疗肠炎、痢疾、
传染性肝炎、肾炎水肿、小儿疳积等症 [1 ]。本品资源
丰富、分布十分广泛。近年来国内外均用于治疗病毒
性乙型肝炎 [2 ]。我们通过对福建叶下珠的化学成分
和抗乙肝病毒活性研究 [3 ] ,发现鞣料云实精为其主
要活性成分 ,其含量测定尚未见报道。 为此 ,我们采
用分光光度法分别对海南、广东罗定县、广西、四川、
湖北、湖南株州、福建同安、上海、西安、贵州 10个
地区及福建同一地区不同采收期的叶下珠进行了鞣
料云实精的含量测定和比较 ,为临床用药提供一定
·157·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2002年第 33卷第 2期
⒇ 收稿日期: 2001-06-26
的参考依据。
1　实验材料
1. 1　仪器: 日立 -220A型分光光度仪 , Sa rto rius R
160型 (德国 )电子分析天平。
1. 2　试剂: Po lyamide 6D薄膜 ( 7 cm× 14 cm ):浙
江黄岩四青生化材料厂出品。 95% 乙醇、正丁醇、丙
酮等溶剂均为分析纯。
1. 3　标准品:鞣料云实精: 系从同属植物蜜柑草 P.
matsumurae Hayata中分得 [4 ] , HPLC法测定其含
量为 98. 53% , TLC法纯度检测 ,点样 50μg层析显
示未见有杂质斑点。符合对照品的要求。
1. 4　叶下珠药材: 于 1992年 9月由湖北中医学院
附院肝病脏象研究所、四川省中药研究所、陕西中医
药研究院、上海曙光医院、广西民族医药研究所、广
州中医学院海南三亚热带医学研究所、珠海市中医
院提供。福建叶下珠采自福建厦门 ,湖南叶下珠采自
湖南株州 ,贵州叶下珠由西苑医院杨鉴英主任赠送。
药材由中国医学科学院药物研究所植物室陈毓亨研
究员鉴定。
2　方法与结果
2. 1　线性关系考察
2. 1. 1　波长确定: 将鞣料云实精标准品溶液 ( 0. 1
mg /mL) 及制备的样品供试液 ,测其紫外吸收光
谱 , 400～ 200 nm扫描 ,标准品及样品吸收曲线一
致 ,均在 270, 220 nm处有最大吸收峰 (图 1) ,因此
选定 270 nm为测定波长。
1-样品　 2-标准品
图 1　紫外吸收光谱图
2. 1. 2　标准曲线的绘制:精密称取鞣料云实精标准
品 25 mg,置于 10 m L容量瓶中 ,加 95% 乙醇溶解
并至刻度。取 6张 Po lyamide薄膜板 ,分别点样 20,
40, 60, 80, 100, 120μL,用丙酮 -水 ( 8∶ 2) 展开 ,切
割 Rf值约 0. 6处的暗黄色带 (在紫外灯下观察 ) ,
剪成细条置 5 mL磨口试管中加 3 mL 95% 乙醇室
温浸泡 6 h,浸出液按分光光度法在波长为 270 nm
处测定吸光度 ( A ) ,以 A为纵坐标 ,浓度 (C )为横
坐标 ,绘制标准曲线 ,呈良好的线性关系 ,回归方程
为 A= 17. 5C+ 0. 016, r= 0. 999 2。
2. 2　精密度试验:取一份供试液 ,于 270 nm连续
测定 5次 , RSD= 0. 42%。
2. 3　稳定性试验:取 2. 6项中供试液 ,每隔 1 h测
定 1次 ,连续 6 h内考察 , RSD= 0. 41% 。
2. 4　重现性实验:精密称取 10 g样品 5份 ,按 2. 6
项下制备供试液并进行测定 ,结果 RSD= 1. 83% 。
2. 5　加样回收率试验: 精密称取已知含量的叶下
珠 ,定量加入鞣料云实精对照品 ,按 2. 6项样品测
定的方法分析 ,求得平均回收率为 100. 4% , RSD=
1. 51% (n= 5)。
2. 6　样品含量测定
2. 6. 1　样品的制备:取粉碎叶下珠全草 10 g ,加水
140 mL浸泡 0. 5 h后 ,加热至沸 ,提取两次 ( 1 h /
次 ) ,过滤 ,滤液减压浓缩至 100 mL后 ,取 20 mL
浓缩液 ,加 20 mL水饱和正丁醇萃取 1次 ,再以 10
mL× 5次萃取 ,合并上述萃取液 ,浓缩至干 ,以 80%
乙醇定容至 5 mL容量瓶中 ,备用。
2. 6. 2　样品的含量测定:用微量点样器吸取上述供
试液 50μL,点于聚酰胺薄膜板 ,用丙酮 -水 ( 8∶ 2)
展开剂展开 ,于紫外灯下切割 Rf植约 0. 6的暗黄
色带 , ,剪成条状置 5 mL磨口试管中 ,加 95% 乙醇
3 mL浸泡 6 h,浸泡液依分光光度法测定吸光度 ,
计算各份鞣料云实精的含量 ,见表 1, 2。
表 1　不同产地叶下珠中鞣料云实精的含量
产 地 鞣料云实精 (% ) 产地 鞣料云实精 (% )
海南 0. 58 广东 0. 60
广西 1. 20 上海 0. 73
四川 1. 45 西安 1. 78
湖北 1. 13 湖南 1. 50
福建 1. 24 贵州 0. 58
表 2　同一产地不同采收时间叶下珠中鞣料云实精含量比较
采收时间 (月 ) 5～ 6 8～ 9 10
鞣料云实精 (% ) 0. 29 1. 24 0. 80
　　注:样品产地为福建同安
3　讨论
3. 1　在样品提取方面 ,用正交法对生药的水提取条
件进行优选 ,通过实验确定以加水量为 14倍 ,浸泡
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0. 5 h后煎提 2次 ( 1小时 /次 )为好 (见样品含量
测定项 )。
3. 2　在样品纯化方面 ,比较了丙酮、乙酸乙酯及水
饱和正丁醇等溶剂的萃取及加热回流等方法 ,确定
水饱和正丁醇萃取 ,且萃取的次数为 6次 (第 7次
萃取液 T LC法检测无鞣料云实精色斑显示 )。
3. 3　以上实验结果表明 ,叶下珠中鞣料云实精的含
量因采收时间和产地的不同差异较大 ,采收期以 8,
9月采收的鞣料云实精的含量较高 ,且同种植物不
同地区的叶下珠鞣料云实精的含量也有较大的差
异 ,以西安的含量最高 ,为 1. 78% 。以海南和贵州的
含量最低 ,仅 0. 58%。 其原因可能与所采植物的生
长环境 ,样品干燥条件和存放时间等有关 ,故本数据
仅供参考。
　　致谢:本文得到赵世萍研究员的帮助 ;并由文中
所提湖北中医学院附院肝病脏象研究所等 7个单
位提供叶下珠样品 ;特致谢意!
参考文献:
[1 ]　江苏新医学院 . 中药大辞典 [M ] . 下册 . 上海:上海人民出版
社 , 1997.
[2 ]　方　蕾 ,任丽娟 . 叶下珠属植物化学和药理作用研究概况 [ J ].
国外医药 -植物药分册 , 1992, 7 ( 6): 249-255.
[3 ]　任丽娟 .叶下珠属植物化学成分研究和临床应用现状 [C ]. 全
国植物资源和植物化学学术讨论会论文摘要集 , 1995: 11-13.
[ 4]　陈玉武 ,任丽娟 . 蜜柑草抗癌有效成分研究Ⅱ 、多酚类成分的
分离与鉴定 [ J ]. 中草药 , 1997, 28 ( 4): 198-202.
菊三七组织培养的研究
黄慧莲 ,刘贤旺 ,谢　平 ,张寿文⒇
(江西中医学院 ,江西 南昌　 330006)
摘　要: 目的　探讨菊三七诱导愈伤组织的过程 ,为快速繁殖幼苗奠定基础。 方法　以菊三七的根、茎、叶为外植
体 ,采用 MS培养基 ,附加不同的植物激素进行实验。 结果　以菊三七的叶片为外植体 ,在培养基 M S+ 1. 0 mg /L
N AA+ 4. 0 mg /L 6-BA上 ,愈伤组织诱导率可达 64%。愈伤组织在适宜的分化培养基上 ,成苗率可达 86. 7%。结
论　通过诱导愈伤组织的途径 ,可以达到快速繁殖菊三七的目的。
关键词: 菊三七 ;组织培养 ;愈伤组织
中图分类号: R282. 13　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253 2670( 2001) 02 159 02
Tissue culture ofGynura segetum
HUANG Hui-lian, LIU Xian-w ang , X IE Ping , ZHANG Shou-w en
( Jiangxi Colleg e of TCM , Nanchang Jiangx i 330006, China )
Abstract: Object　 To study the callus culture o f Gynura segetum ( Lour. ) M err. , so as to lay the
foundation fo r the rapid propagation of i t s breeds.Methods　 The explants used in culture were ro ot , stem
and leaf of G. segerum . The M S basal medium containing dif ferent plant ho rmones w as applied. Results　
The best explants were leaf o f G. segetum . The medium induced callus was M S basal medium containing
1. 0 mg /L N AA and 4. 0 mg /L 6-BA and the ca llus induction ra te was 64% . The sprouting rate o f the
callus transplanted to fi t ting di fferential medium was 86. 7% . Conclusion　 The rapid propagation of G.
segetum can be ca rried out by inducing callus of the plant.
Key words: Gynura segetum ( Lour. ) Mer r. ; tissue culture; callus ti ssue
　　菊三七 Gynura segetum ( Lour. ) M err. 为菊
科土三七属植物 ,以根或全草入药。 别名土三七、血
三七、天青地红、破血丹、紫三七等 ,具有止血散瘀、
止痛消肿、抗疟等功效 [1 ] ,是民间一味常用的中草
药。菊三七的生药学及其所含的化学成分、生物活
性、临床应用等已有多方面的研究 [ 2]。近年来 ,人们
逐渐认识到菊三七的药用价值而大量采挖 ,菊三七
野生资源遭受破坏 ,若不采取行之有效的措施 ,中药
资源将难以实现可持续发展。 应用组织培养的方法
进行菊三七快速繁殖是解决问题的有效方法之一。
·159·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2002年第 33卷第 2期
⒇ 收稿日期: 2001-06-02作者简介: 黄慧莲 ( 1973-) ,女 , 2000年毕业于江西中医学院药学系 ,获中药学硕士学位 ,现为江西中医学院生药学助教 ,主要从事中药资源保护和组织培养的研究工作 ,目前正在参加国家自然科学基金和江西省教育厅等课题的研究 ,发表论文 9篇。