全 文 ：· 药剂与工艺 ·
配伍熟地可增加汤剂中阿魏酸的煎出率△
第四军医大学西京医院临床药理基地 (西安 7 1 0 03 2) 尚刚伟 ’ 蒋永培 黄 熙 类亚置
摘 要 用反相高效液相色谱法测定了川芍单煎剂 ,川芍 、 丹参合煎剂 , 川芍 、 当归合煎剂及改味
四物汤中阿魏酸的含量 。 结果表明 ,各组汤剂中阿魏酸的含量有显著差异 (尸 < 0 . 0 0 1 ) ,配伍熟地对
阿魏酸的溶出具有助溶作用 。
关键词 阿魏酸 熟地 煎剂 高效液相色谱法
阿 魏酸 ( f e r u l i c a e id , F A )是川芍 、 当 归
中主要成分之一 , 具有抗氧化 , 抑制血栓形
成 , 增加冠脉流量 ,改善心肌缺血 ,抑制胶原
和 A D P 诱导的血小板聚集作用 。 最新研究
还表明 , F A 是一种子宫收缩抑制剂 , 谷胧甘
肤 S 一转移酶抑制剂 ,并且具有抗肿瘤和抗炎
作用 。 中医临床 “ 四物汤 ” 为著名的妇科经方 。
为了开展中药临床复方效应成分药代动力学
的研究 , 探讨中药主要单体由于 中药配伍导
致的变化规律 , 我们采用改味 “ 四物汤 ” 通过
中药自身有效成分 F A 作为检测指标 ,研究
了 R P 一 H P L C 法测定临床用药改味 “ 四物汤 ”
中 F A 的溶出量 。
1 仪器和药品
岛津 L C 一 6 A 高效液 相色谱系统 , S P D -
6 A V 紫外检测器 , 二台 L C 一 6 A 高效输液泵 ,
7 1 2 5 型手动式进样注射器 , C 一 R 3 A 色谱数据
处理系统 。
样 品 : 中药饮片川芍购 自四川都江堰市
医药公司 ,经 肖光泽主任药师鉴定为伞形科
植物川芍 L i g u s t i e u m c h u a n x i o n g H o r t . 的干
燥根茎 ,饮片的平均厚度为 4 . 1 m m ; 当归购
自西安市药材公司 , 经肖光泽主任药师鉴定
为伞形科植物当归 八 n g e zi c a : i n e n s i : ( o l i v . )
D ie l S 的干燥根 ;熟地购 自西安市药材公司 ,
经 肖光泽主任药师鉴定为玄参科植物地黄
尺 e人m a n n i a g l u t i n o s a L ib o s e h . 的根 ,经加工
炮制而成 。
阿魏酸标准品 (中国药品生物制品检定
所 ) , 内标物香豆 素购 自于 S ig m a ( U S A )公
司 。
2 色谱条件川
色谱柱 : L i e h r o s o r b R P C I、 ( 1 5 0 m m 火
4
.
6 m m
,
5 拌m ) 。 流动相 : 甲醇 一乙酸 一水 ( 38 ,
0
.
3 : 61
.
7 V / V )用前超声脱气 20 m in ,流速
1
.
0 m L /m in
, 紫外检测 波 长 32 0 n m , 灵 敏
度 : A U F S 一 0 . 01 。
3 标准曲线
精取 F A 标准稀释液 (0 . 0 06 拜g加 L ),
2
.
5
、
5
、
1 0
、
2 0
、
5 0
、
1 0 0
、
2 0 0
、
4 0 0
、
8 0 0
、
1 6 0 0
拜 L , 分置 10 m L 容量瓶中用双蒸水稀释至
1 0 m I
J ,摇匀各取 1 m L , 加 内标 ( 4 2 拌g /m L )
2 0 拜L , 摇匀 , 3 0 0 O r / m i n , 离心 1 0 m i n 后取
20 拜L 进样 , 以峰面积法由色谱数据处理机
C
一
R 3A 自动打印药物 F A 及 内标香豆 素的
峰面积 , 由峰面积比对映浓度作回归计算 。得
回 归方程为 C = 4 3 2 . 1 1X + 1 . 8 8 4 1 , r = o ·
9 9 9 6 ( n = 6 )
,
F A 在 1 2 n g 一 9 6 0 n g /m L 范围
A d d r
e s s :
S h a n g
尚刚伟 男 , 1 9 8 5
G a n g w
e 一 ,
X
一s l n g H o s p l
年沈阳药学院 (现为沈
t a l
,
F o u
r t h M i l
l t a r y M e d i e a l U n i v e r
s
阳药科大学 )毕业 。 现在西安第四军
i t y
,
X i a n
医大学西京医院药剂科 ,主要从事新药 、新
制剂及临床药理方面的工作 , 主管药师 。 负责完成了 ( 9 3 )卫药准字 D 一 0 3一 3 号 “ 脉酶法测定血清 (浆 ) 中尿素氮试剂盒 ” 的研制申报工作 , 协同完成了 (第二作者 ) ( 9 3) 卫药准字 D 一 2 2一 8学基金资助项目两项 ,协助 1 项 ,在全 国性刊物发表论文 葡
萄糖氧化酶法测定血糖试剂盒 ” 的研制 ,先后参加国家自然科余篇 。
△国家自然科学基金资助项 目 塑 3 9 1 0 0 1 3 9
·
1 6 0
.
内呈 良好线性 ,最低检出浓度为6 n g /m L ( S/
N 一 3 . 5) 平均回收率为 9 9 . 94 % 士 3 . 67 % 。
表 1 F A 回收率及精密度试验 (n 一 6)
加人量
(拜g /m L )
测得量士 S
(拌g /m L )
回收率 士 R S D
(% )
日间 R S D
0
.
0 3 0 0
0 2 4 0 0
0
.
9 6 0 0
0
.
0 2 9 5士 0 . 0 0 2 7 9 8 . 2 2士 8 . 8 3
0
.
2 4 3 0士 0 . 0 0 3 9 10 1 . 2 7士 1 . 6 0
0
.
9 6 3 2土 0 . 0 0 5 7 1 0 0 . 3 4士 0 . 5 9
兴
0
.
8 1
0
,
3 ,
4 检样的制备及测定
取 a ) 川芍 10 9 ; b )川芍 1 0 9 + 丹参 2 0
g ; e )川芍 1 0 9 + 当归 2 0 9 ; d )川芍 1 0 9 + 当
归 10 9 + 丹参 10 9 + 熟地 10 9 ,各组分别放
入 25 0 m L 烧杯中 , 加水没过生药 (5 倍总生
药量 )浸泡 Z h ,煎沸 15 m in , 趁热过滤 ,药渣
重复煎提 1 次 , 合并药液 , 药渣过滤后总药量
稀至 5 0 m L , 终浓度以川芍计算为 0 . 02 9 /
m L
。 取 1 m L 终浓度原液置 50 m L 容量瓶
中 ,稀释至刻度 , 摇匀 。 取 1 m L 加 内标香豆
素 ( 4 2 拌g /m L ) 2 0 拜L , 摇匀 , 3 o o o r /m i n , 离
心 1 0 m in 后取 20 拜L 进样 ,结果如表 2
表 2 各类煎液中 F A 的溶出量 (n 一 3)
誓峰面积比
.
7265士0 0 04 0
.
6834士0 . 0 079
.
758 6士 0 . 0030
.
882 6土 0 . 0080
C (。 g /m L。 橇黔麟
)1芍、丹参川芍、 当归
改味“四物汤”
0
.
3158士 0. 0036
0
.
2972士 0 . 0053
0
.
3297士0 . 0032
0
.
3833士0 . 0053
0
.
1579士0 . 00 18
0
.
1486士 0. 0026价
0
.
1648士0 . 0 016
0
.
1916士 0. 0027芳
关 尸 < 0 . 0 0 1
0 6 1 2 0 6 1 2
图 1 样品色谱图
A
一川芍 1 0 9 + 当归 2 0 9 合煎 B一川芍 1 0 9 + 当归 1 0
g + 丹参 10 9 + 熟地 1 0 9 合煎 , a 为 F A ( t R = 5 . 8 8 3 m in ) , b
为香豆素 ( t R 一 9 , 7 5 5 m in ) 。
5 结果与讨论
中药汤剂多为复方 , 每种生药又含有多
种化学成分 ,临床共煎过程中可能产生挥发 、
分解 、 助溶 、 吸附 、 水解 、 取代 、 中和 、 沉淀等一
系列 十分复杂的化学物理变化 ,这些变化直
接影响到制剂的疗效和毒副作用川 。 改味的
“ 四物汤 ” (J 1芍 、 当归 、丹参 、 熟地 )具有较强
的活血化癖作用 , 临床主要用于心血管疾病 ,
我们针对方剂的药剂环节观察了其汤剂中
F A 的溶出量及影响因素 。 结果表明 : 各组汤
剂中 F A 的含量有显著性差异 (尸 < 0 . 0 1 ) ,
配伍不含 F A 中药的汤剂中 F A 含量降低 ,
配伍熟地可增加汤剂中 F A 的煎出率 。 采用
H P L C 色谱法及药渣经氯仿萃取 F A 含量测
定分析 , 汤剂中 F A 含量差异主要是由于药
渣的吸附作用和未溶出引起 。
熟地含有梓醇地黄素 、 维生素 A 类物
质 、 地黄多糖等多种化学组分 ,其中果胶类多
糖 、 胶质类成分可能在汤剂 中对 F A 的溶出
起助溶作用比 ` , 5〕 。
改味 “ 四物汤 ” 在煎煮过程中 , 也可能发
生了十分复杂的物理化学变化 ,但从实验结
果表明 ,对 F A 的影响较小 。
参 考 文 献
1 尚刚伟 , 等 . 中国药学杂志 , 2 9 9 7 . 3 2 ( 12 ) ; 7 6 1
2 黄 熙 , 等 . 中药药理与临床 , 1 9 9 5 , 9 ( 4 ) : 3 7
3 木方正 , 等 . 药学杂志 , 2 9 9 2 , 1 1 2 ( 6 ) : 3 9 3
4 C P I ( B )
, 1 9 94
,
( 94 13 )
:
52
5 T o m o d a M
.
C h e m P h a m B u l l
,
1 9 9 4
, 4 2 ( 3 )
: 6 2 5
( 1 9 9 7
一
0 8
一
1 8 收稿 )
A n I n c r e a s e E x t r a e t i o n R a t e o f F e r u l i e A c i d i n D e e o e t i o n o f
M e d i e i n a l H e r b s w i t h t h e C o m P a t i b i l i t y o f R a d i x R e h m a n n i a e
S h
a n g G
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,
Ji a n Y o n g p e i
,
H u a n g X i
, e t a l (C l in i e a l P h a r m a e o l o g y L a b o r a t o r y o f X IJi n g H o s p i
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a n 7 1 0 0 3 2 )
A b s t r a c t A
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e r f o r m a n c e li q u id e h r o m a t o g r a p h i e ( R p
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H P L C ) m e t h o d f o r t h e a n a l y s i s o f f e r u li e a c i d ( F A ) i n d e e o e t i o n s o f m e d i e in a l h e r b s h a s b e e n d e v e lo p e d
.
T h
e
e o n t e n t s o f F A i
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e e o e t i o n s o f R h i
z o m a e h u a n x i o n g
,
R h i z o m a e h u a n x io n g a n d R a d i x S a l刀故 e 卿 ilt : o r hr i z a e ,
R h i` o m a c h u a n x io n g a n d R a d i x A n g e li e a s i n e n s z s , a n d m o d if ie d “ s i w u t a n g l w e r e d e t e r m in e d b y t h i s R p 一H P L C
m e t h o d
.
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e s u lt s s h o w e d t h a t t h e e o n t e n t s o f F A i n t h e s e d e e o e t i o n s d i f f e r e d s ig n i f ie a n t l y ( P < 0
.
0 0 1 )
.
A
n 一n -
《中草药 》 1 9 9 8 年第 29 卷第 3 期 . 1 6 1 .
e e s e a r
d
e x t e a rt i
o n a rt e of FA w s ao bt ai ne d w it h t h e e o mP at i bil it y of R ad ix Re h ma n ni e a
,
w h ie h a e t e d a s a s o lu
-
b il iz i n g a g e n t f o r F A
.
K e y W
o r d s F e r u li e a e i d R a d ix R e h m a n n i a e e li n ie a l d e e o e t io n H P L C
高效液相色谱法测定抗病毒口服液中连翘试的含量
沈阳药科大学天然药化教研室 ( 1 1 0 0 1 5) 张 国刚 告 徐绥绪
摘 要 应用高效液相色谱法测定杭病毒 口服液中连翘贰的含量 , 回收率为 10 0 . 6% 士 2 . 24 % ,相
关系数为 0 . 9 9 9 9 , R S D %一 1 . 05 % 。 本法可控制抗病毒 口服液的质量 。
关键词 抗病毒口服液 连翘贰 高效液相色谱法
抗病毒 口服液是由连翘 、 知母 、 板蓝根等
9 味中药制成的中药制剂 , 用于治疗病毒感
染 引起 的疾病 。 连翘是木 犀科植物连翘
尸 o sxr t人i
a : u s P e n s a ( T h u n b
.
) v a h l 的 干燥
果实 ,具有清热解毒 、 宣散风热 、 消痛散结之
功 。 近年来药理研究证明连翘有较广的抗菌
作用 ,对 G + 、 G 一菌及流感病毒有明显抑制作
用 ,能反 映抗病毒 口服液的药效 。连翘中成分
复杂 ,连翘醋贰 、 咖啡酸 、 芦丁 、连翘贰及连翘
脂素等为其有效成分川 。 另外 ,在实验中 , 我
们发现连翘贰在高效液相色谱柱分离中很容
易和连翘中乃至样 品中所含其它成分分开 ,
其化学性质稳定 , 在 27 7 n m 紫外区有最大
吸收 ,重现性较好 。 因此 , 我们选择了连翘贰
作为指标成分 , 应用高效液相色谱法进行含
量测定 ,以控制抗病毒 口服液的内在质量 。
1 仪器与试药
高效液相色谱仪 : P e r k i n E lm e r 公司 (美
国 ) , 1 0 2 2一 L C 色 谱工作站 , 2 0 0 泵 , L C 2 9 5
U V 一V IS 检测器 。 溶剂过滤器 (津腾牌 ) ,超
声振荡仪 (江苏昆 山淀 山湖检测 仪器厂 生
产 ) , 样品过滤器 (大连化物所生产 ) , 微量进
样器 ( H A M I L T O N 公司生产 , 美国 ) , 氯仿 、
甲醇 (色谱纯 ) ,对照品连翘贰 (中国药品生物
制品检定所 ) 。
抗病毒 口服液 : 广州市花城制药厂 (批号
9 6 1 0 1 0 市售 ) 。
2 色谱条件
2
.
1 连翘贰最大检测波长的选择 : 见紫外吸
收光谱图 1 。
28,曰。
.
o
曰砚
.0
27
.。目口08峰饥诀|阅侧娜哪
O` ~ - ~ es es - ` 二二二二二二二二
2 0 0
.
0 4 0 0
.
0
波长 (mn )
图 1 连翘试紫外光谱图
2
.
2 测试条件 : 色谱柱 : 键合氨基柱 (4 . 6
m m 又 2 5 c m , 2 0 拌m ,大连化物所 ) , 流动相 :
氯仿 一甲醇 ( 6 : 1 ) ,检测波长 : 2 7 n m ,流速 : 1
m L / m i n
, 纸速 : 3 m m /m i n , 灵敏度 : 0 . 0 2 ,
R E S
:
F A S T
,进样量 : 20 拜L 。
色谱图见图 2 。
3 工作曲线的考察
精密吸取连翘贰对照品 10 m g 置于 10
A d d
r e s s : Z h a n g G u o
张国刚 男 , 天然药物
g a n g , eD p
a r t m e n t o f P h y t o e h e m i s t r y
,
S h
化学专业 ,硕士 ,工程师 。 主要科研成果 :荣获 国家医药管理局科技进步三等奖 ;新药 “ 双清 口
e u t ie a l U n i v e r s i t y
,
S h
主要研制者 新药证书 ,服液 ” 的主要研制者 ,获卫三等奖 ; “ 气滞胃痛冲剂 ” 的改型换代产品“ 气滞胃痛胶囊 ” 质量标准的主要研制者 ;新药 “ 抗病毒水针剂 ” 的主要研制者 。 其中硕士论文 : “ 抗病毒水针剂 ” 化学成分及其质量标准的初步研究受到专家的好评 ;新药 “ 糖脂双降茶 ” 质量标准的主要研制者 。
.
1 6 2
.