全 文 ：表 5　海嘧啶对 H22小鼠生存时间的影响
药物 剂量 ( g /kg ) 给药途径 动物数 (n ) 生存时间 (d, x± s ) 生命延长率 (% )
海嘧啶 27. 05 iv 27 　　　 21. 1± 1. 6* △ 74. 4
13. 53 iv 28 18. 6± 2. 9* △ 53. 7
6. 76 iv 30 17. 1± 3. 2* 41. 3
中药复方 13. 50 iv 30 15. 8± 2. 5 30. 6
5-Fu 0. 03 iv 29 14. 6± 2. 7 20. 7
生理盐水 - iv 30 12. 1± 3. 1
　　　　与中药复方比: * P < 0. 05;　与 5-Fu比: △ P < 0. 05
行了抑制作用的预测 ,结果表明 ,海嘧啶均有一定的
抑制作用。综合两种实验方法的实验结果 ,对其中的
人胃癌 BGC-823细胞、人食管癌 Eca-109细胞、人
结肠癌 HCT-8细胞的杀伤力最强 ,并具有剂量依赖
性。这一结果与本方在临床上治疗噎膈与反胃是相
吻合的。同时这一结果揭示海嘧啶对消化道肿瘤 (胃
癌、食管癌等 )具有较强的敏感性。在体内抗肿瘤实
验中 ,我们采用动物体内移植肿瘤的方法 [ 3] ,观察了
海嘧啶对 3种小鼠肿瘤 (小鼠胃癌 FC、小鼠肉瘤
S180、小鼠肝癌 H22 )生长的影响。实验结果表明 ,海
嘧啶对 FC、 S180小鼠的瘤体生长具有显著的抑制作
用 ,且药物剂量与效果具正相关性。对于 H22小鼠的
生命延长作用有一定意义 ,但作用强度不及对 FC、
S180的强度大 ,提示海嘧啶对实体瘤的抑制作用要优
于对腹水癌的抑制作用。这一结果也与本方在临床
对胃癌、食管癌效果好 ,而对腹水期肝癌疗效较差的
临床效果是一致的。
海嘧啶注射剂是由两部分构成 ,一部分是中药
复方部分 ,另一部分为西药部分 ( 5-Fu) ,我们在研
究中均设立了中药复方组、西药组 ( 5-Fu)做对照 ,
结果显示在抗肿瘤作用方面 ,海嘧啶中西药复方后
其作用远远大于中药复方、 5-Fu单独使用时的作用
(等同剂量 )。根据上述结果我们认为中药复方部分
与 5-Fu复合成海嘧啶后其抗肿瘤方面产生了明显
的协同作用 ,使抑瘤率大幅度提高。
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广枣总黄酮对阿霉素引起大鼠心肌过氧化损伤的保护作用
乌日娜 1 ,张昕原 1 ,张维兰 2 ,王　哲 2 ,王玉莹 1 ,李宝山 1
( 1. 内蒙古民族大学 西区中心实验室 ,内蒙古 通辽　 028041;　 2. 内蒙古民族大学 附属医院检验科 ,内蒙古 通
辽　 028041)
摘　要: 目的　通过广枣总黄酮 ( TFCA)对阿霉素 ( ADR)引起大鼠心肌过氧化损伤保护作用的研究 ,进一步证实
广枣疗效可能与 TFCA抗氧化作用有关。 方法　动物分为空白组、 ADR组和实验组 ( ADR+ TFCA 100, 150, 200
mg /kg组 )。以“心酶谱”、抗氧化酶做为检测指标。结果　 ADR组心酶谱、 MDA均比空白组高 ,而抗氧化酶活性均
比空白组低。 TFCA干预后“心酶谱”、 MDA下降 ,抗氧化酶活性上升。结论　 T FCA能抑制 ADR所引起大鼠心肌
过氧化损伤。
关键词: 广枣总黄酮 ;心酶谱 ;抗氧化酶 ;丙二醛 ;阿霉素
中图分类号: R285. 5　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253 2670( 2001) 06 0527 03
Protective effect of total flavonoids of Choerospondias ax illaris
on rat myocardiac peroxidation injury caused by adriamycin
·527·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2001年第 32卷第 6期
收稿日期: 2000-10-26基金项目:内蒙古自然科学基金资助 ( NO. 9713031)作者简介:乌日娜 ( 1956-) ,女 (蒙古族 ) ,内蒙古科右中旗人 ,现任内蒙古民族大学实验中心实验师。 主要从事蒙药药理学研究工作。
W U Ri-na1 , ZHAN G Xin-yuan1 , ZHANG Wei-lan2 , W ANG Zhe2 , W ANG Yu-ying1 , L I Bao-shan1
　　 ( 1. Cent ral Labor ato ry of Inne r Mongo lia Na tionality Univ er sity West Area, Tongliao Neim enggu 028041, China; 2.
Labor ato ry o f Affiliated Hospital, Inner Mongolia Nationality Univ er sity , Tong liao Neimenggu 028041, China )
Abstract: Object　 By studying the pro tectiv e ef fect of to tal f lav onoids o f Choerospondias ax illaris
( Roxb. ) Burt t et Hill ( T FCA) on rat myocardiac injury caused by adriamycin ( ADR) to provide further
evidence showing the action of this medicinal herb is related to i ts antioxidation activi ties. Methods　 Test
animals w ere randomized into four g roups: blank contro l, ADR control, a nd three experimental g roups
( ADR+ T FCA 100, 150 and 200 mg /kg ) . The antioxidation enzyme activi ties w ere assessed by ca rdiac zy-
mog ram. Results　 Cardiac zymog ram show ed tha t malondia ldehyde ( M AD) of the ADR control was high-
er w hi le the antioxidation enzyme activi ties w ere low er than the blank control. With the interv ention of
T FCA, ca rdiac zymog ram show ed lowering o f MDA and eleva tion of antioxidation enzyme activi ties. Con-
clusion　 T FCA can inhibi t rat myoca rdiac peroxidation injury caused by ADR.
Key words: to tal f lav onoids of Choerospondias axil laris ( Roxb. ) Bur tt et Hill ( TFCA ); cardiac zymog ram;
antio xida tion enzyme; malondia ldehyde; adriamycin ( ADR)
　　阿霉素 ( adriamycin, ADR)是疗效肯定的抗肿
瘤药 ,但临床和实验发现长期使用可产生严重的心
脏毒性 ,其机制之一是阿霉素产生自由基导致心肌
损伤 [1 ]。 广枣是蒙医常用药 ,主治气滞血瘀 ,胸痹作
痛 ,心悸气短 ,心神不宁等症 ,是心血管病的首选
药 [2 ]。 研究证实 ,广枣总黄酮 ( Totol Flavnoids of
Choerospondias axil laris , TFCA)具有很强的清除
和抑制自由基的作用 [3 ]。鉴于阿霉素的毒性是其产
生自由基致使心肌损伤这一机制 ,研究 T FCA的抗
氧化作用。 TFCA和 ADR联合应用于大鼠引起心
肌的损伤 ,测定了大鼠血清中乳酸脱氢酶 ( LDH) ,
谷草转氨酶 ( AST) ,肌酸激酶 ( CK)的活性 ,心肌组
织中的超氧化物歧化酶 ( SOD) ,谷胱甘肽过氧化物
酶 ( GSH-Px )的活性以及脂质过氧化物 ( MDA)含
量 ,以探讨 T FCA对 ADR所致大鼠心脏毒性的保
护作用 ,从而进一步证实 TFCA清除和抑制自由基
的作用。
1　材料和方法
1. 1　材料: TFCA提取、分离、定量和质量控制按文
献 [4, 5 ]进行 , SD大鼠由锦州医学院动物中心提供 ,雄
雌各半 ,体重 ( 242± 55) g , ADR为浙江海正药业
股份有限公司生产 ,用前生理盐水配成所需浓度。
LDH、 AST、 CK试剂盒由北京中生试剂厂提供 ,在
CB171, TRACE半自动生化分析仪中检测。 SOD
测 定由 V B2-M et-N Bt 法 [6 ]。 GSH-Px 用 DTN B
法 [7 ]。 MDA用 TBA法 [ 8]。蛋白质测定用考马斯亮
蓝法 ,所用仪器为日立 557型分光光度计和 754型
分光光度计。
1. 2　给药方案: 大鼠 40只 ,随机分为 5组 ,每组 8
只。正常对照组 , ig等体积生理盐水 ; ADR组于实验
开始后第 2, 4, 6天 ip 1. 5 mg /kg ,第 8, 10, 12, 14天
ip 3. 0 mg /kg ADR;其余 3组为 ADR+ TFCA合
用组: ADR剂量同 ADR组 ; ADR+ TFCA 100,
150, 200 mg /kg组。 TFCA按上述剂量 ,用 0. 5%
CMC配成混悬液 ,每天 1次 ig给药 ,共计 15 d。
1. 3　血清中 LDH、 AST、 CK的测定: 于最后一次
给 T FCA 24 h后 ,用戊巴比妥钠麻醉 ( 40 mg /kg ) ,
心脏取血 ,分离血清 ,冰箱保存 , 24 h内于自动生化
分析仪上测定 LDH, AST, CK活性。
1. 4　心肌中 SOD、 GSH-Px、 MDA的测定: 采血后
大鼠解剖 ,即心尖部肌肉 ,以 0. 15 mol /L KCI为介
质 ,于玻璃研磨器中制成 10%匀浆 ,冷冻离心
( 0℃～ 4℃ , 4 000 r /min) 10 min,取上清液测定蛋
白质后用于 SOD、 GSH-Px、 MDA的测定。
2　结果
2. 1　 TFCA对心肌 LDH、 AST、 CK活性影响: 见表
1。 显示 ADR组 LDH、 AST、 CK活性均比空白组高
( P < 0. 01) ,说明该剂量已对大鼠心脏构成损伤 ,“心
酶谱”大量外流。当 T FCA干预后“心酶谱”逐渐回落 ,
存在剂量依赖性 ,显示了 TFCA保护心脏的作用。
2. 2　 T FCA对心肌 SO D、 GSH-Px、 MDA的影响:
见表 2。显示 ADR组 SOD、 GSH-Px活性下降 (P <
0. 01) , MDA含量上升 ( P < 0. 01) ,说明 ADR通过
生物转化生成超生理量的自由基 ,消耗了自由基清
除酶 ,使酶含量降低 ,自由基清除障碍 ,过氧化反应
增强 ,攻击膜结构 ,产生大量的 MDA,因而其含量
上升 ( P < 0. 01)。 当动物服用 TFCA后情况向相反
方向转化 , SOD、 GSH-Px逐渐上升 , M DA含量回
落 ,说明 TFCA能清除自由基 ,抑制过氧化反应 ,从
而提高自由基清除酶活性。
3　讨论
·528· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2001年第 32卷第 6期
表 1　 TFCA对服用 ADR后大鼠血清中 LDH、 AST、CK活性的影响 ( x± s )
组别 剂量
( mg /k g)
LDH　　
( U /L)　　
AST　　
( U /L)　　
CK　　
( U /L)　　
对照 —　　　　 132. 6± 60. 0 137. 6± 19. 0 183. 2± 32. 4
ADR 1. 5-3. 0　　 　　 234. 5± 58. 0* * 256. 4± 29. 0* * 650. 4± 95. 3* *
ADR+ T FCA 1. 5-3. 0+ 100　　 209. 6± 66. 0 215. 6± 43. 8 533. 2± 85. 4
150　　 183. 4± 56. 0△ 192. 1± 46. 2△ 390. 5± 63. 7△
200　　 156. 0± 38. 4△△ 181. 7± 55. 4△△ 277. 3± 85. 4△△
　　　　与对照组比较: * P < 0. 05　* * P < 0. 01;　与 ADR组比较: △ P < 0. 05　△△ P < 0. 01
表 2　 TFCA对服用 ADR后大鼠心肌中 SOD、 GSH-Px活性和 MDA含量的影响 ( x± s)
组别 剂量
( mg /k g)
M DA含量　　
( nmol /mg· pro)　　
SOD活性　　
( U /mg· pro)　　
GSH-Px活性　　
( U /mg· pro)　　
对照 —　　　　 7. 4± 0. 6 249. 3± 32. 6 11. 5± 2. 5
ADR 1. 5-3. 0　　 　　 16. 7± 1. 2* * 184. 7± 41. 6* * 6. 2± 0. 8* *
ADR+ T FCA 1. 5-3. 0+ 100　　 14. 1± 0. 9 204. 5± 36. 7 7. 2± 1. 5
150　　 13. 2± 0. 7△ 210. 2± 52. 3△ 8. 7± 1. 9△
200　　 8. 7± 0. 8△△ 236. 2± 35. 2△△ 9. 3± 1. 8△△
　　　　与对照组比较: * * P < 0. 01;　与 ADP组比较: △ P < 0. 05　△△ P < 0. 01
　　 ADR对心脏的毒性作用主要是 ADR的醌结
构在心肌中经黄素脱氢酶和含蛋白系统电子传递 ,
与分子氧反应产生半醌自由基和超氧阴离子 ( O÷2 )、
羟自由基 (· OH)等 [ 9]。这些自由基引发细胞膜过氧
化反应 ,使蛋白和磷脂之间发生交联 ,改变膜结构。
有报道证实 ADR中毒大鼠心肌病理切片显示心肌
细胞明显浊肿 ,胞浆质空泡变性 ,间质明显充血水肿
及横 /纵纹不清等 [10 ]。本研究表明随着 ADR在动物
体内累积 ,心脏损伤加重 ,细胞内成分大量外漏及脂
质过氧化物生成。ADR组的 LDH、 AST、 CK均较对
照组为高 (表 1) ,显示了 ADR的毒性作用。 当给予
动物 TFCA时 ,情况发生逆转化 ,随着 TFCA服用
量的增加 , LDH、 AST、 CK回落 ,说明细胞膜得到了
修补 ,外漏减少 ,显示了 TFCA的抗氧化及保护心
脏作用。 尽管 LDH、 AST、 CK可来自各种组织 ,当
同时测定血清 3种酶活性 ,在一定程度上反映心脏
受损程度 ,因此人们称这 3种酶是“心酶谱”。
已经证明 ADR引起过氧化损伤是心脏毒性的
主要原因。由于 ADR在心脏大量转化为自由基 ,促
使抗氧化酶的大量消耗 ,因此过氧化反应增强。本研
究显示 ADR组心肌中抗氧化酶 ( SOD、 GSH-Px )显
著低于对照组 ( P < 0. 01) ,而过氧化产物 ( MDA)显
著高于对照组 (P < 0. 01) ,就验证了上述论点。当给
予动物 TFCA时 ,心肌中 SOD、 GSH-Px 回升 ,
M DA下降 (表 2) ,说明 TFCA通过清除自由基 ,提
高抗氧化酶的活性、抑制过氧化反应。
新近研究表明动脉粥样硬化主要原因是形成氧
化修饰的 LDL( OX-LDL) ,因此抗氧化是治疗动脉
粥样硬化新途径 [11 ]。 黄酮类物质是自由基清除剂 ,
又是金属离子的螯合剂 ,抑制 Fenton反应。 做为抗
氧化剂的黄酮类物质 ,抑制过氧化脂质形成已为人
们所关注 [12 ]。 广枣是蒙医首选治疗心血管病的药
物 ,其有效成分可能就是 TFCA,其确切机制有待进
一步探讨。
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·529·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2001年第 32卷第 6期