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o nr a te o fFA wa s ob tai ne dwi th th e e o mP a ti bi li t y oR fa di xR e h ma n ni e a
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w h ie h a e t e d a s a s o lu
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b il iz i n g a g e n t f o r F A
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K e y W
o r d s F e r u li e a e i d R a d ix R e h m a n n i a e e li n ie a l d e e o e t io n H P L C
高效液相色谱法测定抗病毒口服液中连翘试的含量
沈阳药科大学天然药化教研室 ( 1 1 0 0 1 5) 张 国刚 告 徐绥绪
摘 要 应用高效液相色谱法测定杭病毒 口服液中连翘贰的含量 , 回收率为 10 0 . 6% 士 2 . 24 % ,相
关系数为 0 . 9 9 9 9 , R S D %一 1 . 05 % 。 本法可控制抗病毒 口服液的质量 。
关键词 抗病毒口服液 连翘贰 高效液相色谱法
抗病毒 口服液是由连翘 、 知母 、 板蓝根等
9 味中药制成的中药制剂 , 用于治疗病毒感
染 引起 的疾病 。 连翘是木 犀科植物连翘
尸 o sxr t人i
a : u s P e n s a ( T h u n b
.
) v a h l 的 干燥
果实 ,具有清热解毒 、 宣散风热 、 消痛散结之
功 。 近年来药理研究证明连翘有较广的抗菌
作用 ,对 G + 、 G 一菌及流感病毒有明显抑制作
用 ,能反 映抗病毒 口服液的药效 。连翘中成分
复杂 ,连翘醋贰 、 咖啡酸 、 芦丁 、 连翘贰及连翘
脂素等为其有效成分川 。 另外 ,在实验中 , 我
们发现连翘贰在高效液相色谱柱分离中很容
易和连翘中乃至样 品中所含其它成分分开 ,
其化学性质稳定 , 在 27 7 n m 紫外区有最大
吸收 ,重现性较好 。 因此 , 我们选择了连翘贰
作为指标成分 , 应用高效液相色谱法进行含
量测定 ,以控制抗病毒 口服液的内在质量 。
1 仪器与试药
高效液相色谱仪 : P e r k i n E lm e r 公司 (美
国 ) , 1 0 2 2一 L C 色 谱工作站 , 2 0 0 泵 , L C 2 9 5
U V 一V IS 检测器 。 溶剂过滤器 (津腾牌 ) ,超
声振荡仪 (江苏昆 山淀 山湖检测 仪器厂 生
产 ) , 样品过滤器 (大连化物所生产 ) , 微量进
样器 ( H A M I L T O N 公司生产 , 美国 ) , 氯仿 、
甲醇 (色谱纯 ) ,对照品连翘贰 (中国药品生物
制品检定所 ) 。
抗病毒 口服液 : 广州市花城制药厂 (批号
9 6 1 0 1 0 市售 ) 。
2 色谱条件
2
.
1 连翘贰最大检测波长的选择 : 见紫外吸
收光谱图 1 。
28,曰。
.
o
曰砚
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27
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O` ~ - ~ es es - ` 二二二二二二二二
2 0 0
.
0 4 0 0
.
0
波长 (mn )
图 1 连翘试紫外光谱图
2
.
2 测试条件 : 色谱柱 : 键合氨基柱 (4 . 6
m m 又 2 5 c m , 2 0 拌m ,大连化物所 ) , 流动相 :
氯仿 一甲醇 ( 6 : 1 ) ,检测波长 : 2 7 n m ,流速 : 1
m L / m i n
, 纸速 : 3 m m /m i n , 灵敏度 : 0 . 0 2 ,
R E S
:
F A S T
,进样量 : 20 拜L 。
色谱图见图 2 。
3 工作曲线的考察
精密吸取连翘贰对照品 10 m g 置于 10
A d d
r e s s : Z h a n g G u o
张国刚 男 , 天然药物
g a n g , eD p
a r t m e n t o f P h y t o e h e m i s t r y
,
S h
化学专业 ,硕士 ,工程师 。 主要科研成果 :荣获 国家医药管理局科技进步三等奖 ;新药 “ 双清 口
e u t ie a l U n i v e r s i t y
,
S h
主要研制者 新药证书 ,服液 ” 的主要研制者 ,获卫三等奖 ; “ 气滞胃痛冲剂 ” 的改型换代产品“ 气滞胃痛胶囊 ” 质量标准的主要研制者 ;新药 “ 抗病毒水针剂 ” 的主要研制者 。 其中硕士论文 : “ 抗病毒水针剂 ” 化学成分及其质量标准的初步研究受到专家的好评 ;新药 “ 糖脂双降茶 ” 质量标准的主要研制者 。
.
1 6 2
.
并 3 次氯仿液 ,水浴蒸干 ,用 甲醇转移至带塞
刻度试管中 ,挥干甲醇 ,精密取 1 m L 甲醇溶
解残渣 , 即得供试品溶液 。
5 样品的测定
精密吸取供试品溶液 ,进样 20 拜L , 按上
述色谱条件 , 每个样品测定 3 次 , 取平均值 ,
按外标两点法计算出抗病毒 口服液中连翘贰
的含量 。 结果见表 1 。
表 1 抗病毒 口服液中连翘试的含量测定
10
`
0 0
.
0
时间 t( n u 。 )
1 0 0 15 0
RSD%
C含士S%
(拌g / m L )
图 2 连翘色谱图
A
一标准品连翘贰 B 一样品
m I
J 容量瓶中 ,用 甲醇溶解并稀释至刻度制
成 1 m g /m L 的连翘贰对照品溶液 。精密吸取
1 m g /m l
子 的连翘贰对照品溶液分别稀释配
成 0 . 1 、 0 . 2 、 0 . 3 、 0 . 4 、 0 . 5 ( m g /m L )的连翘贰
对照品溶液 ,分别进样 2 0 爪 J , 每个浓度重复
6 次 ,测定每个浓度的平均色谱峰面积积分
值 。 经计算得 到连翘贰色谱峰面积积分值
( A )与连翘贰浓度 ( C )之 间的 回归方程式为
C = 8
.
1 2 又 10 一 ” A + 4 . 8 9 义 1 0一 “ , r = 0 . 9 9 9 9 。
线性回归曲线说明在 0 . 1一 0 . 5 m g /m L 浓度
范围内连翘贰浓度与色谱峰的峰面积积分值
呈良好的线性关系 ,但是由于系统误差 ,所以
标准曲线未过原点 。 因此 , 我们采用外标两点
法对样品进行测定 。
4 供试品溶液的制备
精 密量取 9 6 1 01 0 批号的抗病毒 口服液
20 m l
才 ,置于 50 m l 、 圆底烧瓶中 ,加入氯仿分
3 次热水浴 回流萃取 , 每次 20 m L 20 m in 。 合
A 3414183 3446255 3499254 3411339 34 67031 1
.
07
C含 14 . 11 14 . 24 14 . 45 14 . 09 14 . 32 1 . 05 14 . 24士0 . 15
6 精密度的测定
取 9 6 1 0 10 批号的抗病毒口服液 ,按样品
的测定项下测定其中的连翘贰的含量 ,连续
进样 5 次 , 每次 20 拜L , 测 定峰 面 积 , 结果
R S D 为 1 . 0 5% ( n = 5 ) 。
7 回收率的测定
精密吸取 9 6 1 0 1 0 批号的抗病毒 口服液
2 份 ,其中 1 份按含量测定方法测 定其中的
连翘贰的含量 (C 含 ) , 另一份定量地加入 0 . 1
m g /m l
一 的连翘贰标准品溶液 1 m I J ,摇匀 ,再
次按含量测定方法测定其中的连翘贰的含量
( C 含 ) , 并计 算 回 收率 , 结 果 为 1 0 . 6% 士
2
.
2 4%
,
R S D 为 2 . 2 2% ( n = 5 ) 。
8 结果与讨论
本法测定抗病毒 口服液中连翘贰的含
量 ,方法简便 、 稳定 、 重现性好 ,可作质量检验
的一个定量方法 。
( 1 9 9 7
一
0 2
一
2 5 收稿 )
Q u a n t i t a t i v e D e t e r m i n a t i o n o f P h y l l i r i n i n
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6士 2 . 2 4 ) % , c o e f fi e io n t o f v a r ia -
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0 5%
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v l r o t l e o r a l L i q
u i d p h y l l ir in
《中草药 》 1 9 98 年第 29 卷第 3 期 1 6 3