全 文 ：率高、传质速度快、选择性高、提取物较干净、省时、
减少有机溶剂 (本实验未加夹带剂 )、环境污染小等。
参考文献:
[1 ]　阴　健 ,郭　力 . 中药现代研究与临床应用 [M ] . 北京:学苑
出版社 , 1994.
[ 2]　张立坤 ,陈新旺 ,邹安庆 .高效液相色谱法测定复方制剂中阿
魏酸和川芎嗪 [ J ]. 中草药 , 1996, 27( 4): 213-214.
[ 3 ]　夏开元 ,阎汝男 .超临界流体萃取技术的原理和应用 [ J] . 中
国中药杂志 , 1992, 27( 8): 489.
RP-HPLC法测定酸枣仁中黄酮碳苷的含量
李玉娟 1 ,李　萍 2 ,李会军 2 ,毕开顺 1
( 1. 沈阳药科大学 药分研究室 ,辽宁 沈阳　 110016; 2. 中国药科大学 生药学教研室 ,江苏 南京　 210038)
摘　要: 目的　建立测定酸枣仁中黄酮碳苷含量的新方法。 方法　 RP-HPLC法 ,采用 Hypersil-C18柱为分析柱 ,乙
腈 -水 ( 17∶ 83)为流动相 ,检测波长为 334 nm, ,流速为 0. 8 mL /min。结果　黄酮碳苷在 5. 280～ 14. 08μg /mL范围
内与峰面积呈良好的线性关系 (r= 0. 999 7, n= 6) ,平均回收率为 95. 8%。 结论　该法简便、快速、重现性好 ,适用
于酸枣仁中黄酮碳苷的定量分析。
关键词: 酸枣仁 ;黄酮碳苷 ; RP-HPLC
中图分类号: R927. 2　　　文献标识码: B　　　文章编号: 0253 2670( 2001) 12 1079 02
Quantitative determination of spinosin in seed of Z iziphus jujuba v ar. spinosa by RP-HPLC
LI Yu-juan
1
, L I Ping
2
, L I Hui-jun
2
, BI Kai-shun
1
　　 ( 1. Depa rt ment of Pha rmaceutical Ana ly sis, Shenyang Pharmaceutical Unive rsity , Shenyang Liaoning 110016, China;
2. Depar tment of Pha rmacognosy , China Pharmaceutical Univ er sity , Nanjing Jiang su 210038, China)
Abstract: Object　 To develop a new method fo r the quantitativ e determination o f spinosin in the seed
o f Ziziphus jujuba Mill. va r. spinosa ( Bunge) Hu ex H. F. Chou. Methods　 The determination was ca r-
ried on RP-HPLC, using Hypersil-C18 column, acetoni trile∶ wa ter ( 17∶ 83, v /v ) as mobile phase wi th a
f low rate of 0. 8 mL /min and detected at the w ave leng th o f 334 nm. Results　 The calibration curv e w as
linea r in the range of 5. 280～ 14. 08μg /mL. The average recovery ra te w as 95. 8% . Conclusion　 The
method is appropriate fo r th e quanti ta tiv e determination o f spino sin.
Key words: the seed of Ziziphus jujuba Mill. v ar. spinosa ( Bunge) Hu ex H. F. Chou; spinosin; RP-
HPLC
　　酸枣仁为中医首选安神药。《中国药典》 2000年
版一部收载其为鼠李科 ( Rhamnaceae)植物酸枣
Ziz iphus jujuba Mill. va r. spinosa ( Bunge) Hu ex
H. F. Chou的干燥成熟种子 [1 ]。 其味酸性平 ,归肝、
胆、心经 ,主要用于治疗虚烦不眠、惊悸多梦、体虚多
汗、津伤口渴等症。研究表明酸枣仁中黄酮碳苷为酸
枣仁镇静催眠的有效成分之一 [ 2, 3 ] ,但迄今其含量测
定方法在国内未见报道。 本文首次采用 RP-HPLC
法对酸枣仁中黄酮碳苷进行含量测定 ,该法简便、快
速、灵敏度高 ,适合常规定量分析。
1　仪器、试剂和对照品
LC-10A高效液相色谱仪 (日本岛津公司 ) ,
SPD-10A紫外检测器 (日本岛津公司 ) , C-R6A积分
仪。
乙腈、甲醇为色谱纯 ,水为重蒸馏水 ,石油醚、正
丁醇均为分析纯 ,黄酮碳苷对照品由中国药科大学
生药学教研室李萍教授提供 (纯度为 98. 1% ) ,酸枣
仁生品药材和炒品药材分别购自辽宁朝阳、山东济
南、山东泰安、河北安国 (均经沈阳药科大学生药鉴
定研究室许春泉高级工程师鉴定 )。
2　色谱条件及系统适用性实验
色 谱 柱: Hypersil-C18 ( 4. 6 mm× 200 mm,
·1079·中草药　 Chinese Traditiona l and He rbal Drug s　 2001年第 32卷第 12期
收稿日期: 2001-03-20作者简介:李玉娟 ( 1975-) ,女 ,现在沈阳药科大学攻读药物分析学博士学位。毕开顺 ( 1956-) ,男 ,河北丰南人。 1990年毕业于沈阳药科大学 ,获理学博士学位 ; 1991-1994年赴香港中文大学中药研究中心从事博士后研究工作。现任沈阳药科大学副校长 ,药学院院长 ,教授 ,博士研究生导师。长期从事中药质量标准化研究工作 ,已发表学术论文 70余篇。
Tel: ( 024) 23843711-3363　 E-mai l: ksbi@ mail. sy. ln. cn
5μm) ,流动相: 乙腈 -水 ( 17∶ 83) ,检测波长:
334 nm ,流速: 0. 8 mL /min,柱温: 室温。
理论塔板数按黄酮碳苷计算 ,不低于 6 200,黄
酮碳苷与其相邻色谱峰的分离度均大于 1. 5。
3　对照品溶液和供试品溶液的制备
精密称取黄酮碳苷对照品 11 mg ,置 25 mL容量
瓶中 ,用甲醇溶解并定容至刻度 ,摇匀 ,备用。精密吸
取该溶液 1. 0 mL置 10 mL容量瓶中 ,用甲醇稀释至
刻度 ,摇匀。 精密吸取该溶液 0. 60, 0. 80, 1. 0, 1. 2,
1. 4, 1. 6 mL置 5 mL容量瓶中 ,用甲醇稀释至刻度 ,
摇匀 ,微孔滤膜过滤 ,取续滤液备用。 此作为对照品
溶液。
取 8份酸枣仁样品各约 1 g,精密称定后置沙氏
提取器中 ,加入 100 mL甲醇 ,回流提取 12 h后 ,将提
取液于旋转蒸发仪上挥干甲醇 ,残渣用 30 mL水溶
解 ,定量转移至 125 mL分液漏斗中 ,加入石油醚萃
取 3次 ,每次 10 mL,收集水层 ,加入水饱和正丁醇
萃取 3次 ,每次 10 mL,收集正丁醇层 ,于旋转蒸发
仪上挥干醇 ,残渣用甲醇溶解 ,定量转移至 5 mL容
量瓶中 ,用甲醇定容至刻度 ,摇匀 ,微孔滤膜过滤 ,取
续滤液备用。 此作为供试品溶液。
4　 HPLC测定
4. 1　标准工作曲线的绘制:精密吸取黄酮碳苷各对
照液 20μL,注入高效液相色谱仪 ,记录色谱图。以
对照品峰面积 ( Y )为纵坐标 ,以对照品溶液的浓度
(μg /mL, X )为横坐标 ,绘制标准工作曲线 ,黄酮碳
苷在 5. 280～ 14. 08μg /mL范围内 , Y 与 X 呈良好
线性。 所得标准工作曲线方程如下:
Y= 1. 444× 1010X - 195. 1, r= 0. 999 7(n= 6)。
4. 2　精密度、重现性与回收率实验:精密吸取同一
份样品溶液 (河北安国炒品 ) 20μL,重复进样 6次 ,
RSD= 0. 9% 。
同一份样品 (河北安国炒品 )按样品制备项下方
法平行制备 6份 ,进样分析 , RSD= 2. 5%。
精密称取同一份样品 (河北安国炒品 )约 0. 4 g ,
共 6份 ,分别加入一定量的黄酮碳苷对照品 ,按样品
测定方法进行分析 ,平均回收率为 95. 8% , RSD=
2. 2% 。
4. 3　样品测定:取 4个产地的生、炒酸枣仁共 8个
样品 ,按样品制备项下方法制备后进样分析 ,并按外
标法计算酸枣仁皂苷 A的含量 ,所得结果见表 1,其
色谱图见图 1。
A-黄酮碳苷　　　　　　 B-酸枣仁样品 (炒品 )
图 1　样品 HPLC图
表 1　样品测定结果
序号 产地 样品 测定结果 ( mg /g )
1 山东泰安 生品 0. 700
2 山东泰安 炒品 0. 726
3 山东济南 生品 0. 898
4 山东济南 炒品 1. 196
5 辽宁朝阳 生品 1. 079
6 辽宁朝阳 炒品 1. 101
7 河北安国 生品 1. 229
8 河北安国 炒品 1. 262
5　结果与讨论
5. 1　本文对提取黄酮碳苷的回流时间进行了考察 ,
8, 10, 12, 14 h相比较 , 12 h和 14 h的高 ,且 12 h和
14 h的含量基本相当 ,因此将提取时间定为 12 h。
5. 2　 8个样本的含量测定结果表明 ,不同产地的酸
枣仁中 ,黄酮碳苷的含量存在一定的差异 ,可能与不
同生长条件有关。同一产地酸枣仁的生品和炒品黄
酮碳苷含量差别较明显 ,说明在炒制后 ,酸枣仁中的
黄酮碳苷更容易溶出。该成分含量的高低是否会影
响酸枣仁的临床疗效 ,有待进一步研究。
参考文献:
[1 ]　中国药典 [ S] . 2000年版一部 .
[ 2 ]　 Won S W , Sam S K, Sang H S. et al . Th e s t ru tu re of
spinosin ( 2″-O-β-glucosylsw er ) f rom Zizphus valgari s var.
sp inosus [ J ]. Ph ytoch emist ry, 1979, 18, 353-355.
更　　正
　　《中草药》 2001年 32卷增刊第 118页表 4更正为:
表 4　乌索酸对肝脏组织学的影响
组别 动物数 气球样变 脂质变性 坏死
- + + + + + + - + + + + + + - + + +
肝损伤组　　 10 1 3 4 2 0 2 3 5 4 3 3
乌索酸治疗组 10 4 6 0 0 5 4 1 0 7 3 0
·1080· 中草药　 Chinese Traditiona l and He rbal Drug s　 2001年第 32卷第 12期