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n vitro Propagation of Common Yam (Dioscorea opposita)

怀山药的离体繁殖



全 文 :怀山药的离体繁殖△
河南师范大学 生物系 (新乡 4 5 3 0 0 2) 李明 军 寮 李金亭 朱命炜 张嘉宝
摘 要 怀 山药带节茎段在 M S + 6一 B A I ~ 2 m g / L + N A A .0 1一 1 m g / L 的培养基上培养 , 均 能
直接形成多芽体 , 均 芽数 为 3一 5 。 将多 芽体转人 M S 或 M S + K T 2 m g / L 十 N A A 0 . 02 m g / L +
P P
3。。 0 . 1 m g /L 的培养基上均 能诱导 生根 , 形成再生植株 。 但后 者形成的苗生长健壮 , 叶色浓绿 , 有
较强 的生活力 。
关键词 怀 山药 节培养 多芽体 再生植株
怀 山 药 又 名 薯 裁 及 o s c o er a pP P o s i t a
T h u n b
, , 为薯孩科薯裁属的一种缠绕草本 肉
质根状茎植物 , 是我国著名的 “ 四大怀药 ” 之
一 , 主产于河南温县 、 武阶 、 沁阳 、 博爱等 地 ,
以根状茎和珠芽 (中药称为余零子 ,俗称山药
蛋 )人药 。 具有健脾 、 固精 、 补肺 、 益肾的功能 ,
主治 肺虚 咳嗽 、 脾 虚 、 腹 泻 、 糖 尿病 、 遗 精尿
频 、 赤 白带下等症 , 因其药用价值高 、 品质好 ,
故其产品畅销国内外 .l[ 幻 。但 由于长期进行营
养繁殖 ,致使其 品质退化 , 产量 降低 ,某些优
良品种 (如铁 棍 山药 ) 已被 广大药农放弃 种
植 , 几乎处于濒临灭绝 的境地 , 因此 , 改善品
质 , 提高 产量 , 并使其优 良品种迅速推 广种
植 , 已成为怀山药生产中函待解决的一个重
要问题 。
植物组织培养技术的发展为植物 品种的
改 良提供 了一个重要 的手段 。 70 年代 中期 ,
植物 组织培养 技术开始 在薯莎属植 物 中应
用 ,并 在某些种的快速繁殖中获得成功以 4〕 。
为解决怀 山药生产 中存在的问题 , 近年来我
们开 展了怀 山药的组织培养 , 对茎尖 、 叶片 、
茎段 、 余零子等不同外植体 的培养进行 了广
泛的研究 , 并通过器官发生途径成功地建立
起了植株再生繁殖体系田 。 但这种繁殖方式
可能会产生体细胞无性 系变异 , 不利于优 良
品种的快速繁殖困 。 通过节培法既可以达到
快繁的 目的 , 又能使优 良品种的优 良种性得
以 保 持 , 这 在 薯 菠 属 的 某 些 种 中 已 有 报
道比幻 。 为此 ,我们也开展 了利用怀山药带芽
茎段进行微型繁殖的研究 。 现将这方面的研
究结果报道如下 。
1 材料与方法
1
.
1 材 料 : 怀山 药 zD’ os co er a 呼沪os i at 优 良
品种 “ 铁棍 山药 ” , 来 自河南温县农科所 , 由王
乾据高级农艺师提供 。
1
.
2 方法 : 按前法阁获得无菌试管苗并进行
继代培养 。 将继代培养达 3 年的无菌苗在超
净工作台上切成长 0 . 5 c m 左右的带一芽茎
段 , 接种在诱导多芽形成的不同培养基上 , 40
d 后统计结果 (表 1 ) 。 多芽形成后将其转人壮
苗生根培养基中 , 以获得完整的再生植株 。 .
基本 培养基 为 M S , 并 附加不同种类的
植 物 生长 调 节剂 , 如 B A 、 K T 、 G A 和 P P 3 3 3
等 , 蔗 糖 浓 度 为 3% 、 6写和 8% , 琼 脂 为
0
.
8%
,调 p H 为 5 , 8 ,在 1 2 1“ C , 1 0 8 k P a 的条
件下高压灭菌 20 m in 。
培养条件为温度 2 5 o C , 光强 2 0 0 0 l x , 每
天光照 1 6 h 。
A d d r e s s
:
L i M in g ju n
,
eD p
a r t m e n t o f Bi o lo g y
,
H e n a n N o r m
a l U n i v e r s i t y
,
X in x i a n g
李 明军 男 , 副教授 , 1 98 5 年获 中国科学院植物研究所理学硕 士学 位 。 现在河南师范大学生 物系任 教 , 多年来一直从事
植物生理学 的教学与植物组织培养方面的研究 工作 。 近年来 在国内外学术期 刊上发表或在学术 会议上交流的研究 论文 30余篇 ,参编专著 3 部 , 主持 “ 四 大怀药产业化技术研究 ” 等 四项河南 省科技攻关项 目和省科委 、省 教委的 自然科学基金研究项目 。 主持 的“ 怀山药快繁体系的建立 ” 项 目获河南省高等学 校成果暨全省科技成果展示会银奖 。△ 河南省 自然科学基金和省科技攻关项 目

2 9 6
.

说 明 , 高浓度的蔗糖可 以促进芽 的萌发和多
芽体 的形成 。 需要指出的是 , 高浓度的 6一B A
与高浓度的蔗糖组合形成 的多芽 比较短粗 、
饱满 ,但不利于后期生长 ( 因为这样的多芽体
无根且生长缓慢 , 转人生根培养基后 ,不易生
根且生长也非常缓慢 ) , 有时还观察到畸形苗
的出现 , 故这样 的组合不能用于优 良品种的
快速繁殖 。
形成 的多芽体在 4 0 d 时一般无根产生 。
将这些多芽体转人 M S 或 M S + K T Zm g / L
+ P P
3 3 3 0
.
1 m g / L + N A A 0
.
0 2 m g / h 培养
基 中培养 15 d 后即可诱导生根 。 但前者形成
的根细长 , 后者形成的根则短粗 (图 2 ) 。 从整
株形态来看 ,前者生长的苗高而细弱 , 叶色淡
绿 ,而后者形成 的苗则健壮 , 叶色浓绿 , 更适
合移栽人大 田 。 造成这种差异的原因可能与
P P 3
3能够改善试管苗的素质 , 并使其根系发
, 生长健 壮 , 适应外 界环境能力较强 l0[ 〕有
江苏新 医学 院编 .
出版社 , 1 9 7 7 : 1 6 7
姚 宗凡 , 等 主编 .
社 , 1 9 9 3 : 7 0
参 考 文 献
中药大词典 . 上册 . 上海 : 上海科技
常用 中药种植技 术 . 北京 : 金盾 出版
达关12
3 L a k s hm i S G
, e t a l
.
J H o r t
.
S e i 1 9 7 6
,
5 1
:
5 5 1
4 M a n t e l l S H
, e t a l
.
J H
o r t s e i
,
1 9 7 8
,
5 3
: 9 5
5 李 明军 , 等 . 植物生理学 通讯 , 19 97 , 3 3 ( 4) : 27 5
6 T h a n u t o n g P I
, e t a l
.
T h e o r A p p l G e n e t
, 19 8 3
, 6 6
:
2 0 9
7 L a u z e r D
, e t a l
.
P l a n t C e l l T i s s u e a n d O r g a n C u l t u r e
,
1 9 9 2
,
2 8 ( 2 )
:
2 1 5
8 张宗勤 , 等 . 生物技术 , 1 9 98 , 8 ( 1 ) : 18
9 李明军 . 植物学通报 , 19 9 5 , 1 2 ( 2 ) : 2 7
1 0 李明军 , 等 . 作物学报 , 1 9 9 7 , 2 3 ( 6 ) : 7 5 9
( 1 9 9 8

0 7

2 0 收稿 )
L i M i n g j
4 5 3 0 0 2 )
A b s t r 皿C t
b
u d s P e r
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v i t or P r o P a g a t i o n o f C o m m o n Y a m (刀止口 s c o er a p P P o s i t a )
u n , L i Ji n t in g
,
Z h u M in g w
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i
, e t a l
.
( D e p a r t m e n t o f B i o l o g y
,
H e n a n N o r m a l U n i v e r s i ty
,
X i n
x i
-
及 os c o er a O PP o s i t a T h u n b . w a s m ie r o p r o p a g a t e d f r o m n o d a l e u l t u r e . T h i s s p e e i e s p r o d u e e d 3
n o d e w h e n e u l t u r e d o n m o d if i e d M S M
e
d i
u m s u p p le m e n t e d w it h 6

B A I ~ 2 m g / L
a n
d N A A 0
.
1
m g / L
.
R
o o t e o u ld b e i n d u e e d w h e n t h e s e m u l t i b u d s w e r e t r a n s p la n t e d o n t o M S b
a s i e M
e d i u m o r M S b
a -
M
e d iu m s u p p l e m e n t e d w i t h K T 2 m g / L
,
P P 33: 0
.
1 m g /L
a n d N A A 0
.
0 2 m g / L
.
T h
e r e g e n e r a t e d p la n t le t s
ùics
t r e a t e d w it h P P 33 : g r e w r o b u s t l y a n d d e v e l o p e d d e e p g r e e n l e a v e s w it h v ig o u r
·
K e y w o r d s 及 o s c o er a OP P o s i t a T h u n b . n o d a l c u l t u r e m u l t i p l e b u d s r e g e n e r a t e d p la n t l e t s
《中草药 》 杂志被引频次在我国科技期刊中的显著地位
1 9 9 7 年中国科技论文统计 源期刊被引次数 《中草药》 杂志为 71 1 次 , 排在全国科技学术
期刊的第 14 位 , 前 20 位的刊物和被引用次数分别依次为 : ①分析化 学 2 3 8 1②科学通报 2’ 2 9
③高等学校化 学学报 1 3 8 3④植物学报 1 1 3 8⑤中国科 学 ( B ) 1 0 7 1⑥植物生理学通报 93 2⑦中
华 医学杂志 8 83 ⑧分析 实验 室 83 2⑨药学学报 81 4L 中华外科杂志 7 86 L化学学报 75 3L物理
学报 72 6L植物生理 学报 72 2L中草药 71 1L金属学报 7 0 L理化检验化学分册 6 92 L中华内
科杂志 6 47 L中国科学 ( A ) 63 4L中华骨科杂志 63 2L中国农业科学 6 2 3 。
1 9 9 7 年中国科学引文数据库的统计数据表明 , 在被引频次最高的中国利技期刊的 50 0 名中 , 综合名次
《中草药》杂志列为第 16 位 , 在其中生命科学和医药卫生类期刊中韵防第 4 位 , 前 20 位的期刊分别依次为 :
①药学学报 综合名次 9②中华医学杂志 n ③中华夕阱杂志 15 ④中草药 16 ⑤中华内科杂志 17 ⑥遗传学报 19 ⑦中华肿瘤杂志 2 ⑧中华心血管病杂志 23 , 中华血液学杂志 23 ⑨生物化学与生物物理进展 25 L中
国药理学报 27 @ 中华妇产科杂志 30 L中华骨科杂志 34 L昆虫学报 37 L环境科学 38 L中国中药杂志 40
L生物化学与生物物理学报 4 L中国免疫学杂志 45 L 中华泌尿夕阱杂志 46 L中华微生物学和免疫学杂
志 5 2L 中国中西医结合杂志 5 3 。
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2 9 8
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