免费文献传递   相关文献

Experimental studies on immunomoderating effect of XIANGQI ORAL SOLUTION on non-specific and humoral immunity

香芪口服液增强非特异免疫和体液免疫作用的实验研究



全 文 :香芪口服液增强非特异免疫和体液免疫作用的实验研究
曲章义 1, 2 ,郭彩玲 2 ,凌 秋 2 ,李 迪 2 ,谷鸿喜 2 ,郑 树 1, 2⒇
( 1. 浙江大学肿瘤学研究所 ,浙江 杭州  310009; 2. 哈尔滨医科大学 微生物学教研室 ,黑龙江 哈尔滨  150086)
摘 要: 目的 研究中药制剂香芪口服液对机体非特异免疫作用和体液免疫作用的影响。 方法 用碳粒廓清法测
定单核巨噬细胞的吞噬功能 ,从而研究对非特异性免疫功能的影响 ;用溶血空斑形成细胞测定法研究对体液免疫
功能的影响。 结果 香芪口服液可有效地纠正免疫功能低下 ,显著提高巨噬细胞的吞噬功能以及使抗体生成细胞
数增多 ,使两者恢复至正常水平。 结论 香芪口服液可有效地恢复和增强继发性免疫功能低下小鼠的非特异性免
疫和体液免疫功能。
关键词: 香芪口服液 ;香菇多糖 ;黄芪多糖 ;免疫功能低下 ;非特异免疫 ;体液免疫
中图分类号: R285. 5; R286. 95   文献标识码: A   文章编号: 0253 2670( 2001) 10 0908 03
Experimental studies on immunomoderating effect of XIANGQI ORAL SOLUTION on
non-specific and humoral immunity
QU Zhang-yi
1, 2
, GUO Cai-ling
2
, LIN G Qiu
1
, L I Di
2
, GU Hong-x i
2
, ZHEN G Shu
1, 2
   ( 1. Institute o f Tumo r, Zh ejiang Univ ersity , Hang zhou Zhejiang 310009, China; 2. Depar tment of Microbio log y ,
Harbin Univ er sity o f Medical Sciences, Harbin Heilong jiang 150086, China )
Abstract: Object  To study the immunomodera ting effects o f Chinese compound preparation X I-
AN GQ I O RAL SOLU TION ( XQOS) on non-speci fic and humoral immuni ty. Methods  The studies w ere
carried out by determining the phagocytic function of mononuclea r macrophage wi th carbon particle clea r-
ance test to obtain the effect on non-specific immuni ty , the ef fect on humo ral immuni ty was studied w ith
plaque forming cell test. Results  XQOS could effeciently redress immunodeficiency and enhance phago-
cytic function of macrophage to increase the number of plaque fo rming cells, enabling the recovery of both
to their no rmal levels. Conclusion  XQOS could recover bo th non-speci fic and humo ral immunity of mice
w ith secondary immunodeficiency.
Key words: X IAN GQI ORAL SOLU TION ( X QO S) ; lentinan; polysaccha ride o f Radix Astragali;
immunodeficiency; non-specific immuni ty; humoral immuni ty
  多糖类化合物具有较强的抗衰老、抗病毒和抗
肿瘤的作用 ,其作用的发挥主要依赖于对免疫功能
的调节。研究表明 ,香菇多糖能促进 IL-1、 IL-2、 IL-
3和 IFN等细胞因子的生成 ,提高由抗原诱导的 B
细胞合成抗体的能力 ,提高 T H和 TC细胞的活
性 [1, 2 ] ,在 MΥ参与下 ,使免疫功能低下小鼠的免疫
功能恢复至正常水平 [3 ]。黄芪多糖不仅能提高正常
机体的抗体生成能力 [4 ] ,还能增强小鼠腹腔巨噬细
胞吞噬功能及增强辅助性 T细胞亚群等 [5 ]。为探讨
香菇多糖和黄芪多糖两者合用对免疫功能的协同调
节作用 ,本文以继发性免疫功能低下小鼠为实验对
象 ,研究了以香菇多糖和黄芪多糖为主要成分的香
芪口服液对继发性免疫功能低下小鼠非特异免疫和
体液免疫的影响。
1 材料和方法
1. 1 动物:昆明系小鼠 , 4周龄 ,体重 ( 20± 2) g ,购
自黑龙江省中医药大学实验动物中心。
1. 2 药物:香芪口服液由哈尔滨医科大学微生物学
教研室研制 (质控标准 Q /HYX001-1999) ,西洋参
口服液由哈尔滨制药三厂生产。
1. 3 实验分组及免疫功能低下模型建立:将小鼠随
机分为 A、 B、 C、 D 4组 , A组为正常对照组 ; B组为
免疫低下对照组 ; C组为香芪口服液组 ; D组为西洋
参阳性药物对照组。 B、 C、 D组 sc氢化可的松
( HC) ,剂量为 30 mg /kg ,连续 5 d,建立免疫功能低
下模型。 A组注射生理盐水 ,剂量为 6 mL /kg,连续
·908· 中草药  Chinese Traditiona l and He rbal Drug s  2001年第 32卷第 10期
⒇ 收稿日期: 2001-03-26基金项目:国家自然科学基金资助项目 ,项目批准号: 39670817作者简介:曲章义 ( 1961-) ,男 ,黑龙江哈尔滨市人 ,哈尔滨医科大学微生物学教研室教授 ,浙江大学肿瘤学研究所博士研究生。主要从事分子病毒学、分子肿瘤学和天然药物抗病毒、抗肿瘤作用的实验研究。现主持国家自然科学基金和黑龙江省科委课题 3项 ,主编出版“细胞因子”等专著 3部 ,参编专著及教材 5部 ,发表研究论文 30余篇。
5 d。 于第 6天起 , A、 B组用生理盐水 , C组 ig香芪
口服液 , D组 ig西洋参口服液 ,剂量为 3 mg /kg,连
续 ig 6 d。
1. 4 溶血空斑形成细胞 ( PFC)测定: 在 ig给药的
第 3天 ,分别 ip绵羊红细胞 ( SRBC) ,免疫各组 10
只小鼠。 SRBC注射剂量为 3× 107~ 3× 108 /mL的
脾细胞悬液 , SRBC配成 3× 109 /mL,将补体以 1∶
3稀释 ,然后取 0. 5 mL脾细胞悬液 , 0. 1 mL SRBC
及 0. 1 mL补体于试管中混匀 ,取 70μL注入用两
张载玻片制成的小室中 ,熔化石蜡将小室封闭 ,置于
37℃ 温箱培养 45 min,肉眼计数每个小室的空斑
数 ,即为 1× 105个脾细胞中 PFC数。
1. 5 碳粒廓清法测单核巨噬细胞吞噬功能:于停止
ig给药的次日 ,向每组中余下的 6只小鼠经尾 iv印
度墨汁 (先用生理盐水 1∶ 5释释 ) 0. 05 mL /10 g ,
于 1 min ( t 1 )和 5 min ( t5 )后分别取其左、右眼球采
血 ,各取血 40μL,分别加入 4 mL 0. 1% Na2 CO3溶
液中摇匀 ,用分光光度计在 680 nm下测定吸光度
( At1、 At5 ) ,计算廓清指数 K值 ,公式为:
廓清指数 K= log At1- log At5 /t5- t1
2 结果
2. 1 对继发性免疫功能低下小鼠非特异免疫功能
的影响:结果见表 1。
表 1 碳粒廓清法测定 MΥ吞噬功能的结果 ( x± s)
组别 n 廓清指数 K  
正常 6 0. 023± 0. 002*
低下 6 0. 014± 0. 002
香芪 6 0. 055± 0. 010* △
西洋参 6 0. 045± 0. 008* △
  与低下组相比: * P < 0. 001; 与正常组相比: △ P < 0. 001
从表 1看出 , HC构建的免疫低下组 ,其廓清指
数比正常对照组明显降低 ,二者有显著差异 ( P <
0. 001) ;香芪口服液组的廓清指数已达到甚至超过
了正常组水平 (P < 0. 001) ;与西洋参阳性对照组相
比 ,香芪口服液与其无显著差异 ( P> 0. 05) ,但数值
上有提高。实验结果表明 ,香芪口服液能够显著增强
免疫功能低下小鼠的吞噬细胞功能 ,从而提高非特
异性免疫水平。
2. 2 对继发性免疫功能低下小鼠体液免疫功能的
影响:结果见表 2。
由表 2可以看出 ,由 HC构建的免疫低下模型
小鼠 ,其 PFC数较正常组显著减少 ( P < 0. 001)。香
芪组的 PFC数比低下组明显升高 ,二者有显著差异
( P < 0. 001)。 与正常组及西洋参阳性对照组相比 ,
香芪组的 PFC虽与其无显著差异 (P> 0. 05) ,但数
表 2 溶血空斑形成细胞 (PFC)测定结果
组别 n PFC (个 /1× 105脾细胞 )
正常 10 73. 4± 9. 5*
低下 10 49. 2± 11. 1
香芪 10 83. 1± 16. 1*
西洋参 10 80. 3± 7. 9*
  与低下组相比: * P < 0. 001
值上已有升高的趋势。实验结果表明 ,香芪口服液可
显著提高继发性免疫功能低下小鼠的溶血空斑形成
细胞数 ,使其恢复至正常水平 ,从而提高小鼠的体液
免疫功能。
3 讨论
非特异性免疫和体液免疫是机体免疫系统的重
要组成部分。单核巨噬细胞的吞噬能力是衡量机体
非特异免疫功能的标志之一。当细菌、异物等抗原性
物质进入机体后 ,可迅速被单核巨噬系统吞噬和清
除 ,因而巨噬细胞廓清指数的多少可以反映其吞噬
功能的强弱 [7 ]。针对病原微生物 ,体液免疫肩负着抗
感染、免疫调理等作用 ,它可能通过产生抗体与对应
的抗原特异性结合产生各种生物学效应 ,所以抗体
产生细胞体现了体液免疫功能的强度。 在 PFC法
中 ,每个空斑表示一个抗体生成细胞 ,故而空斑的数
量较精确反映机体的体液免疫功能。
本实验通过测定香芪口服液对免疫功能低下小
鼠的抗体生成细胞及廓清指数的影响 ,研究香芪口
服液的免疫调节作用。实验结果显示 ,香芪口服液可
以增强巨噬细胞吞噬异物的能力 ,同时还促进 B细
胞增殖分化 ,使抗体生成细胞数显著增多 ,说明香芪
口服液能显著提高继发性免疫功能低下小鼠机体的
体液免疫和非特异免疫功能。
香芪口服液免疫调节的机制推测是对抗小剂量
HC的免疫低下作用 ,在促进吞噬细胞吞噬功能和
溶酶体水解酶含量增加等非特异免疫活性的基础
上 ,使 MΥ处理和传递抗原的能力得到增强 ,同时
MΥ释放的 IL-1, CSF等细胞因子也增多 ,促进诱
导造血干细胞产生白细胞集落以及 B细胞增殖分
化 ,使脾细胞数和 PFC数达到正常对照值 ,提高过
低的 IgM和 IgG水平。有人报道 ,黄芪调节免疫功
能是通过 T细胞介导的 ,它可以提高正常小鼠的抗
体形成量 ,但对于去胸腺小鼠此作用消失 [6 ]。
参考文献:
[1 ] 曲章义 ,牛美娟 ,郭彩玲 ,等 . 香菇多糖抗肿瘤作用的机理 [ J ].
中国食用菌 , 1997, 16( 5): 3-5.
[ 2 ]  Maeda Y, Takeh am a S, Koh ara, et al . Polygenic cont rol of
th e ex pres sion of biological activit ies of an anti tumor polys ac-
chride [ J ]. Lent inan In t J Immunophar1, 1997, 19: 469-472.
[3 ] 曹雪瑜 ,李女娣 ,陈力力 ,等 . 香菇多糖对免疫功能低下小鼠的
·909·中草药  Chinese Traditiona l and He rbal Drug s  2001年第 32卷第 10期
免疫调节作用 [ J ]. 中国中药杂志 , 1989, 14( 2): 46-48.
[4 ] 毛小娟 ,王军志 ,王凤蕴 . 红芪多糖和黄芪多糖的免疫调节作
用 [ J] .中华微生物学和免疫学杂志 , 1988, 8: 365-367.
[5 ] 赵克胜 ,丁丽轩 ,孔海燕 ,等 .黄芪多糖增强人外周血单个和细
胞产生肿瘤坏死因子的研究 [ J ]. 中国中西医结合杂志 , 1993,
13( 5): 263-264.
[ 6 ] 耿长山 . 黄芪多糖对去胸腺小鼠促进抗体产生机理的探讨
[ J] .上海免疫学杂志 , 1985, 5( 2): 69-70.
[ 7 ] 曲章义 ,赵育莹 ,刘惠雯 ,等 . 细胞因子 [M ] . 哈尔滨: 黑龙江
科技出版社 , 1998.
中药四性的生物热动力学研究 (Ⅱ )
参叶和参花药性的微量量热学比较
余惠 2 ,肖小河 1 ,刘塔斯 2 ,赵艳玲 1 ,袁海龙 1 ,谭安民 3 ,高晓山 4⒇
( 1. 解放军 302医院 药学部 ,北京  100039; 2. 湖南中医学院药学院 ,湖南 长沙  410007; 3. 北京医科大学 天然
药物及仿生药物国家重点实验室 ,北京  100083; 4. 中国中医研究院中药研究所 ,北京  100700)
摘 要: 目的 从生物物理化学的角度 ,阐明中药四性 (寒、热、温、凉 )的客观真实性。方法 利用微量量热法 ,测定
了大肠杆菌在不同条件下的生长热谱曲线 ,得到了相应的生物热动力学参数如生长速率常数 (K )、抑制率 ( I )、半抑
制率 ( IC50 )、热焓 (ΔH )。根据生物热动力学通用数值 ,结合本草文献报道 ,综合分析了参叶和参花药性的差异所在。
结果 参叶和参花抑制细菌生长的热谱曲线 ,其形状基本相同 ,随着药物浓度的加大 ,代谢过程的停滞期延长 ,生
长代谢峰后移 ;其热力学参数热焓 (Δ H)存在较稳定的差异—— 参叶降低了细菌生长代谢过程中热量的释放 ,而参
花增加了细菌生长代谢过程中热量的释放。 结论 微量量热法可作为刻划中药药性的一个新的有效手段 ,亦可作
为中药活性筛选的新工具。
关键词: 中药四性 ;微量量热法 ;参叶 ;参花 ;热焓
中图分类号: R285. 1   文献标识码: A   文章编号: 0253 2670( 2001) 10 0910 04
Biothermodynamic study on four therapeutic features of TCM
Ⅱ Comparison of therapeutic features of Folium ginseng and Flos ginseng by microcalorimetry
YU Hui-min2 , X IAO Xiao-he1 , LIU Ta-si2 , ZHAO Yan-ling1 ,
YU AN Hai-long
1 , T AN An-min
3 , GAO Xiao-shan
4
   ( 1. Depa rtment o f Pharmacy, 302 Hospital of PLA , Beijing 100039, China; 2. Co llege o f Pharmacy , Hunan Univ ersity
o f TCM , Chang sha Hunan 410007; 3. Na tiona l Resear ch Labo rato ry o f Na tural and Biomimetic Drug s, Beijing Unive rsity of
Medical Sciences, Beijing 100083, China; 4. Institute o f Chinese Ma teria Medica, Chinese Academy o f TCM , Beijing
100700, China)
Abstract: Object  To demonstrate the naked truth of four therapeutic fea tures of TCM ( cold, ho t,
w arm and cool ) f rom biophysical and biochemica l point of view. Methods  Grow th thermogenesis curves
o f Escherichia col i were determined under dif ferent conditions by micro calo rimetry to giv e biothermody-
namic parameters, such as mul tiplication constant (k ) , median inhibitory concentration ( IC50 ) , and en-
thalpy (ΔH) . Dif ferences betw een folia ginseng and f los ginseng w ere comprehensiv ely compa red wi th ref-
erence to classical Chinese li teratures on material medica. Results  The bacteriosta tic curv e o f bo th drug s
w ere basically simi lar. With increasing concentra tion of decoctions of bo th drug s, the lag phase w as de-
layed and the peaks shif ted to the right. While the di fference o fΔ H was stable, w hich decreases wi th the
increasing concentra tion of Folium ginseng , but increases wi th increasing concentration o f Flos ginseng.
Conclusion  Micro calo rimetry is not only a new effectiv e method to describe the therapeutic features of
TCM , but also could be used as a tool fo r the screening o f activ e TCM.
Key words: four therapeutic fea tures of TCM; micro calo rimetry; Fol ium ginseng , Flos ginseng, en-
thalpy (ΔH)
·910· 中草药  Chinese Traditiona l and He rbal Drug s  2001年第 32卷第 10期
收稿日期: 2001-04-04基金项目:国家自然科学基金资助项目 ( 39970911)作者简介:余惠 ( 1972-) ,男 ,新疆省乌鲁木齐市人 , 1994年毕业于新疆中医学院中药专业 ; 1999年至今于湖南中医学院及解放军 302医院攻读硕士学位。