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90 0
. 中草药 C h in e s e T r a d it io n a l a n d H e r b a l D r u g s 2 0 0 0年第 3 1卷第 12 期
一 2 , 乙醚萃取 4 次 , 合并醚层 , 用 20 m I J 水洗 至中
性 , 回收乙醚 ,加甲醇溶解并稀释至 25 m L ,取 l m L
加 甲醇稀释至 10 m L ,供分析用 。
②精密称取关木通粗粉适量 ,加 10 %含 甲酸的
丙酮 50 m L ,置沙氏提取器中提取至提取液近无色 ,
回收溶媒 ,残渣用 0 . 5%氢氧化钠 15 m L 溶解 并转
移至分液漏斗 中 ( p H 一 10 ) , 用乙 醚萃取 2 次 , 每次
15 m L
, 萃取后 的碱液用 3 . 6%硫酸溶液调 p H 一 2 ,
乙醚萃取 4 次 ,合并醚层 , 回收乙 醚 , 加甲醇溶解并
稀释至 25 m l 一 ,取 1 m I J 加甲醇稀释至 10 m L ,供分
析用 。
③精密称取关木通粗粉适量 , 加甲醇 50 m L , 超
声提取 30 m in ,提取液供分析用 。
④精密称取关木通粗粉适量 ,加甲醇 50 m L , 置
索氏提取器 中提取至近无色 ,提取液供分析用 。
根据以上 4 种供试液的紫外光谱和对照品马兜
铃酸 I 比较 ,结果表明以①法提取效果最好 。
表 2 不 同提取方 法的比较
提取方法
总酸含量 (% )
① ② ③
9 0 2
.
7 5
2
.
4 回收率试验 : 精密称取 同一样品 8 份 , 其 中 6
份加人一定量的马兜铃酸 I 对照品 , 按①法制备供
试品溶液 ,测定吸光度计算 回收率 。 结果加样 回收率
为 9 8 . 5% , R S D = 2 . 0 4% ( n = 6 ) 。
2
.
5 样品测定 : 精密称取关木通粗粉适量 ,按①法制
备供试品溶液 , 测定吸光度并计算含量 ,结果见表 lo
3 讨论
3
.
1 关木通 中含有木、兰碱 , 干扰马兜铃酸类成分的
测定 ,我们采用经酸 、 碱处理 、 有机溶媒萃取纯化 , 以
消除木兰碱的干扰 , 结果表明以 氨水提取 , 酸化后用
乙 醚萃取效果最好 。
3
.
2 不同来源的关木通 中总马兜铃酸的含量差异
较大 ,其中样品 2 未去栓皮 ,总酸含量较高 。 故我们
认为栓皮中马兜酸类成分的含量较高 ; 样品 16 中含
量最低 ,结合药材 的外观质量 ,发现该样 品可能因为
在采收加工或贮运过程中生霉 ,药材变黑 ,致使总酸
含量降低 。
3
.
3 文献报道 , 大 鼠口 服马兜铃酸 的 L D S。平均为
1 9 3
.
7 m g / k g ;药典规定关木通 的用量为 3 ~ 6 9 ,按
6 9 计算 , 治疗指数 大于 10 为安全可靠 , 马兜铃 酸
的含量不得高于 4 . 85 % 。 故只要合理控制关木通的
用量 ,均不至于引起马兜铃酸中毒 。
参 考 文 献
1 中华人 民共和 国药典 . 一部 . 1 995 : 12 比
2 丁林生 ,楼 风昌 . 中草药 , 19 83 , 14 : 4 24
3 M e n g s U
,
S t o t z e m C D
.
M e d s
e
i R e s
, 1 9 9 2
, 20 : 2 0 3
4 P a t t P
.
A r z n e im i t t e l F o r s e h
, 1 9 6 5
, 15 : 9 0
5 谭生建 ,杨 国芬 , 梁玉琴 , 等 . 中国 中药杂志 , 1 9 93 , l 8( 3 ) : 16 9
( 2 0 0 0
一
0 1
一
0 7 收稿 )
复方制剂 “ 稚泻停 口服液 ” 中柠檬酸的 R P 一H P L C 测定研究
陕西师范大学化学系 (西安 7 1 0 0 6 2 ) 陈战 国 ’ 吕九如
摘 要 建立 了用 R P 一H P L C 法直接测定复方制剂 “ 稚泻停口 服液 ” 中柠檬酸含量 的方法 。 线性 回归方程为 Y 一
4 3 5 9 4X 一 3 3 , : = 0 . 9 9 9 5 。 线性范围为 0 . 4 7~ 1 5 . 6 4 拌g , R S D 为 0 . 6 1% ,平均 回收率为 1 0 0 % ( n 一 7 ) 。 一次测定只
需 20 m in ,测定时样品无需特殊处理 。
关键词 R P 一H P L C 柠檬酸 乌梅 稚泻停 口 服液
D e t e r m i n a t i o n o f C i t r i c A c id i n C o m P o u n d C h i n e s e H e r b a l P r e P a r a t i o n
“ Z h i x i e t i n g ” O r a l L i q u i d b y R P 一 H p L C
D e P a r t m e n t o f C h e m is t r y
,
S h
a n x i N o r m a l U n iv e r s i t y
A b s t r a e t T o e s t a b l i s h a m e t h o d f o r t h e
( X i
’ a n 7 1 0 0 6 2 ) C h e n Z h a n g u o a n d L u Ji u r n
d e t e r m i n a t i o n o f e i t r i e a e id i n
“ Z h i x i e t i n g ”
w h ie h 15 a e o m p o u n d C h i n e s e h e r b a l p r e p a r a t i o n e o n t a i n i n g F r u c t u s M
u m e a s t h e m a i n a e t iv e
o r a l l i q u id
,
i n g r e d i e n t
,
s u p p l e m e n t e d w i t h s e v e r a l o t h e r h e r b a l d r u g s
,
f o r t h e t r e a t m e n t o f i n f a n t i l e d i a r r h e a
.
C o n t e n t s o f e i t r i e
A d d r e s s
:
C h e n Z h a n g u o
,
eD p
a r tm e n t o f C h e m i s t r y
,
S h
a n x i N o r m a l U n i v e r s i t y
,
X i
’
a n
陈战 国 男 , 1 9 6 0 年生 ,高级 工程师 , 理学硕士 。 长期从事药物分析研究 工作 。 1 9 81 年毕业 于陕西师范大学化学系 , 现任化学系化学实验教学 中心副 主任 。 1 9 9 1 年至 1 9 9 9 年获省 、 部级科学技术进步奖三项 ,发表论文 40 余篇 。 共同承担并完成国家 自然科学基金项 目一项 ,陕西省 自然科学基金项 目二项 。 研制 出三类中药 “ 稚泻停冲剂 ” 一种 , 四类中药 “ 稚泻停 口服液 ”一种 , 五类 西药 “ 盐酸二甲双肌 ” (治糖尿病药 )粉剂和片剂生产工艺 两项 。
中草药 C h in e s e T r a d i t io n a l a n d H e r b a l D r u g s 2 0 0 0 年第 3 1卷第 12 期 90 1
a e id in s a m p l e s o f t h e p r e p a r a t io n w e r e d e t e r m in e d b y R P
一
H P I
泌
C o n S U P E I
J
C ( ) 5 1
_
I
J
I
,
C
l : e o l u m n ( 1 5 e m x
4
.
6 m m ; 5 拌m ) w i t h a m o b il e p h a s e o f 0 . 5% N H 、 H : p ( ) 4 a n d d e t e e t e d a t a w a v e l e n g t h o f 2 1 4 n m . T h e l i n -
e a r r e g r e s s io n e q u a t i o n w a s f o u n d t o b e y = 4 3 5 9 4 X 一 3 3 ( ,一 0 . 9 9 9 8 ) ; Ii n e a r r a n g e o f d e t e rm i n a t i o n ,
0
.
4 7~ 1 5
.
6 4 拜g ; a v e r a g e r e e o v e r y r a t e , 1 0 0% ( n = 7 ) ; R S D = 0 . 6 1% ; m i n im u m d e t e e t a b l e a m o u n t 2
.
6 x
10
一 ’ g ; a n d a s i n g l e d e t e r m i n a t i o n n e e d e d o n l y
l
2 0 m i n
.
T h e m
e t li o d p r o v e d t o b e s im p l e
, n e e d n o p r e t r e a t
-
m e n t o f s a m l) l e
, a n d m a y b e r e e o m m e n d e d f o r t h e q u a l i t y e o n t r ( ) l (
)
f
“
Z h i x i e t i n g
” o r a l l i q u i d
.
K e y w o r d s R P
一
H P I
J
C e i t r i e a e id F ur c t u s M
“ m e “ Z h i x ie t i n g ” o r a l l i q u i d
复方制剂 “ 稚泻停 口 服液 ” 是我们近年来研制的
一种治疗小儿腹泻的有效药物 ,临床试验结果显示 ,
总有效率达 97 . 3% 。 该药是 由乌梅 、 甘草等多味中
药材组成 , 经提取等工艺制成的中药制剂 。 中医理论
研究证明 , “ 稚泻停 口服液 ” 的止泻功能与其所含 的
乌梅有直接关系 。现代药理研究证明 ,乌梅的抗菌和
固涩作用与乌梅 中的有机酸密切相关 .l[ 2〕 。化学成分
研究证明 , 乌梅中除含 有多量 的柠檬酸和较 多量 的
唬拍酸外 ,还有少量 的酒石酸 、 苹果酸 、草酸 、 抗坏血
酸以及齐墩果酸闭 。 因此 ,可 以认为柠檬酸是乌梅中
的有效成分之一 ,也是 “ 稚泻停 口服液 ” 中的有效成
分之一 。 我们建立 了 R P 一 H IP 刀 法直接测定 “ 稚泻停
口服液 ” 中柠檬酸的新方法 ,该方法也可作为 “ 稚泻
停 口 服液 ” 的质量标准检验方法 。 实验证明 , 该方法
简单 、 准确 , 回收率在 9 . 5%一 10 1% ,快速 ,一次测
定只需 2 0 m i n 。
1 实验部分
1
.
1 仪器与试剂 : 日本岛津 L C 一 6 A 高效液相色谱
系统 , S P D 一 6 A V 紫外检测器 , C 一 R 3 A 色谱数据处理
仪 ,柠檬酸 、 ( N H 4 ) H ZP O ; 、 H 3P O ; 均为国产 A R 级 。
1
.
2 色谱条件 : 色谱柱 : S U P E L C O S l l J , L C 一 18 ( 1 5
e
m x 4
.
6 m m
, 5 拜m ) 。 流动相 ` : 0 . 5% N H ; H ZP O 4 水
溶液 , 用 H 3P O ; 调至 p H 2 . 8 。 流速 : 1 m L /m i n , 纸
速 : 5 m m /m i n 。 A U F S : 0 . 1 6 ,检测波长 2 1 4 n m 。
1
.
3 储备液 的配制 : 取柠檬酸 , 在 80 ℃下烘至恒
重 , 精密称取 0 . 0 64 6 9 ,溶于 50 m L 量瓶中 ,加流动
相至刻度 。 精密移取上述溶液 3 . 0 m L 于 25 m L 量
瓶 中 , 加 流 动 相 至 刻 度 , 得 所 需 储备液 , 浓 度 为
1 5 5
.
0 4 拼g /m I J 。
2 实验结果
2
.
1 标准工作曲线的绘制 : 在上述色谱条件下 ,分
别取储备液 3 , 5 , 7 , 9 , 1 1 , 1 3 , 1 5 , 1 7 拜L , 注人色谱柱
中 , 每份平行进样 3 次 , 以 3 次峰面积的平均值为纵
坐标 ( Y ) , 以进样量 伽 g )为横坐标 ( X )进行线性 回
归 , 柠檬 酸 的 回归 方程 为 Y 一 4 3 5 94 X 一 3 3 , 二 -
0
.
9 9 9 8
, 线性范围为 0 . 4 7一 1 5 . 6 4 拜g 。 色谱图见图
l
一
A
。
2
.
2 精密度试验 :精密移取储备液一定量于 25 m L
泞 , ,
时间 `扣妞》
A
一柠檬酸 B一稚泻停 口服液 C一阴性对照
圈 1 样品色谱圈
量瓶中 , 加流动相至刻度 , 摇均 ,得供精密度试验用 法进样 10 拌L ,色谱图见图 1一 B 。 由色谱图可知 ,柠檬
标准溶液 , 浓度为 5 1 . 68 拜g /m L , 每次进标准溶液 酸可与其它组分完全分离 ,无干扰 。
20 拜L , 每份 平行 3 次 , 峰面积 的精密度 测定 结果 2 . 5 阴性对照试验 : 按制备工艺 , 制备缺乌梅供试
R S D 为 0 . 61 % 。 液 。 按样品测定进行色谱分析 ,柠檬酸峰消失 ,说明
2
.
3 最低检出量 : 在 0 . 16 A U F S 时 ,按色谱要求 , 柠檬酸来自乌梅中 。 见图 1一C 。
以噪音的 3 倍峰高计算柠檬的最低检出量为 2 . 6 x 2 . 6 稳定性试验 : 储备液在 1 , 2 , 4 , 6 , 8 , 10 , 12 h 时
10 一
, g
。 分别进样 10 拌L , 每份平行进样 3 次 , 测得 日内 R S D
2
.
4 干扰性试验 : 在上述色谱条件下 ,按样品测定 为 0 . 65 % 。 在 24 , 48 , 72 , 96 h 时分别进样 巧 拌 L ,每
·
9 0 2
. 中草药 C h in e s e T r a d i t i on a l a n d H e r b a l D r u gs 2 0 0 0年第 3一卷第 1 2期
份进样 3次 , 测得 日间 R S D 为 6 . 7% 。 说明在 12 h
内柠檬酸测定的稳定性 良好 。
2
.
7 回收率试验 : 取 已知浓度 的口 服液 7 份 , 分别
精密加人 柠檬 酸 固体 3 0 . 6 3 , 3 1 . 5 3 , 3 2 . 3 1 , 3 3 . 5 2 ,
3 4
·
1 4
,
3 4
·
8 3
,
3 5
·
6 6 m g 于上述 7 份 口 服液 中 , 使其
完全溶解 ,微孔滤膜 ( 0 . 45 拜m )过滤 , 最后分别定容
到 1 0 0 m L 量瓶 中 ,按样品测定法测定 回收率 , 7 次
测定回收率平均结果为 1 0 % , R S D 一 0 . 48 % 。
2
.
8 样品测定 : 取 3 批 10 m L 装 口 服液各 10 支 ,
用微孔滤膜 ( 0 . 45 拼m )过滤 , 分别移取 10 m L 滤液
于 1 0 0 m L 量瓶中 ,加流动相至刻度 ,摇 匀后每批各
平行进样 4 次 , 每次进样 10 “ L ,峰 面积取平均值 ,
分别代人 回归方程 ,外标法定量 。 3 批稚泻停 口服液
中柠檬酸的含量测定结果见表 1 。
3 讨论
3
.
1 本文优化 的色谱条件下用 R P 一 H P L C 法测定
表 1 稚泻停 口服液中柠檬酸的含 t 测定结果
批 号
9 9 4 1 1
9 9 4 1 8
9 9 4 2 0
测定结 果年 g /m L ) 平均含量年 g /m L )
2 14 6
.
8
2 14 7
.
2
2 14 7
.
0
2 1 4 7
。
0
复方制剂 “ 稚泻停 口 服液 ” 中柠檬 酸含量 , 由色谱图
可以看出 ,柠檬酸能与其它组分完全分离 , 同时柠檬
酸附近的其它组分响应值也较低 。
3
.
2 柠檬 酸的最大吸收波长在 19 0 n m , 但在实验
中发现 , 在 19 0 n m 处 , 色谱 图变得 十分 复杂 , 其它
组分响应值也较高 , 其它组分与柠檬酸几乎无法分
离 。 选取波长为 2 14 n m ,此时色谱图变得较为简单 ,
分离效果好 。
3
.
3 本方法可作为稚泻停 口 服液有效成分含量测
定的方法 , 由测定结果来看 , 柠檬酸含量的平均值为
2 1 47
.
0 铭 /m L 。 为了便于控制质量 ,稚泻停 口服液
中柠 檬酸 的含 量建议控 制在 2 1 0 一 2 2 0 拼g /m L
范围内 。
3
.
4 本方法 的另一特点是样 品不需特殊处理可直
接进行色谱测定 。
参 考 文 献
l 沈红梅 ,乔传卓 ,苏中武 , 等 . 中成药 , 1 9 9 3 ,一5 ( 7 ) : 3 5
2 仓田英明 ,王正德 , 成井孝雄 , 他 . 生药学杂志 , 1 9 。 , 44 (2 ) : 101
3 李时珍 . 本草 纲 目 (校点本下 册 )第 一版 . 北京 : 人 民卫 生出版
社 , 19 8 2 : 1 7 3 6
( 2 0 0 0
一
0 1
一
1 4 收稿 )
超临界流体萃取分析蓬获术挥发性成分
中国科学院兰州化学物理研究所 ( 7 3 0 0 0 0) 陈淑莲 朱 游 静 王 国俊
摘 要
取条件为
馏 比较 。
关键词
用超临界流体萃取 、 毛细管气相色谱及气相色谱一质谱对蓬羲术挥发油进行分析 。 最优化的超临界流体萃
20
.
0 M aP
,
5 ℃ , 0 . 5 m L 乙醇作改性剂 , 动态萃取 40 m in , C O : 用量为 12 m L , 并与索氏萃取 、水蒸气蒸
蓬羲术 挥发油 超临界流体萃取 气相色谱一质谱法
E x t r a c t i o n o f E s s e n t i a l 0 11 f r o m uC cr
u m a P h a e o e a u l i s b y S u P e r e r i t i e a l F l u i d E x t r a c t i o n
L a n z h
o u I n s t it i u t e o f C h
e m ie a l P h y s ie s
,
C h i n
e s e
A
e a
d
e m y o f S e ie n e e s ( L a n z h o u 7 3 0 0 0 0 ) C h e n S h u li a n
,
Y o u Ji n g a n d
W
a n g G u o i
u n
A b s t r a e t T o d e v e l o P a m e t h o d f o r t h e e x t r a e t i o n o f e s s e n t ia l 0 11 f r o m C u cr u m a P h a e o c a u l i s V a l
.
b y
s u P e r e r i t i e a l f l u id e x t r a e t i o n ( S F E )
, a n d a n a l y s is o f i t s e o m P o s i t i o n b y e a p i l l a r y G C a n d G C / M S s p e e t r o m
-
e t r y
.
C o n d it i o n s f o r t h e s u p e r e r i t i e a l f l u id C O
: e x t r a e t io n w e r e s t u d i e d i n e o m p a r i s o n w it h S o x h l e t e x t r a e
-
t i o n ( S X ) a n d s t e a m d i s t i l l a t i o n ( S D )
.
T h e o P t im u m e o n d i t i o n f o r S F E w a s f o u n d t o b e
: 1 2 m L o f C O
: a n d
5 m L e t h y l a l e o h o l a t a p r e s s u r e o f 2 O
.
0 M P a
, a n d 5 5
`
C t e m p e r a t u r e f o r 4 o m i n
.
3 3 e o m p o u n d s w e r e id e n
-
t i f i e d b y C G C a n d G C /M S s p e e t r o m e t r y
.
T h e S F E m e t h o d w a s f o u n d t o b e s u p e r i o r t h a n e i t h e r S X o r S D
e X t r a C t l o fl
.
K e y w o r d s C u cr u m a P h a e
o c a u l i s V a l
.
e s s e n t i a l 0 11 s u p e r e r i t i e a l f l u id e x t r a e t i o n G C / M S s p e e
-
A d d r e s
s :
C h e n S h u l i a n
,
L a n z h o u In s t i t u t e o f C h e m i e
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s ,
C h i n e s e A e a d e m y o f S
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