全 文 ：薄层扫描法测定人体血液中牛磺酸的含量
郭丽仪
(广州市医药工业研究所 ,广东 广州　 510240)
摘　要: 目的　对人血中牛磺酸的含量测定研究。方法　用薄层扫描法。结果　方法简便、精密度高、重现性好 ,灵
敏度可达 40 ng ,平均回收率为 98. 97%。 结论　适合大批量 样品分析 ,可用作体内药代动力学研究中牛磺酸的检
测。
关键词: 牛磺酸 ;薄层扫描法 ;含量测定
中图分类号: R927. 2　　　文献标识码: B　　　文章编号: 0253 2670( 2001) 03 0217 02
Determination of content of taurine in human blood by TLCS
GOU Li-yi
　　 ( Guang zhou Institute o f Pharmaceutical Industry , Guang zhou Guangdong 510240, China )
Key words: taurine; TLCS; determintion
　　牛磺酸 ( taurine,又名牛胆碱、牛胆素 )是中药牛
黄 (Bos taurus domest icus Gmel. ) 和牛胆汁的有效
成分之一。由于其具有广泛的生物学活性 [1 ] ,是多种
中药制剂的主要成分 ,因而测定牛磺酸在机体内的
血药浓度具有较大的意义。 本文采用薄层光密度扫
描法来检测人血中牛磺酸含量 ,探讨在体内药代动
力学研究中更适合于大批量样品分析的方法。
1　仪器与试剂
1. 1　仪器: 岛津 CS-900薄层扫描仪、美国 Drum-
mond微量点样器。
1. 2　试剂:所用试剂均为分析纯 ,硅胶 G(青岛海洋
化工厂 ,分析纯 ) , 0. 5%茚三酮乙醇液 (取分析纯茚
三酮 250 mg,加乙醇稀释至 50 m L) ,牛磺酸 (武汉
制药厂 ,含量 99. 9%以上 )。
2　方法与结果
2. 1　牛磺酸对照液的配备: 精密称取 0. 100 2 g干
燥牛磺酸 ,置于 100 mL容量瓶中 ,加蒸馏水溶解、
稀释至刻度 ,摇匀 ,即得 1. 002μg /μL的对照液。
2. 2　薄层层析及扫描条件: 吸附剂: 0. 2% CMC硅
胶 G板 ,规格 12 cm× 25 cm、厚 0. 3 cm;展开剂:正
丁醇 -冰醋酸 -无水乙醇 -水 ( 4∶ 2∶ 1∶ 1) ;展开方
式:上行法 ;展距: 8～ 12 cm;显色剂: 0. 5%茚三酮乙
醇液 ; 110℃烘 8 min;牛磺酸的斑点呈色后 ,选择λS
= 513 nm,λR= 700 nm进行测试。
2. 3　标准曲线的制备:精密称取 1. 954 g牛磺酸 ,
置于 50 mL容量瓶中 ,加水溶解 ,稀释至刻度 ,吸取
20μL于离心管中 ,加入 0. 8 mL血浆和 10%磺基
水杨酸 0. 5 mL,摇匀 ,离心 ,取上清液 (血清样品 )。
分别以 1, 2, 3, 4, 5, 6μL点样于同一块薄层层析板
上 ,按薄层层析条件展开 ,显色后扫描 ,测定斑点的
面积积分值 ,经回归分析 ,计算得回归方程: Y =
137 698X - 14 396, r= 0. 993 89。
2. 4　灵敏度试验:精密吸取 0. 8 mL血浆 ,加入牛
磺酸对照溶液 20μL,再加入 10%磺基水杨酸 0. 5
mL,摇匀、离心后取上清液 ,点样 ,按薄层层析条件
展开 ,显色。结果表明 ,其灵敏度可达 40 ng ,在 2μL
点样量下 ,肉眼可见其紫红色斑点。
2. 5　精密度试验: 分 5次各吸取“标准曲线的制备”
项下的血清样品 2μL,点样于同一薄层层析板上 ,
按薄层层析条件展开 ,显色后 ,扫描 ,计算其批内
RSD为 3. 8% (n= 5) ;批间 RSD为 4. 8% (n= 5)。
2. 6　回收率试验:在 3支离心管中 ,各加入 0. 8 mL
人血浆 ,分别加入一定量的牛磺酸标准液和 10%磺
基水杨酸 0. 5 mL,摇匀 ,离心 ,取上清液 ,以 2μL点
样 ,展开 ,显色后 ,扫描 ,扣除空白值 ,平均回收率为
98. 97% (n= 3)。
3　讨论
检测牛磺酸的方法有酸碱滴定法、比色法、氨基
酸自动分析仪分析法、高效液相法等 ,但受到操作复
杂、稳定性、准确性等因素影响或仪器昂贵、成本高
·217·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2001年第 32卷第 3期
收稿日期: 2000-03-25作者简介:郭丽仪 ( 1963-) ,女 ,籍贯:广州 ,高级工程师。 1984年毕业于广东医药学院 ,现在广州市医药工业研究所。研究方向:主要进行药物合成研究及某些化学成分的分析测定 ,现主要从事国内外医药信息的研究。通讯地址:广州市江南大道中 134号 ,广州市医药工业研究所医药信息研究室 ,邮编: 510240　　电话: 020-84003059
等限制 ,难以进行大批量样品分析。目前多数作者采
用薄层光密度扫描法测定中药制剂中的牛磺酸 [2, 3 ]。
本文采用薄层光密度测定法测定人血中牛磺酸
的含量 ,操作方法简便 ,成本低 ,线性关系好 ,准确性
好 ,灵敏度可达 40 ng ,精密度高 ,重现性好 ,平均回
收率为 98. 97% ,较适合于大批量样品分析研究 ,可
用作体内药代动力学研究中牛磺酸的检测。
在实验中我们发现 ,在含有牛磺酸的血浆中加
入少量 10%磺基水杨酸 ,沉淀血浆中的蛋白 ,然后
进行层析可得较理想的结果。
参考文献:
[1 ]　岳　旺 ,张士善 . 牛磺酸的药理研究进展 [ J] . 药学通报 ,
1984, 19( 3): 42-44.
[2 ]　唐　盈 . 牛磺酸的薄层光密度测定法 [ J ] .医药工业 , 1987, 18
( 7): 321-322.
[3 ]　刘伟华 . 薄层扫描法测定中药口服液中牛磺酸的含量 [ J ]. 中
国实验方剂学杂志 , 1996, 2( 6): 42-43.
吸附小柱 -高效液相色谱法测定五味沙棘散中栀子苷的含量
刘峰群 ,韩　晋 ,袁海龙 ,张新全 ,崔　燕 ,肖小河 ,蔡光明 ,贺承山
(解放军第 302医院药学部 ,北京　 100039)
摘　要: 目的　测定复方中药制剂五味沙棘散中的栀子苷。 方法　大孔吸附脂预处理样品 ,高效液相色谱法测定。
结果　栀子苷峰面积积分值与进样量 ( 0. 13～ 1. 30μg ) 呈良好的线性关系 ,回归方程为: Y= 1 562. 808 5X+
39. 977 6,r= 0. 999 7;加样回收率 98. 27% , RSD 1. 10%。 结论　大孔吸附树脂小柱富集中药复方制剂中的栀子
苷 ,可排除其它成分对高效液相色谱的干扰。
关键词: 大孔吸附树脂 ;高效液相色谱法 ;五味沙棘散 ;栀子苷
中图分类号: R927. 2　　　文献标识码: B　　　文章编号: 0253 2670( 2001) 03 0218 02
Determination of gardenoside in WUWEISHAJI POWDER by
mini adsorption column-HPLC
LIU Feng-qun, HAN Jin, YUAN Hai-long , ZHAN G Xin-quan, CU I Yan,
X IAO Xiao-he, CA I Guang-ming , HE Cheng-shan
　　 ( Depa rtment o f Pharmacy, No. 302 Hospital o f PLA, Beijing 100039, China )
Key words: macropo rous adso rption resin; HPLC; WUWEISHA JI POWDER
* ; g ardeno side
* W UW EISHAJI POWDER is a Chinese herba l r ecipe o f pow der.
　　五味沙棘散系蒙古族验方 ,由沙棘膏、木香、白
葡萄干、甘草、栀子等多味药材经粉碎后制成的散
剂 ,具有清热祛痰、止咳定喘等功能 ,用于慢性支气
管炎、肺热久嗽、喘促痰多 ,胸中满闷、胸肋作痛 ,收
载于《中华人民共和国药典》2000年版。方中栀子具
有泻火除烦、清热利尿、凉血解毒等作用 ,其所含主
要成分为栀子苷 ,本文研究其含量测定作为控制质
量的一项指标。
1　仪器、材料与试药
大孔吸附树脂 DA-101,天津农药厂提供 ,粒度
20～ 60目 ,干树脂比表面积≥ 400 m2 /g;高效液相
色谱仪:惠普 HP 1100系统 ,紫外检测器 ;栀子苷对
照品 (中国药品生物制品检定所提供 ) ;甲醇 (色谱
纯 ) ;超纯水 ;五味沙棘散 (本院制剂室自制 )。
2　吸附小柱制备与色谱条件
2. 1　吸附小柱制备:选取 40～ 60目大孔吸附树脂
适量 , 95% 乙醇浸泡 24 h ,湿法装入 5 mL酸式滴
定管内 ,装量以树脂沉降后上沿至滴定管刻度 3. 0
m L处为宜。以 95% 乙醇冲洗至洗脱液加等体积水
不浑无色为至 ,改以足量水冲洗至洗脱液不含乙醇 ,
备用。
2. 2　色谱条件: Kromasi l C18分析柱 ( 5μm, 4. 6
mm× 250 mm);流动相甲醇-水 ( 35∶ 65) ;流速 1. 0
m L /min,检测波长 240 nm;柱温: 30℃。
·218· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2001年第 32卷第 3期
收稿日期: 2000-03-17作者简介:刘峰群 ( 1965-) ,男。江苏泰兴人。 1986年毕业于中国人民解放军第二军医大学 ,医学学士学位。现为解放军第三○二医院药学部副主任药师。 长期从事抗肝病中药新药的研究与开发 ,负责制剂工艺与药物分析工作。通讯地址:北京市丰台路 26号 ,
100039。 电话: 010-66933230。 E-mail: snaketop@ 263. net