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高寒藏药──川西獐牙菜组织培养研究──Ⅱ.愈伤组织的生长和培养条件的影响



全 文 :苦杏仁昔含量 测定 :1 9 96 、 1 9 9 7年从各
地区样品种各选出 2 个一 6 个 出仁率较高的
样品测定苦杏仁普的含量 , 结果见表 2 。
表 2 苦杏仁普含 l 比较 ( 1 9 9 6 · 1 9 9 7 )
测定号 苦杏仁昔含量 ( % )
1 9 9 6
一 0 8 1 9 97
一0 7
测定号 苦杏仁昔含量 (%

1 9 9 6
一 0 8 19 9 7
一 0 7
在 4 %以上的有 n 个 , 占送样的 39 . 3 % , 最
低与最高含量相差 2 . 47 % 。 一般资料记载仅
有混合样 品的测定 , 约为 1%一 3% , 说 明选
优的潜力很大 。 尤其是山杏含量较高 , 若将山
杏深加工成为 “ 苦杏仁昔 ”将大大提高山杏的
经济价值 。 如果有计划地繁殖优良苦杏仁品
种或株系则山杏经济效益更能成倍增加 。
参 考 文 献
l 丁东宁 , 等 . 天然产物与开发 , 1 9 9 1; 3 ( 3 ) : 8 8
2 中华人民共和国药典 . 1 9 63 : 3 80 、 51 8
3 G u i lb a h l t G G
, 己 t a l
.
A n a l C h e m
,
19 6 6 ; 3 8
:
8 4 4
4 B e w n e t t W D
, e t a l
.
J C h
r o m a t o g
,
1 9 6 8 ; 3 4
: 4 2 8
5 张加延 , 等 . 北方园艺 , 1 9 9 7 ; ( 1 ) : 3
( 1 9 9 7

1 1

1 8 收稿 )
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1 2
1 3
1 4
1 5
1 6
3
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9 0
3
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4 3
2
.
9 8
4
.
4 5
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5óh月18néUnO0C
从两年测定结果看出 : 苦杏仁昔 含量最
低者为 2 . 98 % , 最高者为 1 9 9 6 年 08 号样高
达 5 . 45 % , 两年共测定 28 个样品 , 其中含量
P r e l im i n a r y S t u d y o n t h e S e l e e t i o n o f B e t t e r o f B i t t e r

A lm o n d V a r i e t i e s
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,
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,
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F o r e s t S e ie n s e s
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A b s ta e t T o s e l e e t b e t t e r a p r ie o t ( P r u n u s L
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·
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·
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K e y W
o r d s B it t o r A lm o n d a m y g d a l in A P r ie o t S e le e t io n
高寒藏药— 川西璋牙菜组织培养研究△五 . 愈伤组织的生长和培养条件的影响
山东大学生命科学院 (济南 2 5 0 1 0 0) 向凤宁 徐 夏光敏 霍丽云 ` ’
摘 要
影响 。
关键词
报道川西璋牙菜愈伤组织的生长动态以及培养基 、 激素 、 接种时期 、 培养温度对其生长的
川西璋牙菜 愈伤组织 培养条件
我们 已报道了川西璋牙菜愈伤组织的诱
导及初步培养 〔 1〕 。 现报道愈伤组织的生长和
外界培养条件的影响 。
1 材料和方法
当川西璋牙菜愈伤组织培养至第 12 代
日龄为 30 d 时 , 将愈伤组织转至不同激素组
合的 B 。 和 M S 培养基上 , 按方法 〔` 〕培养 30 d
后 , 随机取样 10 瓶测定愈伤组织鲜重 , 取平

A d d
r e s s : X i a n g F e n g n i n g
,
A e a d e m y o f L i fe S e 一e n e e s , S h a n d
向凤宁 19 8 6 年一 1 9 8 9 年在山东大学生物系获硕士学位 , 现
o n g U n iv e r s i t y
,
J i
n a n
为山东大学生命科学院教师 , 讲师 。 研究方向为植物细胞工程 , 主要从事禾谷类作物原生质体融合及原生质体培养 , 同时进行中草药组织及细胞培养的研究 , 发表论文 10 余篇 。
乙 山东大学微生物技术国家重点实验室资助课题“ 山东省教育学院

4 8 0
-
均值 (g /瓶 )。 除低温培养外 , 培养温度为 ( 25
士 3 ) Co , 光照 ( 9 士 1 ) h / d , 光强 为 8 0 0 lx 一
1 0 0 0 l x

培养细胞生长量计算 , 以细胞鲜重的增
长倍数表示 , 即接种后 生长若干 天细胞鲜重
与接种时细胞鲜重之 比 。
2 结果与讨论
2
.
1 川西璋牙菜愈伤组织生长基本呈 S 曲
线 (图 1 ) 。 愈伤组织生长的各个时期大体为 :
延迟期 s d一 l o d , 对数生长期 l o d一 1 5 d ,
减慢期约在 20 d 左右 , 生长 25 d一 30 d 进入
静止期 。
1 2卜
基上生长的情况 , 表 1 表明 M S 培养基比 B S
培养基更适于川西璋牙菜愈伤组织的生长 。
表 1 培养基对愈伤组织生长的影响
培养基 接种量 (s/ 瓶) 月增殖量(s/ 瓶) 增殖倍数 (倍胡 )
彭也拼宋势
图 1
5 10 1 5 2 0 2 5 3 0
时间 t ( d )
川西嶂牙菜愈伤组织生长动态
2
.
2 培养条件对愈伤组织生长的影响
.2 .2 1 培养基 : 在川西璋牙菜愈伤组织继代
培养 1 年半后 , 我们观察了在 M S 和 B 。 培养
平均数牙 标准差 a 平均数王 标准差占 平均数王 标准差己
M S 0
.
3 5 0
.
04 1 3
.
16 0
.
0 49 9
.
0 3 0
.
9 61
B
S 0
.
3 5 0
.
03 7 1
.
45 0
.
0 39 4
.
1 4 0
.
8 42
为 10 瓶平均数和标准差
2
.
2
.
2 激素组合 : 从表 2 结果看出 , 在 2 , 4 -
D 2 0十 K T 0 . 5 激素条件下 , 愈伤组织增殖最
快 , 同时瘤状愈伤组织的增殖效果也最好 。在
相同的 2 , 4 一D 浓度下 , K T 浓度降低 到 。 . 5
m g / L 时 , 愈伤组织的生长速度和 生长状况
均最好 。 说明 , 添加适宜浓度的 K T 对愈伤组
织生长有促进作用 , 有利于愈伤组织质量的
改善 , 这 同 F l ie k 等 〔 2〕的报道一致 。 当 0 . 2
m g / I
J 的 N A A 分别同 0 . 4 m g / L 的 6一B A 和
。 . 2 m g / I J 的 K T 组合时 , 生长速度均明显降
低 ,分化出少量不定根 。
2
.
2
.
3 播种时期 : 延迟期取样接种与对数生
长期取样接种比较 , 同样培养 30 d , 前者细胞
生长量 为接种量 的 3 . 82 倍 , 后者 为 6 . 70 倍
(表 3 ) 。 如果到减慢期取样接种 , 虽然生长量
仍增加 , 但由于总的培养时间加长 , 经济上不
合算 。
表 2 不同激素组合对愈伤组织生长的影响
培养基 ( nt g / L ) 增殖倍数平均数
8
.
8 0
2
.
1 6
1 1
.
23
4
.
67
5 80
标准差 愈伤组织生长情况
八卜n自勺é0乃J]9口八几
n乙JlI今口óh汽JJ41é曰八沙行了Oū了洲2Cn叼é.…,门ùǎ日n八曰门néM S + 2
, 小 D 1 . 0 + K T 0 . 5
M S + 2
, 4

D 1
.
0 乍K T I , O
M S 十 2 , 4一 D 2 . 0~ K T 0 . 5
M S + 2
,
4

l ) 2 0丰 K T 1. 0
M S十 2 , 4 1 ) 3 . 0十 K l ’ 0 . 5
M S 弓一 2 , 4 一D 3
.
0月一 K T 1. ( )
M S + N A A 0
.
2+ K T 0
.
2
M S + N A A 0
.
2十 6一 BA 0 . 4
;
.
::
表 3 接种时期对愈伤组织生长的影响
接种时期 延迟期 对数生长期 减慢期
平均数 .3 82
标准差 0 . 6 2 1
增殖倍数以 10 瓶计算
6
.
7 0
0
.
5 42
4
.
9 7
0
.
7 2 1
静止期
3
,
1 2
0
.
6 43
增殖倍数
2
.
2
.
4 培养温度 : 把继代 1 年半的愈伤组织
《中草药 》 1 99 8 年第 29 卷第 7 期
多数浅黄色 , 少数白色 ,较紧密, 有颗粒状结构
多数灰白色 , 有粘稠物分泌 , 非常疏松
浅黄色 , 多为颗粒状结构 , 较紧密
多数浅黄色 , 少数白色或褐色 , 较疏松
多数浅黄色 , 少数白色或褐色 , 较疏松
多数浅白色 , 非常疏松 , 无颗粒状结构
多数浅黄色 ,有短根分化 (平均 3 . 6 条 /瓶 )疏松
多数浅黄色, 有短根分化 (平均 1 . 9 条 /瓶 )疏松
置于 不 同条件下培养 : A : 。 `C 一 4 C , 无光
照 ; B : ( 1 2 士 3 ) C , 散射光 ; C : ( 1 2士 3 ) ℃ , 无
光照 ; D : 25 ℃ ~ 28 C , 散射光照射 。 其中 A 、
B 和 C 条件下培养物 90 d , D 条件下培养物
3 O d 继代 1 次 。 图 2 结果表 明 , 在 A 条件下 ,
愈伤组织未见明显生长 , 大部分愈伤组织变
.
4 8 1
·
白或变褐 ;转入新鲜继代培养在 25℃下培养
5 1d 时 , 愈伤组织存活率仅 0 . 6% 。 在 B 、 C 条
件下 , 愈伤组织生长较快 , 多为浅黄色的颗粒
状愈伤组织 , 少数为 白色或变褐 , 并生有少量
的芽和不 定根 , 转入 25 ℃下继代培养 15 d
时 , 愈伤组织存活率高达 78 % , 而散射光照
对愈伤组织生长影响不大 。
将在 ( 12 士 3) ℃下培养 3 个月后的愈伤
组织转入 25 ℃ 下培养 , 其生长和分化并设
有显著变化 。 在 ( 12 士 3) ℃下生长的培养物
每次继代后 , 与对照 ( 2 5 C 下继代培养 )相 比
有 30 %左右愈伤组织块死亡 , 但因在 ( 12 士
3 ) C 下愈伤组织仍在生长 , 故数 量不 断增
加 。 采用降温保存组织培养物在一些植物 中
已取得成效 〔 3〕 。 但不同植物材料降温保存的
最适温度不同 。 实验表明 , 川西璋牙菜愈伤组
织在低温下 ( 12 士 3) ℃继代培养 , 可有效减
少继代次数和 所需 的物质 , 有利于川西璋牙
菜在适宜季节大量再生植株 。
灌604ǎ冰à铃雌扮
a

b

c 一分别为 A 、 B 、 C 条件下培养后的愈伤组织存活率
图 2 愈伤组织降温培养后的存活率
参 考 文 献
向凤宁 , 等 . 中草药 , 1 9 9 6 ; 2 7 ( 8 ) : 4 9 2
F l i e k C E
.
O
r g a x i o g e n e s i
s
I n
:
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工l
d b o o k o f P l
a r i t C e l l
C u l t u r e
,
m a e m i l l a m C o
,
N e w Y o r k
,
1 98 3
:
1 3
倪德祥译 . 国外作物组织培养 , 10 8 3 ; 1 6 : 4魂
( 1 9 9 7

0 9

3 0 收稿 )
海金沙的引种及栽培△
贵州省植物园 (贵阳 5 5 0 0 0 4 ) 魏德生 米 曾莉莉 王用平 龙 青 冯 芳
贵州省理化测试分析研究中心、 梁 可
摘 要 报道 一r 海金沙的引种驯化 、 饱子繁殖 、 田间管理措施 、 产地加工等技术 。
关键词 海金沙 引种驯化 抱子繁殖
海金沙 勿 g o di u m j’ 之P o ni uc m ( Tl , u n b . )
S w
. 为海金沙科旅类植物 , 又称左转藤 , 铁
线藤 、 蛤蟆藤等 。 以抱子及全草入药 〔`少 , 具清
热利湿功能 , 为治疗淋症要药川 。 主产于广
东 、 浙江 、江苏 、 江西 、 湖南 、 湖北 、 广西 、 云南 、
四川 、贵州 、 陕西 、 河南等省 。 多系野生 ,少有
栽培 。 1 9 9 5年 ~ 1 9 9 7 年 , 我们对海金沙进行
了引种驯化研究 , 成功地进行了引种繁殖 , 掌
握了抱子繁殖技术 , 现将结果报道如下 。
1 植物学特征及生物学特性
海金沙为多年生草质藤本 。根状茎横生 ,
根须状 , 叶二型 ,纸质 , 不育叶尖三角形 , 能育
叶卵状三角形 , 小羽片边缘着生流苏状的抱
子囊穗 , 抱子成熟后 , 从抱子囊中散出 , 暗褐
色 , 形如细沙 。
海金沙在贵州全省分布 , 主产于罗甸 、 赤
水等地 。多生于路边 、 山坡灌丛 、林缘 、溪谷丛
林中 , 常缠绕生长于其它较大型的植物上 。喜
A d d r e
s s :
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e i D e s h e n g
,
G u i z h o u P r o v in e i a l G a r d e n o f OB
t a n y , G u iy a n g
贵州省自然科学年度计划项 目 , 编号 ( 1 9 95 ) 2 1 1 5 号

4 8 2