全 文 :29b ) , 4. 60( 1H, d, J= 2. 2 Hz, H-29a) , 3. 18( 1H,
dd, J = 4. 88 Hz, H-3) , 2. 99 ( 1H, ddd, J = 4. 39,
4. 37, 4. 40 Hz, H-19) , 1. 69 ( 3H , s, H-30) , 0. 97
( 3H, s, H-27) , 0. 96( 3H, s, H-26) , 0. 93( 3H, s, H-
23) , 0. 82( 3H, s, H-25) , 0. 75( 3H , s, H-24) ;
13
CN-
MR ( CDCl3, CD3OD) : 14. 5( C-27) , 15. 2( C-24) ,
15. 7( C-25) , 15. 9( C-26) , 18. 1( C-6) , 19. 1( C-30) ,
20. 7( C-11) , 25. 4( C-12) , 26. 9( C-2) , 27. 7( C-23) ,
29. 5( C-21) , 30. 5( C-15) , 32. 1( C-16) , 34. 2( C-7) ,
37. 0 ( C-10) , 38. 2 ( C-1) , 38. 6( C-4) , 40. 5 ( C-8) ,
42. 3( C-14) , 46. 9( C-18) , 49. 1( C-19) , 50. 4( C-9) ,
55. 3 ( C-5) , 56. 1 ( C-17) , 78. 7 ( C-3) , 109. 93 ( C-
29) , 150. 6( C-20) , 178. 9( C-28)。其中 38. 6( C-13) ,
37. 0( C-22)被掩盖在相对应的峰中,表现为相对应
的峰强增加, 其核磁共振氢谱、碳谱数据与文献基本
一致 [ 3]。故化合物Ⅰ鉴定为 betulinic acid(桦木酸)。
2. 4 毛状根化学成分与原植物薄层层析对照: 将决
明毛状根及原植物的根、茎、叶、种子分别依次用石
油醚、氯仿、乙醇回流或温浸( 50 ℃) 3 次,浸出液分
别浓缩。取化合物Ⅰ纯品, 毛状根石油醚、氯仿提取
物,根、茎、叶、种子的氯仿提取物,用氯仿溶解样品,
应用薄层层析方法进行化学成分对照分析, 展开剂
为氯仿-丙酮( 32∶1) , 显色剂为 5%浓硫酸-乙醇溶
液。
结果表明,化合物Ⅰ在毛状根的氯仿提取部位,
作为主要成分存在, 而在毛状根的石油醚提取部位
及原植物根、茎、叶、种子的氯仿提取物中仅微量存
在或不存在。
3 小结与讨论
3. 1 本实验所得纯品化合物Ⅰ经结构鉴定, 确定为
betulinic acid(桦木酸) , 但在决明毛状根及决明原
植物中分离得到尚属首次。
3. 2 通过本实验的毛状根培养系统可以大幅度提
高桦木酸的含量或诱导其代谢产生原植物中不存在
的桦木酸, 但此定量数据还有待于在进一步的定量
分析实验中阐明。近年来, 有文献报道桦木酸有抗
HIV -病毒[ 4]、抗黑色素瘤[ 5]及较强的抗癌活性 [ 6]。
3. 3 在实验室摇瓶积累的基础之上,将培养条件作
适当的改变以实现培养罐放大培养, 实现药用活性
成分的工业化生产, 这才是我们的目标所在。总之,
用此毛状根培养技术生产药用活性成分将是一个很
有前景的领域。
致谢:波谱数据均由本院仪器中心测定
参考文献:
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超临界流体 CO 2萃取酸枣仁脂肪油化学成分的研究
陈振德,许重远, 谢 立
(第一军医大学南方医院药学部, 广东 广州 510515)
中图分类号: R284. 1 文献标识码: A 文章编号: 0253 2670( 2001) 11 0976 02
中药酸枣仁为鼠李科植物酸枣 Zizyp hus j uj u-
ba M ill. var. sp inosa Hu ex H . F . Chou 的干燥成
熟果仁,具有补肝、宁心、敛汗、生津的功能,多用于
虚烦不眠,惊悸多梦,津伤口渴等症。酸枣仁主要含
·976· 中草药 Chinese T raditiona l and Herbal D rugs 2001 年第 32 卷第 11期
收稿日期: 2000-12-10作者简介:陈振德( 1964-) ,男,福建南安籍,副主任药师,副教授,博士,硕士生导师。长期从事天然药物研究与开发,承担国家自然科学基金及国家新药基金项目各 1项,省部级基金项目多项,获得国家发明专利 1项和军队科技进步二等奖 1项,发表学术论文 30余篇。
有酸枣仁皂苷类、三萜类、脂肪油、蛋白质、甾醇类、
磷脂类等化合物。现代药理研究表明:酸枣仁具有镇
静催眠、镇痛、抗惊厥、降血脂、抗血小板聚集、增强
免疫功能、降压、抗缺氧、抗心肌缺血、抗心率失常、
抗衰老、抗辐射等作用 [ 1]。其中酸枣仁油可明显降低
鹌鹑总胆固醇( T C)、低密度脂蛋白( LDL)和甘油三
酯( T G)水平, 升高 HDL/ LDL 比值, 切片检查发现
明显减少心瓣膜和心内膜疏松增厚,减轻肝脂肪变
性,并能明显抑制二磷酸腺苷诱导的大鼠血小板聚
集反应以及对艾氏腹水瘤小鼠有明显抗肿瘤作
用[ 2]。为了更好地开发利用酸枣仁油脂资源,我们首
次应用超临界流体萃取技术提取酸枣仁脂肪油并用
GC-M S 联用技术对其脂肪酸组成进行了测定。
1 材料与方法
1. 1 材料:酸枣仁购于广东省药材公司, 经鉴定为
鼠 李科 植 物酸 枣 Zizyp hus j uj uba M ill. var.
sp inosa Hu ex H. F. Chou的干燥成熟果仁。
1. 2 方法
1. 2. 1 仪器与条件:采用江苏南通华安公司生产的
HA-9508 型萃取装置, CO2 气体为广州气体厂产
品。经对萃取压力、温度和时间三因素三水平正交试
验,获得最佳萃取条件:压力为 30 MPa, 温度为 45
℃,时间 1 h。美国HP6890-5973GC-M SD型气相色
谱-质谱-计算机联用仪。EI 离子源, 离子能量: 70
eV,离子源温度: 230 ℃, 连接线温度: 230 ℃, 进样
方式: GC, 扫描方式: Scan, 真空度: 0. 1×133. 3
Pa, 色谱柱: FFAD 25 m×0. 2 mm , 进样量: 1. 0
L,柱温: 120 ℃~240 ℃, 10 ℃/ min, 载气: He, 进
样口温度: 250 ℃, 柱前压: 50 kPa, 电子倍增器高
压: 1 700 V,质量扫描: 30~400 amu。
1. 2. 2 SFE 提取与 GC-M S 分析:取 100 g 酸枣仁
干燥粗粉投入萃取釜, 按最佳萃取条件萃取,得脂肪
油,再进行 GC-MS 分析, 重复两次。质谱图经计算
机检索,并核对标准图谱,最后用面积归一化法测出
各成分的相对含量。
2 结果
每样品处理两份,每份测定两次,在上述条件下
脂肪酸组成及相对含量见表 1。
表 1 超临界流体 CO2 萃取酸枣仁脂肪油含量
及其脂肪酸组成 ( % )
峰号 脂肪酸名称 相对含量
1 月桂酸 0. 03
2 豆蔻酸 0. 09
3 十五碳酸 0. 04
4 十六烯酸 0. 04
5 棕榈酸 6. 52
6 亚油酸 37. 14
7 油酸 38. 73
8 硬脂酸 3. 61
9 花生烯酸 5. 18
10 花生酸 1. 27
11 二十二碳酸 1. 49
12 木焦油酸 0. 47
不饱和脂肪酸/总脂肪酸 85. 67
3 讨论
3. 1 采用 SFE 技术提取酸枣仁脂肪油, 其出油率
比文献报道的约高 32% [ 4] ,文献[ 5]报道酸枣仁脂肪
油中含有 8种脂肪酸,我们共分离鉴定出 12种脂肪
酸。可见,应用 SFE 技术提取酸枣仁脂肪油与传统
的有机溶剂提取法相比较,能提高收率,缩短提取时
间,更能真实地反映药材中的化学组分,确是提取研
究中药化学成分的有效方法, 具有传统方法难以达
到的效果。
3. 2 应用 SFE 技术提取脂肪油以及酸枣仁含油率
及不饱和脂肪酸含量较高的分析结果, 为酸枣仁的
进一步综合开发利用展现了良好前景。
参考文献:
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《中国新药杂志》2002年征订启事
《中国新药杂志》由国家药品监督管理局主管 ,中国药学会、中国医药集团总公司、中国医药科技出版社共同主办。是一份
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