全 文 ：养阴延生片增强机体免疫功能的实验研究
刘向红 1 ,孙立明 1 ,薛　玲 2⒇
( 1. 山东大学齐鲁医院 ,山东 济南　 250012;　 2. 山东中医药大学 ,山东 济南　 250014)
摘　要: 目的　研究养阴延生片对机体的免疫作用。 方法　①观察对小鼠“气虚”模型的外周血 T淋巴细胞和白细
胞的作用。②采用碳粒廓清法 ,观察对网状内皮系统吞噬功能的作用。③给 S180小鼠注射绵羊红细胞 ,观察对荷瘤小
鼠溶血素抗体和脾空斑形成细胞的作用。④给小鼠 im植物血凝素 ,观察对淋巴细胞转化率的作用。⑤观察对胸腺、
脾脏重量的作用。 结果　养阴延生片可促进“气虚”小鼠的外周血 T淋巴细胞百分数和白细胞总数 ,增强网状内皮
系统的吞噬廓清能力 ,升高荷瘤小鼠溶血素抗体和脾空斑形成细胞的数量 ,提高淋巴细胞转化率 ,增加胸腺、脾脏
(免疫器官 )的重量。 结论　养阴延生片具有增强免疫作用。
关键词: 养阴延生片 ;免疫调节 ;吞噬功能 ;空斑形成细胞
中图分类号: R286. 95　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253 2670( 2001) 09 0818 03
Experimental studies on enhanced immunity of organism of
YANGYIN YANSHENG TABLET
*
L IU Xiang-hong1 , SUN Li-ming1 , XUE Ling2
　　 ( 1. Qilu Hospita l of Shandong Unive rsity , Jinan Shandong 250012, China; 2. Shandong Univ e rsity o f TCM , Jinan
Shandong 250014, China)
Key words: YAN GYIN YANSHENG T ABLET; regulation of immuni ty; phagocy tic function; plaque
fo rming cell ( PFC)
* YANGYIN YAN SHENG T ABLET is a preparation of Chinese medicine, such as Radix Panacis
Quinquefolii , Radix Astragali , et al . . It has the function of enhancing the immunity of o rg anism.
　　中国传统医学重视整体调理、辨证施治 ,以天然
动、植物及矿物入药 ,具有效果显著 ,毒副作用小的
特点。 养阴延生片是由西洋参、黄芪、生地、生龟板、
甘草等组成 ,在临床使用多年 ,证明为疗效确切的增
强免疫制剂。 本院与山东中医药大学天然药物实验
室合作 ,对其药理作用进行了初步研究。
1　材料
1. 1　药物:养阴延生片:由山东大学齐鲁医院制剂
室制备 ,每克片重相当于生药 3. 69 g;人参固本丸:
临沂健康制药厂 (批号: 941006)。
1. 2　动物: 昆明种小鼠 ,体重 18～ 22 g , 20～ 30 g ,
20～ 24 g。Wistar大鼠 ,体重 180～ 200 g。均由山东
省医科院动物中心购得 ,动物合格证号: 鲁动质
960101。
2　方法与结果
2. 1　对健康和“气虚”小鼠外周血 T淋巴细胞百分
数和白细胞总数的影响 [1 ]: 选取体重 20～ 24 g雄性
健康小鼠分三批 ,第一批小鼠随机分实验组和对照
组 ,实验组限制食量饲料量为 100 g /kg· d) 7 d,造
成气虚模型动物 ,对照正常饮食 ;第二批随机分 4
组 ,均限制食量 7 d(同前 ) ,从第 2周开始恢复足量
饲料 (饲料量为 250 g /kg· d ) ,同时第 1组给大剂
量养阴延生片 ( 0. 27 g /kg ) ;第 2组给小剂量养阴延
生片 ( 0. 135 g /kg ) ;第 3组给人参固本丸 (含生药
0. 25 g /d) ,均制成混悬液每只 ig 0. 4 m L;第 4组对
照组 ,每只给生理盐水 0. 4 mL,共 7 d。第三批:不限
制食量小鼠 ,随机分 4组 ,药物及剂量同第二批。
第一、三批在第 7天由尾部采血 ,测白细胞总数
及涂片 ,第二批在第 15天采血 ,测白细胞总数及作
血涂片 ,血涂片自然干燥后置 4℃甲醛 -丙酮缓冲液
1 min,流水冲洗 ,蒸馏水冲洗 ,自然干燥。 将固定干
燥后涂片浸入孵育染色液中置室温 45～ 60 min,如
上冲洗、干燥置甲基绿溶液复染 3～ 5 min,冲洗、晾
干 ,浸入二甲苯中漂洗 1～ 5 min,在油镜下计数淋
巴细胞 400个 ,算出 T淋巴细胞的百分数 ,结果见
表 1。
·818· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2001年第 32卷第 9期
⒇ 收稿日期: 2001-03-11作者简介:刘向红 ( 1961-) ,女 ,山东省济南人 ,毕业于山东中医药大学中药专业 ,现任山东大学齐鲁医院药剂科副主任 ,现从事中药新药的研究工作。 Tel: ( 0531) 6921941-2066
表 1　养阴延生片对健康和“气虚”小鼠外周 T淋巴细胞百分率和白细胞总数的影响
组　别 剂量 T淋巴细胞 (% ) 白细胞总数 (× 109 /L)
第一批 对照组 - 68± 10 　　　　　　　 12± 1. 8
　　 (n= 10) 实验组 - 32± 9* 5. 2± 1. 7*
第二批 养阴延生片 0. 27 g /k g 72± 8* 21± 3*
　　 (n= 10) 0. 135 g /k g 68± 9* 16. 1± 2. 1*
人参固本 0. 25 g /d 59± 5* 12. 4± 2. 4*
对照组 - 47± 11 8. 4± 2. 1
第三批 养阴延生片 0. 27 g /k g 67± 6 12. 2± 1. 8* *
　　 (n= 10) 0. 135 g /k g 69± 7 12. 4± 1. 6* *
人参固本 0. 25 g /d 66± 8 10. 9± 1. 7*
对照组 - 65± 8 8. 4± 1. 5
　　　　与同批次对照组比: * P < 0. 05　* * P < 0. 01
　　由结果可知 ,模拟气虚小鼠的外周血中 T淋巴
细胞及白细胞明显低于健康小鼠 ,养阴延生片、人参
固本丸对气虚小鼠的外周血 T淋巴细胞百分数和
白细胞数有非常显著的促进作用 ,但对正常小鼠外
周血 T淋巴细胞和白细胞数影响不显著。
2. 2　养阴延生片对小鼠网状内皮系统 ( RES)的血
流中惰性炭粒的吞噬廓清能力的影响 (炭粒廓清
法 ) [2 ]:取雄性小鼠 40只 ,随机分 4组 ,第 1组为对
照组 ,每只给生理盐水 0. 4 m L;第 2组为养阴延生
片大剂量组 ( 0. 27 g /kg ) ;第 3组为养阴延生片小剂
量组 ( 0. 135 g /kg) ;第 4组为人参固本丸组 (含生药
0. 25 g /d) , ig给药共 4 d,末次给药 24 h后于鼠尾
iv稀释印度墨汁 0. 1 mL /10 g体重 , 30 s及 6 min
以小鼠眼眶取血 0. 025 mL,立 刻吹入 0. 1%
Na2 CO3液 2 mL中 ,最后以 0. 025 mL正常小鼠血
溶于 2 mL 0. 1% Na2 CO3溶液中校零 ,于分光光度
计 675 nm处比色 ,计算吞噬指数 K及吞噬系数 T,
结果见表 2。
表 2　养阴延生片对小鼠 RES吞噬功能的影响 ( n= 10)
组　别 剂量 K α
对照 - 　 0. 018± 0. 007 　 5. 1± 0. 5
养阴延生片 0. 27 g /kg 0. 074± 0. 016* * △△ 6. 54± 1. 02* * △
0. 135 g /kg 0. 058± 0. 014* * △△ 6. 2± 0. 9* *
人参固本丸 0. 25 g /d 0. 038± 0. 010* * 5. 9± 0. 7*
　　与对照组比: * P < 0. 05　* * P < 0. 01
　　与人参固本丸比: △ P < 0. 05　△△ P < 0. 01
　　结果可见 ,养阴延生片及人参固本丸显著增强
网状内皮系统吞噬功能 , K值及α值均明显增高。
2. 3　养阴延生片对荷瘤小鼠绵羊红细胞 SRBC所
致小鼠溶血素抗体生成及脾空斑形成细胞 ( PFC)的
影响: 取接种 S180瘤种 24 h后的小鼠 80只 ,随机分
4组 ,每组 20只 ,分组方法给药及剂量同 2. 2, 1次 /
日 ,共 7 d,于给药次日每只小鼠 ip与生理盐水比为
3∶ 5的 SRBC 0. 2 mL免疫小鼠 ,给药 7 d摘眼球取
血 ,离心取血清 ,用生理盐水稀释 100倍 ,在 37℃恒
温箱中保温 30 min, 0℃冰水终止反应 ,离心取上清
液 ,于 721分光光度计 540 nm处比色求吸光度值
( A)。另设不加血清的空白对照 ,取其上清液作比色
时调“ 0”基准。
用同法免疫小鼠 ,给药 7 d后颈椎脱臼处死小
鼠 ,剖腹取脾 ,用 pH 7. 4 PBS溶液洗脾细胞悬液 2
次 ,使脾细胞数为 5× 10 cfu /mL,每管加脾细胞悬
液 , 1∶ 20豚鼠血清和 0. 2% SRBC各 1 mL混匀 , 37
℃温育 1 h, 1 600 r /min离心 10 min,用 721分光光
度计在 413 nm处测 A,结果见表 3。
表 3　养阴延生片对小鼠溶血素的 PFC的影响 (n= 10)
组　别 剂量 溶血素
( A× 102)
PFC数
( 106脾细胞 /m L)
对照 - 　 2. 3± 0. 6 0. 038± 0. 010
养阴延生片 0. 27 g /kg 13. 2± 2. 1* * 0. 190± 0. 010* *
0. 135 g /kg 9. 5± 1. 8* * 0. 160± 0. 010* *
人参固本丸 0. 25 g /d 9. 3± 1. 8* * 0. 150± 0. 010* *
　　与对照组比: * * P < 0. 01
2. 4　养阴延生片对淋巴细胞转化率的影响: 取小鼠
80只 ,随机分组 ,方法同 2. 2,每鼠 im植物血凝素
( PHA) 8 mg /kg ,共 3 d。 养阴延生片及人参固本丸
给药 8 d,第 8天取血推片 ,瑞氏染色 ,油镜下计数
100个淋巴细胞、淋巴母细胞及过渡整细胞数 ,计数
它们所占百分率 ,结果见表 4。
表 4　养阴延生片对小鼠外周血淋巴细胞转化率
的影响 (n= 10)
组　别 剂量 淋巴细胞转化率 (% )
对照 - 66. 7± 2. 9
养阴延生片 0. 27 g /k g 81± 14*
0. 135 g /kg 7. 8± 9*
人参固本丸 0. 25 g /d 79± 10*
　　与对照组比: * P < 0. 05
　　由结果可见 ,养阴延生片及人参固本丸可提高
淋巴细胞转化率。
2. 5　养阴延生片对小鼠免疫器官胸腺、脾脏重量的
影响:取体重 11～ 15 g幼鼠 80只随机分 4组 ,分组
·819·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2001年第 32卷第 9期
给药及剂量同 2. 2, 1次 /日 ,共 7 d,于末次给药后
24 h摘眼球放血处死 ,称体重 ,摘出胸腺及脾脏称
重 ,以胸腺或脾脏重量 ( mg )与体重 ( g )之比作为胸
腺或脾指数 ,结果见表 5。
表 5　养阴延生片对小鼠免疫器官重量的影响 (n= 10)
组别 剂量 体重 ( g ) 胸腺指数 (m g /g) 脾指数 ( mg /g)
对照 - 12. 8± 0. 9 　　　 3. 9± 0. 6 　　　 4. 6± 0. 7
养阴延生片 0. 27 g /kg 13. 1± 1. 1 5. 2± 0. 7* * △ 6. 1± 0. 8* * △
0. 135 g /kg 12. 6± 1. 3 5. 1± 0. 8* * △ 6. 1± 0. 7* * △
人参固本丸 0. 25 g /d 12. 5± 1. 5 4. 7± 0. 6* * 5. 8± 0. 5* *
　　　　与对照组比: * P < 0. 05　* * P < 0. 01;　与人参固本丸比: △ P < 0. 05
　　结果可见 ,养阴延生片、人参固本丸均能增加幼
鼠胸腺、脾脏重量。
3　讨论
　　养阴延生片以西洋参为君 ,辅以补气药等配伍
而成。西洋参微苦、性寒 ,滋肺阴 ,生津液 ,除烦倦 ,具
有补气滋阴双重功效。 伍以黄芪甘温入肺胃以补气
壮阳 ,生地滋阴清热 ,佐以生龟板 ,加强滋阴之功效 ,
同时制黄芪之壮阳 ,用甘草清热除烦调和诸药 ,不寒
不燥 ,从而达到益气养阴之功效。针对气虚模型小鼠
外周血中 T淋巴细胞及白细胞明显低于健康小鼠 ,
其增强免疫作用 ,首先表现为对模型小鼠的外周 T
淋巴细胞百分数的白细胞数有非常显著的促进作
用。并且能使网状内皮系统吞噬功能 K值及α值均
明显增高 ,提高淋巴细胞转化率 ,增加幼鼠胸腺、脾
脏重量。 因此 ,养阴延生片是提高机体抵抗力 ,增强
体质的良方。
参考文献:
[ 1 ]　周梦圣 ,李秋莲 .模拟中医气虚动物模型的研究 [ J ] . 中医杂
志 , 1989; 9: 41-43.
[2 ]　邓文龙 ,刘家玉 ,叶尚钧 ,等 . 人参对网状内皮系统吞噬功能影
响的研究 [ J] .中医杂志 , 1983, 24( 7): 66-70.
硒云芝多糖对巨噬细胞一氧化氮的影响
张宏莲 1 ,蒋一方 2 ,傅中滇 1* ,陈婉蓉 1⒇
( 1. 华东师范大学 生物系 ,上海　 200062;　 2. 上海市儿童医院 营养研究室 ,上海　 200000)
摘　要:目的　研究了硒云芝多糖 ( Se-PSK)对巨噬细胞一氧化氮 ( NO )含量的影响。 方法　用 Grisse法测定 Se-
PSK在不同剂量、不同作用时间中 NO的产量 ,并与云芝多糖 ( PSK)作同步比较。 结果　 Se-PSK在 400μg /m L作
用 48 h达到 NO释放的峰值 ,与 PSK比较效果更为明显。结论　 Se-PSK能显著促进巨噬细胞释放 NO,并有明显
的剂量依赖关系。
关键词: 硒云芝多糖 ;云芝多糖 ;一氧化氮 ;巨噬细胞
中图分类号: R285. 5　　　文献标识码: A　　　文章编号: 0253 2670( 2001) 09 0820 03
Effect of Se-PSK on NO content in macrophages
ZHAN G Hong-lian1 , JIAN G Yi-fang2 , FU Zhong-dian1 , CHEN Wan-rong1
　　 ( 1. Depar tment o f Biolog y, Ea st China No rmal Univ e rsity , Shanghai 200062, China; 2. Depar tment of Nutritio n,
Shanghai Children s Hospital, Shanghai 20000, China)
Key words: selenium po lysaccharide krestin ( Se-PSK) ; poly saccharide krestin; ni t ric oxide ( NO) ;
macrophages
　　云芝多糖 ( PSK)是从担子菌纲杂色菌 Polystic-
tus v ersicolor中提取的一种蛋白多糖 ,它与抗肿瘤、
抗病毒、抗溃疡及降血脂作用有关 [1 ]。刘尚喜等研究
表明 PSK对氧化修饰低密度脂蛋白 ( o xLDL)抑制
巨噬细胞中一氧化氮的产生具有保护作用 ,而且
PSK可以保护巨噬细胞免受氧化修饰 LDL引起的
·820· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2001年第 32卷第 9期
⒇ 收稿日期: 2001-02-26基金项目:国家自然科学基金课题 ( 39670637)作者简介:张宏莲 ( 1976-) ,女 , 1998年于河南师范学院本科毕业 , 2001年于上海华东师范大学硕士研究生毕业。 研究方向:药用植物的药理学与毒理学。
* 指导者