全 文 ：光灯 下检视 见图 。 可见水 、醇提
取液的成分种类基本一致 。 黄连所含 种主
要生物碱均存在 。
口
口 乙
口
口
一盐酸小梁碱 一盐酸巴马汀 一盐酸药根碱
一水回流 一 醇回流 一水连续 回流 一
醇连续回流
图 不同提取液 图
小结与讨论
实验结果表明 回流提取或连续回流提
取 , 水和 乙醇提取黄连有效成分的效果
基本相同 。 因此 , 用水代替 乙醇作溶剂 ,
既可保证提取的质量 , 又能降低成本 。
比较回流和连续回流两种提取方式 , 后
者可多收得 的小璧碱 , 但受热长
达 , 实际生产中还会更长 。 盐酸小巢碱性
质很稳定 , 但黄连中其他生物碱在长的受热
时间内会分解较多〔〕 。 故可根据不同的目的 ,
选择适宜的提取方式 。
在操作中应注意 , 盐酸小璧碱易溶于热
水 , 在冷水中溶解度很小 , 提取液除杂质应趁
热过滤 , 以免盐酸小璧碱析出滤掉 。
参 考 文 献
阴 健 , 等 中药现代研究与临床应用 一 北京 学
苑出版社 ,
中华 人民共和国药典 版 一部 。
王 杰 , 等 中国药学杂志 ,
肖崇厚 , 等 中药化学 上海 上海科技出版社 ,
郭 平 , 等 华西 医科大学学报 ,
钱 捷 , 等 北京中医学院学报 ,
一 一 收稿
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薄层扫描法测定益肾胶囊中大黄素
天津医科大学药学院(300070) 李惠芬 寮 张学敏
摘 要 应用薄层扫描法对益肾胶囊中大黄素进行 了定性定量方法研究 , 对实验条件进行优选 ,
排除了干扰 , 结果满意 , 加样回收率为 98 .6 % , R s D 一 1. 04 % 。
关键词 益肾胶囊 大黄素 薄层扫描法
益肾胶囊是由大黄 、 附片等多味药材组
成 , 大黄在处方中是主药之一 , 具有泻热毒 、
破积滞 、行癖血的功能 , 其泻下作用的主要成
分为葱醒类昔及昔元 , 因此以大黄素作为大
黄制剂的测定指标 , 应用双波长薄层扫描法
测定了益 肾胶囊中大黄素的含量 。
A d d r e s s
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4 4 8
-
仪器与试剂
日本岛津 C S 一 9 30 型 双波长薄层 扫描
仪 , 大黄素标准品 (中国药品生物制品检 定
所 ) , 定量点样毛细管 (U SA ) 。 益肾胶囊 (同
仁堂制药厂提供) , 自铺硅胶 G 薄层板(硅胶
G 为 10 产一 40 拌青岛海洋化工厂 ) , 阴性对
照品 (除去大黄素 , 按处方及工艺制备成模拟
制剂) , 所用试剂均为分析纯 。
2 实验条件选择
2.1 提取方法 :试验比较了¹ 醇类溶剂浸提
法:取胶囊内容物 , 用 甲醇 40 ℃水浴浸提 3
h , 提取游离葱醒类 ;º 双 相水解提取法 :精
密称取样 品粉末 4.0000 9 , 加入 60 m L 2.5
m ol /I J 硫酸溶液 , 水浴回流 4 h , 转至分液漏
斗 中静置 , 分出氯仿层 , 再分别用 氯仿 60 、
50
、
40 m
L 萃取酸水层 , 至氯仿层颜色变淡 ,
合并回收氯仿液 , 残渣加无水 乙 醇溶解 , 滤
过 , 定容 5 m l一, 作为供试品溶液 。 结果显示 :
¹ 法虽简单 , 但未经水解 , 所提取的仅为游离
葱醒类成分 , 而该胶囊中所含游离蕙醒成分
甚微 , 不 利于含量测 定;º 法 则克服以上不
足 , 测定总蕙醒 。 因此我们采用º 法提取液作
为供试品溶液 。
2
.
2 薄层色谱条件 :硅胶板 :取硅胶 G 2 9 ,
加 1.0 % C M C 一 N a 约 5 m IJ铺成 一0 em 薄层
板 , 厚约 0. 5 m m , 1 0 5 ℃活化 l h 。
展开剂 :曾试验比较以下 4 种展开剂体
系 :¹ 石 油 醚 一环 己 烷一乙 酸 乙 醋 (l : 3 :
1.5 ) ,
º 环 己烷 一 乙酸 乙醋一氯仿一冰醋酸(10 :
4 , 1 , 0. 2 ) ,
» 石 油醚 一二 甲苯一甲苯一 甲醇
(4 , l , 1 , 2) , ¼ 石 油醚一乙 酸 乙醋 一冰醋酸
(15 , 2 , 1 ) 。
结果选择第º 种为展开剂 , 层析效果好 。
测试与参比波长选择 :将大黄素标准品
的乙 醇液适量点于薄层板上 , 按上述条件展
开 , 进行光谱扫描 (370 nm ~ 70 0 nm ) , 绘制
吸收 光谱图 , 选定大黄素测 定 波长为 入s -
4 3 0 n m , 参比波长为 入R = 5 4 0 n m 。
扫描条件 :反射法双波长锯齿扫描 , 入S ~
4 3 () n m , 入R = 5 4 0 n m 。 狭缝 1.2 m m x 1.2
《中草药 》1 99 8 年第 29 卷第 7 期
m m , 线性参数 Sx = 3 。
2
.
3 标准溶液的配制 :精密称取大黄素标准
品 0. 0130 9 , 用无水 乙醇定容 10 m L , 得
1. 30 m g /m L 标准 溶液 ¹ , 再精 密 取 2.5
m 1) , 以无水 乙醇定容 5 m L , 得 0.65 m g /m L
标准溶液º 。
2
.
4 线性关系考察 :分别吸取 2.3 项标准溶
液 0.5 、 1 . 0 、 1 . 5 、 2 . 0 、 2 . 5 、 3 . 0 拌L , 点于同一
薄层板上展开 , 按扫描条件扫描 , 得大黄素标
准曲线方程 :
A ;~ 12 353.78+ 39 411.gOCI, r 一 0 · 9 9 1 4 ;
A
Z
= 1 0 1 0 1
.
8 7 + 4 2 9 1 5
.
3 1 C
: , r
= 0
.
9 9 8 9
。
结果 表 明大黄素点样量在 0. 65 拜g 一
3 .90 拌g 范 围内线性良好 。
2
.
5 精密度 、重现性及稳 定性考察 :精密度
试验 :同一斑点连续扫描 8 次 , 大黄素的测定
结果 R SD 一 0. 06 % , 表明仪器重现性良好 。
同板重现性 :准确吸取相同量供试品溶
液点于同一 薄层板上 , 展开 , 扫描 , 测得大黄
素峰面积 , R S D 一 3 .59 % , 表明重现性 良好 。
异板重现性 :按同板重现性测定方法点
样 于 2 块板上 , 测 定结果 R SD 一 3. 15 % , 表
明异板重现性 良好 。
稳定性实验 :精密吸取 2 份供试品液 10
风 , , 与 l 份标准溶液 9 拼L , 点于薄层板上 , 稳
定后 , 每隔 l }1测 定 , 结果 s h 内稳定 , 峰面
积基本不变 , 见表 1。
表 1 稳定性试验
样 品 1 2 3
即刻 115 8 05.9 116 80 1.4 89 572.0
s h 后 115 292.8 116 ()92.0 88 950.4
偏差 (% ) 0.44 0.61 0.69
3 样品测定
3.1 定性分析 :吸取标准液º 、供试品溶液 、
阳性 、 阴性对照品液 2 肛L 分别点于同一薄层
板上 , 以_L 述展开剂º 展开 。 供试品色谱中 ,
在与标准 品相应 的位置上 , 具有相同的黄色
斑点 , 且 阴性无干扰 , 见图 1 。
3
.
2 定 量分析 :标准 品溶 液的制备 见 2.3
项 , 供试品溶液的制备见 2.1 项º 法 。 准确吸
取 供试品溶液1。拼L , 并随行 点标准 品溶液
·
4 4 9
.
川一 于 同一薄层板
上 , 以环 己烷 一 乙 酸 乙
酉旨一氯仿 一冰醋酸 (10 ,
4
:
1
:
0
.
2) 为展开剂 ,
展开 , 扫 描 , 计算结果
见表 2 。
3
.
3 回收率试验 :按
照 样 品 测 定 项 (3.2
项 )平行精称 10 份相
同量样品 , 其中 5 份定
量加入标准品制成回
收溶液 , 依法测定加样
回收率 , 结果 :
牙一 98 . 6 6 % ,
O O
O
O
0 0 0
1
一阴性对照 2 一大黄对照
品 3一大黄素标准品 4
益 ‘肾胶囊
图 1 层析图
R S D = 1 . 0 4 % (n = 6 ) 。
表 2 样品测定结果
样品 胶囊中大黄素测得值
计算含量
71 002.8
72 733 0
72 854 4
71 468.3
72 832.4
72 615 6
(% )
O ,
1 1 7
0
.
1 1 9
0
.
1 2
0
()
.
1 1 7
O
,
1
2 0
0
.
1 1 9
平均含量
(% ) R S D (% )
0 119 1. 15
4 讨论
4.1 应用薄层扫描法测定益肾胶囊 中大黄
素含量 , 采用氯仿酸水双相提取后 , 不经分离
直接以薄层板测定 , 方法简便易行 ;曾试用紫
外法测定大黄素含量 , 以氯仿 、酸水双相提取
后 , 还需酸碱及有机溶剂反复萃取除去杂质 。
4. 2 比较了未经水解直接浸提与酸水水解
后氯仿回流提取2种方法 , 发现前者所提大
黄素甚少 , 不利定量分析 , 后者提取完全 , 以
总葱醒定量 , 能反映该中药制剂含量 。
4
.
3 薄层层析条件的选择决定了成分的分
离效果 , 尤其是对于成分复 杂的中成药显得
更加重要 。 我们曾比较 4 种展开体系 , 分离效
果 以环 己烷 一乙酸 乙酷一氯 仿一冰醋酸 (1。 : 4
: l : 0 . 2) 为好 , 使大黄素与下端的芦荟大黄
素斑点相距较远 , 利于定量扫描 。根据成分与
展开剂的极性分析及除杂要求 , 使用酸性展
开剂 可使葱醒成分分离的斑点更加集中 , 便
于定量 。
4
.
4 薄层板的选择 :曾使用青岛海洋化工厂
生产的硅胶薄层板及高效硅胶薄层板 , 因薄
板薄 , 分离拖尾 , 故改 用 自铺厚 0.5 m m 板 ,
展开后斑点清晰 , 无拖尾 , 符合定量要求 。
4
.
5 限量范围 :曾以大黄阳性单味药作为对
照品 , 按样品测定方法测定大黄素含量 , 得到
大黄素含量限定范围为 。· 1 6 % ~ 0. 1 42 % ,
样 品所测得的含量均在该范围内 , 符和要求 。
参 考 文 献
l 中华人民共和国药 典 , 1 的。年版 (一 部) :15
2 沙世 炎 , 等 . 中草药有效成 分分析法 ( L 册 )1 北 京 :人
民卫生 出版社 , 1 9 8 2 :刽
3 孟宪纤 .等 . 中成药分析 . 北 京:人 民 卫 生 出 版社 、
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:
2 5 ( )
4 彭 继烽 , 等 . 中成药 , 1 9 9 4 : 16 ( 7 ) : 2 。
5 林 军 , 等 . 中成药 , 1 9 9 4 ; 1 6 ( 9 ) : 1 3
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8 B leler W .Seientld P lzar工J飞 . 1 9 7 G : 4 4 : 1 4 0
9 K h a f a g y , ‘ t a l
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