全 文 ：不同色谱系统进行 TLC鉴定 ,用标准品苦参碱和氧
化苦参碱对照 ,其中有一组分为单一的生物碱类成
分 ,但不是该两成分 ,其结构有待进一步鉴定。 另一
组分对生物碱显色剂呈阴性反应 ,其组成亦有待于
进一步鉴定。其他几个峰均为非单一组分 ,可考虑调
整溶剂系统再作进一步分离。
2. 2　本文采用的溶剂系统中 ,水相 pH值对分离结
果有很大影响 ,可考虑采用 pH梯度洗脱方法 ,以求
获得更理想的分离效果。
2. 3　本实验条件下 ,某些组分在固定相中溶解度较
大 ,在其达到饱和浓度前不会随流动相流出。因此 ,
制备时采用了连续进样方式 ,对分离结果无不良影
响。同时流动相经蒸馏后可反复使用 ,从而大大节省
了溶剂 ,缩短了制备时间。
参 考 文 献
1　张天佑 .逆流色谱技术 . 北京:科学技术出版社 , 1991: 1
2　张守芳 .中草药通讯 , 1997, ( 1): 38
3　于喜水 ,关荣娟 ,赵晓丽 ,等 . 中成药 , 1990, 12( 3): 3
4　张天佑 .逆流色谱技术 . 北京:科学技术出版社 , 1991: 295
5　蔡定国 ,顾明娟 ,张吉德 ,等 . 中成药 , 1990, 12( 6): 32
6　崔建芳 ,章观德 ,王慕邹 ,等 . 药学学报 , 1985, ( 1): 59
7　张中苏 ,张树英 ,王润生 ,等 . 中国中药杂志 , 1995, 20( 3): 171
( 1999-12-22收稿 )
肉桂油 β -环糊精包合物的制备工艺研究△
沈阳军区总医院药剂科 ( 110015)　　宋洪涛 　郭　涛
沈阳药科大学　　　　　　　　　　颜秀涛　 张汝华
解放军八七疗养院　　　　　　　　张　群
摘　要　应用三因素六水平的均匀设计方法 ,研究了 β -环糊精对肉桂油的包合作用。 通过对包合物收得率和包合
率这二个指标的比较 ,筛选优化出肉桂油 β -环糊精包合物的最佳制备条件。在此条件下 ,分别采用 5种不同的包合
方法制备肉桂油 β -环糊精包合物 ,结果以搅拌法为最好 ,所得包合物的包合率为 82. 16% ,包合物收得率为
77. 82%。
关键词　肉桂油　β -环糊精　包合物　均匀设计
Studies on the Preparaton of Cinnamon Oil-β-Cyclodextrin Inclusion Complex
　　 Depar tment o f Pha rmacy , the Genera l Hospital of Shenyang Milita ry Region ( Shenyang 110015)　 Song Hong ta o and
Guo Tao
　　 Shenyang Pha rmaceutical Univ ersity　 Yan Xiutao and Zhang Ruh ua
　　No. 87 Sana torium of PLA　 Zhang Qun
Abstract　　 Condi tions for the preparation of the cinnamon oil-β -cyclodex t rin inclusion complex w ere
studied by 3 factors and 6 levels uni fo rm design. The inclusion rate o f cinnamon oil and recovery of
inclusion complex w ere used as cri teria in the study. An optimal condi tion was established, and inclusion
complexes w ere prepa red under such condi tion wi th 5 dif ferent methods. The results show ed that the
agi tation method gave the best result. The inclusion rate of cinnamon oi l w as 82. 16% and the recovery of
inclusion complex w as 77. 82% .
Key words　　 cinnamon oil　β -cyclodex trin　 inclusion complex　 unifo rm design
　　肉桂油 ( cinnamon oil )为樟科 植物肉桂
Cinnamomum cassia Presl的干皮及树皮经水蒸气
蒸馏得到的挥发油 ,是一种常用中药 ,但其易挥发 ,
遇光和热不稳定 [1, 2 ]。为了更好地发挥其治疗作用 ,
提高其稳定性 ,并使其粉末化以便于制备各种剂型 ,
已有文献报道将肉桂油与 β -环糊精 (β -CD)制成包
合物 ,但包合率较低 [3 ]。 为提高其包合率 ,笔者对影
响包合率的诸多因素进行考察 ,经筛选优化得到了
较佳的包合工艺。
1　仪器与试药
·818· 中草药　 Chinese Traditiona l and He rbal Drug s　 2000年第 31卷第 11期
Address: Song Hong tao, Sh en yang Mili tary Region General Hospi tal, Sh enyang宋洪涛　男 , 32岁 ,博士 ,主管药师。已发表论文 30余篇 ,参编著作 2部 ,获军队科技进步三等奖 2项 ,辽宁省科技进步三等奖 1项。现主要致力于“复方中药速释与缓释制剂的研究”。△辽宁省科学技术基金资助项目 , No 9910500508
美国 Waters 501型高效液相色谱仪 ; 484型紫
外检测仪 ; SC1100型色谱工作站 (北京化工学院 ) ;
JB-50D型增力电动搅拌器 (上海标本模型厂 ) ;
AS5150A型超声波清洗机 (天津奥特塞恩斯仪器有
限公司 ) ; DS-200型高速组织捣碎机 (江苏江阴周庄
科研器械厂 ) ; SO-V型球磨机 (浙江海宁新华医疗
器械厂 )。
肉桂 (购自沈阳市药材公司 ,经鉴定为樟科植物
肉桂 Cinnamomum cassia Presl的干燥树皮 ) ;桂皮
醛对照品、对羟基苯甲酸异丙酯内标物 (中国药品生
物制品检定所 ) ; β-CD(广东郁南县环状糊精厂 ,纯
度> 98% );乙腈为色谱纯 ;其他试剂均为分析纯。
2　方法与结果
2. 1　肉桂油的提取:将肉桂粉碎过 2号筛 ,置入装
有挥发油提取器的烧瓶中 ,加 5倍量水 ,加热煮沸提
取挥发油 ,将挥发油加无水硫酸钠脱水即得。经测定
其桂皮醛含量为 97. 2% 。
2. 2　包合物中桂皮醛的含量测定方法
2. 2. 1　色谱条件: 色谱柱: Hypersi l ( ODS2 ) C18 , 10
μm, 4. 6 mm× 250 mm(大连依利特科学仪器有限
公司 ) ;流动相: 乙腈-0. 1%磷酸溶液 ( 25∶ 75) ;流
速: 2 m L /min;柱温: 室温 ;检测波长: 280 nm;灵敏
度: 0. 01AUFS;内标: 对羟基苯甲酸异丙酯 ;进样
量: 20μL。
2. 2. 2　线性关系考察: 精密称取桂皮醛 10 mg ,置
100 mL容量瓶中 ,用乙腈稀释至刻度 ,作为对照品
溶液 ;精密吸取对羟基苯甲酸异丙酯 100 mg ,置 100
m L容量瓶中 ,用乙醇溶解并稀释至刻度 ,作为内标
溶液 ;精密吸取对照品溶液 0. 2, 0. 5, 1. 0, 2. 0, 5. 0
m L至 10 m L容量瓶中 ,并分别加入内标溶液 1
m L,最后加乙醇至刻度 ,混匀 ,进样测定 ,以对照品
峰面积和内标峰面积比值为纵坐标 ,对照品浓度与
内标浓度比值为横坐标 ,作图 ,结果:桂皮醛在 2. 0
～ 50. 0μg /mL范围内线性关系良好 ,其回归方程
为: Y= 5. 492X+ 4. 604× 10- 3 , r= 0. 999 9。
2. 2. 3　包合物中桂皮醛的回收率实验: 称取 β -CD
约 20 mg ,置 15 mL具塞离心管中 ,加入一定量的桂
皮醛 ,精密加入无水乙醇 10 m L,混匀 ,密封 ,超声
15 min后放置过夜 ,次日离心 ( 2 500 r /min ) 10
min,精密吸取上清液及内标溶液 1 mL于 10 mL容
量瓶中 ,补加乙醇至刻度 ,混匀 ,进样测定 ,结果桂皮
醛平均回收率为 98. 9% , RSD= 1. 8% (n= 6)。
2. 2. 4　包合物中桂皮醛的含量测定:精密称取包合
物约 20 mg ,置 15 mL具塞离心管中 ,精密加入无水
乙醇 10 m L,其他操作同 2. 2. 3项下 ,计算包合物中
桂皮醛的含量。
2. 3　包合工艺的研究
2. 3. 1　饱和水溶液电动搅拌法:①肉桂油溶媒的选
择: 分别以乙醇、丙酮、异同醇和乙酸乙酯为肉桂油
的溶媒。 将 β-CD加入 90℃蒸馏水中制成饱和溶
液 ,在 800 r /min条件下 ,缓慢滴加用溶媒溶解的肉
桂油 (β -CD与肉桂油的投料重量比为 13∶ 1) ,搅拌
1 h ,然后置冰箱内冷藏 24 h,过滤 ,并以少量蒸馏水
洗涤 ,以洗去部分未包合的 β -CD,低温真空干燥 24
h,研碎 ,过 80目筛得粗包合物。粗包合物用乙酸乙
酯洗涤 3次后晾干 ,即得疏松状白色包合物粉末。对
此粉末进行各项指标的考察 ,结果见表 1。
结果表明用乙酸乙酯做溶媒制备的肉桂油 β-
CD包合物的包合率均高于用另外 3种溶媒制备的
包合物。
表 1　在不同溶媒条件下制备肉桂油 β-CD
包合物的实验结果
实验号 溶　媒 包合物收得率 (% )
桂皮醛
含量 (% )
包合率
(% )
1 乙　　醇 67. 29 7. 05 68. 23
2 丙　　酮 71. 58 7. 27 74. 94
3 异 丙 醇 70. 83 7. 08 72. 23
4 乙酸乙酯 77. 82 7. 33 82. 16
　　②均匀设计:在选定溶媒的情况下 ,经预实验发
现 ,影响包合效果的主要因素为: β-CD与肉桂油的
比例、搅拌时间、反应温度。为选择最佳条件 ,以此三
因素为考察指标 ,组成 U6 ( A3 )表 ,进行三因素六水
平均匀设计实验 ,均匀设计方案与结果见表 2。
表 2　肉桂油 β-CD包合物均匀设计方案与结果
实验号 β-CD /肉桂油
( w /w )
温度
(℃ )
时间
( h)
包合物收
得率 (% )
桂皮醛
含量 (% )
包合率
(% )
1 8∶ 1 50 3 68. 40 7. 27 46. 04
2 9∶ 1 70 6 76. 20 7. 25 56. 84
3 10∶ 1 90 2 82. 61 7. 32 68. 43
4 11∶ 1 40 5 57. 12 7. 30 51. 48
5 12∶ 1 60 1 71. 26 7. 28 69. 38
6 13∶ 1 80 4 74. 09 7. 35 78. 43
　　③数据处理与结果分析: 将表 2中各因素的各
水平对包合率和包合物收率 ,用《均匀设计和统计优
化软件》 (沈阳药科大学研制 )进行多元逐步回归分
析 ,得到以下 2个回归方程:
桂皮醛包合率对各因素水平的回归方程: Y=
- 19. 879 + 7. 557X 1 + 0. 298X 2 - 0. 260X3 -
0. 134X
2
1
r = 0. 999 8, Q (残数平方和 ) = 0. 200 6, S =
0. 447 9。
·819·中草药　 Chinese Traditiona l and He rbal Drug s　 2000年第 31卷第 11期
经上述优化软件自检 ,α= 0. 026 0, F检验通
过 ,各因素优化值为:
Y (最大值 ) = 82. 246% , X 1= 12. 998∶ 1( w /
w ) ,X 2= 89. 963℃ ,X 3= 1. 047 h
包合物收率对各因素水平的回归方程: Y=
36. 120- 1. 361X 1+ 1. 222X 2 - 0. 709X 3- 0. 006X 22
r= 0. 997 5, Q= 1. 841 2, S= 1. 356 9。
经上述优化软件自检 ,α= 0. 105 8, F检验通
过 ,各因素优化值为:
Y (最大值 )= 85. 746% ,X 1= 8. 010∶ 1( w /w ) ,
X 2= 89. 904℃ , X 3= 1. 015 h
从以上 2个方程可以看出 ,影响包合率和包合
物收得率的主要因素为 X1和 X2 ,即 β -CD与肉桂油
的投料比和温度 ,其中投料比的影响比较复杂 ,投料
比大 ,包合率高 ,而包合物收得率降低 ,但投料比对
包合物收得率的影响远较对包合率的影响为小 ,根
据优化的自变量值并结合生产的实际情况和需要 ,
设计了一个新的试验条件: X 1= 13∶ 1( w /w ) , X 2=
90℃ , X 3= 1 h,按此条件实施 3次 ,结果包合物中
桂皮醛的含量为 7. 33% ,包合物收得率为 77. 82% ,
包合率为 82. 16% ,其结果与方程预报值非常接近 ,
证明了以上 2个回归方程具有高度的可靠性和预报
功能。
2. 3. 2　超声法:按 β -CD-肉桂油 ( w /w )= 13∶ 1,精
密称定 β-CD与肉桂油 (下同 ) ,先将 β -CD制成近饱
和溶液 ,缓慢滴加以乙酸乙酯溶解的肉桂油 ,超声
30 min,冷藏 24 h,包合物处理方法同 2. 3. 1项下。
2. 3. 3　高速组织捣碎法:将 β -CD置高速组织捣碎
机中 ,以 150 mL蒸馏水捣至溶解 ,将用乙酸乙酯溶
解的肉桂油分次加入 β-CD饱和溶液中 ,转速 8 000
r /min,操作 9 min,冷藏 24 h,包合物处理方法同
2. 3. 1项下。
2. 3. 4　手工研磨法: 将 β -CD置研钵中 ,加入 3倍
量蒸馏水 ,边研边加入用乙酸乙酯溶解的肉桂油 ,研
磨 1 h ,低温真空干燥 24 h,其他处理方法同 2. 3. 1
项下。
2. 3. 5　球磨法: 将 β -CD倾入球磨缸内 ,加入 2倍
量蒸馏水 ,然后加入用乙酸乙酯溶解的肉桂油 ,在
42 r /min转速下 ,操作 1 h,低温真空干燥 24 h,其
他处理方法同 2. 3. 1项下。
以上几种方法制备包合物的结果比较见表 3。
表 3　 5种不同方法制备肉桂油 β-CD包合物结果比较
制备方法 包合时间
(min)
包合物收率
(% )
桂皮醛含量
(% )
包合率
(% )
电动搅拌法 60 77. 82 7. 33 82. 16
超声 30 66. 62 6. 80 65. 25
高速组织捣碎 9 62. 73 6. 95 62. 79
手工研磨 60 - 2. 99 43. 07
球磨 60 - 4. 75 68. 21
3　讨论
由于肉桂油的主要有效成分为桂皮醛 ,其含量
高达 97. 2% ,故本实验采用桂皮醛的含量作为包合
率的考察指标 ,测定方法采用 HPLC法 ,方法简便、
灵敏、准确、重现性好。肉桂油用 β -CD包合 ,由于仍
有部分挥发油未被包合而被吸附 ,故在进行含量测
定时 ,用乙酸乙酯洗去未被包合的挥发油。文献报道
用乙醇洗涤 ,由于乙醇具有较强的极性 ,对包合物具
有破坏作用 [4 ] ,而使已被包合的肉桂油被部分洗去 ,
故用乙醇对包合物进行洗涤是不妥当的。在供试品
溶液的制备中 ,以乙醇为溶媒可将包合物完全破坏 ,
从而使肉桂油完全游离出来 ,但此过程需要一定时
间 ,实验证明 ,超声 15 min并不能将肉桂油完全提
出 ,须再浸泡 10 h以上 ,才能将肉桂油提取完全 ,为
了方便测定 ,选择浸泡 24 h。
按照均匀设计后的优化条件 ,本文对常用的几
种包合物的制备方法: 电动搅拌法、超声法、高速组
织捣碎法、手工研磨法、球磨法等 5种方法进行比
较 ,结果表明 ,肉桂油 β -CD包合物的制备以电动搅
拌法为优 ,其包含率为 82. 16% ,明显高于文献报道
的 36. 72% [3 ]。
参 考 文 献
1　中国医学科学院药用植物资源开发研究所编 .中药志 (第五册 ) .
北京:人民卫生出版社 , 1994: 388
2　中华人民共和国药典 (一部 ) . 北京:化学工业出版社 , 1995: 112
3　富志军 ,张　泓 . 中成药 , 1994, 16( 12): 6
4　 Jos ef Pi tha, Teruhik o Hoshino. J Pharm , 1992, 80: 243
( 2000-03-22收稿 )
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学和临床医学 ;生化制药工业管理等。
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·820· 中草药　 Chinese Traditiona l and He rbal Drug s　 2000年第 31卷第 11期