全 文 ：薄层扫描法测定还春补力片中蛇床子素的含量
冯　盛 ,李惠霞⒇
(广州中药一厂 ,广东 广州　 510140)
中图分类号: R927. 2　　　文献标识码: B　　　文章编号: 0253 2670( 2001) 09 0803 02
　　还春补力片是由人参、蛇床子、玉竹等十味中药
制成的片剂 ,具有补肾壮阳 ,益气养血之功效。 其中
蛇床子中所含的蛇床子素为其主要活性成分 [ 1] ,采
用薄层扫描法对蛇床子素的含量进行测定。经方法
学验证 ,方法简便、重现性好、稳定、可靠。
1　仪器与试药
仪器:岛津 CS-930薄层扫描仪 (日本 )。试药:
蛇床子素对照品 (供含量测定用 )由中国药品生物制
品检定所提供 ;还春补力片由广州中药一厂生产 ;其
他试剂均为分析纯。
2　方法和结果
2. 1　提取条件的选择:以中国药典 [2 ]中蛇床子药材
含量测定方法为基础进行筛选 ,用氯仿索氏提取 8
h为最佳提取条件。
2. 2　薄层色谱及薄层扫描条件: 吸附剂: M erk硅
胶 G60薄层板 ( 20 cm× 10 cm ) ;展开剂 ;苯 -乙酸乙酯
( 30∶ 1) ;显色:于紫外光灯 365 nm下检视。采用双
波长反射扫描法 ,λs= 325 nm ,λR= 271 nm。
2. 3　对照品溶液的制备: 精密称取蛇床子素对照
品 ,用无水乙醇制成每 1 mL含 1 mg的溶液 ,作为
对照品溶液。
2. 4　供试品溶液的制备:取还春补力片 20片 ,除去
糖衣 ,研细 ,精密称取 10片的重量 (约 3 g ) ,置索氏
提取器中 ,加入氯仿 9 mL,加热回流 8 h,取出 ,回收
氯仿至干 ,残渣加入无水乙醇适量 ,定量移至 5 mL
量瓶中 ,并用无水乙醇稀释至刻度 ,摇匀 ,即得。
2. 5　线性关系试验: 定量吸取对照品溶液 0. 5,
1. 0, 2. 0, 3. 0, 4. 0μL分别点于同一硅胶 G60薄层板
上 ,以上述展开剂展开 ,取出 ,晾干 ,置薄层扫描仪中
测定。以蛇床子素含量为横坐标 ,峰面积积分值为纵
坐标 ,绘制标准曲线 ,得回归方程: Y= 94. 006X+
55. 812, r= 0. 998。结果表明蛇床子素在 0. 5～ 5. 0
μg范围内呈现良好线性关系。
2. 6　稳定性试验: 定量吸取对照品溶液 ( 3. 348
mg /mL) 3. 0μL,以上述展开剂展开 ,取出 ,晾干 ;然
后每隔半小时测定一次峰面积积分值 ,结果表明 3
h内斑点峰面积积分值基本稳定 ,RSD= 0. 9% 。
2. 7　精密度实验:吸取 6个浓度为 3. 348 mg /mL
的对照品溶液 ,分别点于同一硅胶 G60薄层板上 ,点
样量为 3. 0μL,依上法展开 ,测定其峰面积积分值 ,
RSD= 1. 1%。
2. 8　重复性试验:取同一批号样品 5份 ,精密称定 ,
依法测定 ,得蛇床子素平均含量为 1. 53 mg /g ,RSD
为 2. 4% 。
2. 9　加样回收率试验:精密称取一定量的蛇床子素
对照品 ,加到已知含量的样品中 ,按上述方法制备供
试品溶液 ,依法测定 ,得平均回收率为 99. 0% (n=
5) ,RSD为 2. 2%。
2. 10　空白试验:取缺蛇床子药材的空白样品 ,按样
品测定方法进行测定 ,证明其他成分对蛇床子素的
测定无干扰 (见图 1)。
　 1　　 2　 　 3　　 4　　 5　　 6　　 7　　 8
1～ 4-还春补力片　 5～ 6-空白样品　 7～ 8-蛇床子
素对照品
图 1　蛇床子测定薄层色谱图
2. 11　样品含量测定:分别精密吸取对照品溶液 1,
3μL,供试品溶液 2μL,分别点于同一硅胶 G60薄层
板上 ,依法测定 3批样品 ,结果分别为 0. 51, 0. 52,
0. 48 mg /g。
3　讨论
·803·中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2001年第 32卷第 9期
⒇ 收稿日期: 2001-04-20
3. 1　提取溶媒 ,以氯仿的提取效果较佳 ;提取方法 ,
以索氏提取效果较佳 ;提取时间 ,回流 8 h可取得较
高的收得率。
3. 2　曾试用中国药典 [2 ]荧光扫描法 ,但结果色谱峰
图基线噪声很大 ,改用紫外光区对蛇床子素进行光谱
扫描 ,所得光谱图最大吸收峰和谷底吸收峰分别为λs
= 325 nm和λR= 271 nm ,且基线噪声较小。 同时两
种扫描法所获的回归方程相关系数为: 荧光扫描法
r= 0. 994,紫外双波长反射扫描法 r= 0. 998,考虑以
上两个因素 ,最后选取紫外反射双波长扫描法。
参考文献:
[1 ]　孙丰年 .中药辞海 [M ] .北京:中国医药科技出版社 , 1997.
[2 ]　中国药典 [ S] .一部 . 2000.
抗病毒口服液中连翘苷的含量测定
张庆伟 1 ,王润岭 1 ,李惠芬 1 ,李军燕 2⒇
( 1. 天津医科大学 ,天津　 300203;　 2. 中国中医研究院 ,北京　 100070)
中图分类号: R927. 2　　　文献标识码: B　　　文章编号: 0253 2670( 2001) 09 0804 02
　　抗病毒口服液临床上用于治疗病毒性感冒 ,疗
效确切 ,应用广泛。作为其中主要成份的连翘是处方
中的主药 ,其所含连翘苷的含量的高低 ,直接影响着
抗病毒口服液的疗效。 为此 ,本文采用 HPLC法测
定抗病毒口服液中连翘苷的含量 ,监控其质量 ,获得
满意结果。
1　仪器于试药
仪器: Wa ters高效液相色谱仪 ,含 515溶剂输
送泵 , 2487型紫外检测器 , Anastar色谱工作站。
试药:抗病毒口服液 (天津飞鹰制药有限公司提
供 ) ,连翘苷对照品 (中国药品生物制品检定所提
供 ) ,乙腈、甲醇均为色谱纯 ;大孔树脂 ( D101,南开
大学高分子所提供 )。
2　方法与结果
2. 1　色谱条件:色谱柱: Kromasil C18柱 ( 4. 6 mm×
200 mm , 5μm);流动相: 乙腈-水 ( 30∶ 70) ,流速:
1. 0 mL /min,检测波长: 277 nm;柱温: 25℃ ,进样
量: 20μL。
2. 2　标准曲线制备: 精密称取连翘苷对照品 (于
105℃干燥 2 h) 5 mg置 50 mL量瓶中 ,用甲醇稀释
至刻度 ,作为对照溶液。精密量取该溶液 0. 5, 1. 0,
2. 0, 3. 0, 4. 0 mL分别置 25 mL量瓶中 ,用甲醇稀
释至刻度。 分别进样 20μL,得色谱图 ,计算连翘苷
回归方程: C= 7. 126× 10- 6A+ 0. 207, r= 0. 999 9,
连翘苷在 2. 0～ 16. 0μg /mL范围内呈线性。
2. 3　阴性溶液的制备:同样品溶液方法制备阴性对
照溶液 ,按样品色谱条件测定 ,无干扰。
2. 4　样品的测定: 精密量取抗病毒口服液 25 mL
置分液漏斗中 ,用乙酸乙酯振摇提取 5次 ,每次 20
mL。合并乙酸乙酯液 ,回收乙酸乙酯并蒸发至干 ,残
留物溶于 60%乙醇 5 mL中 ,加于已处理好的大孔
树脂柱 ( 1 cm× 20 cm ) ,先用 30%乙醇溶液 100 mL
冲洗 ,弃去洗液 ,然后用 60%乙醇溶液 120 mL洗
脱 ,收集洗脱液 ,浓缩至干。残留物溶于少量甲醇并
移入 10 mL量瓶中 ,用甲醇稀释至刻度 ,进样 20
μL,得色谱图 ,由回归方程计算连翘苷的含量。样品
测定结果见表 1。
表 1　 3批样品测定结果
批号 连翘苷的含量 (μg /mL)
1 2 3
平均值
(% )
R SD
(% )
20000901 5. 60 5. 65 5. 46 5. 57 1. 77
20000902 4. 96 4. 90 4. 85 4. 90 1. 12
20000903 5. 16 5. 09 5. 23 5. 16 1. 36
2. 5　重复性实验: 同时提取抗病毒口 服液
( 20000902批 ) 5份 ,按上述方法制备样品溶液 ,分别
进样 ,测定。 计算出连翘苷的含量为 4. 81μg /mL,
RSD= 1. 49%。
2. 6　加样加收率的测定:精密量取抗病毒口服液 7
份 ,其中一份作为对照 ,另 6份分别加入不同量的对
照溶液 ,按样品测定方法操作 ,计算回收率为
98. 3% ,RSD= 1. 64%。
3　讨论
3. 1　提取中用到的 30%乙醇溶液 ,其浓度应准确 ,
·804· 中草药　 Chinese T raditional and Herbal Drug s　 2001年第 32卷第 9期
⒇ 收稿日期: 2001-02-18