全 文 ：盐酸小果碱及其复方制剂含量测定方法研究概况
兰州军区乌鲁木齐总医院 (8 30 0 0 0 )王 秀萍 朱 陈召 晖 夏尚全
摘 要 综述了近年来盐酸小粟碱及其复方制剂含量测定方法的研究概况 ,其中包括 U V /V is 、
H P L C
、
T l
,
C S 等 。
关键词 盐酸小璧碱 复方制剂 含量测定
盐酸小桨碱 ( 又名盐酸黄连素 , B B H )具
有清热解毒 、 抗菌消炎的功效 ,在 中药及其复
方制剂中使用很广 , 主要用于痢疾 、 肠 胃炎 、
气管炎 、 咽喉炎 、 扁桃腺炎等症 。 外用治疗疖
疮 、 湿疹及各种化脓性感染 。 B B H 存在于许
多中草药中 , 如黄连 、 黄柏 、 三颗针等 , 且常与
各种成分如巴马亭 、 药根碱等共存 。 其含量测
定对于研究药物的药理作用 、 临床疗效 、 合理
用药 、 开发药源 、 控制制剂质量等均具有重要
意义 。 其剂型 由最初的片剂发展到胶囊剂 、 丸
剂 、 注射剂 、 配剂等 。有关 B B H 的含量测定方
法已有较多的研究报道 〔 ,一 5 , 。 近年来 , 随着剂
型的多样化 ,仪器的更新 , 新的测定方法不断
出现 , 笔者查 阅了近 fL 年国内较先进且准确
度高的含量测定方法 ,综述如下 :
1 紫外 一可见分光光度法 ( U v 一 V I )S
B B H 属于芳香族六元环毗陡类化合物 ,
具有强的紫外吸收 。 因此 , U V 常用作 B BH
的定性定量 。近年来 , 不同剂型的样品前处理
不断得到发展 , 如提取方法的选择 、 溶剂选
择 、 波长选定 、 测定方式改进等 。 对 B B H 及片
剂以 U V 法测 定含量 , 对溶剂进行了选择 ,
实验表 明 ,选蒸馏水更经济且便于操作 。
以中间吸收峰 瑞 a二 26 3 n m 作测 定波长 ,
B B H 及片剂含量和 R S D 分别为 9 7 . 5% (n 二
5 )
、
2
.
2 8%及 9 4 . 9 % ( n = 5 ) 、 0 . 5% 。 本法可
用于样品之间相对含量的比较 〔6〕 。 用 U V 法
对不 同厂家黄连素片中 B B H 的含量进行了
测定 比较 ,方法与前法相同 ,但测定波长选定
为 入 3 4 5 n rn , 平 均 回收 率 1 0 0 . 4 0 % , R S D
0
.
8 6 2%
。 此法简便 、 快速 、 灵敏度高〔 7〕 。 以甲
醇提取样品 ,经中性氧化铝柱层析后 ,利用双
波长系数倍率法 , 消除了对测定成分的干扰 ,
对名贵中成药万应锭中 B B H 进行了测定 f s〕 。
系数倍率法属于计算分光光度法之一 , 对多
组分的混合物的分析测定不失为简便有效的
方法 。
因甲醇毒性较大 ,用无水 乙醇为溶剂 ,其
紫外吸收图谱与甲醇一致 。 采用一阶导数光
谱法可 不 经分离直接 测 定烧伤 l 号 配中
B B H 的含 量 。 B B H 的一 阶 导 数 光谱 于 入
3 61
.
3 n m 处有明显的波谷峰 ,而干扰组分在
此 无吸收 。 实验结果平均 回收率 9 9 . 9 7% ,
R S D 0
.
4 7% ( n = 5 )
,此法与通常的提取 比色
法相 比更加快速 、 简便 、 准确 , 符合医院快检
的要求 〔9〕 。 应用一阶导数光谱法也测定了盐
酸黄连素片中 B B H 的含量 , 可直接消除片剂
中 辅 料 对 测 定 结 果 的 影 响 , 回 收 率 高
( 1 0
.
4% )
, 重现性强 ,测定溶液在 24 h 内稳
定不变 。 在 25 C 士 S C范 围内温度对测定结
果无影响 〔 , 。〕 。
在应用二 阶导数光谱法测 定复方片中
B B H 的含量中 , 有过滤 步骤 , 滤纸对小璧碱
有吸附作用 ,影响含量测定结果 。 因此 ,在配
制标准溶液时 ,也用滤纸同样处理过滤 ,以消
除误差 。 该法不经分离即可直接消除阴性对
夸
A d d r e s s
:
W
a n g X i u p i n g
,
L
a n z h o u A
r
m y W
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一
M u q i G e ne
r a l H o
s p i t a l
,
W
u l u
一
M u q i王秀萍 女 , 1 9 98 一。 6 毕业于 医学院校药学专业 ,现任兰州军区乌鲁木齐总 医院药局药师 。曾在 《中国药房 》 、 《中国医院药学杂志》 、 《中国药事》和 《临床医学 》等刊物上发表专业论文数篇针剂研制和药厂生产等工作 。
.
1 3 2
.
从事药剂专业工作近 10 年 ,
, 主要从事药物检验 、 中草药
照液的干扰〔川 。 对上法的改 良是以柱层析分
离 , 准确度进一步提高 〔` 2〕 。 在测定增效黄连
素片中 B BH 含量时 ,采用了离心沉淀法去除
辅料 , 结果满意 〔` 3 〕 。 由于供试品中含有不溶
性辅料 ,按 文献 t14 ,制成的供试液浑浊 ,用滤
纸过滤其回收率低且不稳定 ,故采用此法 , 回
收率 9 . 76 % 。 对增效黄连素胶囊中 B B H 和
T M P
, 以 U V 法于 入3 4 9 . 6 n m 处测 定其 含
量 ,选择 了适合两者各自特性较佳的溶剂 : 即
乙醇一冰 醋酸 ( 95 : 5) 和 0 . 1 m ol / L H CI , 是
对共存组分不经分离直接测定的较好方法之
一〔 1 5〕
在实际工作中发现 , B B H 在 p H 为 6 . 7
介质中 ,与盐酸奎宁和嗅酚蓝反应形成三元
离子对 , 可被氯仿定量萃取 。 经考查 ,其氯仿
提取液在 入 6 10 n m 处有最大吸收峰 , 线性范
围 O一 5 . 0 拜g / m L , 平均 回收率为 9 7 . 0 % ,
R S D < 1
.
0%
, 用本法测定其片剂含量 , 处方
中赋形剂对实验结果无干扰 , 故该法是测定
制剂中 B BH 较理想的方法 〔` 6〕 。 分光光度法
简便 ,但不能分离共存组分 。
2 薄层色谱法 ( T L C )S
以小璧碱为指标 , 测定了全国七厂家石
解夜光丸中小璧碱含量 。 石解夜光丸由于组
方复杂 , 含蜜量高 ,分析难度大 , 尚未 见有关
含量测定报道 。 经考查 , 样品在 乙酸 乙醋一丁
酮 一甲酸一水 l( o : 7 : 1 : 1 , V / V )中分离效果
较理 想 ,各厂石解丸在紫外灯下可显出圆而
清晰的不 同 R f 值荧光斑点 。 加样 回收率
9
.
9 %
, 小璧碱在 4 h 内颜色稳定 , 峰面积积
分值基本不变 。 以甲醇提取液直接点样 ,展开
后不经显色直接定位测定小巢碱含量 〔` 7〕 。
近年来发展起来的双波长薄层扫描法具
有快速 、 简便的优点 。采用双波长薄层扫描法
测定葛根答连片中小巢碱的含量 ,具有图谱
清晰 、 操作迅速 、结果准确的特点 。 实验是将
标准品及样品溶液同时点在硅胶 G 预制板
上 , 以乙 酸乙醋一氯仿 一甲醇一氨水 ( 10 : 2 : 2
:
2) 下层为展开剂展开 15 。 m , 此展开系统
能得到分离程度高 、 圆而集中的斑点 , 展开后
《中草药 》 1 9 98 年第 29 卷第 2 期
于扫描仪上 测吸收光谱 , 入m a 、为 42 5 n m ,称 in
为 6 5 0 n m , 采用反射法锯齿扫描 , 点样量在 1
一 8 拜g 范围内与积分值呈线性关系 , 加样 回
收率 9 6 . 7% 〔` 8 〕 。
采用 同法测定了复方黄连素片中 B B H
和盐酸 巴马亭的含量 , 展开剂改作正丁醇一冰
醋酸一水 ( 7 : 2 : l ) ,展距 1 5 e m , 选 入s 为 4 3 0
n m 扭 R 为 6 5 0 n m , 回收率 9 8 · 3 5 % 。 B B H 薄
层扫描含量测定有可见 、 紫外 、 荧光测定法 。
在本实验中 , B BH 、 巴马亭在可见光下均为浅
黄色斑点 ,斑点圆而集中 ,且两者能很好地分
离 , 不需在紫外光下定位 ,较简单 ,故采用可
见光进行测定〔 , ’ 〕 。 使用 T L C S 法测定了清肺
抑火丸中有效成分小璧碱的含量 ,平均回收
率 96 . 86 % ,展开剂采用氯仿 一乙酸乙醋 一甲酸
(9
, 3 , 1 , 1 )
,直立上行法展开 ,此方法可作
为药厂控制产品质量使用〔 20j 。 对紫外光 、 可
见光薄层扫描法进行比较 , 发现用荧光光密
度法测定 , 灵敏度更高 ,基线更平直 ,扫描速
度更快 。 用此方法测定了复方黄连生肌散中
小璧碱的含量 ,获得稳定的数据 〔“ , 〕 。 应用瑞
士 C A M A G 厂的薄层扫描仪同时对盐酸黄
连素片 、 胃疡安胶囊 、 胃炎康胶囊 3种药物中
的 B B H 含量进行了对 比 , 其回收率分别为
9 9
·
9 %
、
9 9
·
4%
、
9 9
·
9%
,
R S D 值 分 别 为
.0 75 %
、
1
·
13 %
、
.2 3 %
。 实验中使用这种薄
层扫描仪能自动消除薄层板厚薄不匀引起的
测定误差 , 可直接使用样 品波长进行定量分
析 , 较一般的双波长薄层扫描仪更加快速 、 简
便 〔2 2〕 。
3 高效液相色谱法 ( H P L c )
H P L C 法分辨率高 , 数据处理快 , 且灵敏
度高 ,对于复方制剂的含量测定是较好的方
法之一 。 用正相 H P L C 法 , 以窗 口 图解技术
对色谱条件进行了优化 , 对黄柏及其中成药
中的有效成分小粟碱 、 巴马亭的提取 、测定条
件 、标准曲线进行了研究 ,其中小巢碱的回收
率在 96 %以上 。 流动相的最佳配比是乙酸乙
醋一甲酸一无水 乙醇 ( 1 5 : 3 : 2) ,检测波长 3 46
n m
,流速 1 . 5 m L /m in 。 该实验可以考察产品
.
1 3 3
.
质量 ,也可作为其它中成药复方制剂中小巢
碱 、 巴 马 亭 的含 量测 定 方法 〔23 。 用 反 相
H P L C 测定了 5 种小粟属植物根中 7 种生物
碱的含量 ,改变检测波长 , 即能使各成分在最
大吸收波长处检测 , 又避免了相邻色谱峰的
干扰` 2 4 , 。
用 H P L C 测定心肌炎片中 B B H 的含
量 , 使用 R P I。色谱柱 ,流动相为磷酸盐缓冲
液 ( p H 5 . 2升乙睛一甲醉 ( 6 ` 5 : 1 ) ,平均回收
率 10 % 。 对样品处理 , 比较了索氏提取器和
超声波振荡提取 ,表明以超声波振荡法提取
简便 、快速 ,并对提取液是否用氧化铝柱处理
进行了化较 ,其结果无明显差异〔25j 。
综上所述 , U V 一 V IS 、 H P L C 及 T L C S 为
近年来测定 B B H 含量的主要方法 , 以上诸方
法各有其优缺点 。 U V 法较简便 ,所用仪器及
试剂都较普遍 , 但复方制剂前处理较麻烦 ,测
定组分单一 。 H P L C 分离效率高 、速度快 、 灵
敏度高 ,配以数据处理系统 ,大大提高了结果
的准确性 , 但仪器较昂贵 , 且要求较高 , 尚未
广泛普及 。 T L C S 分离能力强 , 点样量少 ,斑
点集中 ,灵敏度高 ,操作方便 ,但由于薄层板
的展开 、 扫描都较费时 , 仍需进一步简化操
作 。 《中国药典 》 1 9 9 5 年版中对 B BH 单组分
的含量测定仍使用重铬酸钾法 〔26j ,但随着我
国中医药的发展及逐步走向国际市场 , 其分
析方法也将更进一步发展 , 渐趋完善化 、简便
化 。
参 考 文 献
1 中华人民共和国卫生部药典委员会编 . 中国药典一部 .
北京 : 人民卫生出版社 , 1 9 7 . 51 7
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6 余慕婉 . 中药材 , 19 94 , 1 7 ( 6 ) : 3 5
7 丁青龙 ,等 . 中国药房 , 19 弱 , 6 ( 2) : 3
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9 吴延晖 , 等 . 药学实践杂志 , 1 9 9 5 , 1 3 ( 6 ) : 3 6 3
一。 许祯灿 , 等 . 中国 医药工业杂志 , 1 9 94 , 2 5 ( s ) : 3 5 5
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1 2 张丽明 ,等 . 中国药学杂志 , 19 93 , 2 8( 4) : 2 36
13 李 隆 ,等 . 中国药科大学学报 , 19 93 , 2 4 ( 2 ) : 12 7
14 李淑芹 ,等 . 中国医院药学杂志 , 19 90 , 10 (l ) : 29
15 杨群英 ,等 . 西安医科大学学报 , 19 90 , 1 1 (1 ) : 48
16 江国振 ,等 . 中国医院药学杂志 , 1 9 9 6 , 1 6 ( 9 ) : 4 1 3
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18 梅洪勇 , 等 . 中成药 , 1 9 8 9 , 1 1 ( 1 0 ) : 4 2
1 9 甄汉深 , 等 . 中国中药杂志 , 19 93 , 18 (2 ) : 96
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2 1 欧阳仕番 , 等 . 中国中药杂志 , 1 9 9 6 , 2 1 ( 9 ) : 5 4 5
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2 5 孙文基 . 中草药 , 1 9 9 5 , 一7 ( 1 1 ) : 1 1
26 中华人民共和国卫生部药典委员会编 . 中国药典 . 二
部 . 广州 : 广东科技出版社 , 19 95 . 5 67
( 1 9 9 7
一 0 4一 0 9 收稿 )
全国天然药物资源学术会议通知
中国自然资源学会天然药物资源专业委员会定于 1 9 9 8 年 n 月在海南省海口 市召开全国第三届天然药
物资源学术研讨会 ,并同时进行天然药物资源专业委员会换届选举 。 现将有关事宜通知如下 (不再另行文 ) 。
1
、 会议以天然药物资源的综合利用和产品开发为主题 ,征集有关以下论文 :
(1 )药物资源学的理论研究 , (2 )天然药物资源专业教育 , ( 3) 资源化学 , ( 4) 资源动 、植 、 矿物的研究 , ( 5) 资
源综合利用 、 产品工艺及应用 , ( 6) 资源调查与新资源寻找 , ( 7) 资源评价 , (8 )资源区划 , ( 9) 资源保护及更新
等 。
论文要求立论明确 ,文句通顺 ,未在其他会议或刊物上发表过的 。 除特约稿外 ,一般不超过 1 5 0 0 字 ,请书
写清晰 。 附作者单位 、 邮编及英文题 目。 入选论文将统一编印论文集 ,作为《中国野生植物资源 》杂志增刊出
版 。 论文截止日期 : 1 99 8 年 9 月 1 日
论文请寄至 ; 南京 2 1 0 0 38 中央门外中国药科大学 (分部 )资源学会 夏少杰收
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、会议另辟 “产品展销厅 ” ,欢迎各企业 、 事业单位参展 (酌收展地费 ) 。 参展单位请填写参展项 目表 ,并加盖公
章 , 于 9 月 1 日前寄至南京 2 1 0 0 3 8 中央门外中国药科大学资源学会夏少杰收 。参展项目表内容 : 项目名称 ,参
展单位 ,负责人 ,通讯处 (电话及邮编 ) ,参展形式 ,展台要求 (面积 、 体积及电源等 ) 。
天然药物资源全国学术会议筹备组
一
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