全 文 ：时做一空白 ) ,经过计算得回归方程: A= 0. 046 5+
4. 579 9C , r= 0. 998 8(n= 6) ,实验结果表明 ,葡萄
糖在 0. 01～ 0. 11 mg呈良好线性关系。
2. 4　稳定性试验: 取供试品溶液 ,按“样品含量测
定”项下方法操作 ,每隔一定时间测定一次 ,共考察
1. 5 h ,结果表明在 30 min内稳定。
2. 5　重现性试验:取本品内容物 5份各 1 g ,精密称
定 ,按“样品含量测定”项下方法操作 ,测定多糖含
量 ,前后共测定 5次 ,每次平行试验 2份 ,结果含量
为 4. 27% , RSD为 4. 52% 。
2. 6　回收率测定: 在已知含量的供试品中 ,精密加
入一定量的葡萄糖对照品 ,按“样品含量测定”项下
方法操作 ,测定 ,结果平均回收率为 97. 95% RSD
为 1. 85% 。
2. 7　样品含量测定:精密量取供试品溶液 0. 5 mL,
加 水 1. 5 mL, 加 5%苯酚 1. 0 mL, 混 匀 , 滴 加
5. 0 mL浓硫酸 ,室温放置 5 min,沸水浴中加热
15 min,冷却至室温 ,同时做一空白 ,在 751分光光
度计上 ,于 520 nm波长处进行比色测定 (共测定 3
个批次 ) ,计算。结果含量分别为 4. 55% , 4. 13% ,
4. 02% (n= 3)。 本品按干燥品计算 ,含多糖不得少
于 3. 0% 。
3　小结
该法的回收率、精密度、稳定性均较好 ,且克服
了其它成分的干扰 ,故认为本法是一简便、快速、准
确的测定手段 ,为复方制剂中多糖的含量测定提供
较好的方法。
参考文献:
[ 1 ]　李满飞 ,徐国钧 ,平田仪正 ,等 .中药石斛类多糖的含量测定
[ J ]. 中草药 , 1990, 21( 10): 10-12.
[ 2]　钟方晓 ,彭广芳 ,李贵海 .山东太子参多糖含量对质量的影响
[ J ]. 中草药 , 1997, 28( 7): 428-430.
超临界萃取法提取川芎中有效成分的研究
张　虹 1 ,柳正良 2 ,王洪泉 1
( 1. 同济大学附属同济医院 ,上海　 200065; 2. 第二军医大学药学院 ,上海　 200433)
摘　要: 目的　考察影响超临界萃取川芎中有效成分的因素。 方法　采用正交试验法 ,以超临界萃取为提取条件 ,
以提取液中阿魏酸含量为考察指标 ,对影响阿魏酸提取工艺的因素进行了研究。 结果　优选出川芎中阿魏酸的最
佳超临界萃取条件。 结论　提取阿魏酸的最佳 SFE条件是: 萃取罐的温度 70℃、萃取压力 35 M Pa、 CO2流量
25 kg /h,萃取时间 2. 5 h。
关键词: 超临界萃取 ;阿魏酸 ;正交试验
中图分类号: TQ461　　　文献标识码: B　　　文章编号: 0253 2670( 2001) 12 1077 03
Studies on extraction of active ingredients
from Ligusticum chuanxiong by supercritical fluid extraction
ZHANG Hong1 , L IU Zheng-liang2 , WANG Hong-quan1
　　 ( 1. T ongji Hospital Affiliated to Tong ji Univ e rsity , Shanghai 200065, China; 2. Colleg e of Pha rmacy , Second M ilitar y
Univ ersity, Shanghai 200433, China)
Abstract: Object　 To study the condi tions fo r the ex t raction o f activ e ing redients in Ligust icum
chuanx iong Hort. by supercri tical fluid ex t raction ( SFE) . Methods　 Condi tions fo r the ex traction w ere
studied by o rthogonal experimental design as guided by the content of ferulic acid presented in the ex t ract.
Results　 The optimum conditions for the yield of ferulic acid w ere thus established. Conclusion　 The
best SFE conditions w ere: temperature of the ex t raction po t w as 70℃ under the pressure of 35 M Pa, CO2
as the modi fier w ith the flow rate of 25 kg /h , the time fo r ex t raction w as 2. 5 h.
Key words: supercri tical f luid ex traction ( S FE) ; ferulic acid; o rthogona l experimental design
　　川芎的化学成分主要为川芎内酯 ( cinidium lac- tone, cinidi lide)、阿魏酸 ( ferulic acid)、川芎嗪 ( 2,
·1077·中草药　 Chinese Traditiona l and He rbal Drug s　 2001年第 32卷第 12期
收稿日期: 2001-07-10作者简介:张虹 ( ( 1967～ ) ,女 ,浙江海宁人 ,主管药师 ,硕士 ,从事药物分析工作。 Tel: ( 021) 56051080-3203
3, 5, 6-四甲基吡嗪 , tetramethyl-pyrazine)、川芎酚
(chuanxionggol)等 ,临床上有明显的扩张冠脉、增
加冠脉血流量、降低心脉耗氧量、抑制 ADP诱导的
血小板凝聚 ,降低血小板的表面活性等药理作用 ,对
已凝聚的血小板亦有解聚作用 ,其中有较强生理活
性的阿魏酸在川芎中的含量约为 0. 25% [1 ] ,本实验
以阿魏酸为指标对川芎的有效成分的提取进行了研
究。
1　仪器与试药
高效液相色谱仪:日本岛津 LC-9A,配有 SPD-
6A紫外可变波长检测器 ; C-R4A数据处理器 ;色谱
柱: Diamonsil TM C18 ( 250 mm× 4. 6 mm , 5μm,迪
马公司 ) ; Branson 1200型超声波清洗器。
阿魏酸对照品 (中国药品生物制品检定所 ) ;川
芎药材 (上海市药材公司 ) ,经第二军医大学宓鹤鸣
教授鉴定为川芎 l igusticum chuanx iong Hor t. ;甲
醇为色谱纯 ;冰醋酸为分析纯 ;蒸馏水为双蒸水 (自
制 )。
2　阿魏酸含量测定方法 [ 2]
2. 1　 色 谱条 件: 色 谱 柱: Diamonsi l TM C18柱
( 250 mm× 4. 6 mm , 5μm);流动相: 甲醇-水 ( 1%
醋酸 ) ( 35∶ 65) ;流速: 1. 0 mL /min;灵敏度: 0. 08
AU FS;检测波长: 280 nm;柱温: 35℃ ;衰减 A T-
T EN= 2;进样量: 10μL。
2. 2　对照品溶液的制备: 精密称取阿魏酸对照品
5 mg ,置 50 mL棕色量瓶中 ,加甲醇至刻度 ,摇匀 ,即
得 (每 1 mL中含阿魏酸 100μg ) ,作为贮备液 ,稀释
成一定浓度的系列标准液。
2. 3　样品的制备: 精密吸取川芎 S FE萃出液置于
0. 1 mL至 5 mL的容量瓶中 ,加甲醇 (分析纯 )稀释
至刻度 ,超声混匀后 ,放置至与室温平衡 ,用微孔滤
膜 ( 0. 45μm)滤过 ,弃去初滤液 ,取续滤液作为待测
供试液。
在上述色谱条件下 ,阿魏酸对照品、样品溶液的
色谱图见图 1。
3　 SFE的试验与结果
按表 1设计川芎中阿魏酸提取试验的因素水平
表。
选 L9 ( 34 )正交表对川芎中阿魏酸进行超临界萃
取 ,并按上述方法进行含量测定 ,结果见表 2。
　　实验数据经统计学处理 ,其结果:因素对川芎中
阿魏酸提取率的影响程度依次为 A> B> D> C,
A3B3 C3D1条件 ,即萃取罐的温度为 70℃、萃取压力
为 35 MPa、 CO2流量为 25 kg /h、萃取时间为 2. 5 h
为最佳提取条件。
A　　　　　　　　　 B
A-对照品 ( 100μg /m L)　　 B-样品
图 1　阿魏酸的 HPLC图
表 1　萃取川芎中阿魏酸的因素水平表
萃取温度
A(℃ )
萃取压力
B( M Pa)
时间
C( h )
流量
D( kg /h)
1 50 23 1. 5 25
2 60 29 2 35
3 70 35 2. 5 45
注: ( 1)分离Ⅰ 压力为 8 MPa、温度为 45℃ ;
分离Ⅱ压力为 5 MPa、温度为 40℃
( 2)均不加夹带剂 ,单罐萃取
表 2　L9 ( 34 )试验结果
编号 A B C D 阿魏酸含量
( g /100 g)
1 1 1 1 1 0. 012 2
2 1 2 2 2 0. 014 1
3 1 3 3 3 0. 020 1
4 2 1 2 3 0. 017 4
5 2 2 3 1 0. 028 0
6 2 3 1 2 0. 028 3
7 3 1 3 2 0. 043 5
8 3 2 1 3 0. 037 4
9 3 3 2 1 0. 048 7
K1 0. 046 4 0. 073 1 0. 077 9 0. 088 9
K2 0. 073 7 0. 079 5 0. 080 2 0. 085 9
K3 0. 129 6 0. 097 1 0. 091 6 0. 074 9
K1 0. 015 5 0. 024 4 0. 026 0 0. 029 6
K2 0. 024 6 0. 026 5 0. 026 7 0. 028 6
K3 0. 043 2 0. 032 4 0. 030 5 0. 025 0
R 0. 027 7 0. 008 0 0. 004 5 0. 004 6
　　在上述最佳萃取条件下 ,测得阿魏酸的平均含
量 ( 0. 043 2± 0. 004 6)% (n= 3)。
4　讨论
川芎中富含挥发性物质 ,较适合用 SFE法萃取
其中的有效成分。本实验曾对川芎中阿魏酸进行超
声萃取 ,即用甲醇超声 30 min提取 ,测得阿魏酸的含
量为 0. 015 15% ;文献报道 [1, 2 ] ,用溶媒法提取 ,阿魏
酸在川芎中的含量约为 0. 02% ;本实验通过 SFE提
取 ,在上述选定的最佳提取工艺下 ,阿魏酸在川芎中
的含量占 0. 04% 。由此证实了 SFE的优点 [ 3 ]:萃取
·1078· 中草药　 Chinese Traditiona l and He rbal Drug s　 2001年第 32卷第 12期
率高、传质速度快、选择性高、提取物较干净、省时、
减少有机溶剂 (本实验未加夹带剂 )、环境污染小等。
参考文献:
[1 ]　阴　健 ,郭　力 . 中药现代研究与临床应用 [M ] . 北京:学苑
出版社 , 1994.
[ 2]　张立坤 ,陈新旺 ,邹安庆 .高效液相色谱法测定复方制剂中阿
魏酸和川芎嗪 [ J ]. 中草药 , 1996, 27( 4): 213-214.
[ 3 ]　夏开元 ,阎汝男 .超临界流体萃取技术的原理和应用 [ J] . 中
国中药杂志 , 1992, 27( 8): 489.
RP-HPLC法测定酸枣仁中黄酮碳苷的含量
李玉娟 1 ,李　萍 2 ,李会军 2 ,毕开顺 1
( 1. 沈阳药科大学 药分研究室 ,辽宁 沈阳　 110016; 2. 中国药科大学 生药学教研室 ,江苏 南京　 210038)
摘　要: 目的　建立测定酸枣仁中黄酮碳苷含量的新方法。 方法　 RP-HPLC法 ,采用 Hypersil-C18柱为分析柱 ,乙
腈 -水 ( 17∶ 83)为流动相 ,检测波长为 334 nm, ,流速为 0. 8 mL /min。结果　黄酮碳苷在 5. 280～ 14. 08μg /mL范围
内与峰面积呈良好的线性关系 (r= 0. 999 7, n= 6) ,平均回收率为 95. 8%。 结论　该法简便、快速、重现性好 ,适用
于酸枣仁中黄酮碳苷的定量分析。
关键词: 酸枣仁 ;黄酮碳苷 ; RP-HPLC
中图分类号: R927. 2　　　文献标识码: B　　　文章编号: 0253 2670( 2001) 12 1079 02
Quantitative determination of spinosin in seed of Z iziphus jujuba v ar. spinosa by RP-HPLC
LI Yu-juan
1
, L I Ping
2
, L I Hui-jun
2
, BI Kai-shun
1
　　 ( 1. Depa rt ment of Pha rmaceutical Ana ly sis, Shenyang Pharmaceutical Unive rsity , Shenyang Liaoning 110016, China;
2. Depar tment of Pha rmacognosy , China Pharmaceutical Univ er sity , Nanjing Jiang su 210038, China)
Abstract: Object　 To develop a new method fo r the quantitativ e determination o f spinosin in the seed
o f Ziziphus jujuba Mill. va r. spinosa ( Bunge) Hu ex H. F. Chou. Methods　 The determination was ca r-
ried on RP-HPLC, using Hypersil-C18 column, acetoni trile∶ wa ter ( 17∶ 83, v /v ) as mobile phase wi th a
f low rate of 0. 8 mL /min and detected at the w ave leng th o f 334 nm. Results　 The calibration curv e w as
linea r in the range of 5. 280～ 14. 08μg /mL. The average recovery ra te w as 95. 8% . Conclusion　 The
method is appropriate fo r th e quanti ta tiv e determination o f spino sin.
Key words: the seed of Ziziphus jujuba Mill. v ar. spinosa ( Bunge) Hu ex H. F. Chou; spinosin; RP-
HPLC
　　酸枣仁为中医首选安神药。《中国药典》 2000年
版一部收载其为鼠李科 ( Rhamnaceae)植物酸枣
Ziz iphus jujuba Mill. va r. spinosa ( Bunge) Hu ex
H. F. Chou的干燥成熟种子 [1 ]。 其味酸性平 ,归肝、
胆、心经 ,主要用于治疗虚烦不眠、惊悸多梦、体虚多
汗、津伤口渴等症。研究表明酸枣仁中黄酮碳苷为酸
枣仁镇静催眠的有效成分之一 [ 2, 3 ] ,但迄今其含量测
定方法在国内未见报道。 本文首次采用 RP-HPLC
法对酸枣仁中黄酮碳苷进行含量测定 ,该法简便、快
速、灵敏度高 ,适合常规定量分析。
1　仪器、试剂和对照品
LC-10A高效液相色谱仪 (日本岛津公司 ) ,
SPD-10A紫外检测器 (日本岛津公司 ) , C-R6A积分
仪。
乙腈、甲醇为色谱纯 ,水为重蒸馏水 ,石油醚、正
丁醇均为分析纯 ,黄酮碳苷对照品由中国药科大学
生药学教研室李萍教授提供 (纯度为 98. 1% ) ,酸枣
仁生品药材和炒品药材分别购自辽宁朝阳、山东济
南、山东泰安、河北安国 (均经沈阳药科大学生药鉴
定研究室许春泉高级工程师鉴定 )。
2　色谱条件及系统适用性实验
色 谱 柱: Hypersil-C18 ( 4. 6 mm× 200 mm,
·1079·中草药　 Chinese Traditiona l and He rbal Drug s　 2001年第 32卷第 12期
收稿日期: 2001-03-20作者简介:李玉娟 ( 1975-) ,女 ,现在沈阳药科大学攻读药物分析学博士学位。毕开顺 ( 1956-) ,男 ,河北丰南人。 1990年毕业于沈阳药科大学 ,获理学博士学位 ; 1991-1994年赴香港中文大学中药研究中心从事博士后研究工作。现任沈阳药科大学副校长 ,药学院院长 ,教授 ,博士研究生导师。长期从事中药质量标准化研究工作 ,已发表学术论文 70余篇。
Tel: ( 024) 23843711-3363　 E-mai l: ksbi@ mail. sy. ln. cn