全 文 ：苦参诱导 K 5 62 细胞分化的研究
第三军医大学临床检验教研室 (重庆 6 3 0 0 3 8 ) 司维柯 卡 秦建平 “ 蒋纪恺 “ ` ’
王 霞文 ` ’ ` 魏明竞
摘 要 K 56 2 细胞属于人红白血病细胞株 ,是骨髓多能干细胞 。 以苦参作诱导分化剂 ,可使 K 56 2
细胞有分化现象并向多方向分化 ,这为临床探索中药非杀伤性治疗白血病打下了良好的基础 。
关键词 苦参 K 562 细胞 诱导 细胞分化 白血病治疗
苦参属豆科植物 , 其根作为药用 ,具有清
热 、 燥湿 、 利尿 、 祛风 、杀虫等多种功能 , 其药
理作用有抗病原体 、 平喘 、 抗心律不齐 、 抗过
敏 、 抗肿瘤 、 升高白细胞等 ,故被广泛应用于
临床各科 〔` 一 ` 〕 。 近年来苦参的抗肿瘤作用 日
益受到重视 。 早在 1 9 70 年 , R y o he i 等就报道
了山豆根中的苦参碱在体内外均有抗鼠艾氏
腹水瘤的作用 , 氧化苦参碱有抗 5 1 8。肉瘤 的
作用 。 苦参的醇提取物对 鼠肺癌也有明显抑
制作用〔 5〕 。 8 0 年代我国李先荣等也得出同样
的结论〔的 。 除此之外 ,苦参还有治疗宫颈癌 、
膀胧癌 、大肠癌 、 恶性淋巴瘤的作用 〔7 , 8 〕 。 我们
将报道苦参诱导 K 56 2 细胞分化的研究 。
1 K 56 2 细胞分化方向与诱导剂的关系
自 S ac hs 等 1 9 7 8 年发现恶性肿瘤细胞
可逐渐转化为较成熟的细胞以来 ,有关白血
病诱导分化的机理和 治疗研究开始 受到 重
视 〔9〕 。 K 5 6 2 细胞是 1 9 7 5 年由 L o z z i o 等 〔` 0〕从
慢性髓性白血病急变期的病人胸水中获得并
建株的 。 A n d er s so n 等 〔“ 〕认为该细胞起源于
骨髓未分化细胞 系的未成熟细胞株 , 具有 多
向分化的潜能 , 在体内急变期时可向多方 向
分化 ,在体外研究中发现它分化的方向与诱
导剂种类有关 。 如 以佛波醋 ( T P A ) 作诱导
剂 , K 5 62 细胞主要 向巨核系分化 ; 以氯化血
红素 h( e m in) 诱导 ,可向粒系分化 ; 以六亚甲
基双乙酞胺 ( HM B A )和丁酸钠作诱导剂均
可向粒一巨噬系统分化 ;人参皂贰作诱导剂主
要向红系分化 〔,幻 。
2 苦参诱导 K 56 2 细胞分化的研究
以苦参煎液作诱导剂 , 经诱导后 发现
K 5 62 细胞有向红系和粒 一巨噬系统分化的现
象 。 秦建平等 〔` 3 ,发现苦参在 8一 12 9 / L 浓度
范围为有效促分化浓度 , 12 9 / L 为最佳诱导
浓度 , 4 9 / L 浓度对 k 5 62 细胞无诱导分化作
用 ,大于 16 9 / L 时 , K 5 62 细胞主要表现为细
胞毒性作用 。 在 含苦参 12 9 / L 的 R P M I -
1 6 40 培养液中培养细胞 1一 s d ,观察细胞的
生长状况 、 计数 、 细胞 M T T 法的光密度值 、
电镜下形态 、 细胞中的血红蛋白和乳酸脱氢
酶的含量等指标 。发现加药后 ,有效作用时间
为 Z d , 与对照组相比 ,加药组细胞数减少 ,细
胞增殖减弱 。 电镜下有类似原始 、 早 、 中和晚
幼红细胞和幼稚单核细胞及幼稚粒细胞的细
胞存在 ,而对照组细胞分化极差 ,无法确定其
细胞类型 。 经测定细胞内乳酸脱氢酶和血红
蛋 白含量 ,发现前者第 1一 2 天活性降低 , 第
3 天酶活性开始 回升 ,提示 K 56 2 细胞 内乳酸
脱氢酶活性变化与 K 56 2 细胞分化进程相
关 。 血红蛋 白含量 ,对照组为 。 拜g / 1 0 8 细胞 ,
加药组为 45 0 拌g / 1 05 细胞 ,证实苦参可诱导
K 5 62 细胞沿红系分化 。 在连续加药及追加
药的实验中 ,发 现苦参液在 K 56 2 细胞 内有
一定的累积效应 。 本文作者在同样的实验条
·
A d d r e s s
:
5 1 W
e i k
e , D e p a r t m e n t o f C li n i e a l C o n t r o l
,
T h i r d M i li t
a r y M
e
d i
c a l C o l l
e g e
,
C h
o n g q in g
“ 成都军区总医院血液室
. ’ 奋 重庆医科大学临床生化教研室
《中草药》 1 9 9 7 年第 2 8 卷第 5 期 · 3 0 9 ·
件下观察了 K5 62 细胞在加药 1一 3 d 后细胞
瑞氏 一姬姆萨染色结果 ,与对照组相 比较 ,发
现 加药后细胞形态发生变化 , 并随培养时间
延长 ,形态变化越明显 ,特别是核形态变化明
显 。 而对照组细胞基本无变化 。 若将这些核
有变化的细胞作为分化细胞 , 它们占整个细
胞的百分率作为分化率 ,则培养 1一 3 d 分化
率分别为 18 % , 26 %和 58 % 。 可 见随培养时
间延长 , 分化率增加 ,细胞分化加强 。 细胞化
学染色 中 , 加药组髓过 氧化物酶 (M P O ) 、 糖
原 (P A )S 均为阳性 ,并随培养时间延长 , 阳性
程度增强 , 第 3 天 M P O 均 为强 阳性的细胞
占 1 0 0% , P A S 占 3 3% 。 而对照组均为阴性 。
非特异性醋酶 ( N A E ) , 对照组和加药组均为
阴性 , 反映了 K 5 62 细胞受苦参诱导后有分
化现象 ,并有向粒系分化的证据 , N A E 阴性 ,
说明细胞化学染色上无向单核细胞分化的证
据 。 在对 K 56 2 细胞分化现象和机制的研究
中 , 针对不同的分化方向 ,还检测了其特异的
表达物质 〔“ 〕 ,并可检查细胞染色体在细胞分
化后的改变 。
3 存在问题及研究方向
目前对苦参诱导 K 5 62 细胞分化的研究
尚处在初期阶段 ,许多问题尚需深入研究 ,特
别需注重以下两方面 :
3
.
1 研究对 K 5 62 细胞起诱导分化作用的
苦参有效成分 。 目前的实验均建立在 以苦参
煎液作诱导剂 , 因煎液中成分复杂 ,难以确定
起诱导作用的是苦参中的单一成分 ,还是多
种成分共同作用的结果 。 这种单一或多种成
分到底是哪些 , 尚有待确定 。
3
.
2 苦参有效成分对 K 5 62 细胞诱导分化
机理的研究 。 如前所述 , K 5 62 细胞具有多向
分化的潜能 , 向何系分化和诱导剂种类有关 。
苦参对 H L 一 60 及 K 5 62 细胞均有诱导分化作
用 ,说明两株细胞的调控机制可能有相似之
处 ,但详细的分化调控机制有待进一步研究 。
以具有多 向分化潜能的 K 5 62 细胞作实验模
型 的诱导分化研究 , 可导出不 同分化系统调
控机制的差 异的研究 , 有利于筛选不同诱导
方向和机理 的诱导剂 , 为临床诱导治疗 白血
病的研究提供更有价值的信息 。 目前对白血
病的治疗主要采用化疗和骨髓移植 ,但疗效
不十分满意 。 苦参为常用中药 , 毒副作用小 ,
且能升高 白细胞 , 这是其它化疗药物不具备
的优点 。 苦参诱导 K 56 2 细胞分化的研究为
临床探索中药非杀伤性治疗白血病打下了良
好的基础 ,今后有待更深入的研究与探讨 。
参 考 文 献
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(一9 9 6一 0 7一 0 5 收稿
1 9 9 6
一
12 一0 2 修 回 )
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