全 文 ：复方生脉饮对小鼠心肌 L D H 同工酶的影响
北京联合大学应用文理学院( 1 0 0 0 83) 文 镜 带 陈 文 金宗派
摘 要 采用聚丙烯酞胺凝胶 电泳活性染色法 ,观察复方生脉饮对小鼠心肌乳酸脱氢酶 ( L H )同
工酶的影响 。 结果表明 : a )服用复方生脉饮 10 d 的小鼠 L D H 总比活力比对照组提高 13 % 。 b) 实验
组小鼠心肌 I J D H 同工酶谱发生显著变化 , L D H , 和 I J D H : 增加 , I , D H ; 与 I D H 3 减少 。 。 )与对照组
比较 , 实验组小鼠心肌 L D H I _ : 比活力提高 38 % , L D H 4 _ 5比活力降低 31 % 。 d )小鼠剧烈运动后血乳
酸清除速率显著加快 。 结果提示复方生脉饮改变 L D H 同工酶谱 ,增加 L D IH 一 : 比活力是其一个重要
的抗疲劳机制 。
关健词 复方生脉饮 乳酸脱氢酶 同工酶 抗疲劳
近年来 , 乳酸脱氢酶 ( L a e t a t e D e h y d r o -
g e n a s e
,
E e l
.
1
.
1
.
2 7 ,简称 I J D H ) 同工酶与运
动性疲劳的关系逐渐被人们所重视 。 1 9 7 5 年
B ur k e 等发现 S T 肌纤维 比 F T 肌纤维有更
强 的抗疲劳作用 。 1 9 7 8 年 T e s hc 的研究表
明 , F T 肌纤维中 M 型 L D H 活力明显高 于
S T 肌纤维中 M 型 L D H 的活力 “ 〕 。 1 9 8 4 年
P et et 在研究运动引起 F T 向 S T 转变的过程
中发 现 L D H 同工 酶谱 的改变 : L D H ; 和
l
,
D H
S 减少而 L D H I , L D H Z及 I J D H 。 增加 , 指
出这与增强抗疲劳能力有关 〔幻 。 国内一些学
者在研究中药补剂强力宝和蜂花粉的抗疲劳
作用时也观察到 L D H 同工 酶谱改变的现
象 〔 , · ` , 。 1 9 9 0 年我们发现复方生脉饮具有提
高血清 L D H 总活力和加速运动后血乳酸清
除的作用铀 。 在此基础上 , 我们研究了复方生
脉饮对小鼠心肌 L D H 同工酶的影 响 , 探讨
其在乳酸代谢过程中的作用机理 。
1 材料
1
.
1 动物 : B A L B / C , 8 周龄雄性小 鼠 ,体重
1 9
.
5士 0 . 6 9 。
1
.
2 复方生脉饮 ,见文献 〔5〕 。
2 方法
2
.
1 动物分组与饲养 :将小鼠随机分为实验
组与对照组 , 每组 20 只 ,单笼分养 。 实验组小
鼠每日每只灌喂复方生脉饮煎剂 0 . 6 m L (相
当生药 : 24 9 / k g ) ,对照组小鼠每 日每只灌喂
同样剂量的清水 。 连续灌喂 10 d 。
2
.
2 血乳酸含量的测定 : 用乙醛对经基联笨
比色法 〔6 〕在连续给药 10 d 前后取尾血测定
每只小鼠游泳前及于 30 士 2℃水中负重 (体
重 3 % ) 游泳 3 0 m i n , 离水休息 2 5 m i n , 5 0
m in 时测血乳酸含量 。
2
.
3 心肌 L D H 同工酶的提取 :于实验第 n
夭断颈处死小鼠 ,取心脏 ,用预冷的生理盐水
洗去血污 ,滤纸吸干水分 , 称重 。 按 W / V 一 l/
5 比例加入 4 ℃预冷的 10 m rn ol / L , p H 6 . 5 磷
酸钾盐缓冲液 ,在冰浴中匀浆 , 4 ` C 、 6 0 0 o r 离
心 2 0 m i n ,上清液为 I J D H 提取液 。
2
.
4 L D H 比活力的测定 : 取 L D H 提取液
O
·
0 2 m I
J 用 K i n g 氏法测定 L D H 活力〔 7〕 , 以
牛血清 白蛋白为标准 , 用 Br ad for d 方法测定
蛋 白质含量 〔 8〕 。 L D H 比活力单位 : 每毫克蛋
白每秒钟催化乳 酸转变为丙酮酸 的纳摩尔
数 。
2
.
5 L D H 同工酶分析 : 用连续聚丙烯酸胺
* A dd r e s s
文镜 副教授 , 1 9 8 3一血 北京大李分校生物系毕 业 。 长期从事食品分析及生物化学教学和科研 一「作 . 近 5 年内发表论巧篇 ,并参加编写 “ 功能食品评价原理及方法 ” 一书 , 与金宗滚教授合作 1 9 9 6 年完成 。 总后 “ 八五 ” 攻关项目“ 高能野战 口” 中的增力粉剂科研课题 ,该课题为国内外军用野战品 的首创 , 填补国 内外野战口粮研究空白 , 属世界领先水平 。 1 9 9 5 年加北京市自然科学基金项目 “腺普受体阻断剂改善老年记忆障碍研究课题 ” ,该研究利用 H PI 一 c 分析脑内 A ch 填补国内空 白 ,是 国际上首次提出腺昔髓龄增加是老年记忆障碍的 一种可能分子机制 。
《中草药 》 1 9 9 7 年第 2 8 卷第丁了丽 6 7 1
电泳及活性染色法分离 L D H同工酶 。 显色
后的凝胶经透射薄层扫描记录 “0 n m波长
处的电泳酶谱 〔9 〕 。
3 结果
3
.
1复方生脉饮对 L D H比活力的影响:
实验组小鼠服复方生脉饮0 1d后 , 心肌
L D H 总比活力比对照组增加 13 % 。 (见表 1)
表 1 复方生脉饮对小鼠心肌 L D H 比活力
的影响 ` 士 s , n m o l / s · m g )卜`操甲于…瑕井, , 尸 < 0 . 0 5 , 与对 照组比较 (下同 )
3
.
2 复方生脉饮对小鼠心肌 L D H 同工酶
的影响 : 实验第 n 天 , 两组小鼠心肌由电泳
扫描 图谱得出的两组小鼠心肌 L D H 提取液
经电泳分离后的扫描图谱如图 1 ; L D H 同工
对照组 实脸组
图 1 服用复方生脉饮 10 d 后小鼠心肌
L D H 同工酶扫描图谱
峰从左至 右依次为 : L D H I , L D H : , L D H , , L D H 4 ,
L D H s
酶分布情况如表 2 。
表 2
L D H
I
实验第 n 天 ,小鼠心肌 L D H 同工酶分布 ( % )
组别
对照组
实验组
L D H Z L D H 3 LD H
2 0 1 9
.
2士 1 . 6 3 1 . 6士 1 . 3
2 0 2 5
.
1士 1 . 9 备 3 . 6 0士 1 . 5 价
2 4
.
7土 1 . 5 1 5 . 5土 1 . 8 9 . 0士 2 . 2
2 4
,
0士 2 . 0 1 0 . 3士 2 , 1 怪 4 . 6士 1 . 4 .
从图 1 和表 2 可以看到 , 小 鼠服用复方
生脉饮 10 d 后 L D H 同工酶谱发生 了变化 :
与对照组比较 ,实验组 L D H 卜2增加 , L D H -4 5减
少 。
根据 L D H 总 比活力和 同工酶谱计算出
有变化的 L D H 同工酶比活力结果 见表 3 。
表 3 复方生 脉饮对小 民心 肌 L D IH 一: 及
L D H
4
_
: 比活力的影响 ( x 士 , , n m o l / ,
·
m g )
表 4 复方生脉饮对小鼠血乳酸的影响
( x 士 s , n m o l / L )
组别
对照组
实验组
n 游泳前
2 0 2
.
1 5士 0 . 2 6
2 0 2
.
3 9士 0 . 3 9
游泳后 2 5 m in
6
.
9 1士 0 3 6
4
.
9 7士 0 . 4 3 .
游泳后 5 0 nr i n
5
.
9 5上 0 . 3 8
3
.
2 3士 0 . 4 1 .
L D H i
一
2 I
_
D H 4 5
1 9
.
4 4士 1 . 0 7 9 . 3 5士 0 . 8 8
2 6
.
4 9士 1 . 2 6 . 6 . 4 6士 1 . 0 8 “
O0
口乙O右
组别
对 照组
实验组
小 鼠服 用 复方生 脉饮 10 d 后 , 心肌
L D H
I
一
: 比 活 力 比 对 照 组 提 高 了 36 % , 而
L D H “ 比活力比对照组降低了 31 % 。
3
.
3 复方生脉饮对小鼠血乳酸的影响 : 结果
见表 4 。 服用复方生脉饮 10 d 小鼠负重游泳
之后 25 m in 时 ,血乳酸含量比对照组低 1 . 叙
m m o l / L
,
5 0 m i n 时 , 比对照组低 2 . 7 2 m m o l /
L
。
” 尸 < .0 0 5 ,与对照组比较
4 讨论
L D H 的 5 种同工酶都是由 H 型亚基和
M 型亚基按不同比例组成的四聚体 , 它们是
L D H
I
(亚基组成为 H 礴 ) 、 L D H : ( H 3 M I ) 、 L D H 3
( H
Z
M
Z
)
、
L D H
;
( H
I
M
3
)和 L D H 。 (M ; ) , H 型亚
基和 M 型亚基对于相 同底物的 K , 值有显著
区别 。 H 型亚基对乳酸的亲和力高 , M 型亚基
对丙酮酸的亲和力高 。 因此 , L D H , 、 L D H Z 主
要催化乳酸脱氢转变成丙 酮酸的反 应 , 而
L D H
` 和 L D H 。 主要催化丙酮还原为乳酸的
反应 。
从实验结果可以看到 , 小 鼠服用复方生
脉饮 10 d 以后 , 不仅 L D H 总 比活力有了显
著增加 ,而且 L D H 酶谱也发生了变化 。 表现
为心肌细胞中 L D H 卜 2升高而 L D H -4 : 降低 。 酶
.
6 7 2
.
谱的这一改变使得L D HI一此活力 比对照组提
高了 3 6 %。剧烈运动时由于供氧不足 ,机体储
备的糖原主要通过无氧酵解最终生成乳酸的
反应为机体提供能量 。 机体内乳酸的大量积
累成为导致疲劳的一个重要原因 。 体内积累
的乳酸必须经过由乳酸转变为丙酮酸的反应
才能得到清除 。 由于这一反应是在 L D H , 和
L D H
: 的催化下完成的 , 所以 L D H I 一: 比活力
的增加必然会加速乳酸的清除代谢过程 。 从
表 4 的结果可以看到 , 服用复方生脉饮 10 d
的小鼠负重游泳后血乳酸水平明显低于对照
组 ,特别是在游泳停止后 25 一 50 m in 时 , 实
验组血乳酸平均清除速率为 0 . 07 m m ol / L ·
m i n
,而对照组只有 0 . 0 4 m m o l / L . m i n 。
综上所述 ,复方生脉饮通过改变心肌细
胞 L D H 同工酶谱 , 增加 L D H I _ : 比活力 , 从而
加速乳酸的清除代谢过程是其具有抗疲劳作
用的重要机制 。
参 考 文 献
1 T e s e h P
. e t a l
.
A e t a P h y s id sc
a n d
,
1 9 7 8
,
1 0 3
: 4 1 3
2 P e t t e
, e t a l
.
M e d sc i s p o r t s E x e r e
,
19 8 4
,
1 6 ( 6 )
:
5 2 0
3 谢敏豪 , 等 . 中国运动医学杂志 . 19 89 , 8( 4) : Z n
4 吕建新 , 等 . 中国运动 医学杂志 , 19 92 , n ( 4) : 2 48
5 金宗镰 , 等 . 中草药 , 1 9 9 0 , 2 1 ( 8 ) : 1 9
6 aB
r k e r S B
, e t a l
.
J B i o l C h e m
, 1 9 4 1 , 1 3 8
:
5 3 5
7 K in g J A
.
J M e d I
J a b T e e h
.
1 9 5 9
,
1 6
:
2 6 5
8 Br
a d fo r d M M
, e t a l
.
A n a l B i o e h e m
,
1 9 7 6
, 72
:
2 4 8
9 李建武 , 等 . 生物化学实验原理和方法 . 北京 : 北京大学
出版社 , 1 9 9 4 . 3 5 5
( 1 9 9 6
一
0 5
一
2 0 收稿 )
I n f l u e n c e o f “ p u l s e V i t a l i z i n g T o n i e C o m p o u n d , o n H e a r t L D H I s o z y m e o f M i c e
W
e n J i n g
,
C h e n W
e n
,
J i n Z o n g l i a n
E f f
e e t s o f
“
P
u ls e V it a l i z i n g T o n i e C o m p o u n d ” ( F u f a n g s h e n g m a i y i n , F SM Y ) o n m o u s e h e a r t la e t a t e d e h y
-
d r o g e n a s e ( L D H ) i s o z y m e w a s e x a m i n e d w i t h p o ly a e r y la m i d e g e l e l e e t r o p h o r e , 15 a n d a e t iv e s t a i n i n g
.
R e s u l t s
s h o w e d t h a t : ( 1 ) T o t a l s p e e iif e a e t ivi t y o f L D H w a s in e r e a s e d b y 1 3%
a f et r t a k e n F S M Y f
o r 1 0 d
a y s
, a s c o m
-
P a r e d w i th t h
e e o n t r o l
.
( 2 ) L D H is o z y m e m a P o f h e a r t m u s e l e e h a n g e d s ig n i f ie a n t l y w i t h in e r e a s e o f L l〕H I a n d
L D H : a n d d e e r e a s e d o f L D H 。 a n d L D H S
.
( 3 ) S p e e if ie a e t iv i t ie s o f l
,
D H卜 : w a s e le v a t e d b y 3 8 %
,
w h il e t h a t o f
L l 〕H `一。 l o w e r e d b y 3 1% a s e o m p a r e d w i t h t h e e o n t r o l . ( 4 ) B lo o d la c t i e a e id e l e a r a n e e w a s a e e e l e r a t e d a f t e r v i g -
o r o u s e x e e r e i
e e s
.
T h e a b o v e r e s u l t s p o in t e d o u t t h a t in f lu e n e e o n L D H is o z y m e m a p a n d L D H i
一
2 s P e e i fi e a e t iv i
-
t i e s a r e im p o r t a n t a s p e e t s o f a n t i
一
f a t ig u e m e e h a n i s m o f F S M Y
.
火绒草降血糖作用的初步研究
吉林医学院预防医学系 ( 1 3 2 0 0 1)
吉林市药品检验所
焦淑萍 缺
张立明
陈 彪 姜 红
摘 要 用火绒草水煎剂 30 9 k/ g 给小鼠灌胃 10 d , 可以降低正常小鼠的血糖 ,对四氧啥陡引起的
小鼠糖尿病有预防及治疗作用 , 并可对抗肾上腺素或葡萄糖引起的血糖升高 。
关镇词 火绒草 降血糖作用
火绒草系菊科植物 ,具有清热凉血 、 消炎 益肾 〔, 〕等功效 。 对其降血糖作用尚未见报道 。
. A dd r e s s
焦淑萍 女
:
Jia o S h u p i n g
,
D
e p a r t m e n t o f P r e v e n t i v e M
e d i e i n e
,
Ji li n M
e d i e a l C o ll e g e
,
Ji li n
,
1 98 3 年毕业于沈阳药学院药学专业 、 获学士学位 。 1 9 8 8 年被学院聘为讲师 。 近年来主要从事中草药的开发研究及应用研究 。 曾在贵刊发表过《蓝按的抗炎及镇痛作用研究 》 。
.
6 7 3
.