全 文 ：HPL C法测定莲心碱注射液中莲心碱
含量及稳定性
湖北医科大学一附医院 ( 武汉 4 3 0 0 6 0 ) 张 先洲 . 周延安 蔡鸡生 罗顺德
摘婆 采用H P L C测定莲心碱注射液中莲心 碱的含量 , 以甲基莲心碱为内标 , 流动相为二氯甲烷
一异丙醇一二乙胺 ( 75 : 25 : 。 . 2 ) , 平 均 回收率为 10 . 5% , 并对其进行了光和热稳定 性考察 ,
t `份; “ 约为5
.
8个月 , 对光不稳定 , 提示该注射液应在低温 、 遮光条件下保存。
关键词 莲心碱 注射液 稳定性 H P L C
莲心碱注射液是由睡莲科莲属植物莲N el “ 。 bo 叫。汀er a g o er ht 种子中 的绿 色 幼 芽 和
胚根中提取得到的一种双节异唆琳生物碱配制而成 , 莲心碱具有广泛的抗心律失 常 作 用 ,
〔 1一 3) 。 有关莲心碱的含量测定有 U V 和 T L C法〔` , 的 ,但由于莲心碱注射液易氧化 ,杂质于 U V
测定有干扰 , T L C法稳定性差 , 变异较大 。 今探讨用 H P L C 测定莲心碱注射 液的含量 , 并
考察其对光和热的稳定性 。
1 仪器及试药
3 3 5一 H P L C ( 美国 B e e k m a n ) , 配 有 1 l o B双泵 , 16 6检测器 , 4 0 6 控 制 器 , 4 2 7积 分
仪 。 莲心碱 、 甲基莲心碱均由湖北医科大学临床药学研究室提供 。 二氯甲烷 , 异丙醇 , 二乙
胺均为分析纯 , 并经过重蒸 。 莲心碱注射液按文献 〔的配制。
2 方法及结果
2
.
1 色谱条件选择及样品分离
2
.
1
.
1 色谱条件 : U lt r a s p h er e : 1 4 . 6 x 2 5 o m m不诱钢柱 , 流动相 : 二氯甲烷一异丙醇一二
乙胺 ( 7 5 : 2 5 : 0 . 2 , V / V ) , 检测波长 2 8 2 n m , 灵敏度 0 . I A U F S , 流 速 : l m l / m i n , 纸
速 2 . s m m / m i n 。
2
.
1
.
2 标准溶液配制及色谱分离 : 精密称
取减压干燥至恒重的莲心碱和甲基莲心碱各
s o n 、 g 分另,I于 s o m l量瓶中 , 加 甲醇溶解并稀
释至刻度 , 即得莲心碱和甲基莲心碱 l m g / m l
的标准液 。 精密吸取莲心碱标准液和甲基莲
心碱标准液 1 . 0 m l于 10 m l量瓶 中 , 加甲醇至
刻度 , 取 2 0时注入色谱仪中 , 色谱图如图 。
2
.
2 标 准曲线制备 : 分别精密吸取莲心碱
标准液 0 . 5 、 0 . 8 、 2 . 。 、 ` . 2 、 1 . s m l于 l o m l
量瓶 中 , 各加入 甲基莲心 碱 ( 内标 ) l . o m l
加 甲醇至刻度 , 取 2 0时进样记录峰面积 , 以
莲心碱和甲基莲心碱峰面积积分值和莲心碱浓度线性回归 ,
{ 1
}
时间 t ( m i n )
图 莲心碱色谱图
1
一 甲基莲心碱 2 一莲心碱
回归方程 为 C = 一 0 . 3 一5 + 9 5 . 72
A 莲 / A 内 ( r = 0 . 9 9 9 6 ) ,麦明莲心碱在 50 一 15 0件 g / m l范围内线性关系 良好 。
2
.
3 回收率试验 : 配制不含莲心碱的空白注射液后按处方比例精密加入不 同量的 莲心 碱 ,
.
A d d r e s s
:
Z h a n g X i a n z h o u
,
T h e F r i s t A f f i l a t
e d H
o s P i t a l
,
H e b e i M e d i c a l U n i v e r s i t y
,
W
u h a n
一
4 0 6
-
按标准曲线项下操作后 , 测定值代入回归方程 ,计算回收率为 1 0 . 5 士 1 . 5% , R S D 为 1 . 5% 。
2
.
4 样品测定 : 精密吸取莲心碱注射液 1 . o nr l于 10 m l量瓶中加甲醇定容后 , 精密吸取 1 . o m l
于 10 m l量瓶中 ,加入 1 . o m l甲基莲心碱标准液 ,加甲醇至刻度 , 取 20 时进样 , 记录峰面 积 , 代
入回归方程计算含量 。 ’ 表 1 光稳定性结果
2
.
5 光稳定性试验: 取莲心碱注射液 9支 , 一 时 间 ’ ( d)
于 30 0 0 L x 光照条件下室温存放 , 分别于 。 、
2
、
5
、
10
、
15
、
20
、
30 d取样观察其颜色 并 颜色 微黄 微黄 浅黄 黄 黄 深黄 深黄
测定含量 , 结果如表 。 一 含量 9 0 . 2 , 。 . 5 9 3 . 3 0 0 . 2 8 5 . 6 0 5 . 。 ’ 5 0 . 7
2
.
6 热稳定性试验 : 取莲心碱注射液 分 别 — —置 60 、 7。、 8 0 、 9 0℃恒温水浴中 , 按实验设计取样 ,立即冰浴终止反应 , 按含量测定项下测定 ,结果如表 2猛 3 。温 度( o C ) 表2 恒温加速试骏结果不同时间测定浓度 (%) 芬6~ ~ ~ ~ ~ ~ ~一~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~ ~0 4 8 12 1 8 2 4 3 6 4 8 7 2 9 6
1 0 0
1 0 0
1 0 0
1 0 0
:::: ::!
9 5
。
5 9 3
。
2
几J厅`
9 4
。
0
9 6
。
0 ::::
9 8
。
2
9 4
。
3
9 0
。
6
9 2
。
2 8 9
。
9
8 7
。
8
ù”`0ǐUób月且了UOé
温度 ( . C . )
表 3
回归方程
不同通度分解速度常数
K ( h
一 l
) 1 g K
1 g C = 2
.
0 0! 3 x 3
.
1 2 7 x 1 0
一 ` r
l g C = 2
.
0 0 0 2 一 7 . 0 6 9 x 1 0 一 ` t
l g C = 2
。
0 0 0 0 一 1 。 9 9 4 x 1 0 一 3 2
l g C = 1
.
9 ` ) 6 3 一 3 . 1 0 4 又 10 一 3 t
0
。
9 9 1
0
。
9 9 7
0
。
9 9 1
0
。
9 8 9
7
。
2 0 x 1 0
-
1
。
6 2 8 x 1 0
-
4
。
5 9 2 x 1 0
-
7
。
1 5 0 x 1 0
-
3
。
1 4 3
2
.
78 9
2
。
3 3 8
2
。
1 4 6
八仆nA“óU血lh了ó乙Oō
将 l g k对各绝对温度的倒数个进行线 ( 线 ) 性回归 , 得 A r r h o in su 方程为 lg K “ 9 . 3 9 7 -
4 1 7 4
.
4 / T (
r = 0
.
9 9 2 ) 将 x / ( 2 7 3 . 2 + 2 5 ) 代入方程 , 求出K 2 5 · 。 = 2 . 5 0 2 x 10 一 ` ( h 一 , ) ,
t 若泛;c = 5
.
8月 :
3 讨论
H P L C 测定莲心碱注射液的含量 , 方法简便快速准确 , 分解产物不影响测定 。
3
.
2 莲心碱注射液室温通常存放有效期 t 。 二为 5 . 8月 , 提示莲心减注射液应避光冷藏。
参 考 文 献
王嘉陵 , 等 . 同济医科大学学 报 , 1 9 , 2 , 21 ( 5、 : 3 1了 4 张先洲 , 等 。 药物分沂杂志 , 19 9 1 , 1 1 ( 3 ) : 1 8 3
王嘉陵 , 等 .药学学报 , 1 , , 2 , 2 7 ( 2 2 ) : s s x s 胡学民 , 等 . 药物分沂杂志 , 1 9 9 3 , 13 ( 4 ) : 2 6 魂
王嘉陵 , 等 . 中国药理学和毒理学杂 志 , 1 9 9 4 , 8 6 张先洲 , 等 . 中成药 , 1 9 9 4 , 16 ( 1) : 1
、
, ) : 4 8 ( 19 9 4
一 0 5一 0 6收稿 )
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19 9 6年 《 中国医学文摘一中医 》 、 《 福建畜牧兽医 》 杂志
《 中草药 》 1 9 9 5年第 26 卷第 8 期 一 4 0 7 -