全 文 ：广 西 植 物 Guihaia　Mar．２０１４,３４(２):１９４－１９７　　　　　　　　　　 http://journal．gxzw．gxib．cn　
DOI:１０．３９６９/j．issn．１０００Ｇ３１４２．２０１４．０２．０１３
卓燊,秦海洸,陈君,等．绞股蓝对大鼠肝组织内细胞色素P４５０和GST、UGT活性的影响[J]．广西植物,２０１４,３４(２):１９４－１９７
ZhuoS,QinHG,ChenJ,etal．EfectsofGynostemmapentaphyllumonthecytochromeP４５０andGST,UGTactivitiesinliverofrat[J]．Guihaia,２０１４,
３４(２):１９４－１９７
绞股蓝对大鼠肝组织内细胞色素P４５０
和GST、UGT活性的影响
卓　燊１,秦海洸１,陈　君２,杨子明３∗
(１．广西科技大学 医学院,广西 柳州５４５００５;２．湖南中医药大学,长沙４１０２０８;３．广西植物
功能物质研究与利用重点实验室,广西植物研究所,广西 桂林５４１００６)
摘　要:SD大鼠自由饮用绞股蓝汁(绞股蓝汁每天新鲜配制,浓度为每１００g水２g茶叶,１００℃的水温浸泡
３０min,取上清液),连续给药６０d,取出肝脏,用差速离心法制备肝脏胞浆液及肝脏微粒体,采用双光束紫外
分光光度法测定CYP３A、CYP２E１、NADPHＧ细胞色素C还原酶、UGT、GST的活性及细胞色素b５的含量,结
果显示绞股蓝可显著升高细胞色素b５的含量,显著诱导CYP３A、UGT、GST、NADPHＧ细胞色素C还原酶的
活性,但对CYP２E１没有影响.提示绞股蓝与药物合用时,在体内可能会发生代谢性药物相互作用.
关键词:绞股蓝;细胞色素P４５０;谷胱甘肽ＧSＧ转移酶;尿苷二磷酸Ｇ葡萄糖醛酸基转移酶;大鼠
中图分类号:R２８５．５　　文献标识码:A　　文章编号:１０００Ｇ３１４２(２０１４)０２Ｇ０１９４Ｇ０４
EffectsofGynostemmapentaphylumon
thecytochromeP４５０andGST,UGT
activitiesinliverofrat
ZHUOShen１,QINHaiＧGuang１,CHENJun２,YANGZiＧMing３∗
(１．GuangxiUniversityofScienceandTechnology,Liuzhou５４５００５,China;２．HunanUniversityofChinese
Medicine,Changsha４１０２０８,China;３．GuangxiKeyLaboratoryofFunctionalPhytochemicals
ResearchandUtilization,GuangxiInstituteofBotany,Guilin５４１００６,China)
Abstract:TheSDratsweremaintainedonfreshlypreparedaqueousextractofGynostemmapentaphyllum(２％)
whilethecontrolratsweregivendistiledwaterfor６０days．Ratliverwastakenandlivermicrosomeandcytochyma
enzymeswasobtainedbydifferentvelocitycentrifugation．ThenthetotalcontentsandactivitiesofCYP４５０andGST,
UGTofratsdeterminedbydoublewavelengthultravioletspectrophotometry．TheresultsshowedthattheG．penＧ
taphyllumcouldincreasethecontentofb５;IncreasetheactivityofCYP３A,UGT,GST,NADPHＧcytochtomeCreＧ
ductase;ButhadnoefectonCYP２E１．ThestudyshowedthatcoＧadministratedwiththosedrugsmetabolizedbythe
abovemajormetabolizingenzymesinliver,metabolicherbＧdtuginteractionswouldhappened．
Keywords:Gynostemmapentaphyllum;CYP４５０;GST;UGT;rat
　　药物代谢酶可分为Ⅰ相和Ⅱ相代谢酶,可代谢
内源性物质和外源性物质,代谢的内源性物质有白
三烯、前列腺素、胆酸等;代谢的外源性物质有致癌
物、环境污染物、药物、毒物等,负责药物代谢的主要
收稿日期:２０１３Ｇ１１Ｇ２８　　修回日期:２０１４Ｇ０３Ｇ１０
基金项目:广西科技攻关项目(桂科攻１１４０００１Ｇ３６);广西植物功能物质研究与利用重点实验室主任基金(ZRJJ２０１２Ｇ６).
作者简介:卓燊(１９７５Ｇ),女,广西来宾人,硕士研究生,主管中药师,研究方向为中药药效与理论研究,(EＧmail)zhuoshen＠１２６．com.
∗通讯作者:杨子明,硕士研究生,助理研究员,研究方向为植物活性物开发与利用研究,(EＧmail)yangziming１９８３１０＠１２６．com.
是Ⅰ相酶中的细胞色素P４５０,而Ⅱ相代谢酶可加速
环境污染物、致癌物、毒物等的代谢解毒和排泄
(Yangetal．,２００３;薛春苗等,２０１１).药物相互作
用是药物安全性评价的最基本内容之一,日本、欧美
等国家颁布了相关的法律法规或一些指导原则.药
物相互作用是指两种或两种以上药物在前后或同时
用药时,在代谢环节产生的相互干扰作用,结果使疗
效增强或减弱 (Informa,２００８;Wienkers,２００５;
Kakudaetal．,２０１１;Josephson,２０１０;Ahmietal．,
２０１０).中药成分复杂,但大多有效成分仍要通过药
物代谢酶进行代谢分解,这必然会对药物代谢酶产
生诱导或抑制作用,影响药物代谢酶的活性,从而影
响其他药物的代谢,也会对药物的有效性及安全性
产生影响.
绞股蓝(Gynostemmapentaphyllum)又名七叶
胆、小苦药等,是葫芦科绞股蓝属植物,主要分布于
中国、日本、朝鲜等国,为我国常用中药.始载于明
代的«救荒本草»作野菜使用,«本草纲目»中开始将
其以乌蔹莓之名入药.绞股蓝以全草药食兼用,味
苦、性寒,具有清热解毒、补气、止咳、祛痰之功效(杜
小燕等,２００９).现代药理学研究表明,绞股蓝具有
抗肿瘤(杜小燕等,２００９)、抗氧化(陈桂林等,２０１２)、
抗衰老(姚丹丹等,２００７)、降血脂(陈桂林等,２０１２)、
降血糖(魏守蓉等,２００５)、抑制肥胖(魏守蓉等,
２００５)、提高免疫力(张海燕等,２００６)等功能.绞股
蓝作为一种药材或茶饮在我国有着悠久历史,目前
在民间及医院的使用很普遍.因此,研究绞股蓝对
大细胞色素P４５０和GST、UGT活性的影响,有助
于了解绞股蓝与其它中药或西药合用时可能的药物
性相互作用,提高临床用药的有效性和安全性.
１　材料与方法
１．１药品和试剂
绞股蓝,购自广西龙州县;NADP＋、NADPH、
葡萄糖Ｇ６Ｇ磷酸、葡萄糖Ｇ６Ｇ磷酸脱氢酶、甘油、还原型
谷胱甘肽、TritonxＧ１００均购置Solarbio公司;细胞
色素C、UDPＧ葡萄糖醛酸购置SIGMA公司;氨基
比林、２Ｇ氨基酚、４Ｇ氨基酚购置国药集团化学试剂有
限公司;１Ｇ氯Ｇ２,４Ｇ二硝基苯(CDNB)购置 AMRESＧ
CO公司;地塞米松(郑州羚锐制药股份有限公司,
批号:１２０７１８２);苯巴比妥钠(上海新亚药业有限公
司,批号:１２０５０);BCA蛋白测定试剂盒购置碧云天
生物技术研究所;谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶
(AST)测定试剂盒购置南京建成生物工程研究所;
肌酐(Cr)、尿素(Ur)测定试剂盒购置四川迈克科技
有限责任公司;其它试剂均为国产分析纯.
１．２仪器
MIKRO２００高速冷冻离心机(HERAEUS公
司);台式低速离心机(北京京立离心机有限公司);
BeckＧCoulter Opima XLＧ１００K 型 超 速 离 心 机
(Beckman公司);酶标仪(德国BioTek公司);TUＧ
１９０１紫外可见分光光度计(北京谱析);电子天平
(梅特乐Ｇ托利多仪器上海有限公司).
１．３实验动物
SPF级SD雄性大鼠(由广西医科大学实验动
物中心提供,合格证号为SCKX桂２００３Ｇ０００３).
１．４给药方法
将大鼠随机分成四组:蒸馏水组、绞股蓝组、阳
性组(苯巴比妥钠组与地塞米松组),每组８只.绞
股蓝组自由饮用绞股蓝汁(绞股蓝汁每天新鲜配制,
浓度为每１００g水２g茶叶,１００℃的水温浸泡３０
min,取上清液),蒸馏水组自由饮用蒸馏水,连续给
药６０d,苯巴比妥钠组和地塞米松组与第５７天分别
腹腔注射苯巴比妥钠和地塞米松,剂量为８０mg􀅰
kgＧ１,连续３d.
１．５微粒体和胞浆液的制备
全部大鼠末次给药后,禁食不禁水,２４h后从
股动脉取血,分离血清,Ｇ２０℃保存备用.大鼠处死
后,立即移除肝脏,用冷的０．９％的生理盐水充分灌
流、洗净血液和血迹,使肝脏至白陶土样,用滤纸吸
干,称重,用剪刀将组织剪碎,加入冰冷的(４℃)
０．０５mol􀅰LＧ１Tris至０．１５mol􀅰LＧ１KCl(pH７．４)
缓冲液制成的匀浆液,在４℃２０００r􀅰minＧ１的条件
下离心１５min,弃去沉淀;上清液在４℃１００００g的
条件下离心２０min,弃去沉淀;上清液在４℃１０００００
g的条件下离心６０min,所得沉淀为微粒体,上清液
为胞浆液.
１．６指标的测定
氨基比林ＧNＧ脱甲基酶(CYP３A)、苯胺Ｇ４Ｇ羟化
酶(CYP２E１)、NADPHＧ细胞色素C还原酶、葡萄糖
醛酸Ｇ转移酶、谷胱甘肽ＧSＧ转移酶的活性及细胞色
素b５的含量按照药理实验方法学上的方法测定;
ALT、AST、Cr、Ur的测定均按试剂盒上的说明进
行操作.
５９１２期　　　　　 卓燊等:绞股蓝对大鼠肝组织内细胞色素P４５０和GST、UGT活性的影响
１．７统计学方法
采用SPSS１３．０统计软件进行数据统计分析,
实验数据均以x－±s表示,两个独立样本均数比较
采用t检验,多个样本之间的两两比较采用单因素
方差分析,P＜０．０５为具有统计学意义.
２　结果与分析
２．１绞股蓝对大鼠肝、肾功能的影响
从表１可以看出,连续给药６０d后,绞股蓝组与
蒸馏水组比较其ALT、AST、Cr、Ur没有显著性差异.
表１　绞股蓝对大鼠血清ALT、AST、Cr、Ur的影响
Table１　EfectsofGynostemmapentaphyllumonthe
ALT,AST,Cr,Uractivitiesinserumofrat(x－±s,n＝８)
组别 Group
谷丙
转氨酶
ALT
(U􀅰LＧ１)
谷草
转氨酶
AST
(U􀅰LＧ１)
肌酐
Cr
(μmol􀅰
LＧ１)
尿素氮
Ur
(mmol􀅰
LＧ１)
蒸馏水 Water ６．６４±
１．４９
１９．５２±
２．５４
１１７．２３±
１６．４７
７．７１±
１．３
绞股蓝
G．pentaphyllum
７．０２±
０．９８
１８．１８±
２．４５
１２１．１７±
１７．４５
７．４２±
０．６７
苯巴比妥钠
Phenobarbitalsodium
６．１３±
０．８８
１７．４２±
３．１５
１０２．２７±
２２．６５
７．５５±
０．７９
地塞米松
Dexamethasone
５．８８±
１．７８
１６．３５±
５．４１
１０５．２１±
１３．１３
７．６９±
１．０２
　注:与蒸馏水组比较,∗P＜０．０５,∗∗P＜０．０１.下同.
　Note:Comparedwithwatergroup,∗P＜０．０５,∗∗P＜０．０１．Thesamebelow．
２．２绞股蓝对大鼠肝组织里GST和UGT活性的影响
从表２可以看出,连续给药６０d后,绞股蓝组
与蒸馏水组比较能显著性升高GST、UGT活性,P
＜０．０１;苯巴比妥钠组与蒸馏水组比较能显著性升
高GST、UGT活性,P＜０．０１;地塞米松组与蒸馏水
组比较能显著性升高UGT活性,P＜０．０１.
表２　绞股蓝对大鼠肝组织里GST和UGT活性的影响
Table２　EffectsofGynostemmapentaphyllumonthe
GST,UGTactivitiesinliverofrat(x－±s,n＝８)
组别 Group
谷胱甘肽转移酶
GST
(U􀅰mgＧ１)
尿苷二磷酸Ｇ
葡萄糖醛酸基
转移酶 UGT
(nmol􀅰minＧ１􀅰mgＧ１)
蒸馏水 Water ５３２．３３±１４５．６１ ０．２０±０．０７
绞股蓝
G．pentaphyllum
８０４．４５±１３７．５９∗∗ ０．４２±０．０９∗∗
苯巴比妥钠
Phenobarbitalsodium
１０２１．２１±８８．７８∗∗ ０．４１±０．１３∗∗
地塞米松
Dexamethasone
－ ０．３２±０．０５∗∗
２．３绞股蓝对大鼠肝组织里CYP３A、CYP２E１、细胞
色素b５、NADPHＧ细胞色素C还原酶的活性的影响
从表３可以看出,连续给药６０d后,绞股蓝组
与蒸馏水组比较能显著性升高CYP３A、NADPHＧ
细胞色素C还原酶活性,P＜０．０１,能显著性升高细
胞色素b５的含量,P＜０．０１;苯巴比妥钠组与蒸馏水
组比较能显著性升高CYP３A活性,P＜０．０１,能显
著性升高细胞色素b５的含量,P＜０．０１;地塞米松组
与蒸馏水组比较能显著性升高CYP３A、NADPHＧ
细胞色素C还原酶的活性,能显著性升高细胞色素
b５的含量,P＜０．０１.
表３　绞股蓝对大鼠肝组织里CYP４５０的影响
Table３　EffectsofGynostemmapentaphyllumonthe
cytochromeP４５０activitiesinliverofrat(x－±s,n＝８)
组别 Group
细胞色素
３A
CYP３A
细胞色素
２E１
CYP２E１
细胞色素
b５
CYPb５
PＧ４５０
还原酶
NADPHＧ
cytochtome
Creductase
蒸馏水 Water ０．３０±
０．１３
０．０４１±
０．０１２
０．４２±
０．０７
１．８０±
０．３８
绞股蓝
G．Pentaphyllum
１．０９±
０．４３∗∗
０．０５４±
０．０２５
０．７９±
０．１２∗∗
４．５３±
１．０５∗∗
苯巴比妥钠
Phenobarbitalsodium
１．４６±
０．７０∗∗
－ ０．５８±
０．１２∗∗
２．７５±
１．５３
地塞米松
Dexamethasone
１．５０±
０．４５∗∗
－ ０．７０±
０．２４∗
４．５４±
１．９３∗∗
３　结论与讨论
ALT、AST是肝细胞损害的敏感指标,Cr、Ur
是肾功能损害的敏感指标,本实验研究发现大鼠长
期饮用绞股蓝对ALT、AST、Cr、Ur没有影响,说明
长期饮用绞股蓝不会损害肝、肾功能,提示我们在平
时生活中可以放心饮用绞股蓝.
细胞色素b５参与细胞色素P４５０的电子转移,
参与药物氧化过程.微粒体细胞色素b５的含量在
同一组织里一般为细胞色素P４５０含量的一半,所
以测定细胞色素b５的含量也可间接的反应机体内
细胞色素P４５０含量的情况.NADPHＧ细胞色素C
还原酶在某些药物的代谢中将它从 NADPH 得来
的还原电子传递给细胞色素P４５０,将氧化型的细胞
色素P４５０转变为还原型的细胞色素P４５０,提高细
胞色素P４５０的还原能力.本实验研究结果发现绞
股蓝能够显著升高细胞色素b５含量,提高 NADＧ
PHＧ细胞色素C还原酶的活性,说明绞股蓝可以提
高细胞色素P４５０的含量和活性.在细胞色素P４５０
家族的所有基因中CYP３A是最重要的一类,其含
量占CYP４５０的３０％左右,该酶在许多内、外源化
合物的代谢中起着非常重要的作用,参与多种药物
６９１ 广　西　植　物　　　 　　　　　　　　　　　　　　３４卷
的代谢,据统计市售药品有５０％左右通过CYP３A
代谢(Guengerich,２００３).我们的研究结果表明绞
股蓝可以显著性诱导CYP３A的活性,提示我们在
绞股蓝与CYP３A代谢的药物合用时,可能会出现
相互作用.CYP２E１在药物和我们经常接触的溶剂
及环境污染物的代谢中起着重要作用,CYP２E１不
仅参与药物代谢,而且还能催化许多前致癌物和前
毒物的活化过程,CYP２E１主要通过催化前致癌物
去烷基、去硝基等反应而使之转化为致癌物,且其活
性不存在明显的个体差异.迄今发现所有CYP２E１
的底物在动物和人中都是相同的,因此研究动物的
CYP２E１活性对人具有重要的参考意义(石杰等,
２００８).实验结果发现,绞股蓝对CYP２E１的活性
没有影响,说明绞股蓝没有活化致癌物的作用,提示
人们对绞股蓝可以放心使用.
诱导Ⅱ相代谢酶如 UGT、GST等可加速环境
污染、致癌物、毒物等的代谢解毒和排泄.UGT是
化学物质在人体内进行Ⅱ相生物转化时最重要的一
种微粒体酶,在所有通过Ⅱ相药物代谢酶代谢的药
物中,有约３５％是通过UGT代谢的(Kaplanetal．,
２００３).GST能催化谷胱甘肽与细胞色素P４５０催
化形成的产物和体内各种反应形成的亲电子剂结
合;还能催化谷胱甘肽与体内氧化还原产物和体内
代谢形成的氧自由基结合,使其易于从尿液或胆汁
中排泄(杨子明等,２０１１).绞股蓝可显著诱导
UGT、GST的活性,说明其可加速药物、毒物等排
泄,减少毒性.
苯巴比妥钠是CYP３A、GST、UGT的经典诱导
剂;地塞米松是CYP３A、UGT的经典诱导剂,本实
验研究发现苯巴比妥钠组能显著升高 CYP３A、
GST、UGT 的 活 性;地 塞 米 松 组 能 显 著 升 高
CYP３A、UGT的活性,说明实验结果真实可靠.绞
股蓝可以提高大鼠肝组织内细胞色素b５的含量,诱
导CYP３A、UGT、GST、NADPHＧ细胞色素C还原
酶的活性,这可能是绞股蓝的作用机制之一.绞股
蓝对主要药物代谢酶有显著诱导作用,提示绞股蓝
与CYP３A、UGT、GST等药物代谢酶代谢的药物合
用时,可能会发生代谢性相互作用.
参考文献:
DavidR．２００８．Drug􀅰druginteractions[M]．SecondEdition．New
York:InformaHealthcare:５３－８５
AhmiOA,RippSL．２０１０．Evaluationofmodelsforpredicting
drugＧdruginteractionsduetoinduction[J]．ExpertOpinDrug
MetToxicol,６(１１):１３９９－１４１６
ChenGL(陈桂林),LeZY(乐智勇),LuKG(卢锟刚),etal．
２０１２．Studyonhypolipidemicandantioxidationactionof５０％
ethanolfractioningynostemmapentaphylum(绞股蓝５０％乙醇
部位调血脂及抗氧化作用研究)[J]．ChinaPharm(中国药
业),２１(１５):１１－１３
DuXY(杜小燕),HouY(侯颖),QinH(覃华),etal．２００９．StudＧ
iesontheantitumoractivityofpolysaccharidefromgynostemＧ
mapentaphylumanditsmechanism(绞股蓝多糖的抗肿瘤作
用及其机制研究)[J]．SciTechEng(科学技术与工程),９
(２０):５９６８－５９７２
GuengerichFP．２００３．CytochromesP４５０,drugs,anddiseases[J]．
MolInterv,３(４):１９４－２０４
JosephsonF．２０１０．DrugＧdruginteractionsinthetreatmentofHIV
infection:focus on pharmacokinetic enhancement through
CYP３Ainhibition[J]．JInternMed,２６８(６):５３０－５３９
KakudaTN,ScholerＧGyureM,HoetelmansRM．２０１１．PharmacoＧ
kineticinteractionsbetweenetravirineandnonＧantiretroviral
drugs[J]．ClinPharm,５０(１):２５－３９
KaplanM,HammermanC,MaiselsMJ．２００３．Bilirubingeneticsfor
thenongeneticist:hereditarydefectsofneonatalbilirubinconjuＧ
gation[J]．Pediatrics,１１１(４):８８６－８９３
ShiJ(石杰),WangBJ(王本坚),YangX(杨旭)．２００８．Effectsof
newdrunmetabolismnCYP１A２andCYP２E１(体内代谢法研
究新药对细胞色素P４５０１A２和２E１的影响)[J]．ChinHepaＧ
tol(肝脏),１３(５):３８７－３９０
WenCR(魏守蓉),XueCK(薛存宽),HeXB(何学斌),etal．２００５．
Studiesonthedeclinedbloodglucoseactirityofpolysaccharide
fromGynostemmapentaphyllum(绞股蓝多糖降血糖作用的实验
研究)[J]．ChinJGer(中国老年学杂志),２５(４):４１８－４２０
WienkersLC,HeathTG．２００５．Predictinginvivodruginteractions
frominvitrodrugdiscoverydata[J]．NatRevDrugDiscov,４:
８２５－８３３
XueCM(薛春苗),ZhangB(张冰),LiuXQ(刘小青),etal．２０１１．
Effectsofaconitilateralisradixpraeparata,cinnamomicortex
cassiae,curculiginisrhizomaontheactivitiesofdrugmetabolizＧ
ingenzymesCYP３AandGSTinrats(附子、肉桂、仙茅对正常
大鼠药物代谢酶CYP３A和GST活性的影响)[J]．Cjtcmp(中
华中医药杂志),２６(１２):２８２３－２８２６
YangXF,HeW,LuWH,ZengFD．２００３．Effectsofscutelarinon
liverfuntionafterbrainischemiaＧreperfusioninrats[J]．Acta
PharmSin,２４:１１１８－１１２４
YaoDD(姚丹丹),HuangSH(黄善华)．２００７．StudyontheantiＧ
agingfunctionofgynostemmapentaphylummakinoonsubＧagＧ
ingrats(绞股蓝对亚急性衰老大鼠的抗衰老作用研究)[J]．
ModJIntegrTradChinWestMed(现代中西医结合杂志),
１６(２８):４１１２－４１１３
YangZM(杨子明),YangXF(杨秀芬)．２０１１．InhibitionofglutaＧ
thioneＧSＧtransferasebytotalsaponinsofpanaxnotoginsengand
itskineticsanalysisinliverofmice(三七总皂苷对小鼠肝脏谷
胱甘肽ＧSＧ转移酶的抑制作用及其动力学分析)[J]．ChinJ
ChinMatMed(中国中药杂志),３６(１７):２４１３－２４１７
ZhangHY(张海燕),GuoQ(郭强)．WenWY(温伟业)．２００６．
EffectsofgynostermmapentaphylumontheadjusementofimＧ
nunefunctioninmice(绞股蓝总皂苷对小鼠免疫功能的影响)
[J]．ChinJTradVetSci(中兽医学杂志),２:１３－１５
７９１２期　　　　　 卓燊等:绞股蓝对大鼠肝组织内细胞色素P４５０和GST、UGT活性的影响