全 文 ：广 西 植 物 Guihaia　May２０１４,３４(３):３８１－３８６　　　　　　　　　　 http://journal．gxzw．gxib．cn　
DOI:１０．３９６９/j．issn．１０００Ｇ３１４２．２０１４．０３．０１８
张卫华,许丽萍,龚峥,等．马来沉香组织培养技术研究[J]．广西植物,２０１４,３４(３):３８１－３８６
ZhangWH,XuLP,GongZ,etal．TissueculturepropagationtechnologyofAquilariamalaccensis[J]．Guihaia,２０１４,３４(３):３８１－３８６
马来沉香组织培养技术研究
张卫华１∗,许丽萍１,２,龚　峥１,潘　文１,朱报著１
(１．广东省林业科学研究院,广州５１０５２０;２．普洱市林科所,云南 普洱６６５０００)
摘　要:以马来沉香茎段为外植体,分别对外植体的消毒、启动培养、增殖培养、壮苗培养、生根培养、炼苗移
栽环节进行研究,着重探索马来沉香组织培养技术各个环节的最佳培养基配方,为马来沉香的工厂化育苗提
供技术指导.结果表明:马来沉香最佳消毒方法是用０．１％升汞消毒４~５min;启动率最高的培养基配方是
１/２MS＋６ＧBA０．２mg􀅰LＧ１＋NAA０．１mg􀅰LＧ１＋蔗糖３０g􀅰LＧ１＋琼脂５．８g􀅰LＧ１,启动率达７０．５％;增殖系
数最高的培养基是１/２MS＋０．１mg􀅰LＧ１６ＧBA＋２５g􀅰LＧ１蔗糖＋５．８g􀅰LＧ１琼脂,增殖系数达２．９;最佳壮苗
培养基是１/２MS＋３０g􀅰LＧ１蔗糖＋５．８g􀅰LＧ１琼脂;最佳生根培养基为１/２MS＋NAA５．０mg􀅰LＧ１＋２０g􀅰
LＧ１糖＋６g􀅰LＧ１琼脂,培养２d后移入１/２MS培养基继续培养,生根率为８３％;马来沉香移栽较难成活,在泥
炭土∶黄泥土(２∶１)的基质上成活率最高,移栽成活率６５％.
关键词:马来沉香;组织培养;外植体;生长调节剂
中图分类号:Q９４３．１　　文献标识码:A　　文章编号:１０００Ｇ３１４２(２０１４)０３Ｇ０３８１Ｇ０６
Tissueculturepropagationtechnology
ofAquilariamalaccensis
ZHANGWeiＧHua１∗,XULiＧPing１,２,GONGZheng１,PANWen１,ZHUBaoＧZhu１
(１．GuangdongAcademyofForestry,Guangzhou５１０５２０,China;２．Pu’erInstituteofForestry,Pu’er６６５０００,China)
Abstract:Usingtheyoungshootsasexplants,themethodsincludingsterilization,induction,propagation,rooting
andplantingoftheAquilariamalaccensiswerestudied．Itwasindicatedthatthebestmethodtosterilizewas４－５
minas０．１％ HgCl２;１/２MS＋６ＧBA０．２mg􀅰LＧ１＋NAA０．１mg􀅰LＧ１＋sugar３０g􀅰LＧ１＋agar５．８g􀅰LＧ１astheefＧ
fectivemediumforadventitiousshootinduction,theinductionratewas７０．５％;１/２MS＋０．１mg􀅰LＧ１６ＧBA＋sugar
２５g􀅰LＧ１＋agar５．８g􀅰LＧ１asthesuitablepropagationmedium,andthecoeficientwas２．９;themediumof１/２MS
＋sugar３０g􀅰LＧ１＋agar５．８g􀅰LＧ１madetheemblingsgrowstrongtocut;１/２MS＋NAA５．０＋sugar２０g􀅰LＧ１
＋agar６．０g􀅰LＧ１astherootingmedium,therootingplantletswouldbetransferredtothemediumwithnohormone
aftertwodays．Therootingratewas８３％．Itwasalittledificulttotransplant,andthesurvivalratewasonly６５％
inthemediummixedwithpeatsoilandyelowmud(proportionwas２∶１)．
Keywords:Aquilariamalaccensis;tissueculture;explants;germinateregularchemical
　　沉香属(Aquilaria)植物共有１５种,属瑞香科
(Thymelaeaaceae),具有珍贵的药用用途.其形态
为乔木或小乔木,落叶或不落叶,分布于缅甸、泰国、
越南、老挝、柬埔寨、印度东北部及不丹、马来半岛、
苏门答腊、加里曼丹等热带、亚热带地区.马来沉香
(Aquilariamalaccensis),又称容水沉香树,属瑞香
收稿日期:２０１３Ｇ０６Ｇ０６　　修回日期:２０１３Ｇ０８Ｇ１５
基金项目:国家公益性行业专项(２０１２０４３０３);引进国际先进林业科学技术项目(２００８Ｇ４Ｇ０１).
作者简介:张卫华(１９７７Ｇ),女,河北定兴人,博士,高级工程师,从事组织培养与林木遗传育种工作,(EＧmail)zwh５２３＠sinogaf．cn.
∗通讯作者
科沉香属常绿乔木,在热带、亚热带的雨林和荒山野
岭中生长.高可达４０m,胸径为１．５~２．５m,开白
色小花,马来沉香和同一科的其他几种可产生具有
很高药用价值、芬芳浸满树脂的心材,通常被称为琼
脂木、沉香木.它还具有广泛适应性,可长在沙地、
石灰质、水分缺乏的坡地和山脊以及沼泽地,在平均
气温为２０~２２℃、海拔１０００m的地域有分布.马
来沉香的组织培养研究在国内未见报道,由于同属
植物沉香是我国的乡土树种,对其研究相对较多,离
体组织培养、建立无性系快繁方面也有报道,何旭君
等(２００６)对沉香树组织培养快速繁殖技术进行了研
究,筛选出了各培养阶段适宜培养基和移栽基质;徐
强兴等(２００６)对土沉香的组培快繁技术进行了研
究,得出 MS＋BA０．２mg􀅰LＧ１培养基比较适合芽
的诱导培养的结论;兰芹英等(２００１)对沉香成熟胚
的组织培养和植株再生进行了研究.
马来沉香PK品系是马来西亚林业科学研究所
Soehartno博士从１９８５年开始在种源和家系试验基
础上选育了２个优良品系.马来沉香PK品系的树
高和胸径生长量比平均高２５％和１８％,该品系不仅
开始结香时间略有提早,结香率高,沉香产量提高在
５％以上,而且香味浓郁,质量好,价格高,经济效益
显著.本文对马来西亚引进的PK品系进行了较完
善的组织培养研究.
１　材料与方法
１．１材料
以马来西亚林业研究所引进的马来沉香PK品
系为材料.
１．２方法
１．２．１外植体材料的预处理　取材选在晴天,在取材
前一天停止浇水,选择健康、无病虫害的马来沉香实
生苗嫩茎,去除叶片,带回试验室,在流水下冲洗,清
除明显的污垢,然后再用１％左右的洗衣粉液轻柔
地涮洗,在流水下冲洗干净,用灭过菌的剪刀将其剪
成１~２cm长的带芽茎段,待用.
１．２．２消毒试验　以NaClO、HgCl２为消毒剂,消毒
剂种类及浓度、时间见表１.在消毒试验阶段,培养
基为 MS＋６ＧBA０．２mg􀅰LＧ１,附加蔗糖３０g􀅰LＧ１,
琼脂粉５．８g􀅰LＧ１,pH５．８.将准备好的外植体在
表１中的处理浸泡后,浸泡的过程边摇晃,用无菌水
冲洗５~６次,每瓶接种一个外植体,每次２０瓶,
３次重复,１０d后观察污染情况和启动情况.
表１　消毒剂的种类和浓度
Table１　Typeandconcentrationofdisinfectant
处理
Treatment
消毒剂
Disinfectant
消毒时间 (min)
Disinfectanttime
ⅠＧ１ ０．１％HgCl２ ５
ⅠＧ２ ０．２％HgCl２ ５
ⅠＧ３ １％ NaClO １０
ⅠＧ４ ２％ NaClO １０
　　选出最好的消毒剂,用同样的方法,以３~８
min的时间梯度做最佳消毒时间的筛选.
１．２．３诱导培养基筛选　利用预处理过的外植体为
试验材料,以 MS、１/２MS、B５为基本培养基,添加
６ＧBA、NAA、KT３种植物生长调节剂,其中培养基
中含有蔗糖３０g􀅰LＧ１,琼脂粉５．８g􀅰LＧ１,采用正交
设计方法(表２).在超菌工作台上用１．２．２筛选出
的最佳的外植体消毒方法处理外植体后,接入表２
中ⅡＧ１~ⅡＧ９的培养基中,每个处理３０瓶,每瓶一
个外植体,３次重复,观察启动率,找出最佳的启动
培养基配方.
表２　启动培养正交方案表
Table２　Orthogonaldesignofinductiontest
处理
Treatment
A(培养基)
Medium
B(６ＧBA
mg􀅰LＧ１)
C(NAA
mg􀅰LＧ１)
ⅡＧ１ １(MS) １(０．２) １(０．０５)
ⅡＧ２ １ ２(０．５) ２(０．１)
ⅡＧ３ １ ３(１．０) ３(０．２)
ⅡＧ４ ２(１/２MS) １ ２
ⅡＧ５ ２ ２ ３
ⅡＧ６ ２ ３ １
ⅡＧ７ ３(B５) １ ３
ⅡＧ８ ３ ２ １
ⅡＧ９ ３ ３ ２
１．２．４芽增殖培养基筛选　以启动培养试验所获得
的无菌嫩芽为试验材料,基本培养基为１/４MS、１/２
MS、３/４MS、MS,附加植物生长调节剂６ＧBA０．０５、
０．１、０．２、０．５mg􀅰LＧ１４种浓度,添加蔗糖３０g􀅰LＧ１,
琼脂粉５．８g􀅰LＧ１,pH５．８,增殖培养设计方案见表
３,继代周期为４０d.每个处理３０瓶,每瓶一个芽,３
次重复.
１．２．５不定根诱导培养基筛选　(１)单次生根诱导
试验:以１/２MS为基本培养基,设附加IBA０．１、
０．５、１．０、１．５、２．０mg􀅰LＧ１,NAA０．１、０．５、１．０、１．５、
２．０mg􀅰LＧ１;IBA０．５mg􀅰LＧ１＋NAA０．２mg􀅰
LＧ１;IBA０．５mg􀅰LＧ１＋GTY２．０mg􀅰LＧ１;IBA０．５
mg􀅰LＧ１＋GTY１．０mg􀅰LＧ１;IBA０．２mg􀅰LＧ１＋
２８３ 广　西　植　物　　　 　　　　　　　　　　　　　　３４卷
表３　增殖培养正交方案表
Table３　Orthogonaldesignofmultiplicationtest
处理
Treatment
A(培养基)
Medium
B
(６ＧBAmg􀅰LＧ１)
ⅢＧ１ １(１/４MS) １(０．０５)
ⅢＧ２ １ ２(０．１)
ⅢＧ３ １ ３(０．２)
ⅢＧ４ １ ４(０．５)
ⅢＧ５ ２(１/２MS) １
ⅢＧ６ ２ ２
ⅢＧ７ ２ ３
ⅢＧ８ ２ ４
ⅢＧ９ ３(３/４MS) １
ⅢＧ１０ ３ ２
ⅢＧ１１ ３ ３
ⅢＧ１２ ３ ４
ⅢＧ１３ ４(MS) １
ⅢＧ１４ ４ ２
ⅢＧ１５ ４ ３
ⅢＧ１６ ４ ４
NAA０．３mg􀅰LＧ１＋GTY１．０mg􀅰LＧ１;IBA０．３mg
􀅰LＧ１＋NAA０．１mg􀅰LＧ１＋GTY２．０mg􀅰LＧ１等１５
个处理,切取高约２cm、大小基本一致的不定芽接
入各种培养基中培养,每个处理３瓶,每瓶接种５
株.培养３０d后观察各处理组培苗的生根情况.
(２)二次生根诱导试验:以１/２MS为基本培养
基,设附加NAA３．０、５．０、７．０mg􀅰LＧ１及IBA３．０、
５．０、７．０mg􀅰LＧ１等６个处理,切取大小基本一致、生
长正常、高约２cm的不定芽接入各种培养基中,培
养２d后移入不加任何外源激素的１/２MS培养基
中继续培养,每处理３瓶,每瓶接种１２株.培养３０
d后观察各处理组培苗的生根情况.
１．２．６炼苗、移栽　３月份瓶苗的根多数长于１cm
时,将瓶苗移至大棚进行炼苗,３d后,将瓶盖拧松,
以后每隔１~２d将盖子拧开少许,分３~４次全部
打开,１０d后,进行移栽,移栽前,要用清水将培养
基洗掉;用１０００倍的根太阳浸泡根部５min,栽至
基质中,基质用蛭石∶珍珠岩∶黄心土(比例为１∶
１∶１)和泥炭土∶黄心土(比例为２∶１),用水淋透,
盖上塑料膜和遮荫网.基质在移栽前３d经过太阳
晒,移栽时用０．１％高锰酸钾溶液消毒基质,３５d
后,统计结果.
１．３试验数据的记录与处理
材料接种后,定期观察记录生长情况,主要统计
指标包括:(１)污染率＝(污染的外植体数/接种外植
体总数)×１００％;(２)死亡率＝(死亡的外植体数/接
种的外植体总数)×１００％;(３)启动率＝(未污染且
成活的外植体数/接种的外植体总数)×１００％;(４)
增殖系数＝(增殖的芽苗数/起始的芽苗数)×
１００％;(５)生根率＝(生根苗数/培养总苗数)×
１００％;(６)移栽成活率＝(成活苗数/移栽苗总数)×
１００％.采用SPSS统计分析软件进行数据分析.
２　结果与分析
２．１消毒剂种类和浓度的筛选
用于消毒处理的化学药剂很多,一般NaClO因
其性温和,杀菌效果好,而常用于组织培养中外植体
消毒;升汞是一种杀菌效果比较优良的消毒剂,通过
汞离子使蛋白质变性而杀死外植体表面微生物,尤
其能有效杀死细菌.用不同消毒剂处理过的茎段,
接入培养基,２０d后统计污染率、启动率、死亡率,
试验结果表明:０．１％ HgCl２消毒效果最好,其启动
率在四个消毒剂中最高,启动率５５．８％,污染率
２１．３％,达到了较为理想的效果;０．２％的 HgCl２处
理５min虽然使污染率下降到１１．７％,但死亡率很
高,达４６．６％;１％的NaClO消毒１０min后的污染
率仍较高;用２％的 NaClO处理外植体,对污染率
的下降和启动率的提高没有很明显的影响.最适合
的消毒剂是HgCl２(表４).
表４　不同消毒剂消毒效果的比较
Table４　Comparisonofdifferentdisinfectanteffections
消毒方法
Disinfectionmethod
污染率
ContaminaＧ
tionrate
死亡率
Mortality
启动率
Startedrate
未污染未启动
Notstarted
０．１％ HgCl２５min ０．２１３ ０．２１９ ０．５５８ ０．０１０
０．２％ HgCl２５min ０．１１７ ０．４６６ ０．３５０ ０．０６７
１％ NaClO１０min ０．４６１ ０．０９０ ０．３８６ ０．０６３
２％ NaClO１０min ０．３５２ ０．１８３ ０．３５７ ０．１０２
　　在上一步试验的基础上,为找出最佳的消毒时
间,以浓度为０．１％的HgCl２为消毒剂,设计了３~８
min的时间梯度试验,２０d后观察,从表５可以看
出,随着消毒时间的逐渐增加,马来沉香污染率、启
动率、死亡率呈现有规律地变化,污染率随时间的增
加呈下降趋势,变化相对缓和,死亡率随时间的增加
呈上升趋势,启动率先上升后下降,在４min时达最
高值(６２．８％),４min和５min的启动率均超过
５０％,死亡率低于２０％.由此,马来沉香的最佳消
毒方法是用０．１％的HgCl２处理４~５min.
２．２芽的诱导
外植体接入培养基后,每天观察外植体萌发生
３８３２期　　　　　　　　　　　　张卫华等:马来沉香组织培养技术研究
表５　消毒时间梯度试验
Table５　Gradientexperimentoftimelevelinsterilization
消毒时间
Disinfectant
rate(min)
污染率
Contamination
rate
死亡率
Mortality
启动率
Startedrate
未污染未启动
Unpolutedand
notstarted
３ ０．４４８ ０．０５２ ０．４６３ ０．０３７
４ ０．３０７ ０．１０２ ０．６２８ ０．０５３
５ ０．２１３ ０．１９９ ０．５５８ ０．０３０
６ ０．１８９ ０．３２６ ０．４２６ ０．０７９
７ ０．１４９ ０．４５７ ０．３１１ ０．０８３
８ ０．１３２ ０．５１７ ０．２７１ ０．０８６
长情况,部分外植体萌发生长比较快,最快的３d即
有萌发迹象,一个星期后芽有０．３cm长,这和外植
体本身的基因型有关,大部分萌发生长较快的外植
体较为粗壮.一个星期后,大量外植体开始萌发,两
个星期后,统计其启动率,严重玻璃化不计入其内.
启动率最高的培养基组合是ⅡＧ４号培养基１/２MS
＋６ＧBA０．２mg􀅰LＧ１＋NAA０．１mg􀅰LＧ１,启动率达
７０．５％,差异性分析显示ⅡＧ４号和ⅡＧ１号培养基差
异性不显著,ⅡＧ２号和ⅡＧ５号差异性不显著,ⅡＧ３
号和ⅡＧ６号差异性不显著,除掉误差,其余各个处
理差异性均显著.由此而知,基本培养基的选择对
沉香茎段芽的启动影响显著,本试验中 MS和１/２
MS差异性不显著,１/２MS最好.６ＧBA的影响也
较为显著,以低浓度的效果较好.NAA对沉香茎
段培养启动率影响不显著.
表６　启动试验外植体启动率
Table６　Resultsofexplantstartedrate
instartingexperiment
处理 Treatment
启动率Startedrate
Ⅰ Ⅱ Ⅲ
平均值
Mean
ⅡＧ１ MS＋６ＧBA０．２mg􀅰LＧ１＋
NAA０．０５mg􀅰LＧ１
０．６３３ ０．６７７ ０．７１４ ０．６７５
ⅡＧ２ MS＋６ＧBA０．５mg􀅰LＧ１＋
NAA０．１mg􀅰LＧ１
０．６３３ ０．５４８ ０．５７１ ０．５８４
ⅡＧ３ MS＋６ＧBA１．０mg􀅰LＧ１＋
NAA０．２mg􀅰LＧ１
０．４００ ０．４１９ ０．３７１ ０．３９７
ⅡＧ４ １/２MS＋６ＧBA０．２mg􀅰LＧ１
＋NAA０．１mg􀅰LＧ１
０．６６６ ０．６７７ ０．７７１ ０．７０５
ⅡＧ５ １/２MS＋６ＧBA０．５mg􀅰LＧ１
＋NAA０．２mg􀅰LＧ１
０．５６６ ０．５８１ ０．５４３ ０．５６３
ⅡＧ６ １/２MS＋６ＧBA１．０mg􀅰LＧ１
＋NAA０．０５mg􀅰LＧ１
０．３６６ ０．４５２ ０．４００ ０．４０６
ⅡＧ７ B５＋６ＧBA０．２ mg􀅰LＧ１＋
NAA０．２mg􀅰LＧ１
０．３３３ ０．３２３ ０．３１４ ０．３２３
ⅡＧ８ B５＋６ＧBA０．５ mg􀅰LＧ１＋
NAA０．０５mg􀅰LＧ１
０．３００ ０．２５８ ０．３１４ ０．２９１
ⅡＧ９ B５＋６ＧBA１．０ mg􀅰LＧ１＋
NAA０．１mg􀅰LＧ１
０．２３３ ０．２５８ ０．２２９ ０．２４０
２．３芽的增殖壮苗培养
马来沉香在一般４０d继代１次,增殖倍数在１．９
~２．７之间.增殖培养过程中,很容易产生水渍状
透明的玻璃芽,严重影响了芽的增殖和质量.不同
无机盐浓度培养基试验结果表明,在外源激素６ＧBA
添加浓度为０．１mg􀅰LＧ１的条件下,不同无机盐浓度
对马来沉香的芽增殖和玻璃芽率有不同的影响.其
中,全量 MS和３/４MS培养基易产生玻璃芽,严重
阻碍了芽的增殖,不适合作增殖培养基;在l/２MS
培养基中培养的芽生长正常、健壮,增殖率较高,且
玻璃芽率较低,比较适合用于芽的增殖培养;随着无
机盐浓度的继续降低,玻璃芽率有下降的趋势,即
l/４MS培养基中的玻璃芽率较低,但芽的长势较
差,增殖率较低,不适合作增殖培养基.增殖芽若连
续在全量 MS培养基中培养,玻璃芽的发生会逐渐
加重;而连续在l/２MS培养基中培养,玻璃芽率则
保持在较低的水平,说明l/２MS培养基适宜于马来
沉香增殖芽的连续培养.
表７　增殖培养试验结果
Table７　Resultsoftheproliferation
编号
Code
因子Factor
A(基本培养基)
Minimalmedium
B
(６ＧBAmg􀅰LＧ１)
平均增殖系数
MeanenhanceＧ
mentrate
ⅢＧ１ １/４MS ０．０５ １．９
ⅢＧ２ １/４MS ０．１ ２．４
ⅢＧ３ １/４MS ０．２ １．８
ⅢＧ４ １/４MS ０．５ ２．２
ⅢＧ５ １/２MS ０．０５ ２．４
ⅢＧ６ １/２MS ０．１ ２．９
ⅢＧ７ １/２MS ０．２ ２．６
ⅢＧ８ １/２MS ０．５ ２．７
ⅢＧ９ ３/４MS ０．０５ ２．０
ⅢＧ１０ ３/４MS ０．１ ２．５
ⅢＧ１１ ３/４MS ０．２ ２．２
ⅢＧ１２ ３/４MS ０．５ ２．５
ⅢＧ１３ MS ０．０５ １．９
ⅢＧ１４ MS ０．１ ２．３
ⅢＧ１５ MS ０．２ ２．３
ⅢＧ１６ MS ０．５ ２．１
　　芽增殖对细胞分裂素６ＧBA的浓度要求较低,
当６ＧBA浓度小于０．１mg􀅰LＧ１时,增殖倍数随着浓
度的加大而升高,当６ＧBA为０．１mg􀅰LＧ１时,其增
殖倍数达到最大值,之后随着６ＧBA浓度的继续升
高,增殖倍数反而下降,并且随着６ＧBA浓度的升
高,芽玻璃化有加重的趋势.
适宜增殖的培养基为l/２MS＋６ＧBA０．１mg􀅰
LＧ１＋５．８g􀅰LＧ１琼脂粉＋３０g􀅰LＧ１糖,pH５．８.
４８３ 广　西　植　物　　　 　　　　　　　　　　　　　　３４卷
增殖培养得到的芽苗矮小纤弱,木质化程度低,
将这些小苗直接转入生根培养基,生根效果不理想,
而且容易掉叶,导致生长停滞,所以,还需要进行壮
苗培养,树种不一样,所要求的壮苗培养基也不一
样,马来沉香的壮苗培养基只要１/２MS基本培养
基,不需添加任何激素.将经过继代培养得到的马
来沉香芽苗,苗高小于１cm的,切下转入壮苗培养
基,即１/２MS＋３０g􀅰LＧ１蔗糖＋５．８g􀅰LＧ１琼脂粉.
３０d后,苗高为１．５~３cm.
２．４生根培养
由表８可知,马来沉香总体生根率并不高,最高
只有５６．７％,在１/２MS上单独使用IBA或 NAA
时,可诱导生根,但生根率较低,在１０％~３０％之
间,两者配合使用或再加根太阳效果要好一些.单
独使用 NAA的生根效果比单独使用IBA的效果
好,其生根率分别为２４．２％、１７．９％,相差６．３％.根
太阳对马来沉香诱导生根效果比较好,配合NAA、
IBA其中一种或三种一起配合加到１/２MS培养基
中,生根率明显提高,生根率最好的是ⅤＧ１４号培养
基,即１/２MS＋IBA０．２mg􀅰LＧ１＋NAA０．３mg􀅰
LＧ１＋GTY１．０mg􀅰LＧ１.平均根长和生根率呈正相
关,平均根长最短的为生根率最低的ⅤＧ１号培养
基,即１/２MS＋IBA０．２mg􀅰LＧ１,平均根长为０．６１
cm.最长的为ⅤＧ１４号培养基,１．２３cm.
表８　生根培养实验结果及分析表
Table８　Analysisoftherootingculture
编号
Code
处理Treatment
IBA
(mg􀅰LＧ１)
NAA
(mg􀅰LＧ１)
GTY(根太阳)
(mg􀅰LＧ１)
生根率
Rooting
rate
(％)
平均根长
Meanroot
length
(cm)
ⅤＧ１ ０．１ １５．４ ０．６１
ⅤＧ２ ０．５ １７．１ ０．５４
ⅤＧ３ １．０ １９．９ ０．８５
ⅤＧ４ １．５ １７．４ ０．８７
ⅤＧ５ ２．０ １９．９ ０．７６
ⅤＧ６ ０．１ １６．２ ０．８０
ⅤＧ７ ０．５ ２０．３ ０．７８
ⅤＧ８ １．０ ２６．７ ０．８９
ⅤＧ９ １．５ ２９．６ ０．９３
ⅤＧ１０ ２．０ ２８．４ １．０２
ⅤＧ１１ ０．５ ０．２ ３１．５ ０．９８
ⅤＧ１２ ０．５ ２．０ ５１．７ １．１７
ⅤＧ１３ ０．５ １．０ ４９．７ １．１９
ⅤＧ１４ ０．２ ０．３ １．０ ５６．７ １．２３
ⅤＧ１５ ０．３ ０．１ ２．０ ５０．９ １．１８
　　根据单次生根法的结果,采用高浓度的NAA,
诱发原基的形成,然后转入不添加激素的培养基内
生长,在二次生根法均出现根萌动,根系较直接生根
法粗壮,１５d后,单株生根最多条数为５条,生根率
为１７％~８３％,其中最佳生根培养基为１/２MS＋
NAA５．０mg􀅰LＧ１＋６g􀅰LＧ１琼脂＋２０g􀅰LＧ１糖,pH
５．８,培养２d后移入１/２MS培养基继续培养,生根
率为８３％.
２．５移栽
用蛭石∶珍珠岩∶黄心土(１∶１∶１)作基质共
移植１２５株,成活５５株,移栽成活率４４．３２％,泥炭
土∶黄心土(２∶１)作基质共移植１２０株,成活７８
株,移栽成活率６５％.
３　讨论与结论
(１)外植体消毒是植物组织培养技术关键的一
步,控制污染是组织培养技术首要解决的问题,本试
验采用０．１％升汞消毒４~５min,污染率可降低至
２０％,而启动率可达７０％.
(２)不同种类的植物,甚至同一种植物的不同组
织,对营养的要求也是不尽相同的,因此没有一种能
适应于所有种类植物组织和器官的“通用”培养基.
目前,木本植物组织培养可供选择的基本培养基较
多,如 MS、B５、WPM、DCV、GD、SH等.本研究选
择MS和B５作为马来沉香启动培养的基本培养基,
其结果不论是启动培养速度还是启动率,两种基本
培养基存在着显著性差异,MS的启动速度明显快
于B５;对芽诱导率的诱导两种培养基也存在显著性
差异,MS培养基的芽诱导率比B５培养基的芽诱导
率高,因此在芽诱导和增殖培养中均选用 MS作为
主要基本培养基.用 MS和１/２MS基本培养基对
启动率的影响不是很大,但玻璃化现象用 MS的比
用１/２MS的明显.以１/２MS为基本培养基,添加
０．２mg􀅰LＧ１的６ＧBA和NAA０．１mg􀅰LＧ１,启动率
达７０．５％,外植体一星期左右开始萌发,有的外植体
３d即有萌发的迹象.
(３)不同无机盐浓度对马来沉香的芽增殖和玻
璃芽率有不同影响.全量 MS和３/４MS培养基易
产生玻璃芽,严重阻碍了芽的增殖,随着无机盐浓度
的继续降低,玻璃芽率有下降趋势,在l/２MS培养
基中培养的芽生长正常、健壮,增殖率较高,且玻璃
芽率较低.芽增殖对细胞分裂素６ＧBA的浓度要求
较低,当６ＧBA浓度小于０．１mg􀅰LＧ１时,增殖倍数
随着浓度的加大而升高,当６ＧBA为０．１mg􀅰LＧ１时
其增殖倍数达到最大值,之后随着６ＧBA浓度的继
５８３２期　　　　　　　　　　　　张卫华等:马来沉香组织培养技术研究
续升高,增殖倍数反而下降,并且随着６ＧBA浓度的
升高,芽玻璃化有加重的趋势.因此适宜增殖的培
养基为l/２MS＋６ＧBA０．１mg􀅰LＧ１＋８g􀅰LＧ１卡拉
胶＋３０g􀅰LＧ１糖,pH５．８.
(４)木本植物的生根普遍较难,马来沉香单次生
根的生根率并不高,１/２MS培养基上单独加IBA
或NAA时,均可以诱导马来沉香生出根来,但生根
率非常低,两者配合使用效果要好一点,但顶多能使
生根率达到３０％.单独使用NAA的效果比单独使
用IBA 的效果好.再加入根太阳能使生根率在
５０％以上.不管是生根培养阶段还是移栽阶段,根
太阳是一种较好的根诱导剂.单次生根法采用１/２
MS＋IBA０．２mg􀅰LＧ１＋NAA０．３mg􀅰LＧ１＋GTY
１．０mg􀅰LＧ１培养基时生根率为５６．７％;二次生根最
佳培养基为１/２MS＋NAA５．０mg􀅰LＧ１＋６g􀅰LＧ１
琼脂＋２０g􀅰LＧ１糖,pH５．８,培养２d后移入１/２
MS培养基继续培养,生根率为８３％.
(５)外植体在试管中生长发育形成完整的植株
后,能否成为１株合格的出圃苗木决定于树种本身
的生物学特性、移栽技术和季节等因素的影响.本
次移栽是在春季进行,由于空气湿度大,气温适中,
用泥炭土∶黄心土(２∶１)作基质得到较好的效果.
在生产过程中应在春季多生长瓶苗,在初夏之前完
成移栽,而在广州市一定要冬季移栽应在室内完成,
且做好保温措施;掌握合适的根长也有助于提高成
活率.
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６８３ 广　西　植　物　　　 　　　　　　　　　　　　　　３４卷